Белок в ликворе при рассеянном склерозе: Белок общий в ликворе

Основной белок миелина в ликворе (цереброспинальной жидкости): исследования в лаборатории KDLmed

Определение концентрации основного белка миелина в ликворе, используемое для диагностики, оценки прогноза и контроля лечения рассеянного склероза.

Синонимы русские

ОБМ в спинномозговой жидкости, в СМЖ.

Синонимы английские

Myelin basic protein (MBP), CSF.

Метод исследования

Иммуноферментный анализ (ИФА).

Единицы измерения

Нг/мл (нанограмм на миллилитр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Ликвор.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Основной белок миелина, ОБМ – это один из главных компонентов внутреннего слоя оболочки миелина. При демиелинизации ОБМ и/или его фрагменты поступают в спинномозговую жидкость и поэтому могут быть использованы в качестве клинико-лабораторного маркера разрушения миелина для диагностики, оценки прогноза и контроля лечения рассеянного склероза.

Показано, что повышение уровня ОБМ в ликворе наблюдается примерно в 80 % случаев обострения рассеянного склероза и лишь у немногих пациентов в ремиссии заболевания. Нарастание уровня ОБМ соотносится с прогрессированием изменений по данным МРТ и сохраняется в течение 5-6 недель после начала обострения. На фоне терапии глюкокортикостероидами концентрация ОБМ снижается.

Если рассеянный склероз проявляется только в виде ретробульбарного неврита, повышения ОБМ в ликворе, как правило, не наблюдается. Это, вероятно, обусловлено тем, что очаг демиелинизации в этом случае расположен на относительно большом расстоянии от четвертого желудочка головного мозга. Другой особенностью ОБМ является то, что при высвобождении из миелина ОБМ может подвергаться фрагментации с образованием множества разных по структуре компонентов, не все из которых могут быть идентифицированы с помощью стандартных тест-систем. Результат исследования в таком случае не всегда соответствует реальной концентрации ОБМ в ликворе.

Повышение ОБМ наблюдается не только при рассеянном склерозе, но и при других заболеваниях ЦНС, например при инсульте, некоторых энцефалопатиях и энцефалитах. Более того, так как ОБМ также обнаруживается в периферических нервах, его концентрация в ликворе может изменяться при наличии демиелинизации нервных волокон за пределами ЦНС. Таким образом, ОБМ – это неспецифический маркер рассеянного склероза.

Следует отметить, что на сегодняшний день ОБМ – это дополнительный маркер рассеянного склероза. Как и другие маркеры ликвора (олигоклональные иммуноглобулины G, IgG-индекс), он не входит в основной алгоритм диагностики рассеянного склероза.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики, оценки прогноза и контроля лечения рассеянного склероза.

Когда назначается исследование?

• При наличии симптомов рассеянного склероза: нарушение зрения (помутнение, двоение в глазах), слабость, онемение, покалывание в руках и ногах, нарушение равновесия, учащение мочеиспускания, особенно если симптомы носят перемежающийся характер и наблюдаются у молодой женщины;
• при получении неоднозначных результатов магнитно-резонансного исследования головного мозга (МРТ).

Что означают результаты?

Референсные значения: менее 1 нг/мл.

Положительный результат:

• рассеянный склероз и другие демиелинизирующие заболевания ЦНС;
• инсульт;
• энцефалопатии;
• энцефалиты.

Отрицательный результат:

• норма;
• эффективное лечение заболевания.

Что может влиять на результат?

• Фрагментация основного белка миелина при его высвобождении из миелина;
• наличие сопутствующих заболеваний.

Важные замечания

• Основной белок миелина является неспецифичным маркером рассеянного склероза и других демиелинизирующих заболеваний;
• результаты анализы следует интерпретировать с учетом дополнительных клинических, лабораторных и инструментальных данных.

Также рекомендуется

• Диагностика рассеянного склероза (изоэлектрофокусирование олигоклонального IgG в ликворе и сыворотке)

Кто назначает исследование?

Невролог, врач общей практики.

Литература

• Giovannoni G. Multiple sclerosis cerebrospinal fluid biomarkers. Dis Markers. 2006;22(4):187-96. Review.
• Greene DN, Schmidt RL, Wilson AR, Freedman MS, Grenache DG.Cerebrospinal fluid myelin basic protein is frequently ordered but has little value: a test utilization study. Am J Clin Pathol. 2012 Aug;138(2):262-72.

Анализ ликвора при рассеянном склерозе на олигоклональные антитела в Москве по доступной цене

Анализ ликвора – это анализ спинномозговой жидкости. Спинномозговая жидкость имеет название ликвор или цереброспинальная жидкость. Ликвор создается фильтрацией крови через сосудистые сплетения желудочков мозга, обращается в желудочках головного мозга и субарахноидальной оболочке головного и спинного мозга. Спинномозговая жидкость служит для смягчения толчков во время механического воздействия на мозг, поддерживает постоянное внутричерепное давление, защищает мозг от инфекции, поддерживает нормальную концентрацию питательных веществ, способствует насыщению нейронов мозга кислородом и выведению углекислого газа, продуктов распада, обеспечивает транспортировку гормонов и других необходимых веществ. С помощью этой биологической жидкости обеспечивается баланс внутренней среды спинного и головного мозга.

В клинике неврологии Юсуповской больницы применяют современные и эффективные методы диагностики заболеваний нервной системы, исследования проводятся на современном оборудовании ведущих производителей из США, Европы и других стран. В Юсуповской больнице можно сдать анализ ликвора на олигоклональные антитела и получить эффективное лечение рассеянного склероза.

Исследование при рассеянном склерозе

Рассеянный склероз относится к неврологическим заболеваниям, чаще болеют женщины. Рассеянный склероз не всегда проявляется выраженными симптомами, нередко характеризуется неспецифическими признаками – онемением и покалыванием в конечностях, слабостью, быстрой утомляемостью. При рассеянном склерозе почти в 90% случаев в ликворе обнаруживают иммуноглобулины IgG, которые синтезируются в области повреждения миелиновой оболочки головного мозга. Олигоклональные IgG обнаруживаются при многих других заболеваниях нервной системы, для диагностики рассеянного склероза анализ ликвора проводят как дополнительное исследование, когда исследование на МРТ показало неоднозначные результаты. При рассеянном склерозе показатели электрофореза белков сыворотки крови нормальные, в то же время в ликворе обнаруживаются олигоклональные антитела. Для дифференцирования рассеянного склероза от других заболеваний проводят исследование определенных параметров ликвора – количества и состава клеток, уровня белка. При рассеянном склерозе уровень повышения белка будет умеренный. Анализ ликвора для диагностики рассеянного склероза назначается при появлении симптомов заболевания:

• учащение мочеиспускания.
• онемение и покалывание в конечностях.
• двоение в глазах.
• слабость, быстрая утомляемость.
• нарушение координации при движении.

Расшифровка результатов

Расшифровку анализа спинномозговой жидкости можно посмотреть онлайн. Интерпретация анализа ликвора следующая:

• Изменение цвета ликвора:
• красный цвет ликвора наблюдается при попадании крови в спинномозговую жидкость и при субарахноидальном кровоизлиянии;
• ксантохромный цвет ликвора будет при интраспинальной опухоли, хронической субдуральной гематоме, карциноматозе мозговых оболочек;
• зеленоватый оттенок жидкости или желтый наблюдается при гнойном менингите, вскрывшемся абсцессе головного мозга;
• опалесцирующий окрас ликвора наблюдается при карциноматозе оболочек головного мозга, бактериальном менингите;
• бесцветная жидкость – норма;
• помутнение ликвора – наличие большого количества микроорганизмов, повышение уровня лейкоцитов, эритроцитов, эпителия;
• прозрачный ликвор – норма;
• повышенное давление спинномозговой жидкости отмечается при опухоли, субдуральной гематоме, абсцессе, черепно-мозговой травме, остром бактериальном менингите, туберкулезе мозга, инфаркте мозга, вирусной менингоэнцефалитной инфекции;
• пониженное давление ликвора возникает при интраспинальной опухоли, хронической субдуральной гематоме;
• увеличение плотности ликвора отмечается при воспалении мозговой оболочки, травме головного мозга;
• снижение плотности ликвора происходит при гидроцефалии;
• повышенный цитоз (плеоцитоз) отмечается: при кровоизлиянии в мозг, аллергии, опухоли мозга, метастазировании раковой опухоли, при новообразованиях в области оболочек мозга, при прорыве абсцесса мозга, инфаркте мозга, менингите, интракраниальном абсцессе, при заражении мозга глистами;
• рН ликвора при большей части заболеваний не изменяется;
• высокий уровень белка в ликворе наблюдается при опухоли мозга, сдавливании спинного мозга, грыже позвоночника, энцефалите, кровоизлиянии в мозг, субдуральной хронической гематоме, инфаркте мозга, серозном и гнойном менингите, интракраниальном абсцессе;
• повышение уровня глюкозы в ликворе происходит при сахарном диабете, опухоли головного мозга, сотрясении головного мозга, энцефалите, эпилептическом припадке;
• понижение уровня глюкозы в ликворе определяется при воспалении оболочек мозга, туберкулезном менингите;
• повышенный показатель хлоридов указывает на опухоли головного мозга, энцефалит, сердечную недостаточность, почечную недостаточность;
• сниженный показатель хлоридов в ликворе указывает на менингит, опухоль головного мозга.

Расшифровка анализа ликвора помогает дифференцировать заболевание, для более точной диагностики назначают дополнительные исследования. Определенные изменения одних показателей ликвора при нормальном уровне других показателей может указывать на развитие тяжелых поражений нервной системы – рассеянного склероза, синдрома Гийена-Барре и других заболеваний. Осмотр пациента неврологом, исследование МРТ и анализ ликвора позволяют начать лечение рассеянного склероза на раннем этапе развития.

Анализ ликвора: расшифровка (таблица 1)

Исследование при менингите

Если при исследовании ликвора не обнаружены воспалительные изменения, диагноз менингит исключается. Важным компонентом анализа является плеоцитоз. Мутный ликвор с измененной окраской жидкости (от молочного до зеленоватого) указывает на развитие гнойного менингита. В жидкости преобладают нейтрофилы, что позволяет говорить об остроте воспалительного процесса. Повышен белок, снижен уровень глюкозы. При уменьшении количества нейтрофилов и увеличении лимфоцитов, повышении уровня глюкозы можно говорить о благоприятном исходе заболевания.

При исследовании на туберкулезный менингит бактериоскопический анализ может быть отрицательным. Об этой форме менингита говорит выпадение осадка в ликворе при его отстаивании. В большинстве случаев микобактерии туберкулеза обнаруживаются в осадке, представляющем собой паутинообразную нежную сеточку. Ликвор при туберкулезном менингите не имеет цвета, прозрачен, в плеоцитозе высокий уровень лимфоцитов, в некоторых случаях растет уровень нейтрофилов и лимфоцитов. Неблагоприятный прогноз при увеличении числа макрофагов и моноцитов. При туберкулезном менингите повышен уровень белка, снижен уровень глюкозы, у части больных падает уровень хлоридов.

Менингококковый менингит характеризуется повышением внутричерепного давления, при исследовании ликвора обнаруживается слабовыраженный нейтрофильный цитоз, затем происходят изменения как при гнойном менингите.

Серозный менингит характеризуется прозрачным ликвором, отмечается небольшой плеоцитоз с ростом уровня лимфоцитов. Уровень белка находится в пределах нормы или слегка повышается, у части больных уровень белка может упасть из-за гиперпродукции спинномозговой жидкости. Если в начальной стадии заболевания отмечается плеоцитоз с ростом нейтрофилов, то прогноз заболевания считается неблагоприятным, течение заболевания тяжелым.

Как делается анализ

Перед сдачей анализа больной проходит обследование. Затем врач опрашивает пациента на предмет принимаемых лекарственных препаратов, перенесенных недавно заболеваний. За 12 часов до анализа ликвора следует прекратить прием пищи и питья. Для забора ликвора применяется полая длинная игла, контроль действий врача осуществляется с помощью флюороскопа, преобразующего рентген лучи в изображение на мониторе. Дополнительно используются другие устройства.

Пациент находится на процедурном столе, лицом вниз. Проводится обезболивание процедуры. Кожа в месте будущего прокола очищается и дезинфицируется. Под контролем рентген аппарата игла вводится в спинномозговой канал между двумя поясничными позвонками, затем измеряется давление ликвора. После забора ликвора вводится обезболивающее средство в спинномозговой канал. Игла извлекается, накладывается давящая повязка. После процедуры пациент должен несколько часов лежать на боку.

Проведением исследования ликвора, диагностикой рассеянного склероза, лечением заболеваний нервной системы занимаются врачи-неврологи Юсуповской больницы. Точность диагностики, опыт и знания врачей помогают в назначении эффективного лечения при заболеваниях головного мозга. Записаться на консультацию врача можно по телефону.

Тяжелые цепи нейрофиламентов (оценка нейродегенерации)

Описание

Синонимы (rus): Фосфорилированные тяжелые цепи нейрофиламентов

Синонимы (eng): Neurofilament heavy chain

Биоматериал: Цереброспинальная жидкость

Показатель(и): Тяжелые цепи нейрофиламентов

Метод(и): Иммуноферментный анализ (ИФА)

Тип контейнера и особенности преаналитики: Стерильный контейнер, БЕЗ добавок, 60 мл

Для бокового амиотрофического склероза (БАС) характерно избирательное поражение центральных и периферических двигательных нейронов и разрушение нейронального цитоскелета. Структурную основу цитоскелета составляют нейрофиламенты (НФ). Нейрофиламенты представляют собой промежуточные филаменты, входящие в состав цитоскелета нейронов и преобладающие в аксонах. Данный тип филаментов состоит из 3х белков, имеющих молекулярные массы 68 кД (легкий белок нейрофиламентов — NFL), 150 кД (средний белок нейрофиламентов — NFM) и 200 кД (тяжелый белок нейрофиламентов — NFH). Все белки нейрофиламентов обладают структурным сходством и могут быть обнаружены в ликворе при нейродегенеративном процессе. С-концевой домен NFH отвечает за взаимодействие с микротрубочками, ассоциированными с ними белками и аксональными белками-транспортерами. В связи с этим, нарушение структуры концевого домена NFH может изменять структуру всего комплекса цитоскелета аксонов и тем самым влиять на функционирование как аксона, так и всего нейрона. Так как фосфорилированные формы NFH довольно устойчивы к протеазам, что указывает на стабильность этого белка при протеолитическом расщеплении после высвобождения из поврежденных аксонов. По сравнению с другими белками, определение fNFH обладает наибольшей чувствительностью и специфичностью для ранней диагностики БАС, которые достигают 90,91% и 84,0%. Определение fNFH на ранних стадиях БАС позволяет выявлять большее число больных, чем при использовании только диагностических критериев El Escorial 1994 (внесены в клинические неврологические рекомендации РФ 2015) и Awaji-Shima 2008 года. Кроме этого, концентрация тяжелых цепей НФ коррелирует с количеством вовлеченных областей и скоростью прогрессии. Увеличение тяжелых цепей НФ в ликворе наблюдается при других неврологических состояниях, в том числе при рассеянном склерозе, однако уровни повышения значительно ниже. Определение тяжелых цепей НФ в ликворе следует дополнять определением концентрации основного белка миелина. Исследование рекомендуется проводить всем пациентам с подозрением на БАС.

Когда назначается

Ранняя диагностика бокового амиотрофического склероза, прогнозирование течения рассеянного склероза. Оценка уровня нейродегенерации при рассеянном склерозе и других дегенеративных заболеваний головного мозга.

Подготовка к анализу

Специальной подготовки не требуется. Исследование проводится натощак (не принимать пищу 3 часа до исследования, можно пить воду).

Интерпретация

Отрицательный результат выявления свободных тяжелых цепей нейрофиламентов (fNFH) в спинно-мозговой жидкости значительно снижает вероятность диагноза бокового амиотрофического склероза (БАС), а также наличие повреждений спинного и головного мозга. Для БАС характерно снижение концентрации fNFH по мере прогрессирования заболевания, поэтому на поздних стадиях болезни показатель fNFH может нормализоваться. Повышение концентрации фосфорилированных свободных тяжелых цепей нейрофиламентов (fNFH) в спинно-мозговой жидкости может свидетельствовать о наличии повреждений спинного и головного мозга, а также о возможном наличии диагноза бокового амиотрофического склероза (БАС). Небольшое повышение fNFH может наблюдаться у больных с демиелинизирующими заболеваниями (рассеянный склероз, оптикомиелит Девика, атрофия зрительных нервов Лебера), субарахноидальным кровоизлиянием, опухолями и рядом других воспалительных и дегенеративных заболеваний головного мозга. Значительное повышение fNFH может встречаться у больных с тяжёлой черепно-мозговой травмой, обширным инсультом или энцефалитом, которые не требуют проведения дифференциального диагноза с БАС. Для ранних стадий БАС характерны наиболее высокие значения fNFH, которые коррелирует с количеством вовлечённых областей и скоростью прогрессии заболевания. Для дополнительного обследования может быть рекомендовано определение основного белка миелина в ликворе, определение мутаций генов C9orf72 и SOD1.

Список литературы

1. Poesen K, De Schaepdryver M, Stubendorff B, Gille B, Muckova P, Wendler S, et al. . Neurofilament markers for ALS correlate with extent of upper and lower motor neuron disease. Neurology (2017) 88:2302–9. 2. Steinacker P, Feneberg E, Weishaupt J, Brettschneider J, Tumani H, Andersen PM, et al. . Neurofilaments in the diagnosis of motoneuron diseases: a prospective study on 455 patients. J Neurol Neurosurg Psychiatry (2016) 87:12–20.

Спинномозговая жидкость / анализ ликвора / цереброспинальная жидкость (расширенный).

Категория подготовлена по материалам издания «Клиническая лабораторная диагностика. Национальное руководство» в двух томах под ред. В.В. Долгова (ГЭОТАР-Медиа, 2012г.)

Навигационное меню.

Объем
Относительная плотность спинномозговой жидкости
Прозрачность
Фибриновая (фибринозная) пленка
Цвет
Эритроцитархия (эритроархия) / эритроциты в ликворе
Билирубинархия (ксантохромия) / билирубин ликвора
Кислотность ликвора (рН)
Протеинархия (белки ликвора)
Индивидуальные белки ликвора (белковый состав спинномозговой жидкости)
Гликоархия (глюкоза ликвора)
Кетонархия (кетоновые тела спинномозговой жидкости)
Микроскопическое исследование спинномозговой жидкости
     Определение цитоза
— Изменение количества клеточных элементов в люмбальном ликворе при острых нарушениях мозгового кровообращения
— Плеоцитоз при заболеваниях ЦНС
Клеточные элементы ликвора
     Лейкограмма СМЖ
     Лимфоциты
     Моноциты
     Макрофаги
     Нейтрофилы
     Эозинофилы
     Базофилы
     Плазматические клетки
     Бласты
     Клетки арахноэндотелия (арахноэндотелиоциты)
     Клетки опухолей
Ферменты спинномозговой жидкости
     Аспартатаминотрансфераза ликвора (АсАт)
     Аланинаминотрансфераза ликвора (АлАт)

     γ-глютамилтрансфераза  спинномозговой жидкости (ГГТП)
     Креатининкиназа ликвора (КК) 
     Лактатдегидрогеназа спинномозговой жидкости (ЛДГ)
     Общая холинэстераза ликвора
Минералы и электролиты спинномозговой жидкости
     Хлор, натрий, калий, неорганический фосфор, магний, железо
Иные элементы ликвора
     Общие липиды ликвора
     Холестерин
     Лактат
     Мочевина
     Мочевая кислота
     Креатинин
     Аммиак
Ликвор при менингитах

Получение без осложнений (люмбальная пункция)
грудные дети – 2-3 мл
дети – 5-7 мл
взрослые -8-10 мл СМЖ
Вверх
Референтные пределы
-люмбальная спинномозговая жидкость – 1,005-1,009 г/мл
-субокципитальная спинномозговая жидкость – 1,003-1,007 г/мл
-вентрикулярная спинномозговая жидкость – 1,002-1,004 г/мл

Повышение относительной плотности
-менингиты
-уремия
-сахарный диабет

Снижение относительной плотности
-гидроцефалия
Вверх

В норме СМЖ бесцветна, прозрачна
98,9-99,0% — вода, 1,0-1,1% — сухой остаток

Степени помутнения
-полностью прозрачная
-опалесцирующая
-слегка мутноватая
-мутная
-резко мутная

! Помутнение спинномозговой жидкости зависит от существенного увеличения количества клеточных элементов, бактерий, грибов, повышение содержания белка.
Вверх

В норме спинномозговая жидкость практически не содержит фибриногена

При появлении
-туберкулез
-гнойный и серозный менингит
-опухоли ЦНС
-компрессия головного мозга
-мозговое кровоизлияние
-синдром Нонне-Фройна (полная блокада ликворного пространства при опухолях спинного мозга, абсцессах, туберкулах, арахноидитах и костных компрессиях)
Вверх

В норме СМЖ бесцветна

! Сероватый или серовато-розовый цвет ликвора может наблюдаться в результате неудачной пункции («путевая» кровь)
Вверх

Градации содержания
0,1 – 0,15 х10⁹/л – ликвор остается бесцветным
0,6 – 1,0 х10⁹/л – ликвор серовато-розовой окраски
2 — 50 х10⁹/л – ликвор розово-красного цвета
51 – 150 х10⁹/л – ликвор цвета свежего мяса
более 150 х10⁹/л – спинномозговая жидкость цвета крови

Патологии. сопровождающиеся эритроцитархией

-внутричерепное кровотечение в результате разрыва аневризмы сосудов головного мозга
-геморрагический инсульт
-кровоизлияния в ткань головного мозга
-геморрагический энцефалит
-черепно-мозговая травма

Динамика
При ЧМТ эритроциты исчезают из ликвора на 5-10-е сутки
При геморрагическом инсульте  и тяжелой ЧМТ – на 10-20-е сутки
При разрыве аневризмы сосудов головного мозга эритроциты изчезают из СМЖ на 40-80-е сутки
В независимости от травмы:
На 2-е сутки удаляется из СМЖ 25-50% эритроцитов по сравнению с количеством в 1 день
На 3-4-е сутки – 52-97% эритроцитов
Оставшаяся часть эритроцитов удаляется в различные сроки
Вверх

Окраска ликвора при ксантохромии розовая, оранжевая, желтая, желтоватая, кофейно-желтая, коричневая, бурая, зеленая (выраженная билирубинархия при окислении билирубина в биливердин), мутная зеленая (в результате примеси гноя при гнойном менингите, прорыве абсцесса головного мозга).

Геморрагическая билирубинархия (ксантохромия)
-ЧМТ
-кровоизлияние в головной и \или спинной мозг

Застойная билирубинархия
-васкуляризованные опухоли ЦНС
-блокада субарахноидального пространства, компрессия
-менингиты (в основном, туберкулезный)
-арахноидиты

Физиологическая билирубинархия (ксантохромия)
! Встречается у новорожденных и почти у всех недоношенных детей в результате повышенной проницаемости ГЭБ для билирубина плазмы крови

Ложная билирубинархия
-проникновение в ликвор липохромов
-прием лекарственных препаратов (напр., бензилпенициллин)
Вверх

Референтные пределы
рН люмбальной СМЖ – 7,28-7,32
рН цистернальной СМЖ – 7,32-7,34

При метаболическом ацидозе (уремия, диабетический кетоацидоз, алкогольная интоксикация, отравление метиловым спиртом)
-снижение кислотности ликвора в пределах нормы

При метаболическом алкалозе (заболевания печени, продолжительная рвота, прием щелочей)
-рН СМЖ в норме либо парадоксально снижен до 7,27

При респираторном ацидозе (легочная недостаточность)
-возможно незначительное снижение кислотности ликвора по сравнению с рН плазмы крови

При респираторном алкалозе (мозговые травмы, отравления, в частности, салицилатами, заболевания печени)
-рН плазмы крови увеличивается до 7,65, тогда как рН ликвора в норме

Первичный ацидоз спинномозговой жидкости наблюдается при:
-тяжелые субарахноидальные и мозговые кровоизлияния
-черепно-мозговые травмы
-инфаркт головного мозга
-гнойный менингит
-эпилептический статус
-метастатические поражения головного мозга
Вверх

Референтные пределы
Содержание белка в люмбальной спинномозговой жидкости – 0,22-0.33 г/л
Содержание белка в желудочковой СМЖ – 0,12-0,20 г/л
Содержание белка в цистернальном ликворе – 0,10-0,22 г/л

Концентрация белка в ликворе в зависимости от возраста
Возраст                  Концентрация, г/л
1 — 30 дней                   0,2 — 1,5
1 — 3 месяца                 0,2 — 1,0
3 — 6 месяцев               0,15 — 0,5
0,5 — 10 лет                  0,1 — 0,3
10 — 40 лет                   0,15 — 0,45
40 — 50 лет                   0,2 — 0,5
50 — 60 лет                   0,25 — 0,55
60 и старше                 0,3 — 0,6

Гипопротеинархия (содержание белка в люмбальном ликворе менее 0,20 г/л)
-гидроцефалия
-повышенное внутричерепное давление
-проведение пневмоэнцефалографии
-доброкачественная внутричерепная гипертензия, гипертиреоз, некоторые лейкозы (описаны эпизоды)

Гиперпротеинархия
-ишемический (от 0,33 до 1,0 г/л) и геморрагический (до 8,4 г/л) инсульт
-субарахноидальные кровоизлияния различной этиологии
-опухоли головного мозга
-хронические воспалительные процессы различной этиологии (арахноидиты, арахноэнцефалиты, перивентральные энцефалиты) – чаще сопровождается повышением белка до 0,39-0,50 г/л, повышение до 1,5-2,0 г/л свидетельствует о фазе обострения воспалительного процесса
-абсцесс головного мозга (при вовлечении в процесс мозговых оболочек гиперпротеинархия достигает 1,0 г/л)
-черепно-мозговые травмы
-цистицеркоз головного мозга (гиперпроотеинархия 0,5-2,0 г/л)
Вверх

Референтные пределы

Белок	Содержание белков в СМЖ	Содержание белков в плазме крови	Соотношение плазма/СМЖ
Общий белок	0,15-0,45 г/л	68 г/л
Преальбумин	6-22 мг/л (2-11%)	238 мг/л	14
Альбумин	70-350 мг/л (40-70%)	59-69%	236
Альфа1-глобулины	7-40 мг/л (4-10%)	6-7%
Альфа2-глобулины	9-42 мг/л (5-12%)	7-12%
Бета1-глобулины	13-54 мг/л (7-13%)	3-6%
Гамма-глобулины	6-26 мг/л (3-7%)	4-8%
Трансферрин	9,61±2,57 мг/л	2040 мг/л	130-160
Церулоплазмин	1,15±0,53 мг/л	366 мг/л	305-375
Иммуноглобулин G	30,62 ±12,6 мг/л	9870 мг/л	802
Иммуноглобулин A	1,03±2,41 мг/л	1750 мг/л	1346
Альфа2-макроглобулин	2,46±0,73 мг/л	2200 мг/л	1111
Фибриноген	0,6 мг/л	2964 мг/л	4940
Иммуноглобулин М	0,6 мг/л	700 мг/л	1167
Бета-липопротеин	0,6 мг/л	3728 мг/л	6213

Белки спинномозговой жидкости, синтезируемые интратекально тканями головного мозга и мозговых оболочек.

Белок	Содержание в ликворе	Содержание в плазме крови	Соотношение СМЖ/плазма крови	Интратекальный синтез, %
Транстиретин (преальбумин)	17 мг/л	250 мг/л	0,068	93
Простагландин-Д-синтетаза	10 мг/л	0,3 мг/л	33	Более 99
Цистатин С	6 мг/л	1,0 мг/л	Более 5	Более 99
Апопротеин Е	6 мг/л	93,5 мг/л	0,063	90
Бета2-микроглобулин	1 мг/л	5,8 мг/л	0,59	99
Нейронспецифическая енолаза	5 мкг/л	5,8 мкг/л	0,8733	Более 99
Ферритин	6 мкг/л	120 мкг/л	0,05	97
S100-белок	2 мкг/л	Более 0,3 мкг/л
Основной миелиновый белок	0,5 мкг/л	Более 0,5 мкг/л
Интерлейкин 6	10,5 нг/л	12 нг/л	0,88	99
Фактор некроза опухолей — альфа	5,5 нг/л	20 нг/л	0,28	94
Нейрональная ацетилхолинэстераза	13 Ед/л	3 Ед/л	4,3	Более 99

Степень дисфункции гематоэнцефалического барьера при патологии головного мозга

Соотношение альбумин СМЖ/альбумин плазмы крови до 10х10^-3 (слабая степень дисфункции)
-рассеянный склероз
-хронический ВИЧ-ассоциированный энцефалит
-алкогольная полинейропатия
-амиотрофический латеральный склероз (БАС)

Соотношение альбумин СМЖ/ альбумин плазмы крови до 20х10^-3 (умеренная степень дисфункции)
-вирусный менингит
-оппортунистический менингоэнцефалит
-диабетическая полинейропатия
-инфаркт головного мозга
-кортикальная атрофия

Соотношение альбумин СМЖ/ альбумин плазмы крови более 20х10^-3 (тяжелая степень дисфункции)
-туберкулезный менингит
-полиневрит Жиллиана-Барра
-менингополиневрит
Вверх

Референтные пределы
3,33 ±0,42

! Определение пределов содержания глюкозы в ликворе проводится в зависимости от содержания глюкозы плазмы крови, в норме в люмбальной СМЖ содержится глюкозы концентрацией около 60% от плазменного уровня.

! Как правило, содержание глюкозы в спинномозговой жидкости остается в пределах нормы при арахноидитах, гиперкинетическом прогрессирующем панэнцефалите, грыже межпозвоночного диска, кровоизлияниях в головной мозг, полиневрите и нек. др.

Гипогликоархия (снижение концентрации глюкозы менее 2,2 ммоль/л, либо снижение соотношения – глюкоза плазмы/ глюкоза ликвора менее 0,3)
-бактериальный, туберкулезный, грибковый менингит
-цистицеркоз и трихинеллез
-первичные и метастатические опухоли оболочек мозга (глюкоза может практически полностью исчезать из СМЖ)
-субарахноидальные кровоизлияния (незначительная гипогликоархия на 1-е сутки)

Гипергликоархия
-первичная или вторичная гипергликемия
-состояние сна (замедление кровообращения и снижение общего метаболизма мозговой ткани)
-травмы головного мозга
-менингоэнцефалиты (редко)
-ишемические нарушения мозгового кровообращения (геморрагический, ишемический инсульт, преходящие нарушения мозгового кровообращения)

Содержание глюкозы в спинномозговой жидкости в норме и при заболеваниях ЦНС

Заболевание	Глюкоза, ммоль/л	Заболевание	Глюкоза, ммоль/л
Контроль	3,33 ±0,42	Ишемический инсульт	4,47±1,12
Серозный менингит	2,94±0,44	Геморрагический инсульт	4,66±1,62
Гнойный менингит	1,38±0,58	Интрацеребральная гематома	3,33±0,42
Туберкулезные менингиты	2,51±0,36	Мозговые кровоизлияния с прорывом в ликворное пространство	3,71±1,2
Рассеянный склероз	3,43±0,39	Субарахноидальное кровоизлияние	3,11±0,66
Гиперкинетический прогрессирующий панэнцефалит	3,23±0,42	Грыжи межпозвоночных дисков	3,38±0,41
Арахноидиты	3,19±0,48	Спинная сухотка	3,18±0,42
Доброкачественные новообразования	3,08±0,46	Прогрессивный паралич	3,36±0,34
Злокачественные новообразования	1,91±0,66	Цереброспинальный сифилис	3,58±0,61
Преходящее нарушение мозгового кровообращения	4,05±0,81	Эпилепсия	3,16±0,47

Вверх
! Состояние развивается после операции на мозговых оболочках, при ЧМТ, субарахноидальных кровоизлияниях, энцефалографии, сильном раздражении и возбуждении ЦНС. 
Вверх

Микроскопическое исследование спинномозговой жидкости

Референтные пределы
вентрикулярная СМЖ – 0-1 клетка на 1 мкл
субокципитальная СМЖ – 2-3 клетки на 1 мкл
люмбальная СМЖ – 3-5 клеток в 1 мкл

Нормоцитоз в зависимости от возраста

Возраст	Количество клеток в 1 л люмбальной спинномозговой жидкости
От 0 до 3 месяцев	20-25 х106/л
От 3 месяцев до 1 года	14-15 х106/л
От 1 года 1 месяца до 2 лет	11-14 х106/л
От 2 лет и 1 месяца до 5 лет	10-12 х106/л
От 5 лет и 1 месяца до 7 лет	8-10 х106/л
От 7 лет и 1 месяца до 10 лет	6-8 х106/л
Старше 10 лет	4-6 х106/л
Взрослые	3-5 х106/л

Критерии плейоцитоза
-слабый или легкий (6-70 х10⁶/л)
-умеренный (70-250 х10⁶/л)
-выраженный (250-1000 х10⁶/л)
-резко выраженный (более 1000 х10⁶/л)
-массивный (более 10 х10⁹/л)

Плейоцитоз при заболеваниях ЦНС

Заболевания	Количество клеток в 1 л ликвора
Острый бактериальный менингит	Более 3 х109/л
Актиномикоз ЦНС	Около 3 х109/л
Вирусный менингоэнцефалит (вирус Коксаки, аденовирус и др)	1-3 х109/л
Туберкулезный менингит (острая стадия)	0,3-3,0 х109/л
Герпетическое поражение ЦНС	Менее 1 х109/л
Миелит	Менее 0,15 х109/л
Серозный менингит	0,1-0,3 х109/л и более
Абсцесс головного мозга	1-2 х109/л
Энцефалиты	0,03-0,3 х109/л
Рассеянный склероз	3-50 х106/л
Нейросифилис	0,05-0,5 х109/л
Нейролейкемии	От 0,1-0,3 х106/л до 2-5 х109/л
Опухоли до операции	10-60 х106/л
Опухоли после операции	Выраженный плейоцитоз с быстрым снижением
Эпилепсия, гидроцефалия, арахноидиты, спондилез, дистрофические процессы, гиперкинетический прогрессирующий панэнцефалит	Чаще нормоцитоз
Медиальная грыжа диска	Незначительный плейоцитоз

Изменение количества клеточных элементов в люмбальном ликворе при острых нарушениях мозгового кровообращения

Заболевания	Количество клеточных элементов
Преходящее расстройство мозгового кровообращения	Нормоцитоз
Ишемический инсульт	В первые 24 часа – выраженный плейоцитоз с максимумом на 2-7 сутки. Количество лейкоцитов варьирует от 0 до 14 х109/л
Геморрагический инсульт	Выраженный плейоцитоз, в среднем 30,1-127,3 х109/л, максимум на 8-21 сутки
Интрацеребральная гематома	В начале – значительный плейоцитоз 21,4-40,6 х106/л
Кровоизлияние в головной мозг с прорывом в ликворное пространство	В первые 24 часа -196,1 — 281,1 х106/л, затем количество быстро снижается
Субарахноидальное кровоизлияние	В первые 24 часа – умеренный плейоцитоз, на 2-7 сутки выраженный (133,2-292,3 х106/л), через 3-4 недели количество клеток приходит к норме

Вверх

Клеточные элементы ликвора

Тип клеток	Взрослые, %	Новорожденные, %
Лимфоциты	62+-43	20+-18
Моноциты	36+-20	72+-22
Нейтрофилы	2+-5	3+-5
Эозинофилы	Редко	Редко
Гистиоциты (макрофаги)	Редко	5+-4
Эпендимальные клетки	Редко	Редко

Вверх


Референтные пределы
2-4 клетки на 1 мкл

Состояния, сопровождающиеся увеличением количества лимфоцитов (лимфоцитарный плейоцитоз)
-Инфекционные заболевания
     вирусные менингиты
     туберкулезные, микотические менингиты
     амебный энцефаломиелит
     сифилитический менингоэнцефалит
     паразитарные заболевания ЦНС (цистицеркоз, токсоплазмоз)
     асептический менингит, вызванный септическим очагом, прилегающим к мозговым оболочкам
-Дегенеративные заболевания
     подострый склерозирующий панэнцефалит
     рессеянный склероз
     энцефалопатии при неадекватном применении лекарственных препаратов
     острый диссеминированный энцефаломиелит
-Другие патологии ЦНС
     саркоидоз
     полиневриты
     периартериит с вовлечением сосудов головного мозга
Вверх

Референтные пределы
1-3 клетки на 1 мкл

! Крупные моноциты диаметром 16-30 мкм называются активированными моноцитами или незрелыми макрофагами. Они обнаруживаются при воспалительном процессе, после энцефалографии или интратекального введения лекарственных препаратов.

Увеличение количества моноцитов
-туберкулезный менингит 
-цистицеркоз
-нейросифилис
-вирусный менингит
-рассеянный склероз
-гиперкинетический прогрессирующий панэнцефалит
-ишемические болезни и опухоли головного мозга
Вверх

! Наличие 1-2 макрофагов в 1 мкл ликвора при нормоцитозе – признак кровотечения или воспаления ЦНС

Липофаги (макрофаги с каплями жира) присутствуют при наличии патологической жидкости из мозговых кист, при распаде ткани головного мозга и новообразований, прорастающих в просвет желудочков мозга, при травматическом и ишемическом некрозе ткани головного мозга
Вверх
В норме отсутствуют

! Количество нейтрофилов более 2000 клеток в 1 мкл – признак бактериального менингита.

Нейтрофильный плейоцитоз
— острое воспаление (неизмененные нейтрофилы)
-затухание воспалительного процесса (измененные нейтрофилы)
-острая экссудативная фаза бактериального менингита
-ранняя кратковременная стадия вирусного менингита
-острая фаза туберкулезного менингита
-начальная стадия микозного менингита
-амебный менингоэнцефалит
-абсцесс головного мозга
-нейросифилис
-субдуральная эмпиема
-ранний период после операций на мозговых оболочках
-геморрагический и ишемический инсульт
-субарахноидальные геморрагии (1-3 сутки)
-внутримозговые геморрагии
-реакции на первую и повторные пункции
-метастазы злокачественных новообразований в ЦНС
Вверх

В норме в спинномозговой жидкости не встречаются

Появление эозинофилов в ликворе
-состояния, протекающие с эозинофилией (паразитарные инвазии, эозинофильные менингиты, грибковые инфекции, острые полиневриты, идиопатический гиперэозинофильный синдром, кисты головного мозга, реакции на введение контрастных веществ и лекарственных препаратов)
-бактериальный менингит
-туберкулезный менингоэнцефалит
-лимфоцитарный менингит
-токсический, эпидемический, сифилитический, вирусный менингит
-ишемический и геморрагический инсульт
-опухоли головного мозга
-лейкозы
-нейросаркоидоз
-послеоперационные состояния на мозговых оболочках
Вверх

В норме в ликворе не встречаются

! Появление базофилов в спинномозговой жидкости свидетельствует о тяжелопротекающих нейроинфекциях
Вверх

В норме отсутствуют в ликворе

Появление плазматических клеток в спинномозговой жидкости
-длительные вялотекущие процессы головного мозга и мозговых оболочек (хронический энцефалит, менингиты, арахноидиты)
-рассеянный склероз
-гиперкинетический прогрессирующий панэнцефалит
-нейросифилис
-острые воспалительные процессы ЦНС и опухоли головного мозга
-туберкулезный менингит
-саркоидоз
-коллагенозы с вовлечением ЦНС
-зоонозы
-состояния после кровоизлияния в ткань головного мозга
Вверх

! При лейкозах может возникнуть лейкозный менингит (нейролейкемия). При острых лейкозах выявляются бласты при нормоцитозе (5-42%), количеством 100-300 х10⁶/л, иногда 2-5 х10⁹/л

! При злокачественных лимфомах на фоне химио – и иммуносупрессивной терапии могут развиваться криптококкозный, кокцидиоидозный, кандидамикозный, бластомикозный менингит, энцефалит или менингоэнцефалит.
Вверх

В норме отсутствуют в СМЖ

! Появляются при черепно-мозговых травмах, при опухолях головного мозга, после операций на мозговых оболочках.
Вверх

! Клетки опухолей обнаруживаются в спинномозговой жидкости при первичных и метастатических опухолях ЦНС

Частота обнаружения
-при лейкозах – 70%
-при метастатических поражениях ЦНС – 20-60%
-при первичных опухолях головного мозга – 30%
Вверх

Ферменты спинномозговой жидкости

Референтные пределы
0.0-10,0 МЕ/л

Значительное увеличение активности 
-при кровоизлиянии, черепно-мозговых травмах, 
-при острых воспалительных заболеваниях, 
-при туберкулезном и гнойных менингитах.
Вверх

Референтные пределы
0.0-3,0 МЕ/л

! Активность повышается при паркинсонизме, хорее, гидроцефалии, атрофии, эпилепсии, шизофрении, прогрессирующей мышечной дистрофии при острых воспалительных заболеваниях, при туберкулезном и гнойных менингитах.
Вверх

Референтные пределы
1,8-3,2 МЕ/л

! Активность увеличивается при ишемическом и геморрагическом инсультах, у больных с опухолями ЦНС.
Вверх

Референтные пределы
0,0-5,0 МЕ/л

! Имеет большое диагностическое значение в условиях плеоцитоза. 
Активность повышается при сосудистых мозговых заболеваниях, опухолях, эпилепсии, а также активность коррелирует с тяжестью черепно-мозговой травмы.
Вверх

Референтные пределы
5,0-40,0 МЕ/л

! Наиболее чувствительный индикатор ишемических повреждений (активность напрямую зависит от размеров инсульта). Также активность ЛДГ повышается при сосудистых заболеваниях, опухолях (особенно с метастазами), бактериальных менингитах, травмах мозга.
Вверх

Референтные пределы
13,4-21 МЕ/л

! Повышение активности общей холинэстеразы наблюдается при менингитах, гидроцефалии, опухолях мозга.
Вверх

Хлор – основной анион СМЖ (120-130 ммоль/л). Уменьшение уровня хлора отмечается у больных с различными видами менингитов (особенно туберкулезной этиологии), при компрессионных синдромах с высокой гиперпротеинемией, при мозговых опухолях, вовлекающих мозговые оболочки. Увеличение концентрации хлора встречается довольно редко и, главным образом, при почечной недостаточности (особенно при уремии), сердечной декомпенсации, эпилепсии, энцефалитах, опухоли мозга, абсцессе, эхинококкозе, рассеянном склерозе, прогрессивном параличе.

Натрий повышается при тяжелых почечных, эндокринных заболеваниях, систематических погрешностях в диете, у больных эпилепсией непосредственно перед припадком и после него, при субарахноидальном кровоизлиянии. При менингитах (особенно туберкулезном) концентрация натрия в ликворе падает.

Калий повышается при атеросклерозе, геморрагии, уремических энцефалитах, после эпилептических припадков. Незначительное уменьшение калия наблюдается при опухолях, вовлекающих оболочки мозга.

Неорганический фосфор повышается при острых воспалительных процессах, туберкулезном менингите.

Магний снижается при менингитах, особенно гнойных, при некоторых опухолях, энцефалитах, нейросифилисе, алкоголизме, циррозах, энцефалопатии.

Железо снижается при тяжелой железодефицитной анемии и туберкулезном менингите, а повышается при некоторых сосудистых заболеваниях ЦНС.
Вверх

Иные элементы ликвора

Референтные пределы
0,01-0,02 г/л

Повышение отмечается при рассеянном склерозе, кровоизлияниях в мозг, менингитах  (бактериальных, особенно при туберкулезном), опухолях, полиневропатии, гиперлипидемии, инфантильной амавротической идиотии, липидозе.

Снижение может наблюдаться при гидроцефалии у детей.
Вверх

Референтные пределы
12,0-14,0 мкмоль/л или 0,24-0,50 мг/дл
у новорожденных до 5,69 ммоль/л

!Увеличение концентрации общего холестерина отмечается при гнойных и туберкулезном менингитах, нейросифилисе, невриномах, менингиомах, субарахноидальном кровоизлиянии, мозговом инсульте.
Повышение холестерина при нормальной концентрации белка в СМЖ наблюдается при мозговых травмах, при симптоматической эпилепсии, некоторых опухолях, спинной сухотке, амавротической идиотии.
Вверх

Референтные пределы
1,1-2,8 ммоль/л, по другим данным 0,33-0,77 ммоль/л

! Установлена прямая зависимость концентрации лактата и числа лейкоцитов в ликворе. Лактат, как биохимический маркер, имеет несомненное преимущество перед определением глюкозы и белка. Источником лактата в ликворе является мозговая ткань, лейкоциты и бактерии.
Увеличение концентрации лактата отмечено при бактериальном менингите карциноматозе оболочек мозга, после эпилептических припадков, при тяжелых травмах, некоторых опухолях ЦНС и тяжелых формах старческой деменции.
Вверх

Референтные пределы
1,0-5,5 ммоль/л
у новорожденных 2,8-6,3 ммоль/л

! Колеблется при уремии и острых азотемических менингоэнцефалитах.
Вверх

Референтные пределы
5,95-17,54 мкмоль/л

! Увеличивается при повышенном метаболизме нуклеиновых кислот и атрофии мозга, а также при тяжелых формах бактериальных менингитов, уремии, заболевании печени, подагре.
Вверх

Референтные пределы
44,2-94,5 мкмоль/л

! Незначительно повышается при нервно-мышечных заболеваниях, значительное повышение наблюдается при почечной недостаточности, при боковом амиотрофическом склерозе.
Вверх

Референтные пределы
11,86-19,9 мкмоль/л

! Достаточно токсическое вещество для ЦНС, поэтому его увеличение считается неблагоприятным прогностическим признаком. Повышение концентрации аммиака наблюдается при печеночной коме, эпилепсии, печеночной энцефалопатии.
Вверх

Ликвор при менингитах

Показатели	Нормальный ликвор	Серозный менингит	Гнойный менингит	Туберкулёзный менингит
Давление (мм. рт. ст.)	Сидя 150-200; лежа 100-150	Повышено	Повышено	Повышено
Цвет	Прозрачный, бесцветный	Прозрачный, бесцветный	Мутный, желто-зеленый, белесоватый, голубоватый	Геморрагичный или ксантохромный
Клетки в 1 мкл	0-5 (не более 1 нейтрофила, остальные лимфоциты)	2-12 (преобладают лимфоциты)	1000-5000 (90-100% нейтрофилов)	200-700 (лимфоциты 40-60%)
Белок, г/ л	0,2-0,45	0,2-0,45	0,7-16,0	1-5
Фибриновая пленка	Нет	Нет	Часто грубая либо в виде осадка	В 30-40% случаев
Глюкоза ммоль/л	2,8-3,9 (0,5-0,8 г/ л) 50-60% от глюкозы крови	2,8-3,9 (0,5-0,8 г/ л) 50-60% от глюкозы крови	Снижена иногда 0	Резко снижена
Хлориды ммоль/л	120-130 (7,0-7,5г/ л)	120-130 (7,0-7,5г/ л)	Снижены или не изменены	Снижены
Примечания	—	—	Микроскопия, посев ликвора-определение специфического возбудителя	Микроскопия, после посева ликвора на микобактерии туберкулеза
Осадочные реакции (Панди, Нонне-Апельта)	+/+++	—	—	—
Нарушение соотношения содержания числа клеток/белка	—	Редко клеточно-белковая диссоциация	Выраженная клеточно-белковая диссоциация	Выраженная клеточно-белковая диссоциация

28.03.2015 | 20:01:59

Nothing found for Rasseyannyj Skleroz %3Flang%3Dru

Политика Cookies Политика Cookies

Использование файлов cookies Настоящий веб-сайт использует так называемые файлы сookies. Файлы cookies — это небольшие файлы, которые загружаются на ваш компьютер и помогают обеспечить нормальное и безопасное функционирование веб-сайта. Они позволяют собирать информацию о продуктах, которыми интересуются посетители сайта, а также учитывают использованную при посещении навигацию. Это делается для того, чтобы сделать наши онлайн-предложения более выгодными для пользователей. ООО «Институт клеточной терапии» соблюдает права на неприкосновенность частной жизни посетителей веб-сайта и признает важность защиты их персональных данных. Анализ информации с веб сайта получается на анонимной основе.

При посещении данного веб-сайта интернет-браузер каждого посетителя передает на сервер ООО «Институт клеточной терапии» определенные сведения: дату и время посещения, тип браузера, языковые настройки, операционную систему. Информация о том, каким образом используется сайт, не будет привязываться к полному IP-адресу. На нашем сайте активирована функция анонимизации IP, предложенная компанией Google, поэтому последние 8 цифр (тип IPv4) или последние 80 бит (тип IPv6) вашего IP-адреса удаляются. Данные сведения сохраняются в журналах подключений в течение ограниченного времени для обеспечения безопасности и надлежащей работы веб-сайта, а также для сбора статистической информации. Мы используем две категории файлов cookies: (1) файлы cookies, необходимые в технических целях, без которых функциональность нашего сайта значительно снизится, и (2) optional cookies.

Веб-анализ

Наш веб-сайт использует Google Analytics — сервис анализа сайтов от компании Google Inc., 1600 Амфитеатр Парквэй, Маунтин-Вью, штат Калифорния, 94043, Соединенные Штаты Америки (Google). На основании данного вами предварительного согласия, Google будет анализировать от нашего имени то, каким образом вы используете веб-сайт. Вы можете в любое время отключить файлы cookies или настроить ваш веб-обозреватель для предупреждения о получении таких файлов. Для того, чтобы это сделать, пожалуйста, выберите желаемый вариант в таблице Optional Cookies. Однако если файлы cookies будут выключены, вы не сможете пользоваться всеми функциями данного веб-сайта.

Файлы optional cookies

На веб-сайте мы используем собственные файлы optional cookies, которые помогают понять, как сделать сервисы более привлекательными для посетителей. Файлы optional cookies помогают узнать, как долго вы просматривали страницу или на какие именно страницы заходили. Файлы technical cookies других компаний Кроме того, мы используем файлы technical cookies других компаний. Эти файлы помогают нам узнать вас на веб-сайтах других компаний и показывать на этих веб-сайтах персонализированный контент.

Что такое рассеянный склероз, признаки, стадии, лечение

Рассеянный склероз — это хроническое заболевание центральной нервной системы. В основе патологии лежат аутоиммунные процессы повреждения миелиновых оболочек аксонов. Нарушается проводимость нервных импульсов, развивается характерная симптоматика. Лечением болезни занимается врач-невролог.

Этиология и причины

Точные причины рассеянного склероза назвать сложно — механизм запуска аутоиммунных процессов неясный. Известно только, что провоцирующим фактором может стать вирусная инфекция. Микроорганизм в теле человека вырабатывает белки, которые вызывают аномальную реакцию иммунитета. В лимфоузлах активируются аутореактивные В- и Т-лимфоциты.

Заболеванию подвержены люди всех возрастов и обоего пола, но диагноз чаще ставят молодым женщинам европеоидного типа, проживающим в странах северных широт.

В процессе передачи нервных импульсов между клетками большую роль играет миелиновая оболочка аксонов. При рассеянном склерозе собственная иммунная система человека частично разрушает эту структуру. Участки демиелинизации могут находиться в различных частях тела. На месте повреждённых клеток формируется склеротическая бляшка из соединительной ткани, которая полностью блокирует электрические сигналы. В результате угнетается основная функция нервных волокон.

Среди наиболее частых причин рассеянного склероза называют наследственность. Если в роду есть люди с неврологическими заболеваниями или аутоиммунными патологиями, риски возрастают примерно на 30%. Ещё 70% — это негенетические факторы рассеянного склероза.

Важно понимать, что наследуется не само заболевание, а предрасположенность к нему. Если у одного из родителей был рассеянный склероз, то всего в 2% случаев ребёнку ставят такой же диагноз. У остальных малышей сохраняется только повышенный риск. То есть при прочих равных условиях риск развития болезни у ребёнка с отягощённой наследственностью выше, чем у детей от здоровых родителей.

Провоцирующими факторами для рассеянного склероза являются:

1. Возраст. Диагноз чаще ставят в возрасте от 20 до 40 лет. Но рассеянный склероз может развиться и у детей, и у стариков. Чем позднее дебют, тем тяжелее протекает болезнь.

2. Инфекции. Риск развития рассеянного склероза повышает наличие цитомегаловируса, полиома- и ретровирусов, вируса Эпштейна-Барр, вызывающего мононуклеоз.

3. Дисбактериоз. Как ни странно, но микрофлора кишечника напрямую влияет на иммунитет. Признано, что бактерии помогают активным клеткам-защитникам распознавать угрозу и вовремя ликвидировать её. По непонятным причинам иногда антигены микроорганизмов кишечника провоцируют аутоиммунные процессы и вызывают прогресс демиелинизации. Доказательства теории получены в ходе исследований на животных и людях.

4. Курение. Никотин повышает риски и ускоряет разрушительное действие иммунитета.

5. Плохое питание. Врачи в разных странах мира выдвигают предположения, что избыточное потребление насыщенных животных жиров может провоцировать развитие рассеянного склероза.

Симптомы рассеянного склероза

Проявления болезни индивидуальны. Характер симптомов зависит от места и степени разрушения нервных волокон.

Признаком рассеянного склероза может быть:

• онемение, слабость в конечностях;
• затруднения при движении;
• нарушения рефлексов;
• снижение остроты зрения без видимых причин;
• неустойчивая походка;
• двоение в глазах, головокружение;
• повышенный тонус мышц;
• изменение характера речи: она может стать замедленной;
• повышенная утомляемость и слабость;
• эмоциональная нестабильность;
• нарушение мочеиспускания и т. д.

Первые симптомы могут проявляться в молодом возрасте, в 20–40 лет. На ранних стадиях рассеянного склероза больные редко обращают внимание на тревожные признаки, продолжают жить и работать в прежнем ритме. Периоды обострений сменяются ремиссиями иногда без приёма лекарственных препаратов. Между эпизодами болезни может проходить несколько лет. Постепенно интервалы уменьшаются. Когда заболевание прогрессирует, человек сам замечает изменения в своём состоянии и обращается к врачу. Выраженные симптомы рассеянного склероза снижают качество жизни.

В медицинской практике встречаются случаи быстрого прогрессирования. Ранний рассеянный склероз всего за несколько лет переходит в поздние стадии. Утрата двигательной активности прогрессирует постоянно и приводит к инвалидности, в то время как другие пациенты с таким же дебютом продолжают вести полноценную жизнь в обществе.

Формы рассеянного склероза

Выделяют:

1. Клинически изолированный синдром (КИС). Это предвестник рассеянного склероза. Клинически изолированный синдром представляет собой проявление одного или нескольких неврологических симптомов на протяжении 24 часов и дольше.

2. Ремиттирующая форма рассеянного склероза. Период между обострениями длится годами и даже десятилетиями. При этом неуклонно нарастает инвалидизация. Ремиттирующая форма неизбежно прогрессирует. Иногда она бывает короткой или вовсе отсутствует.

3. Вторично-прогрессирующая форма рассеянного склероза. Болезнь развивается в течение нескольких лет после установления ремитирующей патологии. В каждом втором случае вторично-прогрессирующая форма возникает через 10 лет после проявления симптомов. Через 30 лет после ремитирующего рассеянного склероза у 90% пациентов диагностируют переход в данную стадию. Для заболевания характерно тяжёлое течение с постоянным усилением симптоматики.

4. Первично-прогрессирующая форма рассеянного склероза. Патология протекает тяжело с самого начала, без ремиссий, приводит к быстрой инвалидизации.

Диагностика

Заболевание не имеет специфических симптомов. На ранней стадии рассеянного склероза обследование пациента не выявляет каких-либо патологий. Неопытные специалисты часто делают вывод, что необычные симптомы вызваны переутомлением или эмоциональным состоянием больного. Ретроспективные оценки показывают, что каждый второй пациент к моменту обращения к врачу болен уже не менее 5 лет.

Любой из явных признаков рассеянного склероза может наблюдаться при других патологиях нервной системы. Поэтому важно проводить дифференциальную диагностику у опытного специалиста.

Комплекс обследований включает:

1. МРТ головного и спинного мозга. На снимках видны повреждённые участки нервных волокон. Для лучшей детализации проводят МРТ с контрастом. Если на томограмме отсутствуют бляшки, но у пациента диагностирован клинически изолированный синдром, то риск развития рассеянного склероза невысокий.

2. Анализ ликвора. Для забора спинномозговой жидкости выполняют пункцию. При рассеянном склерозе в ликворе обнаруживают продукты распада миелина. Результаты анализа не являются достаточными для однозначной постановки диагноза, но необходимы для комплексной оценки клинической картины.

3. Доплерография сосудов. Исследование необходимо для исключения других заболеваний с неврологическими симптомами.

4. Анализ вызванных потенциалов. Уточняющий метод диагностики, основанный на измерении электрической активности нейронов в ответ на стимуляцию специфических нервных путей. Анализ позволяет установить нарушение проводимости импульса, вызванное изменениями в оболочках аксонов.

5. Анализы крови. Результаты необходимы для исключения инфекционных болезней и аутоиммунных состояний, способных повлиять на работу нервной системы.

Для постановки точного диагноза врачу необходимо обнаружить признаки демиелинизации в двух разных зонах центральной нервной системы (рассеяние), подтвердить образование бляшек в разное время и исключить другие возможные неврологические болезни. Поэтому по результатам первого обследования специалист пишет предположения. Окончательный диагноз ставят после обнаружения новых бляшек на повторных снимках, которые делают с интервалом 6 месяцев.

Лечение

Медикаментозное лечение

Терапия рассеянного склероза направлена на снижение активности иммунной системы в части атак на оболочки нервных волокон. Врач назначает лекарства в форме инъекций или таблеток. Современные препараты помогают остановить процессы нейродегенерации и значительно увеличить продолжительность жизни больного. Чем раньше начато лечение рассеянного склероза, тем благоприятнее прогноз. В запущенных случаях развивается стойкий неврологический дефицит, который не поддаётся терапии и приводит к инвалидизации.

В мире для лечения рассеянного склероза одобрено более 10 препаратов, условно разделённых на 4 группы:

1. Иммуномодулирующие средства. Активные вещества подавляют активацию аутореактивных лимфоцитов.

2. Препараты с селективным действием. Лекарство связывается с рецепторами лимфоцитов и не позволяет им выходить из лимфатических узлов.

3. Гуманизированные моноклональные антитела. Препараты предотвращают проникновение аутореактивных лимфоцитов к очагу воспаления.

4. Иммуносупрессоры. Подавляют активность иммунной системы.

Доказана эффективность лекарств против ремиттирующей и вторично-прогрессирующей форм болезни. В настоящее время ведутся исследования медикаментов для лечения первично-прогрессирующего рассеянного склероза. Некоторые препараты входят в перечень жизненно важных и закупаются на средства федерального бюджета.

Рассеянный склероз с дебютом в среднем возрасте и без качественного лечения в течение нескольких лет может привести к летальному исходу. Причиной смерти обычно становится почечная недостаточность, которая развивается на фоне рецидивирующих инфекций мочевыводящей системы.

Лечение методами гемокоррекции

Цель врача — очистить кровь от иммунных комплексов и продуктов распада нервных клеток.
Существует несколько современных методик лечения:

1. Иммуносорбция. Селективный метод удаления из крови иммуноглобулинов и липопротеинов низкой плотности. Содержание остальных компонентов остаётся неизменным.

2. Инкубация клеточной массы. Используются собственные структуры крови пациента — фармакоциты. С помощью клеток лекарства доставляют непосредственно к участку разрушения. Метод позволяет повысить эффективность препаратов, уменьшить их дозировку, снизить риск побочных действий.

3. Каскадная фильтрация плазмы. Из субстанции выборочно удаляются вирусы, бактерии, токсичные вещества, сохраняются все побочные элементы. Плазма проходит через специальную систему фильтров.

4. Криоаферез. Полуселективный метод, основанный на способности крупных молекул плазмы крови образовывать нерастворимые соединения и оседать в условиях низкой температуры.

5. Лимфоцитоферез. Из крови удаляют лимфоциты — клетки иммунной системы. Метод позволяет подавить аномальные реакции без приёма препаратов и практически без побочных эффектов.

6. Фотоферез. На кровь вне тела пациента воздействуют ультрафиолетовым излучением с определённой длиной волны. Свет вызывает гибель лимфоцитов. После этого кровь возвращают в сосуды.

Аутологичная трансплантация стволовых клеток

Один из новых методов лечения, который предполагает «перезагрузку» иммунной системы. Перед трансплантацией добиваются полного уничтожения аутореактивных лимфоцитов. Затем пациенту вводят собственные гемопоэтические стволовые клетки, иммунная система восстанавливает защитные структуры, но уже без аномальных реакций. Методика не может повлиять на те изменения, которые уже произошли. Но трансплантация существенно замедляет или полностью останавливает дальнейшую демиелинизацию.

Лечение сложное, долгое, требует постоянного медицинского контроля. Пациент в это время находится в стационаре. После трансплантации необходима реабилитация, которая занимает несколько месяцев — до тех пор, пока функции иммунной системы не будут восстановлены.

За последние 20 лет врачам в разных странах мира удалось достичь большого прогресса в лечении рассеянного склероза. Разрабатываются препараты, подавляющие аутоиммунное воспаление на разных стадиях развития. Клеточные технологии помогают частично восстанавливать утраченные функции нервной системы, пока, конечно, в рамках клинических исследований.

Диагностика и лечение рассеянного склероза в Москве

Своевременная и качественная медицинская помощь поможет сохранять качество жизни при рассеянном склерозе в течение многих лет. Запишитесь на консультацию к неврологу в клинику MedEx. В нашем центре вас ждёт комплексное обследование и грамотное лечение. Врачи клиники постоянно повышают квалификацию, изучают новые препараты и технологии, помогают пациентам добиться желаемых результатов. Записаться на приём можно через форму обратной связи или по телефону.

 

Белок общий в ликворе ᐈ Показания к сдаче и расшифровка результатов

Общая информация

Ликвор – это спинномозговая жидкость, которая является единственной биологической средой, исследование которой в клинической практике дает возможность получить точную информацию о состоянии центральной нервной системы. Многие патологии головного и спинного мозга, характеризуются изменением состава спинномозговой жидкости. Одним из основных компонентов ликвора, является общий белок, концентрация которого изменяется при поражении центральной нервной системы. Определение уровня общего белка ликвора, является обязательным анализом, который проводят при подозрении на инфекционно-воспалительные, онкологические, аутоиммунные и другие поражения центральной нервной системы.

Общий белок в спинномозговой жидкости является основным и самым чувствительным маркером заболеваний центральной нервной системы. В норме в ликворе взрослых людей присутствует от 150 до 500 мг/л белка. Примерно около 80% белка поступает из крови во время ее фильтрации в хориоидном сплетении желудочков головного мозга. Незначительная часть данного вещества продуцируется непосредственно интратекально, клетками хориоидного сплетения, глией, нейронами и иммунными клетками. Белковый состав спинномозгового вещества напрямую зависит от белкового состава крови. Точно также, как и в крови, в норме основной белок ликвора является альбумином, состоящим из 35, а иногда 80% общего белка ликвора, и главные иммуноглобулины ликвора относятся к иммуноглобулинам класса G. Следует отметить, что в норме, основная часть IgG транспортируется в ликвор именно из крови, а не вырабатывается интратекально.

Помимо этого, белковый состав ликвора значительно отличается от белкового состава крови. Данное различие характеризуется наличием гематоэнцефалического барьера (ГЭБ), который по сути является механическим фильтром, не позволяющем белку крови проникнуть в ликвор. Белки небольшого размера – альбумины, могут легко проникать сквозь ГЭБ, в то время как поступление крупных белковых молекул, которые называются иммуноглобулинами, в этом случае значительно затруднено. Например, диффузия альбумина из крови в ликвор происходит в течении суток, а диффузия иммуноглобулинов IgM значительно дольше, в течении нескольких дней. В результате таких процессов на белок ликвора приходится от 0,1 до 0,2% от белка крови. Помимо этого, в ликворе могут обнаруживаться специфические для центральной нервной системы белки, например, основной белок миелина, глиальный фибриллярный кислый белок, тау-белок. На долю таких специфических белков, приходится от 1 до 2% общего белка ликвора.

Изменение уровня общего белка в спинномозговой жидкости чаще всего возникает при поражении центральной нервной системы. Увеличение количества общего белка ликвора может возникать в трех случаях:

увеличение проницаемости ГЭБ, основанное на изменении уровня белка в ликворе при инфекционно-воспалительных патологиях, обусловленных изменением состава белка ликвора;

усиленная интратекальная выработка белка, как, например, при рассеянном склерозе, саркоидозе или нейросифилисе;

нарушение резорбции белка ликвора через арахноидальные грануляции, обнаруживающиеся в мягкой мозговой оболочке.

Показания

Данное исследование применяется при диагностике и контроля терапии воспалительно-инфекционных патологий, онкологических и аутоиммунных нарушений.

Определение уровня общего белка в ликворе может потребоваться при контрольном обследовании человека, которой проходит терапию от какого-либо из вышеперечисленных заболеваний.

Полученные результаты

Референсные значения

Предполагаемые болезни

Причинами увеличения общего белка в ликворе могут являться абсцессы головного мозга, злокачественные неоплазии головного и спинного мозга, диабетические неоплазии, синдром Гийена-Барре, синдром Фройна, интоксикация тяжелыми металлами, черепно-мозговые травмы, кровоизлияния, бактериальные, туберкулезные или вирусные менингиты, рассеянный склероз, системная красная волчанка, хронический алкоголизм.

Снижение белка в ликворе может возникать на фоне водной интоксикации, многократных люмбальных пункциях, хронической ликвореи.

Врач-консультант

Определение уровня общего белка в крови может чаще всего назначает невролог, нейрохирург и врач общей практики.

Спинномозговая жидкость при рассеянном склерозе

Ann Indian Acad Neurol. Октябрь-декабрь 2009 г .; 12 (4): 246–253.

Kottil W. Rammohan

Клиническая и экспериментальная нейроиммунология, Отдел неврологии, Государственный университет Огайо, Колумбус, Огайо 43221 США

Клиническая и экспериментальная нейроиммунология, Отделение неврологии, Государственный университет Огайо, Колумбус, Огайо 4321021 США

Для корреспонденции: д-р Коттил В. Раммохан, 2050 Kenny Road, Suite 2250, Columbus, Ohio 43221, USA.E-mail: [email protected]

Поступила в редакцию 26 мая 2009 г .; Пересмотрено 31 мая 2009 г .; Принято 30 июля 2009 г.

Copyright © Annals of Indian Academy of Neurology

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии, что оригинальная работа правильно процитировано.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Предпосылки:

Технологические достижения сделали возможным исследование спинномозговой жидкости человека (CSF) способом, который ранее был невозможен.ЦСЖ позволяет увидеть изменения, происходящие в центральной нервной системе (ЦНС) при здоровье и болезнях. Анализируя CSF, мы косвенно определяем состояние здоровья ЦНС и правильно или неверно делаем выводы о механизмах повреждения и восстановления ЦНС.

Цель, материалы и методы:

Рассмотреть текущее состояние знаний об изменениях в спинномозговой жидкости при рассеянном склерозе.

Обсуждение:

Создание маркеров спинномозговой жидкости, позволяющих оценивать различные биологические процессы при рассеянном склерозе, остается сложной задачей.Из всех биологических процессов маркеры воспаления, вероятно, идентифицируются лучше всего. Обнаружение полос олигоклонального иммуноглобулина в спинномозговой жидкости теперь признано единственным наиболее полезным лабораторным маркером в спинномозговой жидкости, помогающим в диагностике рассеянного склероза. Маркеры демиелинизации, ремиелинизации, нейроаксональной потери, восстановления и регенерации нейронов и астроглиоза только сейчас распознаются. На сегодняшний день не определен хороший суррогат для любого из этих патофизиологических процессов.

Заключение:

Целью будущих исследований является не только определение суррогатных маркеров в спинномозговой жидкости для каждой из вышеперечисленных функций, но и распространение их на другие более легкодоступные жидкости организма, такие как кровь и моча.В этой статье представлен синопсис современной литературы по большинству из этих областей оценки спинномозговой жидкости, относящейся к рассеянному склерозу.

Ключевые слова: Спинномозговая жидкость, рассеянный склероз

Спинномозговая жидкость (ЦСЖ) долгое время находилась в центре внимания при рассеянном склерозе. «Кривая коллоидного золота» использовалась в диагностике рассеянного склероза (РС) до появления современных методов разделения и оценки белков. [1–2] «Паретический» образец (как «общий парез» при сифилисе центральная нервная система) или повышение «первой зоны» в этом анализе считалось подтверждением диагностики этого расстройства.Основа изменений, наблюдаемых в анализе кривой коллоидного золота, не известна, но характер первой зоны, описанный в этом анализе, вероятно, был отражением присутствия иммуноглобулинов в спинномозговой жидкости, обычно наблюдаемого при РС, а также при общем парезе сифилиса.

ЦСЖ прозрачная и бесцветная у всех пациентов с РС, и у большинства пациентов количество клеток и общий уровень белка нормальные. Даже во время обострения общий белок и количество клеток в спинномозговой жидкости остаются нормальными, хотя иногда можно выявить умеренный мононуклеарный плеоцитоз.Уровни белка более 100 мг / дл явно необычны для рассеянного склероза и должны насторожить врача на альтернативный диагноз, а также на плеоцитоз более 100 клеток мм ³ . За прошедшие годы стало ясно, что уровни IgG в спинномозговой жидкости или индекс IgG постоянно повышаются, 24-часовой интратекальный синтез IgG аномально повышен, а IgG, продуцируемый в ЦНС, имеет ограниченный характер заряда, что приводит к известному аномальному электрофоретическому профилю. в виде олигоклональных полос (ОКБ). В дополнение к типичным большим и многочисленным белкам, таким как преальбумин, альбумин, трансферрин и иммуноглобулины, которые можно идентифицировать стандартным электрофорезом, многие другие белки были идентифицированы в спинномозговой жидкости пациентов с РС с помощью передовых чувствительных методов.На сегодняшний день в нормальной спинномозговой жидкости обнаружено более 400 белков, и некоторые из этих белков являются многообещающими маркерами болезненного процесса, когда экспрессируются в спинномозговой жидкости в аномальных количествах. Кроме того, исследования расширили изменения в спинномозговой жидкости на липиды и нуклеиновые кислоты. Цель этого сообщения — предоставить обзор большинства последних достижений в нашем понимании изменений CSF при РС. Для получения дополнительной информации читателя отсылают к обзорам по конкретным темам, поскольку подробное обсуждение всех этих тем выходит за рамки этого ограниченного обзора.

МС и олигоклональные полосы

Аномальный повышенный интратекальный синтез IgG является основой ОКБ при МС. Повышенный индекс IgG , также известный как «индекс связи», был определен Хансом Линком и его коллегами как отношение IgG CSF к альбумину CSF к отношению сывороточного IgG к сывороточному альбумину [3,4]. отношение a-фактора, когда оно больше 0,7 (или определенное значение для лаборатории), свидетельствует об интратекальном синтезе IgG. Tourtellotte и его коллеги установили формулу для определения интратекального синтеза IgG в течение 24-часового периода, и значения, превышающие 4 мг за 24-часовой период (или значения, установленные лабораторией), считались ненормальными.[5,6] Хотя эти количественные измерения интратекального IgG были полезны, наиболее полезным тестом в спинномозговой жидкости пациентов с РС была демонстрация ОКБ. В 1942 году Эльвин Кабат впервые описал повышенный уровень «гамма-глобулина» в спинномозговой жидкости у пациентов с РС [7]. Находясь в Колумбийском университете в Нью-Йорке, он описал использование тогда новой техники электрофореза в агарозном геле, чтобы показать аномальное повышение гамма-глобулинов, но не альбумина или трансферрина в спинномозговой жидкости у пациентов с рассеянным склерозом, но не у контрольных субъектов.Впоследствии, в 1957 году в Антверпене, Бельгия, Дениз Карчер и ее коллеги из лаборатории Армана Ловенталя впервые описали присутствие олигоклональных полос в спинномозговой жидкости пациентов с РС с помощью электрофореза в агарозном геле [8]. Они описали обнаружение олигоклональных полос в неконцентрированной спинномозговой жидкости с использованием метода окрашивания серебром [9], который был модификацией методов Кереньи и Галяса для агарозных гелей. [10] Первоначальная методика окрашивания серебром, которую они разработали, была громоздкой, и для анализа одного образца спинномозговой жидкости потребовалось целых три дня.Впоследствии мы модифицировали этот метод и адаптировали его для одновременного анализа до 20 образцов спинномозговой жидкости за три часа. [11] Поскольку методы окрашивания серебром являются громоздкими, мы разработали и в 1986 году внедрили иммуноблот-анализ неконцентрированной спинномозговой жидкости, который позволил обнаруживать ОКБ в неконцентрированной спинномозговой жидкости [12]. Повышение уровня 3 ‘, 4’-диаминобензидина (DAB) серебром дополнительно позволило при необходимости разбавить нормальный CSF в десять раз, и этот метод также позволил исследовать микролитровые количества CSF у мышей и анализировать другие жидкости организма, такие как слезы, на предмет обнаружения. ОКБ.[13]

После разработки иммуноблот-анализа спинномозговой жидкости в 1986 году мы регулярно использовали этот метод в нашем учреждении для исследования спинномозговой жидкости на ОКБ в более чем 10 000 проб (~ 600 проб в год). Методы окрашивания серебром для агарозных гелей и текущая методика иммуноблот-анализа CSF описаны ниже:

Окрашивание серебром агарозных гелей

Изоэлектрическое фокусирование агарозы проводили с использованием стандартных методик. Вкратце, изоэлектрическое фокусирование неконцентрированной CSF проводили при постоянном токе с использованием 1% агарозы с нулевым EEO, содержащей 10% амфолинов, pH 3.5-10. По завершении процедуры гель фиксировали в 60% метаноле и 4% уксусной кислоте, обильно промывали деионизированной водой, сушили с помощью фена и окрашивали серебром, как описано ниже.

Все реагенты, используемые для окрашивания, описаны в. 2% (мас. / Об.) Раствор ферроцианида калия готовили в ацетатном буфере, pH 6, и использовали достаточное количество для пропитывания высушенного геля. Через 10 минут гель промывали обильным количеством деионизированной воды трижды по 5 минут каждый, в результате чего общее время промывки составляло 15 минут.Равные объемы растворов A и B [] смешивали путем медленного добавления по каплям раствора B к раствору A, избегая образования белого осадка. В этот раствор помещали гель, и полосы обычно появлялись в течение пяти минут; разработка была завершена за 15 минут. После завершения проявления гели промывали 1% уксусной кислотой в течение 20 минут и сушили.

Таблица 1

Окрашивание агарозных гелей серебром

1.	Ацетатный буфер
a.	Ацетат натрия	82 г / л
	С помощью ледяной уксусной кислоты довести pH до 6,0
2.	Ферроцианид калия (2% мас. / Об.) В ацетатном буфере
3.	Раствор A
	7% (мас. / Об.) Карбонат натрия
	Раствор B
	Нитрат аммония	3 грамма
	Нитрат серебра	2 грамма
	Кремневольфрамовая кислота	10 граммов
	Формалин	8.8 мл
	Вода на 1 л

Иммуноблот-анализ CSF

Изоэлектрическое фокусирование агарозы выполняли, как описано выше. Парные образцы спинномозговой жидкости и сыворотки (разведенных 1: 300) обрабатывали таким образом, чтобы профиль IgG в спинномозговой жидкости можно было сравнить с профилем сыворотки. Аппликационная бумага, на которую было загружено приблизительно 20 мкл CSF или разбавленной сыворотки, подвергалась изоэлектрическому фокусированию. Электродные растворы 0,5 М уксусной кислоты и 0.В качестве анодалита и катодалита использовали 5 М гидроксид натрия соответственно. Для достижения идеальных результатов фокусировку следует производить в режиме постоянного тока. Запуск был прерван через первые 15 минут (обычно около 1000 вольт), чтобы удалить полосы. Дополнительная фокусировка проводилась в течение 15-20 минут, пока напряжение не достигало 1500 вольт. По завершении цикла электродные полоски удаляли, и гель ненадолго промывали PBS. Нитроцеллюлозную бумагу подходящего размера, пропитанную PBS, использовали для переноса белков из геля на нитроцеллюлозную бумагу.Хотя мы ранее использовали PBS с 20% метанолом для подготовки нитроцеллюлозы для переноса, не было отмечено, что использование метанола добавляет каких-либо преимуществ для переноса белка и больше не используется. Путем простого контакта и адсорбции все белки могут быть успешно перенесены на нитроцеллюлозную бумагу после плотного контакта в течение 30 минут. В конце этого периода гель удаляли, а бумагу промывали в PBS в течение пяти минут для трех смен. Гашение осуществляли замачиванием нитроцеллюлозы в 5% лошадиной сыворотке в течение 15 минут.После обработки геля в течение одного часа подходящей антисывороткой, конъюгированной с щелочной фосфатазой или пероксидазой, окрашивание завершали с использованием соответствующего субстрата для проявления цвета. Нитроцеллюлозную бумагу сушили и подвергали исследованию для обнаружения олигоклональных полос, которые присутствовали в спинномозговой жидкости, но не в сыворотке. Известные положительные и отрицательные образцы были проанализированы в каждом образце для обеспечения стандартов качества.

Сравнение методов окрашивания серебром и иммуноблоттинга было проведено на идентичных образцах спинномозговой жидкости от пациентов с РС и без МС.Воспроизводимость и улучшенное разрешение неизменно наблюдались с помощью анализа иммуноблоттинга []. Кроме того, способность повышать содержание диаминобензидина серебром позволяла разводить нормальный CSF, чтобы детектировать олигоклональные полосы без потери разрешения []. Сегодня мы используем неконцентрированный CSF в исследованиях изоэлектрического фокусирования для определения олигоклональных полос, а канцерогенный потенциал DAB привел к его замене 4-хлор-1-нафтолом в качестве субстрата для развития.

ЦСЖ субъектов с РС и без МС исследовали с помощью изоэлектрической фокусировки на гелях агарозы. Одну половину цикла обрабатывали окрашиванием серебром (панель A), а другую половину — анализом иммуноблоттинга (панель B). Дорожки 1 и A, а также дорожки 3 и C представляют CSF от 2 пациентов с MS, а дорожки 2 и B, 4 и D от 2 субъектов без MS. Обратите внимание на улучшенное разрешение гелей иммуноблоттинга

CSF от nonMS (дорожки 1 и A) и 2 пациентов с MS (дорожки 2, 3 и B, C) были исследованы с помощью анализа иммуноблоттинга.Неконцентрированный CSF использовался в панели A, а CSF, разведенный 1/10, использовался в панели B. Усиление DAB серебром (панель B) позволило разбавить CSF для анализа с превосходным разрешением полос OCB

Присутствие OCB в CSF является показательным. аномально повышенного синтеза интратекального IgG. Часто, но не всегда, это открытие связано с повышением индекса IgG и 24-часовым синтезом IgG. В то время как последние два показателя являются количественными, определение полос IgG является качественным показателем продуцируемого IgG, а именно оценкой гетерогенности заряда интратекальных иммуноглобулинов.Хотя количественное определение полос IgG может быть выполнено довольно легко, в этом упражнении мало пользы, поскольку количество полос редко коррелирует со степенью инвалидности. Вместо этого это может быть косвенным показателем продолжительности болезни. Полосы, которые появляются редко, исчезают; со временем появляются новые полосы, и по мере того, как болезнь продолжается, количество полос также увеличивается. Хотя есть свидетельства того, что количество полосок редко коррелирует с инвалидностью, есть некоторые свидетельства того, что заболевание протекает легче у пациентов с отрицательной полосой, которые составляют <3% всех пациентов с РС.[14–16]

Отличается ли спинномозговая жидкость при раннем начале или в детском рассеянном склерозе и остром диссеминированном энцефаломиелите (ОДЭМ) от таковых у взрослых? В исследовании, в котором изучалась СМЖ 136 пациентов с рассеянным склерозом и заболеванием, начавшимся в возрасте до 16 лет, олигоклональные полосы были замечены у 92% пациентов [17]. В отличие от взрослых, у которых плеоцитоз в спинномозговой жидкости редко встречается даже во время обострения, у 66% детей было повышенное количество клеток в спинномозговой жидкости, а у 30% — более 30 / куб.мм. В другом исследовании, в котором ADEM изучали у педиатрических пациентов, анализ 54 спинномозговой жидкости не выявил полос ни у одного пациента. [18,19] В совокупности оказалось, что наличие ОКБ в значительной степени способствует диагностике рассеянного склероза и его отсутствия. , диагноз ADEM в соответствующих клинических условиях. В спинномозговой жидкости от педиатрических пациентов с РС также наблюдалась более высокая частота олигоклональных полос IgM, чем у взрослых [17]. Значение этого открытия для будущего возникновения прогрессирующего заболевания необходимо изучить, поскольку наличие полос IgM было связано с возникновением прогрессирующего течения у взрослых с РС.[20–23]

В недавнем исследовании, в котором изучались ОКБ в спинномозговой жидкости 441 пациента с РС и 77 пациентов с ADEM, ОКБ, уникальные для спинномозговой жидкости, чаще наблюдались при РС (89%), но не при ADEM (10%). . [24] Примерно 10% пациентов с РС и 84% пациентов с ADEM не показали полос или «зеркального рисунка», а именно идентичных полос в сыворотке и спинномозговой жидкости. Интересно, что картина IEF CSF у экспериментальных животных с аутоиммунным энцефаломиелитом (EAE) также показала зеркальную картину, указывая на то, что системный иммунный ответ преобладает при EAE и ADEM.Однако при РС иммунный ответ преимущественно интратекальный. Следовательно, ОКБ полезны для дифференциации ADEM от MS, так как присутствие ОКБ более вероятно при МС, чем при ADEM.

Антигенная специфичность олигоклональных IgG была предметом интенсивных исследований. Реактивность к антигенам, которые являются универсальными для пациентов с РС, но не для контрольной группы, еще предстоит определить в спинномозговой жидкости или сыворотке. Реактивность ОКБ исследовали с использованием CSF от 14 MS и 14 нормальных людей с использованием случайных гексамеров, экспрессированных в библиотеке бактериофагов.[25] Аминокислотный мотив, RRPFF, был идентифицирован в реактивности IgG от 5/14 пациентов с РС и 1/14 контрольной группы. С помощью поиска в GenBank последовательность была идентифицирована в ядерном антигене вируса Эпштейна-Барра (EBNA 1) и белке теплового шока, α β кристаллическом, причем оба антигена участвовали в патогенезе рассеянного склероза. [26]

Идентификация ОКБ неоценима для диагностики РС. Согласно последним критериям Макдональда, если присутствуют ОКБ или выявлен повышенный индекс IgG, это открытие можно использовать с менее строгими критериями МРТ для удовлетворения распространения в космосе.[27] ОКБ также полезны в качестве предиктора будущего возникновения РС после дозорной атаки демиелинизации, совместимой с будущим возникновением рассеянного склероза, а именно, клинически изолированного синдрома (CIS). Появление ОКБ в спинномозговой жидкости при поступлении у пациента с КИС является сильным индикатором будущего развития РС. В исследовании, в котором изучали МРТ и ЦСЖ на исходном уровне и во время последующего наблюдения у 415 пациентов с СНГ, наблюдаемых в течение более 50 месяцев, было обнаружено, что наличие ОКБ в ЦСЖ является фактором риска развития второго рецидива и диагнозом клинического РС. независимо от отклонений на МРТ.Наличие полос удваивает риск развития рассеянного склероза в этой популяции, но наличие или отсутствие ОКБ, по-видимому, не влияет на инвалидность. [14]

Протеомика CSF

Двумерный электрофорез с последующей масс-спектрометрией потенциальных «пятен» привел к идентификации множества белков в CSF человека. Техника, называемая «протеомикой», позволяет детально разделить белки в биологических жидкостях. Анализ «протеома» клеток и биологических жидкостей дает надежду на определение патогенеза различных заболеваний, и анализ спинномозговой жидкости у пациентов с рассеянным склерозом был в центре внимания.Обнаружение белков, уникальных для рассеянного склероза, дало возможность идентифицировать белки, специфичные для заболевания, и открыло возможности идентификации возбудителей, если такие агенты экспрессируются в спинномозговой жидкости. Объединенный РС CSF от трех пациентов и трех воспалительных заболеваний ЦНС был изучен в одном таком исследовании. [28] CSF концентрировали в 500 раз и исследовали на различия зарядов с использованием изоэлектрического фокусирования в трех отдельных градиентах pH и на различия молекулярной массы во втором измерении с помощью SDS PAGE.Всего было идентифицировано 430 пятен из 61 белка в CSF MS, из которых все, кроме четырех белков, как известно, присутствовали в нормальном CSF человека. Однако четыре белковых пятна, уникальные для MS CSF, не смогли идентифицировать какой-либо белок, который расширил наши представления об этом заболевании (хрящевой кислотный белок, тетранектин, SPARC-подобный белок и аутотаксин t, ингибитор фосфодиастеразы). Роли этих четырех различных белков в патогенезе РС, если таковые имеются, еще предстоит определить.

В последующем исследовании MS CSF исследовали с использованием другого метода, который не требовал изоэлектрического фокусирования с последующим SDS PAGE.[29] Вместо этого CSF подвергали фракционированию и концентрированию с использованием ультрафильтрации для обогащения белками размером 5–50 кДа. Таким образом были удалены белки, такие как альбумин, трансферрин и иммуноглобулины, которые являются большими, многочисленными и мешают идентификации более мелких белков. Ретентат 5–50 кД был подвергнут расщеплению пепсином и двумерной жидкостной хроматографии с последующим газофазным фракционированием в ионной ловушке. Этот безгелевый подход идентифицировал 148 белков в спинномозговой жидкости поясницы пациентов с РС и контрольной группы.Были идентифицированы шестьдесят новых белков, о существовании которых ранее не было известно в спинномозговой жидкости, а также ряд белков, уникальных для рассеянного склероза. Некоторые из этих белков являются многообещающими биомаркерами, но необходимо провести количественные исследования ЦСЖ, чтобы лучше определить их роль в патогенезе рассеянного склероза и установить их соответствующие роли в качестве биомаркеров для различных функций воспаления, демиелинизации, дегенерации и восстановления. Потенциальные биомаркеры и терапевтические мишени рассеянного склероза в настоящее время изучаются в других подобных исследованиях.[30,31]

Следует отметить, что потенциальные биомаркеры РС могут быть белками, которые предпочтительно экспрессируются в спинномозговой жидкости пациентов с РС, или могут быть белками, экспрессируемыми как в группах РС, так и не в группах МС. Значение белков, наблюдаемых исключительно в контроле, но не в группе MS, неясно. Следует также помнить, что методы протеомики являются качественными, а не количественными и не позволяют дифференцировать белки, экспрессируемые преимущественно в больших количествах у пациентов с РС, и поэтому, вероятно, имеют значение с точки зрения патогенеза.

Липидомия в спинномозговой жидкости

Фосфолипиды, церамиды, сфингомиелин, цереброзиды, холестерин и их производные составляют основную часть сухой массы ЦНС. Анализ липидов в спинномозговой жидкости пациентов с РС [32,33] не выявил патологий, связанных с заболеванием, поэтому до недавнего времени интерес к изучению липидов угас. Методы ионизации электрораспылением и ионизации химическим распылением в атмосфере сделали возможным исследование липидов в спинномозговой жидкости человека ранее невозможным образом.[34] Липиды служат основным каркасом для нейронов и глии и служат для изоляции аксонов через липидный миелин. Они являются источником энергии для клеток и могут быстро превращаться в сигнальные молекулы и молекулы, которые опосредуют воспаление за счет производства простагландинов и простациклинов. Исследования ионизации электрораспылением выявили снижение содержания сульфатидов в бляшках и в прилегающем нормальном белом веществе головного мозга с рассеянным склерозом на 60 и 25% соответственно. [35] Такие исследования ЦСЖ при РС, несомненно, выявят глобальные липидные изменения при РС, которые могут дать ценную информацию о диагностике и патогенезе этого расстройства.

Транскриптомика в CSF

Транскриптомика — это исследование «профилирования экспрессии» в мозге и, следовательно, в CSF в определенный момент времени. Сбор CSF в идеальных условиях, поддерживающих целостность мРНК, имеет решающее значение в таких исследованиях, поскольку мРНК очень нестабильна. После того, как собраны и получены соответствующие молекулы кДНК, технологии массива генов помогают идентифицировать гены как с повышенной, так и с пониженной регуляцией. Эта молодая технология в настоящее время находится в стадии разработки для CSF и может служить для определения изменений, которые характеризуют различные стадии рассеянного склероза, воспаления, демиелинизации, ремиелинизации и нервного генеза.В недавнем исследовании транскриптом из В-клеток в спинномозговой жидкости при РС был коррелирован с протеомом, идентифицированным с помощью масс-спектрометрии. Было выявлено полное соответствие между рекомбинацией V (D) J и соматической гипермутацией вариабельной области гена иммуноглобулина и последовательностями вариабельной области IgG, что указывает на то, что В-клетки действительно являются источником некоторых компонентов наблюдаемого протеома. в спинномозговой жидкости у пациентов с РС. [36]

Биомаркеры в CSF

Воспаление в MS

Растворимые медиаторы воспаления, а именно лимфокины, простагландины, хемокины и комплекс атаки на мембрану комплемента C5b-9, изучались в CSF в ограниченных исследованиях рассеянного склероза.[37–39] IL1, IL12, TNF-α, INF, IL10, TGF-β и молекулы адгезии и их растворимые рецепторы, а также MMP 9 — все исследованные состояния воспаления или покоя. [40–43] Была обнаружена умеренная корреляция. идентифицированы между некоторыми из этих воспалительных маркеров в сыворотке или спинномозговой жидкости и свидетельством активности заболевания на МРТ [44–47]. Ни один из них не оправдал ожиданий суррогата клинической активности или прогрессирования заболевания.

Маркеры демиелинизации

Насколько хорошо CSF отражает демиелинизацию в ЦНС? Новаторские исследования электронной микроскопии отложений из ультрацентрифугированной спинномозговой жидкости от пациентов с РС выявили типичные многослойные фрагменты миелина с четкой основной плотной линией и межпериодными линиями как внеклеточные фрагменты во время клинических обострений.[48] ​​Эти наблюдения привели к изучению белков миелина в спинномозговой жидкости как маркеров демиелинизации. «Материал, подобный МБП» (МБП), вероятно, изучен лучше всего; иммунореактивный MBPL или его фрагменты могут быть обнаружены в спинномозговой жидкости во время острых обострений у 80% пациентов с ремиттирующим рецидивирующим РС, перенесших острые обострения. [49–51] Уровни MBPL в спинномозговой жидкости резко повышаются во время обострения и падают в течение следующих 4–6 недель. Однако оценка MBPL не оправдала ожиданий суррогата демиелинизации в CSF по ряду причин.Уровни MBP в спинномозговой жидкости поясницы могут быть нормальными при остром неврите зрительного нерва [52], но часто отклоняются от нормы у пациентов, перенесших активный миелит. [53,54] Это, вероятно, просто отражение анатомической близости или расстояния от места взятия пробы до места расположения демиелинизация. Иммунореактивный MBPL или его фрагменты также могут быть обнаружены в спинномозговой жидкости при нарушениях, отличных от рассеянного склероза, и его присутствие является просто маркером повреждения миелина, будь то рассеянный склероз, травма, нарушение мозгового кровообращения или любое нарушение, которое может вызвать повреждение миелина.Однако следует отметить, что фрагмент MBP 43–88 заметно отсутствовал в CSF в одном исследовании с участием 8/10 пациентов с ADEM, расстройством с диссеминированным повреждением белого вещества [55]. Было высказано предположение, что обнаружение специфических фрагментов MBP может быть более специфичным для обострений MS, поскольку размер MBP, наблюдаемый в CSF пациентов с цереброваскулярными событиями, значительно отличается от фрагментов, наблюдаемых в CSF пациентов с MS. Фрагменты MBP образуются в результате деградации MBP лизозомальными карбоксиэндопептидазами, особенно катепсином D, который обычно присутствует в участках демиелинизации рассеянного склероза.[56] Полезность обнаружения конкретных фрагментов, которые придают специфичность обнаружения MBP-подобного материала при рассеянном склерозе, еще предстоит продемонстрировать.

Есть ли какое-либо клиническое применение в измерении ЦСЖ MBP? Измерение уровней MBP в спинномозговой жидкости при рассеянном склерозе иногда используется для подтверждения клинического обострения, поскольку повышенные уровни обычно не наблюдаются у пациентов в периоды ремиссии. Повышенные уровни обычно остаются повышенными в течение 4–6 недель и поэтому могут использоваться в качестве маркера недавней активности заболевания.Однако нормальное значение не означает прекращения болезни по причинам, указанным выше. Однако следует отметить, что определение активности заболевания, используемое в большинстве этих исследований, предшествовало эпохе МРТ исследований при рассеянном склерозе и, следовательно, не отражает истинную активность заболевания, определяемую поражениями, повышающими уровень гадолиния. Ограничения перевешивают полезность оценки уровней ОБМ в спинномозговой жидкости, из-за чего измерение уровней ОБМ в спинномозговой жидкости не является стандартом при рутинном анализе спинномозговой жидкости пациентов с рассеянным склерозом.

Отсутствие маркеров ремиелинизации

Ремиелинизация не является основным механизмом восстановления функции при рассеянном склерозе. Фактически, большинство поражений остаются демиелинизированными в то время, когда происходит восстановление функции. Это лучше всего видно при неврите зрительного нерва, когда зрительные нервы, которые обычно поражаются, демонстрируют тяжелую демиелинизацию на месте первоначального неврита зрительного нерва при вскрытии, хотя в течение жизни пациент сообщал о нормальном или почти нормальном зрении. Часто это дозорное событие, которое привело к будущему возникновению РС, событию, которое могло произойти примерно за 30–50 лет до смерти.Многие пациенты не могут вспомнить, какой глаз был поражен во время дозорного неврита зрительного нерва, хотя возврата миелина не произошло. В модели демиелинизации лизолецитином приматов, отличных от человека, ремиелинизация зрительного нерва была медленной по сравнению со спинным мозгом [57]. Хотя «теневые бляшки» возникают при рассеянном склерозе, ремиелинизация является скорее исключением, чем правилом в развитии большинства поражений рассеянного склероза. Нет хороших маркеров ремиелинизации, позволяющих обнаруживать теневые бляшки у пациентов в течение жизни.Визуализация с переносом намагниченности на основе вокселей пытается определить параметры ремиелинизации при МС, но полезность этого метода остается инструментом исследования. [58] Эта неспособность обнаружить ремиелинизацию затруднила идентификацию маркеров в спинномозговой жидкости, которые коррелируют с ремиелинизацией. В настоящее время нет маркеров для обнаружения ремиелинизации в спинномозговой жидкости.

Маркеры прогрессирования и инвалидности

Клеточные и молекулярные субстраты прогрессирования и инвалидности при РС только начинают изучаться.Аксональное повреждение, без сомнения, является значительным фактором инвалидности, а также астроглиоз демиелинизированной бляшки, который может препятствовать восстановлению и регенерации. В CSF есть несколько маркеров, которые отражают эти изменения и показывают многообещающие суррогатные маркеры в CSF для травм, которые коррелируют с инвалидностью и прогрессированием.

Фосфорилированные формы белков нейрофиламентов поддерживают целостность аксона, а их отталкивание отрицательных зарядов делает аксоны громоздкими и цилиндрическими.При повреждении аксонов нейрофиламенты становятся нефосфорилированными, а аксоны разрушаются и больше не могут поддерживать нормальную функцию. Антитела к нефосфорилированным нейрофиламентам были полезны для обнаружения поврежденных аксонов с помощью конфокальной микроскопии. Недавно эти антитела были использованы для определения степени повреждения аксонов, характеризующейся присутствием нефосфорилированных нейрофиламентов в спинномозговой жидкости [59]. Исследование показало, что повышенные уровни белка нейрофиламентов в спинномозговой жидкости предсказывают, как независимую переменную, вероятность развития рассеянного склероза в будущем у пациентов с CIS.

Три группы белков составляют нормальные нейрофиламенты; легкие, средние и тяжелые цепи. В ряде исследований было установлено, что легкие цепи нейрофиламентов увеличиваются в спинномозговой жидкости у большинства пациентов с рецидивирующим ремиттирующим рассеянным склерозом. [60–62] Есть некоторые предварительные доказательства того, что уровни тяжелых цепей нейрофиламентов могут быть повышены в спинномозговой жидкости у пациентов. с невритом зрительного нерва или рассеянным склерозом, и что такие уровни могут быть предиктором наличия увеличивающихся поражений на МРТ, а также повышенных уровней MBP в спинномозговой жидкости.Интересным было наблюдение, что изменение тяжелой цепи нейрофиламентов спинномозговой жидкости от исходного уровня до трех недель было предиктором последующего клинического исхода в группе рассеянного склероза, но не в группе неврита зрительного нерва [63]. Интересно также наблюдение, что антитела к нейрофиламентам встречаются в сыворотке и спинномозговой жидкости пациентов с рассеянным склерозом. Такие антитела были идентифицированы как при рецидиве, так и при прогрессирующем заболевании, и могут служить маркерами прогрессирующего повреждения аксонов. Необходимо установить, играют ли эти антитела роль в патогенезе рецидивирующих и прогрессирующих форм рассеянного склероза.Если сывороточные титры легкой цепи нейрофиламента значительно коррелируют с повреждением аксонов, это измерение антител в сыворотке может быть показателем повреждения аксонов при РС и служить подходящим суррогатом для прогрессирования заболевания.

Глиальный белок фибриллярной кислоты (GFAP) и белок S100B — это белки, уникальные для глии. GFAP, основной белок глиального промежуточного филамента, был впервые выделен из бляшки MS из фиброзных астроцитов, которые плотно заселяют типичную бляшку.[64] Белок S100B — это цитозольный белок, обнаруженный в астроцитах и ​​олигодендроцитах. Глиоз является скорее правилом, чем исключением в организации бляшки при РС, и поэтому GFAP и белок S-100B были исследованы в спинномозговой жидкости у пациентов с РС [62]. Уровни GFAP и S100B в спинномозговой жидкости были повышены у пациентов с рецидивом, а также с прогрессирующим заболеванием. Оба эти белка могут служить маркерами глиальной пролиферации в областях демиелинизации и повреждения аксонов. [63,65] Поскольку белок S100B также экспрессируется олигодендроцитами, возможно, что его уровни в спинномозговой жидкости могут отражать не только астроглиоз, но и ремиелинизацию.В совокупности они также могут служить маркерами прогрессирования заболевания. Необходимо провести продольный анализ этих белков в спинномозговой жидкости и установить их полезность в диагностике и прогнозе инвалидности и прогрессирования.

В заключение, оценка спинномозговой жидкости позволяет исследовать изменения в ЦНС, возникающие при здоровье и болезни. С появлением усовершенствованных методов, которые генерируют большие объемы данных и улучшают хранение и анализ данных с использованием биоинформатики, из CSF становится доступной информация, которая помогает в диагностике, лечении и исследованиях рассеянного склероза.Достижения в этих областях, несомненно, изменят лицо рассеянного склероза и дадут возможность пациенту и врачу лучше понять и лечить это заболевание в предстоящие годы.

Сноски

Источник поддержки: Нет

Конфликт интересов: Нет

Ссылки

1. Нажмите EM. Сравнительное исследование спинномозговой жидкости и белков сыворотки крови при рассеянном склерозе с особым упором на реакцию коллоидного золота Ланге. Биохим Дж.1956; 63: 367–72. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 2. Фон Штроч Т.Дж., юрист Т.-младший, Харрис А.Х. Реакция коллоидного золота при рассеянном склерозе. AMA Arch Neurol Psychiatry. 1950; 64: 668–75. [PubMed] [Google Scholar] 3. Ссылка H. Вклад исследований спинномозговой жидкости в диагностику рассеянного склероза. Ital J Neurol Sci. 1987. 6: 57–69. [PubMed] [Google Scholar] 4. Ссылка H. Значение иммуноглобулинового анализа спинномозговой жидкости в клинической неврологии. Рив Патол Нерв Мент. 1976; 97: 323–40. [PubMed] [Google Scholar] 5.Tourtellotte WW. Рассеянный склероз и спинномозговая жидкость. Med Clin North Am. 1963; 47: 1619–28. [PubMed] [Google Scholar] 6. Lemmen LJ, Tourtellotte WW, Glimn JG, Higgins JE, Parker JA. Исследование белков спинномозговой жидкости с помощью бумажного электрофореза. IV: Методы концентрирования разбавленных белковых растворов. Мед Булл (Анн-Арбор) 1957; 23: 135–8. [PubMed] [Google Scholar] 7. Кабат Е.А., Мур Д.Х., Ландоу Х. Электрофоретическое исследование белковых компонентов в спинномозговой жидкости и их взаимосвязи с белками сыворотки.J Clin Invest. 1942; 21: 571–7. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 8. Karcher D, Van Sande M, Lowenthal A. Электрофорез белков жидких цефалорахидных (новая техника) Acta Clin Belg. 1957; 12: 538–9. [Google Scholar] 9. Karcher D, Lowenthal A, Van Soom G. Электрофорез спинномозговой жидкости без предварительного концентрирования. Acta Neurol Belg. 1979; 79: 335–7. [PubMed] [Google Scholar] 10. Кереньи Л., Галяс Ф. Высокочувствительный метод демонстрации белков в препаратах электрофоретической иммунодиффузии.Clin Chim Acta. 1972; 38: 465–7. [PubMed] [Google Scholar] 11. Раммохан К.В. Олигоклональные полосы в неконцентрированном окрашивании СМЖ серебром для агарозных гелей. Neurochem Pathol. 1985; 3: 15–25. [PubMed] [Google Scholar] 12. Раммохан К.В., Браттон Дж. Обнаружение олигоклональных IgG в спинномозговой жидкости с использованием иммуноблот-анализа изоэлектрического фокусирования в агарозе. Неврология. 1986; 36: 315. [Google Scholar] 13. Раммохан К.В., Калланд Дж., Карни Л. Олигоклональные IgG в слезах пациентов с рассеянным склерозом. Неврология. 1988; 38: 251. [Google Scholar] 14.Tintore M, Rovira A, Rio J, Tur C, Pelayo R, Nos C и др. Добавляют ли олигоклональные полосы информацию к МРТ при первых приступах рассеянного склероза? Неврология. 2008; 70: 1079–83. [PubMed] [Google Scholar] 15. Вильяр Л., Гарсия-Барраган Н., Эспино М., Ролдан Е., Садаба М., Гомес-Риал Дж. И др. Влияние специфичности олигоклональных IgM на течение рассеянного склероза. Мульт Склер. 2008. 14: 183–7. [PubMed] [Google Scholar] 16. Джозеф Ф.Г., Херст К.Л., Пикерсгилл Т.П., Бен-Шломо Ю., Робертсон Н.П., Сколдинг, штат Нью-Джерси. Статус олигоклональной полосы спинномозговой жидкости определяет прогноз при рассеянном склерозе: исследование случай-контроль с участием 100 пациентов.J Neurol Neurosurg Psychiatry. 2009. 80: 292–6. [PubMed] [Google Scholar] 17. Pohl D, Rostasy K, Reiber H, Hanefeld F. Характеристики спинномозговой жидкости при раннем рассеянном склерозе. Неврология. 2004; 63: 1966-7. [PubMed] [Google Scholar] 18. Tenembaum S, Chamoles N, Fejerman N. Острый диссеминированный энцефаломиелит: долгосрочное последующее исследование 84 педиатрических пациентов. Неврология. 2002; 59: 1224–31. [PubMed] [Google Scholar] 19. Тенембаум С., Читнис Т., Несс Дж., Хан Дж. С.. Международная педиатрическая исследовательская группа РС. Острый диссеминированный энцефаломиелит.Неврология. 2007. 68: S23–36. [PubMed] [Google Scholar] 20. Villar LM, Masjuan J, Gonzalez-Porque P, Plaza J, Sádaba MC, Roldán E, et al. Интратекальный синтез IgM предсказывает начало новых рецидивов и ухудшение течения болезни при РС. Неврология. 2002; 59: 555–9. [PubMed] [Google Scholar] 21. Villar LM, Masjuan J, Gonzalez-Porque P, Plaza J, Sádaba MC, Roldán E, et al. Интратекальный синтез IgM является прогностическим фактором рассеянного склероза. Энн Нейрол. 2003. 53: 222–6. [PubMed] [Google Scholar] 22. Вильяр Л.М., Садаба М.С., Ролдан Э., Масджуан Дж., Гонсалес-Порке П., Вильяррубия Н. и др.Интратекальный синтез олигоклональных IgM против липидов миелина предсказывает агрессивное течение болезни при РС. J Clin Invest. 2005; 115: 187–94. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 23. Вильяр Л., Гарсия-Барраган Н., Эспино М., Ролдан Е., Садаба М., Гомес-Риал Дж. И др. Влияние специфичности олигоклональных IgM на течение рассеянного склероза. Мульт Склер. 2008. 14: 183–7. [PubMed] [Google Scholar] 24. Франсиотта Д., Колумба-Кабесас С., Андреони Л., Равалья С., Яриус С., Романьоло С. и др. Паттерны полос олигоклонального IgG при воспалительных демиелинизирующих заболеваниях человека и мышей.J Neuroimmunol. 2008. 200: 125–8. [PubMed] [Google Scholar] 25. Rand KH, Houck H, Denslow ND, Heilman KM. Молекулярный подход к поиску мишеней для олигоклональных полос при рассеянном склерозе. J Neurol Neurosurg Psychiatry. 1998. 65: 48–55. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 26. ван Сечел А.С., Байрамович Дж. Дж., ван Стипдонк М. Дж., Персун-Дин С., Гойцкенс С. Б., ван Ноорт Дж. М.. Экспрессия, индуцированная EBV, и HLA-DR-ограниченная презентация человеческими В-клетками альфа-В-кристаллина, потенциального аутоантигена при рассеянном склерозе.J Immunol. 1999. 162: 129–35. [PubMed] [Google Scholar] 27. Polman CH, Reingold SC, Edan G, Filippi M, Hartung HP, Kappos L, et al. Диагностические критерии рассеянного склероза: редакция 2005 г. «критериев Макдональда» Энн Нейрол. 2005. 58: 840–6. [PubMed] [Google Scholar] 28. Hammack BN, Fung KY, Hunsucker SW, Duncan MW, Burgoon MP, Owens GP и др. Протеомный анализ спинномозговой жидкости при рассеянном склерозе. Мульт Склер. 2004; 10: 245–60. [PubMed] [Google Scholar] 29. Noben JP, Dumont D, Kwasnikowska N, Verhaert P, Somers V, Hupperts R, et al.Протеом спинномозговой жидкости в поясничном отделе при рассеянном склерозе: характеристика с помощью ультрафильтрации, жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии. J Proteome Res. 2006; 5: 1647–57. [PubMed] [Google Scholar] 30. Хан М.Х., Хван С.И., Рой Д.Б., Лундгрен Д.Х., Прайс СП, Усман С.С. и др. Протеомный анализ активных очагов рассеянного склероза позволяет выявить терапевтические цели. Природа. 2008; 451: 1076–81. [PubMed] [Google Scholar] 31. Ромео MJ, Espina V, Lowenthal M, Espina BH, Petricoin EF, 3rd, Liotta LA. Протеом CSF: хранилище белков для идентификации потенциальных биомаркеров.Exp Rev Proteomics. 2005; 2: 57–70. [PubMed] [Google Scholar] 32. Tourtellotte WW, Dejong RN, Van Houten WH. Исследование липидов спинномозговой жидкости: I: исторические аспекты. Мед Булл (Анн-Арбор) 1958; 24: 66–96. [PubMed] [Google Scholar] 33. Tourtellotte WW. Исследование липидов спинномозговой жидкости: VI: нормальный липидный профиль. Неврология. 1959; 9: 375–83. [PubMed] [Google Scholar] 34. Фонтех А.Н., Харрингтон Р.Дж., Хьюмер А.Ф., Бирингер Р.Г., Риггинс Дж.Н., Харрингтон М.Г. Идентификация маркеров заболевания в спинномозговой жидкости человека липидомными и протеомными методами.Маркеры Дис. 2006; 22: 39–64. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 35. Marbois BN, Faull KF, Fluharty AL, Raval-Fernandes S, Rome LH. Анализ сульфатидов мозжечка крыс и белого вещества рассеянного склероза методом масс-спектрометрии с электрораспылением отрицательных ионов. Biochim Biophys Acta. 2000; 1484: 59–70. [PubMed] [Google Scholar] 36. Обермайер Б., Ментеле Р., Малотка Дж., Келлерманн Дж., Кюмпфель Т., Векерле Х. и др. Сопоставление транскриптомов олигоклональных иммуноглобулинов и протеомов спинномозговой жидкости при рассеянном склерозе.Nat Med. 2008; 14: 688–93. [PubMed] [Google Scholar] 37. Halawa I, Lolli F, Link H. Терминальный компонент комплемента C9 в спинномозговой жидкости и плазме пациентов с рассеянным склерозом и асептическим менингитом. Acta Neurol Scand. 1989; 80: 130–5. [PubMed] [Google Scholar] 38. Белекова Б., Мартин Р. Развитие биомаркеров при рассеянном склерозе. Головной мозг. 2004; 127: 1463–78. [PubMed] [Google Scholar] 40. Кракауэр М., Соренсен П., Хадеми М., Олссон Т., Селлебьерг Ф. Повышенная экспрессия мРНК IL-10 и мРНК IL-23 при рассеянном склерозе: лечение интерфероном-бета увеличивает экспрессию мРНК IL-10 при одновременном снижении экспрессии мРНК IL-23.Мульт Склер. 2008; 14: 622–30. [PubMed] [Google Scholar] 41. Селлебьерг Ф., Кристиансен ТБ, Виттенхаген П., Гарред П., Ойген-Ольсен Дж., Фредериксен Дж. Л. и др. Хемокиновый рецептор CCR5 при рассеянном склерозе, леченном интерфероном. Acta Neurol Scand. 2007; 115: 413–8. [PubMed] [Google Scholar] 42. Соренсен П.С. Биологические маркеры в жидкостях организма для активности и прогрессирования рассеянного склероза. Мульт Склер. 1999; 5: 287–90. [PubMed] [Google Scholar] 43. Файнарди Э., Кастеллацци М., Беллини Т., Манфринато М.С., Балди Э., Казетта I и др.Уровни спинномозговой жидкости и сыворотки, а также интратекальное производство металлопротеиназы-9 активного матрикса (MMP-9) как маркеры активности заболевания у пациентов с рассеянным склерозом. Мульт Склер. 2006; 12: 294–301. [PubMed] [Google Scholar] 44. Джованнони Г., Миллер Д.Х., Лосефф Н.А., Зайлер М., Левеллин-Смит Н., Томпсон А.Дж. и др. Сывороточные маркеры воспаления и клинические / МРТ-маркеры прогрессирования болезни при рассеянном склерозе. J Neurol. 2001; 248: 487–95. [PubMed] [Google Scholar] 45. Путети П., Моррис М., Ставиарц Л., Телешова Н., Кивисакк П., Пашенков М. и др.Рассеянный склероз: исследование хемокиновых рецепторов и регуляторных Т-клеток в отношении переменных МРТ. Eur J Neurol. 2003. 10: 529–35. [PubMed] [Google Scholar] 46. Сейди О.А., Семра Ю.К., Шариф М.К. Экспрессия CD5 на В-лимфоцитах коррелирует с активностью заболевания у пациентов с рассеянным склерозом. J Neuroimmunol. 2002; 133: 205–10. [PubMed] [Google Scholar] 47. Брук В., Нойберт К., Бергер Т., Вебер-младший. Клинические, радиологические, иммунологические и патологические данные при воспалительной демиелинизации ЦНС — возможные маркеры процесса, опосредованного антителами.Мульт Склер. 2001; 7: 173–7. [PubMed] [Google Scholar] 48. Herndon RM, Kasckow J. Электронно-микроскопические исследования осадка спинномозговой жидкости при демиелинизирующем заболевании. Энн Нейрол. 1978; 4: 515–23. [PubMed] [Google Scholar] 49. Whitaker JN. Основной белок миелина и рассеянный склероз. Ital J Neurol Sci. 1983; 4: 153–7. [PubMed] [Google Scholar] 50. Башир Р.М., Уитакер Дж. Молекулярные особенности иммунореактивного основного белка миелина в спинномозговой жидкости у лиц с множественным слайцерозом. Энн Нейрол. 1980; 7: 50–7.[PubMed] [Google Scholar] 51. Уитакер Дж., Гупта М., Смит О.Ф. Эпитопы иммунореактивного основного белка миелина в спинномозговой жидкости человека. Энн Нейрол. 1986; 20: 329–36. [PubMed] [Google Scholar] 52. Фредериксен JL, Уитакер JN. Миелиновый основной протеиноподобный материал спинномозговой жидкости при остром моносимптомном неврите зрительного нерва. Acta Neurol Scand. 1996; 94: 303–9. [PubMed] [Google Scholar] 53. Охта М., Охта К. Обнаружение основного белка миелина в спинномозговой жидкости. Эксперт Rev Mol Diagn. 2002; 2: 627–33. [PubMed] [Google Scholar] 54.Селлебьерг Ф, Кристиансен М, Нильсен П.М., Фредериксен Дж. Цереброспинальная жидкость: показатели активности заболевания у пациентов с рассеянным склерозом. Мульт Склер. 1998. 4: 475–9. [PubMed] [Google Scholar] 55. Уитакер Дж. Н., Лисак Р. П., Башир Р. М., Fitch OH, Сейер Дж. М., Кранс Р. и др. Иммунореактивный основной белок миелина в спинномозговой жидкости при неврологических расстройствах. Энн Нейрол. 1980; 7: 58–64. [PubMed] [Google Scholar] 56. Цао Л., Гудин Р., Вуд Д., Москарелло М.А., Уитакер Дж. Быстрое высвобождение и необычная стабильность иммунодоминантного пептида 45-89 из цитруллинированного основного белка миелина.Биохимия. 1999; 38: 6157–63. [PubMed] [Google Scholar] 57. Лашапель Ф., Бачелин С., Муассонье П., Наит-Умесмар Б., Идальго А., Фонтен Д. и др. Нарушение ремиелинизации зрительного нерва приматов. Brain Pathol. 2005. 15: 198–207. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 58. Чен Дж. Т., Кульман Т., Янсен Г. Х., Коллинз Д. Л., Аткинс Г. Л., Фридман М. С. и др. Анализ на основе вокселей эволюции коэффициента передачи намагниченности для количественной оценки ремиелинизации и демиелинизации с гистопатологической валидацией при поражении рассеянным склерозом.Нейроизображение. 2007; 36: 1152–8. [PubMed] [Google Scholar] 59. Бретшнайдер Дж., Петцольд А., Юнкер А., Тумани Х. Маркеры повреждения аксонов в спинномозговой жидкости пациентов с клинически изолированным синдромом улучшают прогнозирование конверсии в определенный рассеянный склероз. Мульт Склер. 2006; 12: 143–8. [PubMed] [Google Scholar] 60. Lycke JN, Karlsson JE, Andersen O, Rosengren LE. Белок нейрофиламента в спинномозговой жидкости: потенциальный маркер активности при рассеянном склерозе. J Neurol Neurosurg Psychiatry. 1998. 64: 402–4.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 61. Семра Ю.К., Сейди О.А., Шариф МК. Повышенное интратекальное высвобождение белков аксонального цитоскелета при рассеянном склерозе связано с прогрессирующим заболеванием и клинической инвалидностью. J Neuroimmunol. 2002; 122: 132–9. [PubMed] [Google Scholar] 62. Malmestrom C, Haghighi S, Rosengren L, Andersen O, Lycke J. Легкий белок нейрофиламента и глиальный фибриллярный кислый белок как биологические маркеры при РС. Неврология. 2003. 61: 1720–5. [PubMed] [Google Scholar] 63. Lim ET, Sellebjerg F, Jensen CV, Altmann DR, Grant D, Keir G и др.Острое повреждение аксонов позволяет прогнозировать клинический исход у пациентов с рассеянным склерозом. Мульт Склер. 2005; 11: 532–36. [PubMed] [Google Scholar] 64. Eng LF, Gerstl B, Vanderhaeghen JJ. Исследование белков в бляшках рассеянного склероза. Trans Am Soc Neurochem. 1970; 1: 42. [Google Scholar] 65. Лим Е.Т., Грант Д., Пашенков М., Кейр Г., Томпсон Э.Дж., Седерстрём М. и др. Уровни специфических белков головного мозга в спинномозговой жидкости при неврите зрительного нерва. Мульт Склер. 2004; 10: 261–5. [PubMed] [Google Scholar]

Спинномозговая жидкость при рассеянном склерозе

Ann Indian Acad Neurol.Октябрь-декабрь 2009 г .; 12 (4): 246–253.

Kottil W. Rammohan

Клиническая и экспериментальная нейроиммунология, Отдел неврологии, Государственный университет Огайо, Колумбус, Огайо 43221 США

Клиническая и экспериментальная нейроиммунология, Отделение неврологии, Государственный университет Огайо, Колумбус, Огайо 4321021 США

Для корреспонденции: д-р Коттил В. Раммохан, 2050 Kenny Road, Suite 2250, Columbus, Ohio 43221, USA. E-mail: [email protected]

Поступила в редакцию 26 мая 2009 г .; Пересмотрено 31 мая 2009 г .; Принята в печать 30 июля 2009 г.

Copyright © Annals of Indian Academy of Neurology

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии правильного цитирования оригинальной работы.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Предпосылки:

Технологические достижения сделали возможным исследование спинномозговой жидкости человека (CSF) способом, который ранее был невозможен.ЦСЖ позволяет увидеть изменения, происходящие в центральной нервной системе (ЦНС) при здоровье и болезнях. Анализируя CSF, мы косвенно определяем состояние здоровья ЦНС и правильно или неверно делаем выводы о механизмах повреждения и восстановления ЦНС.

Цель, материалы и методы:

Рассмотреть текущее состояние знаний об изменениях в спинномозговой жидкости при рассеянном склерозе.

Обсуждение:

Создание маркеров спинномозговой жидкости, позволяющих оценивать различные биологические процессы при рассеянном склерозе, остается сложной задачей.Из всех биологических процессов маркеры воспаления, вероятно, идентифицируются лучше всего. Обнаружение полос олигоклонального иммуноглобулина в спинномозговой жидкости теперь признано единственным наиболее полезным лабораторным маркером в спинномозговой жидкости, помогающим в диагностике рассеянного склероза. Маркеры демиелинизации, ремиелинизации, нейроаксональной потери, восстановления и регенерации нейронов и астроглиоза только сейчас распознаются. На сегодняшний день не определен хороший суррогат для любого из этих патофизиологических процессов.

Заключение:

Целью будущих исследований является не только определение суррогатных маркеров в спинномозговой жидкости для каждой из вышеперечисленных функций, но и распространение их на другие более легкодоступные жидкости организма, такие как кровь и моча.В этой статье представлен синопсис современной литературы по большинству из этих областей оценки спинномозговой жидкости, относящейся к рассеянному склерозу.

Ключевые слова: Спинномозговая жидкость, рассеянный склероз

Спинномозговая жидкость (ЦСЖ) долгое время находилась в центре внимания при рассеянном склерозе. «Кривая коллоидного золота» использовалась в диагностике рассеянного склероза (РС) до появления современных методов разделения и оценки белков. [1–2] «Паретический» образец (как «общий парез» при сифилисе центральная нервная система) или повышение «первой зоны» в этом анализе считалось подтверждением диагностики этого расстройства.Основа изменений, наблюдаемых в анализе кривой коллоидного золота, не известна, но характер первой зоны, описанный в этом анализе, вероятно, был отражением присутствия иммуноглобулинов в спинномозговой жидкости, обычно наблюдаемого при РС, а также при общем парезе сифилиса.

ЦСЖ прозрачная и бесцветная у всех пациентов с РС, и у большинства пациентов количество клеток и общий уровень белка нормальные. Даже во время обострения общий белок и количество клеток в спинномозговой жидкости остаются нормальными, хотя иногда можно выявить умеренный мононуклеарный плеоцитоз.Уровни белка более 100 мг / дл явно необычны для рассеянного склероза и должны насторожить врача на альтернативный диагноз, а также на плеоцитоз более 100 клеток мм ³ . За прошедшие годы стало ясно, что уровни IgG в спинномозговой жидкости или индекс IgG постоянно повышаются, 24-часовой интратекальный синтез IgG аномально повышен, а IgG, продуцируемый в ЦНС, имеет ограниченный характер заряда, что приводит к известному аномальному электрофоретическому профилю. в виде олигоклональных полос (ОКБ). В дополнение к типичным большим и многочисленным белкам, таким как преальбумин, альбумин, трансферрин и иммуноглобулины, которые можно идентифицировать стандартным электрофорезом, многие другие белки были идентифицированы в спинномозговой жидкости пациентов с РС с помощью передовых чувствительных методов.На сегодняшний день в нормальной спинномозговой жидкости обнаружено более 400 белков, и некоторые из этих белков являются многообещающими маркерами болезненного процесса, когда экспрессируются в спинномозговой жидкости в аномальных количествах. Кроме того, исследования расширили изменения в спинномозговой жидкости на липиды и нуклеиновые кислоты. Цель этого сообщения — предоставить обзор большинства последних достижений в нашем понимании изменений CSF при РС. Для получения дополнительной информации читателя отсылают к обзорам по конкретным темам, поскольку подробное обсуждение всех этих тем выходит за рамки этого ограниченного обзора.

МС и олигоклональные полосы

Аномальный повышенный интратекальный синтез IgG является основой ОКБ при МС. Повышенный индекс IgG , также известный как «индекс связи», был определен Хансом Линком и его коллегами как отношение IgG CSF к альбумину CSF к отношению сывороточного IgG к сывороточному альбумину [3,4]. отношение a-фактора, когда оно больше 0,7 (или определенное значение для лаборатории), свидетельствует об интратекальном синтезе IgG. Tourtellotte и его коллеги установили формулу для определения интратекального синтеза IgG в течение 24-часового периода, и значения, превышающие 4 мг за 24-часовой период (или значения, установленные лабораторией), считались ненормальными.[5,6] Хотя эти количественные измерения интратекального IgG были полезны, наиболее полезным тестом в спинномозговой жидкости пациентов с РС была демонстрация ОКБ. В 1942 году Эльвин Кабат впервые описал повышенный уровень «гамма-глобулина» в спинномозговой жидкости у пациентов с РС [7]. Находясь в Колумбийском университете в Нью-Йорке, он описал использование тогда новой техники электрофореза в агарозном геле, чтобы показать аномальное повышение гамма-глобулинов, но не альбумина или трансферрина в спинномозговой жидкости у пациентов с рассеянным склерозом, но не у контрольных субъектов.Впоследствии, в 1957 году в Антверпене, Бельгия, Дениз Карчер и ее коллеги из лаборатории Армана Ловенталя впервые описали присутствие олигоклональных полос в спинномозговой жидкости пациентов с РС с помощью электрофореза в агарозном геле [8]. Они описали обнаружение олигоклональных полос в неконцентрированной спинномозговой жидкости с использованием метода окрашивания серебром [9], который был модификацией методов Кереньи и Галяса для агарозных гелей. [10] Первоначальная методика окрашивания серебром, которую они разработали, была громоздкой, и для анализа одного образца спинномозговой жидкости потребовалось целых три дня.Впоследствии мы модифицировали этот метод и адаптировали его для одновременного анализа до 20 образцов спинномозговой жидкости за три часа. [11] Поскольку методы окрашивания серебром являются громоздкими, мы разработали и в 1986 году внедрили иммуноблот-анализ неконцентрированной спинномозговой жидкости, который позволил обнаруживать ОКБ в неконцентрированной спинномозговой жидкости [12]. Повышение уровня 3 ‘, 4’-диаминобензидина (DAB) серебром дополнительно позволило при необходимости разбавить нормальный CSF в десять раз, и этот метод также позволил исследовать микролитровые количества CSF у мышей и анализировать другие жидкости организма, такие как слезы, на предмет обнаружения. ОКБ.[13]

После разработки иммуноблот-анализа спинномозговой жидкости в 1986 году мы регулярно использовали этот метод в нашем учреждении для исследования спинномозговой жидкости на ОКБ в более чем 10 000 проб (~ 600 проб в год). Методы окрашивания серебром для агарозных гелей и текущая методика иммуноблот-анализа CSF описаны ниже:

Окрашивание серебром агарозных гелей

Изоэлектрическое фокусирование агарозы проводили с использованием стандартных методик. Вкратце, изоэлектрическое фокусирование неконцентрированной CSF проводили при постоянном токе с использованием 1% агарозы с нулевым EEO, содержащей 10% амфолинов, pH 3.5-10. По завершении процедуры гель фиксировали в 60% метаноле и 4% уксусной кислоте, обильно промывали деионизированной водой, сушили с помощью фена и окрашивали серебром, как описано ниже.

Все реагенты, используемые для окрашивания, описаны в. 2% (мас. / Об.) Раствор ферроцианида калия готовили в ацетатном буфере, pH 6, и использовали достаточное количество для пропитывания высушенного геля. Через 10 минут гель промывали обильным количеством деионизированной воды трижды по 5 минут каждый, в результате чего общее время промывки составляло 15 минут.Равные объемы растворов A и B [] смешивали путем медленного добавления по каплям раствора B к раствору A, избегая образования белого осадка. В этот раствор помещали гель, и полосы обычно появлялись в течение пяти минут; разработка была завершена за 15 минут. После завершения проявления гели промывали 1% уксусной кислотой в течение 20 минут и сушили.

Таблица 1

Окрашивание агарозных гелей серебром

1.	Ацетатный буфер
a.	Ацетат натрия	82 г / л
	С помощью ледяной уксусной кислоты довести pH до 6,0
2.	Ферроцианид калия (2% мас. / Об.) В ацетатном буфере
3.	Раствор A
	7% (мас. / Об.) Карбонат натрия
	Раствор B
	Нитрат аммония	3 грамма
	Нитрат серебра	2 грамма
	Кремневольфрамовая кислота	10 граммов
	Формалин	8.8 мл
	Вода на 1 л

Иммуноблот-анализ CSF

Изоэлектрическое фокусирование агарозы выполняли, как описано выше. Парные образцы спинномозговой жидкости и сыворотки (разведенных 1: 300) обрабатывали таким образом, чтобы профиль IgG в спинномозговой жидкости можно было сравнить с профилем сыворотки. Аппликационная бумага, на которую было загружено приблизительно 20 мкл CSF или разбавленной сыворотки, подвергалась изоэлектрическому фокусированию. Электродные растворы 0,5 М уксусной кислоты и 0.В качестве анодалита и катодалита использовали 5 М гидроксид натрия соответственно. Для достижения идеальных результатов фокусировку следует производить в режиме постоянного тока. Запуск был прерван через первые 15 минут (обычно около 1000 вольт), чтобы удалить полосы. Дополнительная фокусировка проводилась в течение 15-20 минут, пока напряжение не достигало 1500 вольт. По завершении цикла электродные полоски удаляли, и гель ненадолго промывали PBS. Нитроцеллюлозную бумагу подходящего размера, пропитанную PBS, использовали для переноса белков из геля на нитроцеллюлозную бумагу.Хотя мы ранее использовали PBS с 20% метанолом для подготовки нитроцеллюлозы для переноса, не было отмечено, что использование метанола добавляет каких-либо преимуществ для переноса белка и больше не используется. Путем простого контакта и адсорбции все белки могут быть успешно перенесены на нитроцеллюлозную бумагу после плотного контакта в течение 30 минут. В конце этого периода гель удаляли, а бумагу промывали в PBS в течение пяти минут для трех смен. Гашение осуществляли замачиванием нитроцеллюлозы в 5% лошадиной сыворотке в течение 15 минут.После обработки геля в течение одного часа подходящей антисывороткой, конъюгированной с щелочной фосфатазой или пероксидазой, окрашивание завершали с использованием соответствующего субстрата для проявления цвета. Нитроцеллюлозную бумагу сушили и подвергали исследованию для обнаружения олигоклональных полос, которые присутствовали в спинномозговой жидкости, но не в сыворотке. Известные положительные и отрицательные образцы были проанализированы в каждом образце для обеспечения стандартов качества.

Сравнение методов окрашивания серебром и иммуноблоттинга было проведено на идентичных образцах спинномозговой жидкости от пациентов с РС и без МС.Воспроизводимость и улучшенное разрешение неизменно наблюдались с помощью анализа иммуноблоттинга []. Кроме того, способность повышать содержание диаминобензидина серебром позволяла разводить нормальный CSF, чтобы детектировать олигоклональные полосы без потери разрешения []. Сегодня мы используем неконцентрированный CSF в исследованиях изоэлектрического фокусирования для определения олигоклональных полос, а канцерогенный потенциал DAB привел к его замене 4-хлор-1-нафтолом в качестве субстрата для развития.

ЦСЖ субъектов с РС и без МС исследовали с помощью изоэлектрической фокусировки на гелях агарозы. Одну половину цикла обрабатывали окрашиванием серебром (панель A), а другую половину — анализом иммуноблоттинга (панель B). Дорожки 1 и A, а также дорожки 3 и C представляют CSF от 2 пациентов с MS, а дорожки 2 и B, 4 и D от 2 субъектов без MS. Обратите внимание на улучшенное разрешение гелей иммуноблоттинга

CSF от nonMS (дорожки 1 и A) и 2 пациентов с MS (дорожки 2, 3 и B, C) были исследованы с помощью анализа иммуноблоттинга.Неконцентрированный CSF использовался в панели A, а CSF, разведенный 1/10, использовался в панели B. Усиление DAB серебром (панель B) позволило разбавить CSF для анализа с превосходным разрешением полос OCB

Присутствие OCB в CSF является показательным. аномально повышенного синтеза интратекального IgG. Часто, но не всегда, это открытие связано с повышением индекса IgG и 24-часовым синтезом IgG. В то время как последние два показателя являются количественными, определение полос IgG является качественным показателем продуцируемого IgG, а именно оценкой гетерогенности заряда интратекальных иммуноглобулинов.Хотя количественное определение полос IgG может быть выполнено довольно легко, в этом упражнении мало пользы, поскольку количество полос редко коррелирует со степенью инвалидности. Вместо этого это может быть косвенным показателем продолжительности болезни. Полосы, которые появляются редко, исчезают; со временем появляются новые полосы, и по мере того, как болезнь продолжается, количество полос также увеличивается. Хотя есть свидетельства того, что количество полосок редко коррелирует с инвалидностью, есть некоторые свидетельства того, что заболевание протекает легче у пациентов с отрицательной полосой, которые составляют <3% всех пациентов с РС.[14–16]

Отличается ли спинномозговая жидкость при раннем начале или в детском рассеянном склерозе и остром диссеминированном энцефаломиелите (ОДЭМ) от таковых у взрослых? В исследовании, в котором изучалась СМЖ 136 пациентов с рассеянным склерозом и заболеванием, начавшимся в возрасте до 16 лет, олигоклональные полосы были замечены у 92% пациентов [17]. В отличие от взрослых, у которых плеоцитоз в спинномозговой жидкости редко встречается даже во время обострения, у 66% детей было повышенное количество клеток в спинномозговой жидкости, а у 30% — более 30 / куб.мм. В другом исследовании, в котором ADEM изучали у педиатрических пациентов, анализ 54 спинномозговой жидкости не выявил полос ни у одного пациента. [18,19] В совокупности оказалось, что наличие ОКБ в значительной степени способствует диагностике рассеянного склероза и его отсутствия. , диагноз ADEM в соответствующих клинических условиях. В спинномозговой жидкости от педиатрических пациентов с РС также наблюдалась более высокая частота олигоклональных полос IgM, чем у взрослых [17]. Значение этого открытия для будущего возникновения прогрессирующего заболевания необходимо изучить, поскольку наличие полос IgM было связано с возникновением прогрессирующего течения у взрослых с РС.[20–23]

В недавнем исследовании, в котором изучались ОКБ в спинномозговой жидкости 441 пациента с РС и 77 пациентов с ADEM, ОКБ, уникальные для спинномозговой жидкости, чаще наблюдались при РС (89%), но не при ADEM (10%). . [24] Примерно 10% пациентов с РС и 84% пациентов с ADEM не показали полос или «зеркального рисунка», а именно идентичных полос в сыворотке и спинномозговой жидкости. Интересно, что картина IEF CSF у экспериментальных животных с аутоиммунным энцефаломиелитом (EAE) также показала зеркальную картину, указывая на то, что системный иммунный ответ преобладает при EAE и ADEM.Однако при РС иммунный ответ преимущественно интратекальный. Следовательно, ОКБ полезны для дифференциации ADEM от MS, так как присутствие ОКБ более вероятно при МС, чем при ADEM.

Антигенная специфичность олигоклональных IgG была предметом интенсивных исследований. Реактивность к антигенам, которые являются универсальными для пациентов с РС, но не для контрольной группы, еще предстоит определить в спинномозговой жидкости или сыворотке. Реактивность ОКБ исследовали с использованием CSF от 14 MS и 14 нормальных людей с использованием случайных гексамеров, экспрессированных в библиотеке бактериофагов.[25] Аминокислотный мотив, RRPFF, был идентифицирован в реактивности IgG от 5/14 пациентов с РС и 1/14 контрольной группы. С помощью поиска в GenBank последовательность была идентифицирована в ядерном антигене вируса Эпштейна-Барра (EBNA 1) и белке теплового шока, α β кристаллическом, причем оба антигена участвовали в патогенезе рассеянного склероза. [26]

Идентификация ОКБ неоценима для диагностики РС. Согласно последним критериям Макдональда, если присутствуют ОКБ или выявлен повышенный индекс IgG, это открытие можно использовать с менее строгими критериями МРТ для удовлетворения распространения в космосе.[27] ОКБ также полезны в качестве предиктора будущего возникновения РС после дозорной атаки демиелинизации, совместимой с будущим возникновением рассеянного склероза, а именно, клинически изолированного синдрома (CIS). Появление ОКБ в спинномозговой жидкости при поступлении у пациента с КИС является сильным индикатором будущего развития РС. В исследовании, в котором изучали МРТ и ЦСЖ на исходном уровне и во время последующего наблюдения у 415 пациентов с СНГ, наблюдаемых в течение более 50 месяцев, было обнаружено, что наличие ОКБ в ЦСЖ является фактором риска развития второго рецидива и диагнозом клинического РС. независимо от отклонений на МРТ.Наличие полос удваивает риск развития рассеянного склероза в этой популяции, но наличие или отсутствие ОКБ, по-видимому, не влияет на инвалидность. [14]

Протеомика CSF

Двумерный электрофорез с последующей масс-спектрометрией потенциальных «пятен» привел к идентификации множества белков в CSF человека. Техника, называемая «протеомикой», позволяет детально разделить белки в биологических жидкостях. Анализ «протеома» клеток и биологических жидкостей дает надежду на определение патогенеза различных заболеваний, и анализ спинномозговой жидкости у пациентов с рассеянным склерозом был в центре внимания.Обнаружение белков, уникальных для рассеянного склероза, дало возможность идентифицировать белки, специфичные для заболевания, и открыло возможности идентификации возбудителей, если такие агенты экспрессируются в спинномозговой жидкости. Объединенный РС CSF от трех пациентов и трех воспалительных заболеваний ЦНС был изучен в одном таком исследовании. [28] CSF концентрировали в 500 раз и исследовали на различия зарядов с использованием изоэлектрического фокусирования в трех отдельных градиентах pH и на различия молекулярной массы во втором измерении с помощью SDS PAGE.Всего было идентифицировано 430 пятен из 61 белка в CSF MS, из которых все, кроме четырех белков, как известно, присутствовали в нормальном CSF человека. Однако четыре белковых пятна, уникальные для MS CSF, не смогли идентифицировать какой-либо белок, который расширил наши представления об этом заболевании (хрящевой кислотный белок, тетранектин, SPARC-подобный белок и аутотаксин t, ингибитор фосфодиастеразы). Роли этих четырех различных белков в патогенезе РС, если таковые имеются, еще предстоит определить.

В последующем исследовании MS CSF исследовали с использованием другого метода, который не требовал изоэлектрического фокусирования с последующим SDS PAGE.[29] Вместо этого CSF подвергали фракционированию и концентрированию с использованием ультрафильтрации для обогащения белками размером 5–50 кДа. Таким образом были удалены белки, такие как альбумин, трансферрин и иммуноглобулины, которые являются большими, многочисленными и мешают идентификации более мелких белков. Ретентат 5–50 кД был подвергнут расщеплению пепсином и двумерной жидкостной хроматографии с последующим газофазным фракционированием в ионной ловушке. Этот безгелевый подход идентифицировал 148 белков в спинномозговой жидкости поясницы пациентов с РС и контрольной группы.Были идентифицированы шестьдесят новых белков, о существовании которых ранее не было известно в спинномозговой жидкости, а также ряд белков, уникальных для рассеянного склероза. Некоторые из этих белков являются многообещающими биомаркерами, но необходимо провести количественные исследования ЦСЖ, чтобы лучше определить их роль в патогенезе рассеянного склероза и установить их соответствующие роли в качестве биомаркеров для различных функций воспаления, демиелинизации, дегенерации и восстановления. Потенциальные биомаркеры и терапевтические мишени рассеянного склероза в настоящее время изучаются в других подобных исследованиях.[30,31]

Следует отметить, что потенциальные биомаркеры РС могут быть белками, которые предпочтительно экспрессируются в спинномозговой жидкости пациентов с РС, или могут быть белками, экспрессируемыми как в группах РС, так и не в группах МС. Значение белков, наблюдаемых исключительно в контроле, но не в группе MS, неясно. Следует также помнить, что методы протеомики являются качественными, а не количественными и не позволяют дифференцировать белки, экспрессируемые преимущественно в больших количествах у пациентов с РС, и поэтому, вероятно, имеют значение с точки зрения патогенеза.

Липидомия в спинномозговой жидкости

Фосфолипиды, церамиды, сфингомиелин, цереброзиды, холестерин и их производные составляют основную часть сухой массы ЦНС. Анализ липидов в спинномозговой жидкости пациентов с РС [32,33] не выявил патологий, связанных с заболеванием, поэтому до недавнего времени интерес к изучению липидов угас. Методы ионизации электрораспылением и ионизации химическим распылением в атмосфере сделали возможным исследование липидов в спинномозговой жидкости человека ранее невозможным образом.[34] Липиды служат основным каркасом для нейронов и глии и служат для изоляции аксонов через липидный миелин. Они являются источником энергии для клеток и могут быстро превращаться в сигнальные молекулы и молекулы, которые опосредуют воспаление за счет производства простагландинов и простациклинов. Исследования ионизации электрораспылением выявили снижение содержания сульфатидов в бляшках и в прилегающем нормальном белом веществе головного мозга с рассеянным склерозом на 60 и 25% соответственно. [35] Такие исследования ЦСЖ при РС, несомненно, выявят глобальные липидные изменения при РС, которые могут дать ценную информацию о диагностике и патогенезе этого расстройства.

Транскриптомика в CSF

Транскриптомика — это исследование «профилирования экспрессии» в мозге и, следовательно, в CSF в определенный момент времени. Сбор CSF в идеальных условиях, поддерживающих целостность мРНК, имеет решающее значение в таких исследованиях, поскольку мРНК очень нестабильна. После того, как собраны и получены соответствующие молекулы кДНК, технологии массива генов помогают идентифицировать гены как с повышенной, так и с пониженной регуляцией. Эта молодая технология в настоящее время находится в стадии разработки для CSF и может служить для определения изменений, которые характеризуют различные стадии рассеянного склероза, воспаления, демиелинизации, ремиелинизации и нервного генеза.В недавнем исследовании транскриптом из В-клеток в спинномозговой жидкости при РС был коррелирован с протеомом, идентифицированным с помощью масс-спектрометрии. Было выявлено полное соответствие между рекомбинацией V (D) J и соматической гипермутацией вариабельной области гена иммуноглобулина и последовательностями вариабельной области IgG, что указывает на то, что В-клетки действительно являются источником некоторых компонентов наблюдаемого протеома. в спинномозговой жидкости у пациентов с РС. [36]

Биомаркеры в CSF

Воспаление в MS

Растворимые медиаторы воспаления, а именно лимфокины, простагландины, хемокины и комплекс атаки на мембрану комплемента C5b-9, изучались в CSF в ограниченных исследованиях рассеянного склероза.[37–39] IL1, IL12, TNF-α, INF, IL10, TGF-β и молекулы адгезии и их растворимые рецепторы, а также MMP 9 — все исследованные состояния воспаления или покоя. [40–43] Была обнаружена умеренная корреляция. идентифицированы между некоторыми из этих воспалительных маркеров в сыворотке или спинномозговой жидкости и свидетельством активности заболевания на МРТ [44–47]. Ни один из них не оправдал ожиданий суррогата клинической активности или прогрессирования заболевания.

Маркеры демиелинизации

Насколько хорошо CSF отражает демиелинизацию в ЦНС? Новаторские исследования электронной микроскопии отложений из ультрацентрифугированной спинномозговой жидкости от пациентов с РС выявили типичные многослойные фрагменты миелина с четкой основной плотной линией и межпериодными линиями как внеклеточные фрагменты во время клинических обострений.[48] ​​Эти наблюдения привели к изучению белков миелина в спинномозговой жидкости как маркеров демиелинизации. «Материал, подобный МБП» (МБП), вероятно, изучен лучше всего; иммунореактивный MBPL или его фрагменты могут быть обнаружены в спинномозговой жидкости во время острых обострений у 80% пациентов с ремиттирующим рецидивирующим РС, перенесших острые обострения. [49–51] Уровни MBPL в спинномозговой жидкости резко повышаются во время обострения и падают в течение следующих 4–6 недель. Однако оценка MBPL не оправдала ожиданий суррогата демиелинизации в CSF по ряду причин.Уровни MBP в спинномозговой жидкости поясницы могут быть нормальными при остром неврите зрительного нерва [52], но часто отклоняются от нормы у пациентов, перенесших активный миелит. [53,54] Это, вероятно, просто отражение анатомической близости или расстояния от места взятия пробы до места расположения демиелинизация. Иммунореактивный MBPL или его фрагменты также могут быть обнаружены в спинномозговой жидкости при нарушениях, отличных от рассеянного склероза, и его присутствие является просто маркером повреждения миелина, будь то рассеянный склероз, травма, нарушение мозгового кровообращения или любое нарушение, которое может вызвать повреждение миелина.Однако следует отметить, что фрагмент MBP 43–88 заметно отсутствовал в CSF в одном исследовании с участием 8/10 пациентов с ADEM, расстройством с диссеминированным повреждением белого вещества [55]. Было высказано предположение, что обнаружение специфических фрагментов MBP может быть более специфичным для обострений MS, поскольку размер MBP, наблюдаемый в CSF пациентов с цереброваскулярными событиями, значительно отличается от фрагментов, наблюдаемых в CSF пациентов с MS. Фрагменты MBP образуются в результате деградации MBP лизозомальными карбоксиэндопептидазами, особенно катепсином D, который обычно присутствует в участках демиелинизации рассеянного склероза.[56] Полезность обнаружения конкретных фрагментов, которые придают специфичность обнаружения MBP-подобного материала при рассеянном склерозе, еще предстоит продемонстрировать.

Есть ли какое-либо клиническое применение в измерении ЦСЖ MBP? Измерение уровней MBP в спинномозговой жидкости при рассеянном склерозе иногда используется для подтверждения клинического обострения, поскольку повышенные уровни обычно не наблюдаются у пациентов в периоды ремиссии. Повышенные уровни обычно остаются повышенными в течение 4–6 недель и поэтому могут использоваться в качестве маркера недавней активности заболевания.Однако нормальное значение не означает прекращения болезни по причинам, указанным выше. Однако следует отметить, что определение активности заболевания, используемое в большинстве этих исследований, предшествовало эпохе МРТ исследований при рассеянном склерозе и, следовательно, не отражает истинную активность заболевания, определяемую поражениями, повышающими уровень гадолиния. Ограничения перевешивают полезность оценки уровней ОБМ в спинномозговой жидкости, из-за чего измерение уровней ОБМ в спинномозговой жидкости не является стандартом при рутинном анализе спинномозговой жидкости пациентов с рассеянным склерозом.

Отсутствие маркеров ремиелинизации

Ремиелинизация не является основным механизмом восстановления функции при рассеянном склерозе. Фактически, большинство поражений остаются демиелинизированными в то время, когда происходит восстановление функции. Это лучше всего видно при неврите зрительного нерва, когда зрительные нервы, которые обычно поражаются, демонстрируют тяжелую демиелинизацию на месте первоначального неврита зрительного нерва при вскрытии, хотя в течение жизни пациент сообщал о нормальном или почти нормальном зрении. Часто это дозорное событие, которое привело к будущему возникновению РС, событию, которое могло произойти примерно за 30–50 лет до смерти.Многие пациенты не могут вспомнить, какой глаз был поражен во время дозорного неврита зрительного нерва, хотя возврата миелина не произошло. В модели демиелинизации лизолецитином приматов, отличных от человека, ремиелинизация зрительного нерва была медленной по сравнению со спинным мозгом [57]. Хотя «теневые бляшки» возникают при рассеянном склерозе, ремиелинизация является скорее исключением, чем правилом в развитии большинства поражений рассеянного склероза. Нет хороших маркеров ремиелинизации, позволяющих обнаруживать теневые бляшки у пациентов в течение жизни.Визуализация с переносом намагниченности на основе вокселей пытается определить параметры ремиелинизации при МС, но полезность этого метода остается инструментом исследования. [58] Эта неспособность обнаружить ремиелинизацию затруднила идентификацию маркеров в спинномозговой жидкости, которые коррелируют с ремиелинизацией. В настоящее время нет маркеров для обнаружения ремиелинизации в спинномозговой жидкости.

Маркеры прогрессирования и инвалидности

Клеточные и молекулярные субстраты прогрессирования и инвалидности при РС только начинают изучаться.Аксональное повреждение, без сомнения, является значительным фактором инвалидности, а также астроглиоз демиелинизированной бляшки, который может препятствовать восстановлению и регенерации. В CSF есть несколько маркеров, которые отражают эти изменения и показывают многообещающие суррогатные маркеры в CSF для травм, которые коррелируют с инвалидностью и прогрессированием.

Фосфорилированные формы белков нейрофиламентов поддерживают целостность аксона, а их отталкивание отрицательных зарядов делает аксоны громоздкими и цилиндрическими.При повреждении аксонов нейрофиламенты становятся нефосфорилированными, а аксоны разрушаются и больше не могут поддерживать нормальную функцию. Антитела к нефосфорилированным нейрофиламентам были полезны для обнаружения поврежденных аксонов с помощью конфокальной микроскопии. Недавно эти антитела были использованы для определения степени повреждения аксонов, характеризующейся присутствием нефосфорилированных нейрофиламентов в спинномозговой жидкости [59]. Исследование показало, что повышенные уровни белка нейрофиламентов в спинномозговой жидкости предсказывают, как независимую переменную, вероятность развития рассеянного склероза в будущем у пациентов с CIS.

Три группы белков составляют нормальные нейрофиламенты; легкие, средние и тяжелые цепи. В ряде исследований было установлено, что легкие цепи нейрофиламентов увеличиваются в спинномозговой жидкости у большинства пациентов с рецидивирующим ремиттирующим рассеянным склерозом. [60–62] Есть некоторые предварительные доказательства того, что уровни тяжелых цепей нейрофиламентов могут быть повышены в спинномозговой жидкости у пациентов. с невритом зрительного нерва или рассеянным склерозом, и что такие уровни могут быть предиктором наличия увеличивающихся поражений на МРТ, а также повышенных уровней MBP в спинномозговой жидкости.Интересным было наблюдение, что изменение тяжелой цепи нейрофиламентов спинномозговой жидкости от исходного уровня до трех недель было предиктором последующего клинического исхода в группе рассеянного склероза, но не в группе неврита зрительного нерва [63]. Интересно также наблюдение, что антитела к нейрофиламентам встречаются в сыворотке и спинномозговой жидкости пациентов с рассеянным склерозом. Такие антитела были идентифицированы как при рецидиве, так и при прогрессирующем заболевании, и могут служить маркерами прогрессирующего повреждения аксонов. Необходимо установить, играют ли эти антитела роль в патогенезе рецидивирующих и прогрессирующих форм рассеянного склероза.Если сывороточные титры легкой цепи нейрофиламента значительно коррелируют с повреждением аксонов, это измерение антител в сыворотке может быть показателем повреждения аксонов при РС и служить подходящим суррогатом для прогрессирования заболевания.

Глиальный белок фибриллярной кислоты (GFAP) и белок S100B — это белки, уникальные для глии. GFAP, основной белок глиального промежуточного филамента, был впервые выделен из бляшки MS из фиброзных астроцитов, которые плотно заселяют типичную бляшку.[64] Белок S100B — это цитозольный белок, обнаруженный в астроцитах и ​​олигодендроцитах. Глиоз является скорее правилом, чем исключением в организации бляшки при РС, и поэтому GFAP и белок S-100B были исследованы в спинномозговой жидкости у пациентов с РС [62]. Уровни GFAP и S100B в спинномозговой жидкости были повышены у пациентов с рецидивом, а также с прогрессирующим заболеванием. Оба эти белка могут служить маркерами глиальной пролиферации в областях демиелинизации и повреждения аксонов. [63,65] Поскольку белок S100B также экспрессируется олигодендроцитами, возможно, что его уровни в спинномозговой жидкости могут отражать не только астроглиоз, но и ремиелинизацию.В совокупности они также могут служить маркерами прогрессирования заболевания. Необходимо провести продольный анализ этих белков в спинномозговой жидкости и установить их полезность в диагностике и прогнозе инвалидности и прогрессирования.

В заключение, оценка спинномозговой жидкости позволяет исследовать изменения в ЦНС, возникающие при здоровье и болезни. С появлением усовершенствованных методов, которые генерируют большие объемы данных и улучшают хранение и анализ данных с использованием биоинформатики, из CSF становится доступной информация, которая помогает в диагностике, лечении и исследованиях рассеянного склероза.Достижения в этих областях, несомненно, изменят лицо рассеянного склероза и дадут возможность пациенту и врачу лучше понять и лечить это заболевание в предстоящие годы.

Сноски

Источник поддержки: Нет

Конфликт интересов: Нет

Ссылки

1. Нажмите EM. Сравнительное исследование спинномозговой жидкости и белков сыворотки крови при рассеянном склерозе с особым упором на реакцию коллоидного золота Ланге. Биохим Дж.1956; 63: 367–72. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 2. Фон Штроч Т.Дж., юрист Т.-младший, Харрис А.Х. Реакция коллоидного золота при рассеянном склерозе. AMA Arch Neurol Psychiatry. 1950; 64: 668–75. [PubMed] [Google Scholar] 3. Ссылка H. Вклад исследований спинномозговой жидкости в диагностику рассеянного склероза. Ital J Neurol Sci. 1987. 6: 57–69. [PubMed] [Google Scholar] 4. Ссылка H. Значение иммуноглобулинового анализа спинномозговой жидкости в клинической неврологии. Рив Патол Нерв Мент. 1976; 97: 323–40. [PubMed] [Google Scholar] 5.Tourtellotte WW. Рассеянный склероз и спинномозговая жидкость. Med Clin North Am. 1963; 47: 1619–28. [PubMed] [Google Scholar] 6. Lemmen LJ, Tourtellotte WW, Glimn JG, Higgins JE, Parker JA. Исследование белков спинномозговой жидкости с помощью бумажного электрофореза. IV: Методы концентрирования разбавленных белковых растворов. Мед Булл (Анн-Арбор) 1957; 23: 135–8. [PubMed] [Google Scholar] 7. Кабат Е.А., Мур Д.Х., Ландоу Х. Электрофоретическое исследование белковых компонентов в спинномозговой жидкости и их взаимосвязи с белками сыворотки.J Clin Invest. 1942; 21: 571–7. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 8. Karcher D, Van Sande M, Lowenthal A. Электрофорез белков жидких цефалорахидных (новая техника) Acta Clin Belg. 1957; 12: 538–9. [Google Scholar] 9. Karcher D, Lowenthal A, Van Soom G. Электрофорез спинномозговой жидкости без предварительного концентрирования. Acta Neurol Belg. 1979; 79: 335–7. [PubMed] [Google Scholar] 10. Кереньи Л., Галяс Ф. Высокочувствительный метод демонстрации белков в препаратах электрофоретической иммунодиффузии.Clin Chim Acta. 1972; 38: 465–7. [PubMed] [Google Scholar] 11. Раммохан К.В. Олигоклональные полосы в неконцентрированном окрашивании СМЖ серебром для агарозных гелей. Neurochem Pathol. 1985; 3: 15–25. [PubMed] [Google Scholar] 12. Раммохан К.В., Браттон Дж. Обнаружение олигоклональных IgG в спинномозговой жидкости с использованием иммуноблот-анализа изоэлектрического фокусирования в агарозе. Неврология. 1986; 36: 315. [Google Scholar] 13. Раммохан К.В., Калланд Дж., Карни Л. Олигоклональные IgG в слезах пациентов с рассеянным склерозом. Неврология. 1988; 38: 251. [Google Scholar] 14.Tintore M, Rovira A, Rio J, Tur C, Pelayo R, Nos C и др. Добавляют ли олигоклональные полосы информацию к МРТ при первых приступах рассеянного склероза? Неврология. 2008; 70: 1079–83. [PubMed] [Google Scholar] 15. Вильяр Л., Гарсия-Барраган Н., Эспино М., Ролдан Е., Садаба М., Гомес-Риал Дж. И др. Влияние специфичности олигоклональных IgM на течение рассеянного склероза. Мульт Склер. 2008. 14: 183–7. [PubMed] [Google Scholar] 16. Джозеф Ф.Г., Херст К.Л., Пикерсгилл Т.П., Бен-Шломо Ю., Робертсон Н.П., Сколдинг, штат Нью-Джерси. Статус олигоклональной полосы спинномозговой жидкости определяет прогноз при рассеянном склерозе: исследование случай-контроль с участием 100 пациентов.J Neurol Neurosurg Psychiatry. 2009. 80: 292–6. [PubMed] [Google Scholar] 17. Pohl D, Rostasy K, Reiber H, Hanefeld F. Характеристики спинномозговой жидкости при раннем рассеянном склерозе. Неврология. 2004; 63: 1966-7. [PubMed] [Google Scholar] 18. Tenembaum S, Chamoles N, Fejerman N. Острый диссеминированный энцефаломиелит: долгосрочное последующее исследование 84 педиатрических пациентов. Неврология. 2002; 59: 1224–31. [PubMed] [Google Scholar] 19. Тенембаум С., Читнис Т., Несс Дж., Хан Дж. С.. Международная педиатрическая исследовательская группа РС. Острый диссеминированный энцефаломиелит.Неврология. 2007. 68: S23–36. [PubMed] [Google Scholar] 20. Villar LM, Masjuan J, Gonzalez-Porque P, Plaza J, Sádaba MC, Roldán E, et al. Интратекальный синтез IgM предсказывает начало новых рецидивов и ухудшение течения болезни при РС. Неврология. 2002; 59: 555–9. [PubMed] [Google Scholar] 21. Villar LM, Masjuan J, Gonzalez-Porque P, Plaza J, Sádaba MC, Roldán E, et al. Интратекальный синтез IgM является прогностическим фактором рассеянного склероза. Энн Нейрол. 2003. 53: 222–6. [PubMed] [Google Scholar] 22. Вильяр Л.М., Садаба М.С., Ролдан Э., Масджуан Дж., Гонсалес-Порке П., Вильяррубия Н. и др.Интратекальный синтез олигоклональных IgM против липидов миелина предсказывает агрессивное течение болезни при РС. J Clin Invest. 2005; 115: 187–94. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 23. Вильяр Л., Гарсия-Барраган Н., Эспино М., Ролдан Е., Садаба М., Гомес-Риал Дж. И др. Влияние специфичности олигоклональных IgM на течение рассеянного склероза. Мульт Склер. 2008. 14: 183–7. [PubMed] [Google Scholar] 24. Франсиотта Д., Колумба-Кабесас С., Андреони Л., Равалья С., Яриус С., Романьоло С. и др. Паттерны полос олигоклонального IgG при воспалительных демиелинизирующих заболеваниях человека и мышей.J Neuroimmunol. 2008. 200: 125–8. [PubMed] [Google Scholar] 25. Rand KH, Houck H, Denslow ND, Heilman KM. Молекулярный подход к поиску мишеней для олигоклональных полос при рассеянном склерозе. J Neurol Neurosurg Psychiatry. 1998. 65: 48–55. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 26. ван Сечел А.С., Байрамович Дж. Дж., ван Стипдонк М. Дж., Персун-Дин С., Гойцкенс С. Б., ван Ноорт Дж. М.. Экспрессия, индуцированная EBV, и HLA-DR-ограниченная презентация человеческими В-клетками альфа-В-кристаллина, потенциального аутоантигена при рассеянном склерозе.J Immunol. 1999. 162: 129–35. [PubMed] [Google Scholar] 27. Polman CH, Reingold SC, Edan G, Filippi M, Hartung HP, Kappos L, et al. Диагностические критерии рассеянного склероза: редакция 2005 г. «критериев Макдональда» Энн Нейрол. 2005. 58: 840–6. [PubMed] [Google Scholar] 28. Hammack BN, Fung KY, Hunsucker SW, Duncan MW, Burgoon MP, Owens GP и др. Протеомный анализ спинномозговой жидкости при рассеянном склерозе. Мульт Склер. 2004; 10: 245–60. [PubMed] [Google Scholar] 29. Noben JP, Dumont D, Kwasnikowska N, Verhaert P, Somers V, Hupperts R, et al.Протеом спинномозговой жидкости в поясничном отделе при рассеянном склерозе: характеристика с помощью ультрафильтрации, жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии. J Proteome Res. 2006; 5: 1647–57. [PubMed] [Google Scholar] 30. Хан М.Х., Хван С.И., Рой Д.Б., Лундгрен Д.Х., Прайс СП, Усман С.С. и др. Протеомный анализ активных очагов рассеянного склероза позволяет выявить терапевтические цели. Природа. 2008; 451: 1076–81. [PubMed] [Google Scholar] 31. Ромео MJ, Espina V, Lowenthal M, Espina BH, Petricoin EF, 3rd, Liotta LA. Протеом CSF: хранилище белков для идентификации потенциальных биомаркеров.Exp Rev Proteomics. 2005; 2: 57–70. [PubMed] [Google Scholar] 32. Tourtellotte WW, Dejong RN, Van Houten WH. Исследование липидов спинномозговой жидкости: I: исторические аспекты. Мед Булл (Анн-Арбор) 1958; 24: 66–96. [PubMed] [Google Scholar] 33. Tourtellotte WW. Исследование липидов спинномозговой жидкости: VI: нормальный липидный профиль. Неврология. 1959; 9: 375–83. [PubMed] [Google Scholar] 34. Фонтех А.Н., Харрингтон Р.Дж., Хьюмер А.Ф., Бирингер Р.Г., Риггинс Дж.Н., Харрингтон М.Г. Идентификация маркеров заболевания в спинномозговой жидкости человека липидомными и протеомными методами.Маркеры Дис. 2006; 22: 39–64. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 35. Marbois BN, Faull KF, Fluharty AL, Raval-Fernandes S, Rome LH. Анализ сульфатидов мозжечка крыс и белого вещества рассеянного склероза методом масс-спектрометрии с электрораспылением отрицательных ионов. Biochim Biophys Acta. 2000; 1484: 59–70. [PubMed] [Google Scholar] 36. Обермайер Б., Ментеле Р., Малотка Дж., Келлерманн Дж., Кюмпфель Т., Векерле Х. и др. Сопоставление транскриптомов олигоклональных иммуноглобулинов и протеомов спинномозговой жидкости при рассеянном склерозе.Nat Med. 2008; 14: 688–93. [PubMed] [Google Scholar] 37. Halawa I, Lolli F, Link H. Терминальный компонент комплемента C9 в спинномозговой жидкости и плазме пациентов с рассеянным склерозом и асептическим менингитом. Acta Neurol Scand. 1989; 80: 130–5. [PubMed] [Google Scholar] 38. Белекова Б., Мартин Р. Развитие биомаркеров при рассеянном склерозе. Головной мозг. 2004; 127: 1463–78. [PubMed] [Google Scholar] 40. Кракауэр М., Соренсен П., Хадеми М., Олссон Т., Селлебьерг Ф. Повышенная экспрессия мРНК IL-10 и мРНК IL-23 при рассеянном склерозе: лечение интерфероном-бета увеличивает экспрессию мРНК IL-10 при одновременном снижении экспрессии мРНК IL-23.Мульт Склер. 2008; 14: 622–30. [PubMed] [Google Scholar] 41. Селлебьерг Ф., Кристиансен ТБ, Виттенхаген П., Гарред П., Ойген-Ольсен Дж., Фредериксен Дж. Л. и др. Хемокиновый рецептор CCR5 при рассеянном склерозе, леченном интерфероном. Acta Neurol Scand. 2007; 115: 413–8. [PubMed] [Google Scholar] 42. Соренсен П.С. Биологические маркеры в жидкостях организма для активности и прогрессирования рассеянного склероза. Мульт Склер. 1999; 5: 287–90. [PubMed] [Google Scholar] 43. Файнарди Э., Кастеллацци М., Беллини Т., Манфринато М.С., Балди Э., Казетта I и др.Уровни спинномозговой жидкости и сыворотки, а также интратекальное производство металлопротеиназы-9 активного матрикса (MMP-9) как маркеры активности заболевания у пациентов с рассеянным склерозом. Мульт Склер. 2006; 12: 294–301. [PubMed] [Google Scholar] 44. Джованнони Г., Миллер Д.Х., Лосефф Н.А., Зайлер М., Левеллин-Смит Н., Томпсон А.Дж. и др. Сывороточные маркеры воспаления и клинические / МРТ-маркеры прогрессирования болезни при рассеянном склерозе. J Neurol. 2001; 248: 487–95. [PubMed] [Google Scholar] 45. Путети П., Моррис М., Ставиарц Л., Телешова Н., Кивисакк П., Пашенков М. и др.Рассеянный склероз: исследование хемокиновых рецепторов и регуляторных Т-клеток в отношении переменных МРТ. Eur J Neurol. 2003. 10: 529–35. [PubMed] [Google Scholar] 46. Сейди О.А., Семра Ю.К., Шариф М.К. Экспрессия CD5 на В-лимфоцитах коррелирует с активностью заболевания у пациентов с рассеянным склерозом. J Neuroimmunol. 2002; 133: 205–10. [PubMed] [Google Scholar] 47. Брук В., Нойберт К., Бергер Т., Вебер-младший. Клинические, радиологические, иммунологические и патологические данные при воспалительной демиелинизации ЦНС — возможные маркеры процесса, опосредованного антителами.Мульт Склер. 2001; 7: 173–7. [PubMed] [Google Scholar] 48. Herndon RM, Kasckow J. Электронно-микроскопические исследования осадка спинномозговой жидкости при демиелинизирующем заболевании. Энн Нейрол. 1978; 4: 515–23. [PubMed] [Google Scholar] 49. Whitaker JN. Основной белок миелина и рассеянный склероз. Ital J Neurol Sci. 1983; 4: 153–7. [PubMed] [Google Scholar] 50. Башир Р.М., Уитакер Дж. Молекулярные особенности иммунореактивного основного белка миелина в спинномозговой жидкости у лиц с множественным слайцерозом. Энн Нейрол. 1980; 7: 50–7.[PubMed] [Google Scholar] 51. Уитакер Дж., Гупта М., Смит О.Ф. Эпитопы иммунореактивного основного белка миелина в спинномозговой жидкости человека. Энн Нейрол. 1986; 20: 329–36. [PubMed] [Google Scholar] 52. Фредериксен JL, Уитакер JN. Миелиновый основной протеиноподобный материал спинномозговой жидкости при остром моносимптомном неврите зрительного нерва. Acta Neurol Scand. 1996; 94: 303–9. [PubMed] [Google Scholar] 53. Охта М., Охта К. Обнаружение основного белка миелина в спинномозговой жидкости. Эксперт Rev Mol Diagn. 2002; 2: 627–33. [PubMed] [Google Scholar] 54.Селлебьерг Ф, Кристиансен М, Нильсен П.М., Фредериксен Дж. Цереброспинальная жидкость: показатели активности заболевания у пациентов с рассеянным склерозом. Мульт Склер. 1998. 4: 475–9. [PubMed] [Google Scholar] 55. Уитакер Дж. Н., Лисак Р. П., Башир Р. М., Fitch OH, Сейер Дж. М., Кранс Р. и др. Иммунореактивный основной белок миелина в спинномозговой жидкости при неврологических расстройствах. Энн Нейрол. 1980; 7: 58–64. [PubMed] [Google Scholar] 56. Цао Л., Гудин Р., Вуд Д., Москарелло М.А., Уитакер Дж. Быстрое высвобождение и необычная стабильность иммунодоминантного пептида 45-89 из цитруллинированного основного белка миелина.Биохимия. 1999; 38: 6157–63. [PubMed] [Google Scholar] 57. Лашапель Ф., Бачелин С., Муассонье П., Наит-Умесмар Б., Идальго А., Фонтен Д. и др. Нарушение ремиелинизации зрительного нерва приматов. Brain Pathol. 2005. 15: 198–207. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 58. Чен Дж. Т., Кульман Т., Янсен Г. Х., Коллинз Д. Л., Аткинс Г. Л., Фридман М. С. и др. Анализ на основе вокселей эволюции коэффициента передачи намагниченности для количественной оценки ремиелинизации и демиелинизации с гистопатологической валидацией при поражении рассеянным склерозом.Нейроизображение. 2007; 36: 1152–8. [PubMed] [Google Scholar] 59. Бретшнайдер Дж., Петцольд А., Юнкер А., Тумани Х. Маркеры повреждения аксонов в спинномозговой жидкости пациентов с клинически изолированным синдромом улучшают прогнозирование конверсии в определенный рассеянный склероз. Мульт Склер. 2006; 12: 143–8. [PubMed] [Google Scholar] 60. Lycke JN, Karlsson JE, Andersen O, Rosengren LE. Белок нейрофиламента в спинномозговой жидкости: потенциальный маркер активности при рассеянном склерозе. J Neurol Neurosurg Psychiatry. 1998. 64: 402–4.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 61. Семра Ю.К., Сейди О.А., Шариф МК. Повышенное интратекальное высвобождение белков аксонального цитоскелета при рассеянном склерозе связано с прогрессирующим заболеванием и клинической инвалидностью. J Neuroimmunol. 2002; 122: 132–9. [PubMed] [Google Scholar] 62. Malmestrom C, Haghighi S, Rosengren L, Andersen O, Lycke J. Легкий белок нейрофиламента и глиальный фибриллярный кислый белок как биологические маркеры при РС. Неврология. 2003. 61: 1720–5. [PubMed] [Google Scholar] 63. Lim ET, Sellebjerg F, Jensen CV, Altmann DR, Grant D, Keir G и др.Острое повреждение аксонов позволяет прогнозировать клинический исход у пациентов с рассеянным склерозом. Мульт Склер. 2005; 11: 532–36. [PubMed] [Google Scholar] 64. Eng LF, Gerstl B, Vanderhaeghen JJ. Исследование белков в бляшках рассеянного склероза. Trans Am Soc Neurochem. 1970; 1: 42. [Google Scholar] 65. Лим Е.Т., Грант Д., Пашенков М., Кейр Г., Томпсон Э.Дж., Седерстрём М. и др. Уровни специфических белков головного мозга в спинномозговой жидкости при неврите зрительного нерва. Мульт Склер. 2004; 10: 261–5. [PubMed] [Google Scholar]

Рассеянный склероз: ЛАБОРАТОРНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ

Важно помнить, что ни один лабораторный тест не является диагностическим для РС.Тем не менее, ряд исследований может быть полезным для подтверждения подозреваемого диагноза РС и разделения демиелинизирующих поражений во времени и пространстве.

---

• Исследования спинномозговой жидкости

Исследования спинномозговой жидкости могут подтвердить демиелинизирующее заболевание нервной системы. Они показывают увеличение концентрации иммуноглобулинов более чем у 90% пациентов с РС. Индекс IgG (сравнение уровней IgG в спинномозговой жидкости и сыворотке) повышен у многих пациентов с РС.Полосы олигоклонального иммуноглобулина можно идентифицировать в спинномозговой жидкости пациентов с РС с помощью электрофореза. Общий уровень протеина также немного повышен — до 0,1 г / л. Уровень белка может быть выше, если у пациента наблюдается выраженный рецидив (например, тяжелый неврит зрительного нерва). У некоторых пациентов также наблюдается небольшое увеличение количества клеток (до 50 на кубический миллиметр). Большинство клеток можно идентифицировать как Т-лимфоциты.

Олигоклональные полосы в CSF

• Исследования вызванных потенциалов

Исследования вызванных потенциалов могут быть полезны для доказательства разделения поражений в пространстве.Для оценки этого разделения используется аномальное замедление электрических импульсов. Наиболее часто используемые вызванные потенциалы у пациентов с РС — это зрительные вызванные ответы (VER), слуховые вызванные ответы ствола мозга (BAER) и соматосенсорные вызванные ответы (SSER). Приблизительно 75% пациентов с РС демонстрируют аномальный ВЭР независимо от того, есть ли у пациента в анамнезе клинически очевидный неврит зрительного нерва. В последнем случае аномальный вызванный зрительный ответ может быть использован для идентификации параклинического второго поражения и подтверждения диагноза РС.BAER сложнее интерпретировать, и только 30% пациентов демонстрируют аномальную реакцию со стороны центральных областей слуха в стволе головного мозга. SSEP технически является наиболее сложным для выполнения исследованием, но обнаруживается, что он отклоняется от нормы у более чем 80% пациентов с определенным РС. Это исследование может помочь выявить замедленную проводимость в центральных сенсорных путях и помочь отличить периферические поражения от центральных.

Визуальные вызванные потенциалы

• Магнитно-резонансная томография

Магнитно-резонансная томография важна как для подтверждения диагноза РС, так и для понимания динамики развития демиелинизирующих бляшек у пациентов с РС.Однако важно понимать, что аномальных результатов МРТ без клинических данных недостаточно для подтверждения диагноза РС. И наоборот, отсутствие аномальных результатов МРТ при клинически определенном РС не опровергает диагноз.

На изображениях, взвешенных по T-2, пятнистые участки аномального белого вещества чаще всего обнаруживаются в полушариях головного мозга в паравентрикулярных областях;
Часто поражения могут присутствовать в мозжечке и стволе головного мозга;
Поражения могут присутствовать в шейном и / или грудном отделах спинного мозга;
Повышение содержания гадолиния на МРТ считается признаком активного поражения, но оно не обязательно коррелирует с повышенной активностью заболевания.

Аномальные снимки МРТ находятся в:

90% пациентов с определенным диагнозом МС;

70% пациентов с вероятным диагнозом РС;

30% -50% пациентов с возможным МС;

Существует три критерия МРТ-диагностики РС (Fazekas et al.):

1. Поражения, примыкающие к боковым желудочкам
2. Поражения диаметром более 0.6 см

   Существует слабая корреляция между размером и площадью поражений, присутствующих на МРТ-изображениях, и инвалидностью пациента, т. Е. Пациенты с большими поражениями могут иметь незначительные клинические признаки, а пациенты с небольшими поражениями могут иметь тяжелую инвалидность.Однако увеличение площади и количества поражений в полушариях головного мозга или истончение мозолистого тела может коррелировать с плохой когнитивной функцией у пациентов.

   Наличие поражений спинного мозга не коррелирует с тяжестью заболевания. Наличие атрофии спинного мозга действительно коррелирует с большей инвалидностью.

   Исследования спинномозговой жидкости: МРТ:

   
   

   Анализы крови и мочи у пациентов с РС неспецифичны и ничем не примечательны.В настоящее время предпринимаются попытки разработать количественные методы оценки продуктов распада миелина, выделяемых с мочой у пациентов с рассеянным склерозом. Пока нет клинических применений этой техники. У пациентов, которые принимают лекарства с побочными эффектами токсичности для печени, противосудорожные препараты, иммунодепрессанты и т. Д., Может потребоваться мониторинг крови. Исследования мочи проводятся, когда у пациента наблюдаются симптомы инфекции мочевыводящих путей или если пациент принимает лекарства с известной нефротоксичностью.

   Рекомендуемый стандарт

   анализа спинномозговой жидкости в диагностике рассеянного склероза: согласованное заявление | Демиелинизирующие заболевания | JAMA Neurology

   Новые критерии диагностики рассеянного склероза (РС) были опубликованы в результате работы комитета, сформированного на международном уровне.Чтобы повысить специфичность диагноза и свести к минимуму количество ложных диагнозов, комитет рекомендовал использовать как клинические, так и параклинические критерии, последние включают информацию, полученную с помощью магнитно-резонансной томографии, вызванных потенциалов и анализа спинномозговой жидкости (CSF). Хотя предъявлялись строгие требования к магнитно-резонансной томографии, «документ с новыми критериями» не соответствовал рекомендациям относительно того, как следует проводить анализ спинномозговой жидкости, и просто приравнивал индекс IgG к изоэлектрической фокусировке без какого-либо обоснования.Спектр анализируемых параметров и методы анализа спинномозговой жидкости различаются во всем мире и часто дают разные результаты с точки зрения чувствительности, специфичности, точности и надежности, при этом не существует определенного «оптимального» теста спинномозговой жидкости для диагностики РС. Чтобы ответить на этот вопрос конкретно, была созвана международная группа экспертов по диагностическим методам РС и спинномозговой жидкости, и результатом стала эта статья, представляющая консенсус всех участников. Эти рекомендации по установлению стандарта оценки спинномозговой жидкости у пациентов с подозрением на рассеянный склероз должны значительно дополнить новые критерии, гарантирующие постановку правильного диагноза.

   Неправильный диагноз рассеянного склероза (РС) вызывает сильное беспокойство у пациентов и может привести к ненужному лечению дорогостоящими препаратами. Чтобы свести к минимуму этот риск и поддерживать высокий уровень специфичности заболевания, недавно был опубликован набор новых рекомендуемых диагностических критериев ¹ , которые используют как клиническую, так и параклиническую информацию в алгоритме, который допускает только 3 категории диагностической достоверности: РС, возможный РС , а не MS.Критерии подчеркивают клинический диагноз, относя любые параклинические измерения (например, магнитно-резонансную томографию [МРТ], вызванные потенциалы или спинномозговую жидкость [CSF]) к поддерживающим, а не диагностическим. Критерии используют один параклинический тест для повышения специфичности другого параклинического теста. Например, только 2 обнаруженных МРТ поражения, согласующихся с РС в присутствии олигоклональных полос или повышенного индекса IgG, достаточны для соответствия определению нового критерия для «распространения в космосе», тогда как такой результат МРТ сам по себе — нет. ¹ Чтобы получить максимальную пользу от CSF в качестве диагностического параклинического теста, следует использовать наиболее чувствительный метод. Мощность параклинических тестов может быть даже больше, если клинический диагноз вызывает некоторые сомнения. Если результаты параклинических тестов в норме, это настоятельно предполагает альтернативный диагноз; тогда как когда они отклоняются от нормы, они подтверждают первичный диагноз. Кроме того, в соответствии с первым новым критерием «нет лучшего объяснения», кроме рассеянного склероза, для учета исторических и объективных свидетельств неврологической дисфункции, использование параклинических тестов помогает исключить другие состояния.Анализ спинномозговой жидкости играет важную роль в этом отношении, но новые критерии не позволяют рекомендовать, как следует проводить этот анализ. Существует множество различных методов оценки CSF, и лаборатории не используют последовательных стандартов ни при тестировании, ни при составлении отчетов о результатах CSF. Некоторые методы утверждают, что предлагают большую чувствительность и специфичность в отношении качественных или количественных отклонений, которые измеряются в поддержку диагноза РС. Стремясь оценить и рекомендовать тип анализа спинномозговой жидкости, который дает наибольшую специфичность, в соответствии с основной целью новых критериев, Консорциум клиник рассеянного склероза заказал исследовательскую группу, в которую вошли люди, обладающие значительным опытом в диагностике и лечении. пациенты с РС, анализ CSF или оба.Его задача заключалась в том, чтобы подготовить отчет для неврологов и специалистов по лабораторной медицине с подробным описанием того, что будет считаться «минимальным стандартом» для оценки CSF у пациентов с подозрением на рассеянный склероз. Основываясь на всей представленной и проверенной информации, это отчет этой исследовательской группы.

   Все аспекты анализа спинномозговой жидкости помогут различить другие причины системного воспаления, которые распространяются на центральную нервную систему и могут имитировать РС, например, васкулит или хроническая инфекция.Количество лейкоцитов (WBC) и дифференциальное количество клеток, а также концентрация белка и уровень глюкозы помогают завершить картину спинномозговой жидкости вместе с более точными измерениями альбумина и иммуноглобулина. Подсчет ячеек должен быть выполнен не позднее, чем через 2 часа после получения CSF, в противном случае изменения в форме ячеек могут помешать возможности предложить правильный и полный дифференциальный подсчет ячеек. Слишком высокое количество эритроцитов (от 5 × 10 ⁹ / л до 7 × 10 ⁹ / л), вероятно, указывает на травматическое поражение, что делает другие количественные измерения, возможно, не интерпретируемыми.Выше нормы [N] (<5 × 10 ⁶ / л) Количество лейкоцитов обнаруживается примерно в 34% случаев рассеянного склероза, ² очень высокое количество лейкоцитов в спинномозговой жидкости (> 50 × 10 ⁶ / л) является необычным в MS. Низкие уровни глюкозы в спинномозговой жидкости (по сравнению с сывороткой, соотношение CSF / сыворотка <0,4) и очень высокое содержание общего белка (например,> 1 г / л) больше соответствуют инфекционному или неопластическому процессу. Лактат, если он доступен, является хорошей заменой и имеет преимущество перед парными измерениями глюкозы в спинномозговой жидкости и плазме в том, что требуется только одно измерение спинномозговой жидкости. ³ Возрастная оценка отношения ЦСЖ к сывороточному альбумину предпочтительна из-за ее более высокой точности, чем уровень общего белка, для выявления дисфункции гемато-ликворного барьера (БКБ). Коэффициент альбумина также является основой для различных концепций количественной оценки интратекального иммуноглобулинового ответа. Полный отчет с данными CSF является стандартом для многих лабораторий в Европе и в некоторых лабораториях в Северной и Южной Америке и на Ближнем Востоке. ^{4 , 5}

   Методы анализа иммуноглобулинов

   Цереброспинальную жидкость следует исследовать в чистом или чистом виде; концентрирование спинномозговой жидкости перед проведением анализов устарело, поскольку большинство исследований иммуноглобулинов можно проводить с использованием только небольшого объема спинномозговой жидкости (<1 мл).Для качественного анализа иммуноглобулинов ⁶ некоторые лаборатории загружают известное количество поровну из сыворотки и спинномозговой жидкости (например, 40 нг), тогда как другие используют фиксированное разведение сыворотки (например, 1: 400) и сравнивают его с заданным объемом (например, 4 мкл) CSF. Если гели перегружены белком или если загружено недостаточное количество иммуноглобулина, интерпретация затруднена и требует повторного анализа образцов. Для иммуноблоттинга иммуноглобулина образцы должны содержать от 20 до 1200 нг IgG, что в большинстве случаев переводится в 3-5 мкл спинномозговой жидкости.При использовании такого количества неконцентрированной спинномозговой жидкости в опытных лабораториях редко возникали проблемы с недогрузкой или перегрузкой гелей.

   Базовая программа анализа спинномозговой жидкости для диагностики неврологических заболеваний

   Неврологам необходимо учитывать результаты всех других тестов, выполненных как часть панели CSF (например, количество клеток, уровни белка, глюкозы и лактата и другие).Существует множество различных методов измерения количества иммуноглобулина, присутствующего в спинномозговой жидкости и образце сыворотки, чтобы определить, синтезировался ли иммуноглобулин локально в спинномозговой жидкости или диффундировал в нормальном или аномальном BCB. (В данном контексте термин гематоэнцефалический барьер рекомендуется над гематоэнцефалическим барьером.) Опубликованные формулы помогают точно оценить целостность BCB. Гиперболическая и экспоненциальная функции, описывающие синтез IgG в ЦСЖ, клинически эквивалентны, и обе они более точны, чем упрощенный индекс IgG. ^{7 -10}

   Сообщается о некотором улучшении чувствительности после внесения изменений в эту формулу. ¹¹ Количественное измерение IgG может иметь дополнительную роль в диагностике рассеянного склероза. Без лучшего объяснения у большинства пациентов с повышенным индексом IgG будет РС, но чувствительность варьируется, а специфичность падает, особенно из-за увеличения ложноположительных результатов, если гиперболическая функция не используется. Однако результаты других лабораторий ¹² предполагают, что даже при коррекции гиперболической функции количественный анализ IgG обычно позволяет выявить только около 75% пациентов, у которых окажется положительный олигоклональный диапазон.

   Качественное и количественное определение интратекального igg в мс

   Что касается более низкой чувствительности количественного и качественного анализа при обнаружении интратекального синтеза IgG при РС, это происходит из-за фундаментальных различий, которые используются двумя методами для различения нормального и ненормального.При количественном анализе каждого пациента сравнивают с большой популяцией и, следовательно, с широким эталонным диапазоном белков крови в спинномозговой жидкости, тогда как при качественном анализе профиль IgG в спинномозговой жидкости каждого пациента сравнивается с его или ее собственным параллельным образцом сыворотки.

   Таким образом, мы пришли к единому мнению в отношении диагностики РС, что индекс IgG или любой другой количественный анализ IgG не эквивалентен качественному анализу с использованием изоэлектрического фокусирования с иммунофиксацией, в отличие от предыдущей рекомендации, которая приравнивала индекс IgG к качественному анализу. ¹

   Качественные методы анализа спинномозговой жидкости

   Существует полное согласие с тем, что изоэлектрическое фокусирование (IEF) на агарозных гелях с последующим иммуноблоттингом ¹³ должно быть «золотым стандартом» для обнаружения присутствия олигоклональных полос. Другие методы, такие как полиакриламидный гель в сочетании с ИЭФ и окрашиванием белков серебром, могли оказаться полезными в прошлом, но они не обладают специфичностью к IgG и, следовательно, не поддерживаются консенсусом. ^{14 , 15} Прямое сравнение точности двух методов приведено в таблице 1. ²⁰ По сравнению с иммуноблоттингом IEF и IgG, методы прямого окрашивания серебром демонстрируют пониженную чувствительность и специфичность в диагностике рассеянного склероза. Примеры предпочтительного метода оценки олигоклональных полос с помощью IEF и иммуноблоттинга показаны на рисунке.

   Тип паттерна 1 считается отрицательным (то есть без определенных полос в спинномозговой жидкости), тогда как паттерн типа 2 определенно показывает определенные полосы, присутствующие только в спинномозговой жидкости, но не в образце сыворотки.Типы паттернов 3 и 4 требуют более внимательной интерпретации. В частности, тип 4 может быть неверно истолкован, если количество IgG в образце сыворотки слишком велико, что может размыть полосы сыворотки. Это одна из причин добавления равных количеств IgG из спинномозговой жидкости и образца сыворотки. Тип 4 можно увидеть при таких состояниях, как синдром Гийена-Барре. Тип паттерна 5 указывает на наличие моноклональной гаммапатии, но IEF разделяет то, что было бы одной полосой с использованием других электрофоретических методов, на несколько полос, различающихся на 1 единица заряда.Эта особенность, вероятно, связана с посттрансляционными модификациями, такими как гликозилирование.

   Метод этой техники IEF и иммуноблоттинга стандартизирован и коммерчески доступен. Использование этой техники требует определенного уровня технических знаний, а интерпретация также требует некоторого опыта. Лучше оставить это лабораториям и клиническим биохимикам, имеющим опыт диагностики спинномозговой жидкости. ²¹ Каждый прогон геля требует наличия определенных средств контроля, которые помогают определить надежность каждого данного прогона.Знание того, когда прогон «поддается интерпретации», — вот где больше всего нужен опыт.

   Некоторые лаборатории также окрашивают легкие цепи κ и / или λ (как свободные, так и связанные), поскольку данный IgG может быть связан только с одним или другим. ²² полосы IgG распознаются на поликлональном фоне; Окрашивание легких цепей существенно снижает этот поликлональный фон, так что слабые полосы лучше видны. Если в спинномозговой жидкости видна одна специфическая полоса или видны только слабые полосы, но полосы разрешаются при окрашивании на легкие цепи, то это означает, что на самом деле существуют олигоклональные полосы, которые не разрешаются при окрашивании IgG.Окрашивание легкой цепи также будет положительным в редких случаях, когда олигоклональные полосы вызваны присутствием IgA или IgM, которые не появляются на гелях, окрашенных только на IgG. Некоторые лаборатории продолжили этот анализ у пациентов, у которых на основании клинических данных или данных МРТ имеется серьезное подозрение на рассеянный склероз, но которые были отрицательными при тестировании олигоклональных полос IgG. ²³ Большинство этих лабораторий анализируют наличие свободных, а не связанных легких цепей, которые часто синтезируются плазматическими клетками в избытке тяжелых цепей иммуноглобулина.Любое окрашивание легких цепей в спинномозговой жидкости, скорее всего, вызвано локальным синтезом, поскольку бессывороточные легкие цепи легко удаляются почками. IgG, синтезируемый интратекально у пациентов с РС, в основном связан с легкими цепями κ. ²² Некоторые пытались сопоставить соотношение, которое может иметь место при РС. ²³ Свободные олигоклональные полосы легкой цепи κ также были обнаружены с помощью IEF и иммуноблоттинга в спинномозговой жидкости у пациентов с РС, но сильно связаны с присутствием олигоклональных полос IgG. ^{23 -25} Хотя этот тип дополнительного анализа может уменьшить количество пациентов с отрицательными олигоклональными полосами, диагностическая и прогностическая информация, передаваемая путем идентификации свободных изолированных легких цепей, либо IgA, либо IgM в отсутствие олигоклональных IgG, имеет не были полностью рассмотрены. Фактически, изолированное обнаружение свободных олигоклональных полос легкой цепи λ является неспецифическим открытием и может служить аргументом против диагноза РС. ^{23 , 25 , 26}

   Чувствительность к обнаружению олигоклональных полос с использованием ИЭФ с иммуноблоттингом превышает 95% (таблица 2). ^{11 , 16 -19} Хотя мы еще не понимаем точную роль олигоклональных полос при РС, их присутствие тесно связано (> 95%) с заболеванием и, таким образом, может служить полезным дополнением к диагноз. Доказательства исследований с участием примерно 3000 пациентов (таблица 2) представлены из отдельных публикаций с использованием ИЭФ с иммунофиксацией на более чем 500 пациентах по чувствительности и специфичности с использованием проспективных исследований с последующим наблюдением более 2 лет.Специфика варьируется в зависимости от того, насколько вы уверены, что нет другой причины для интратекального воспаления. Тем не менее, они высокие, а именно более 86% (таблица 2). В редких случаях результаты количественного анализа IgG будут повышены в отсутствие олигоклональных полос при использовании ИЭФ с иммуноблоттингом в истинном случае РС, тогда как обычно верно обратное. Zeman et al., ^{, 27,} из группы Queen Square обнаружили 34 случая с отрицательными олигоклональными полосами, когда клиницист счел вероятным диагноз РС.После дальнейшего исследования только у 3 пациентов с клинически определенным РС были обнаружены отрицательные олигоклональные полосы. Таким образом, когда клиническое подозрение велико и результат теста оказывается отрицательным на локальный синтез олигоклональных полос, это должно быть «предупреждением» для клинициста, чтобы он переоценил случай. Это означает, что чаще всего отрицательный результат теста с большей вероятностью указывает на другое заболевание, чем ложноотрицательный. ²⁸ В наши дни, когда диагноз рассеянного склероза часто приводит к назначению обременительных и дорогостоящих методов лечения, жизненно важно, чтобы неврологи использовали всю доступную информацию для постановки правильного диагноза.

   Есть некоторые особые соображения в отношении пар CSF – сыворотка, где CSF, но не образец сыворотки, демонстрирует одну полосу. В группе таких пациентов, которым в последующем были выполнены контрольные люмбальные пункции, почти треть превратилась в олигоклональную полосу уже через 6 месяцев. ²⁹ Эти преобразователи попали в 2 группы: либо с ранним заболеванием (т. Е. С клинически изолированными синдромами), либо с прогрессирующим заболеванием (см. Ниже). У многих из неконвертеров были диагностированы альтернативные расстройства.Следовательно, хотя и отрицательный по определению, одна полоса CSF может быть хорошей причиной для повторения анализа CSF, если другие критерии явно не указывают на MS. Это исследование ²⁹ также проверяет, почему олигоклональные полосы имеют самую высокую специфичность для MS, а одна полоса не является диагностической.

   Анализ спинномозговой жидкости — это первый критерий для постановки диагноза первично-прогрессирующего РС (ППРС). Хотя, по определению, во всех случаях группы Куин-сквер был первичный прогрессирующий РС и положительные олигоклональные полосы, другие группы не обнаружили такой высокой распространенности, когда применялось клиническое определение (например, критерии Шумахера). ³⁰ Одна лаборатория обнаружила, что только 83% пациентов с клиническим первичным прогрессирующим РС были положительными на олигоклональные полосы, хотя при этом использовалась менее чувствительная система электрофореза в полиакриламидном геле-ИЭФ. Есть несколько других крупных исследований. В крупнейшем на сегодняшний день исследовании первично-прогрессирующего РС с участием более 900 пациентов (исследование PROMISE [Jerry Wolinsky, MD; неопубликованные данные; 2004]) до одной трети пациентов были признаны отрицательными по СМЖ; однако анализ CSF не контролировался, и многие положительные или отрицательные определения основывались только на количественных анализах IgG.

   Было проведено несколько исследований, посвященных полезности анализа CSF у пациентов с подозрением на РС на основании наличия «клинически изолированного синдрома» и подозрений на типичные поражения РС на МРТ. ^{31 -34} При использовании высококвалифицированных анализов спинномозговой жидкости, таких как описанные здесь, пациенты с клинически изолированным синдромом и с нормальными результатами МРТ и нормальными результатами анализа спинномозговой жидкости имеют низкую вероятность развития рассеянного склероза. ³⁵ Эта высокая прогностическая ценность отрицательного результата должна побудить невролога рассмотреть другие диагнозы, чтобы учесть клинически изолированное проявление синдрома. Кроме того, в случаях клинически изолированного синдрома, когда МРТ либо отрицательна, либо показывает только неспецифические поражения, ЦСЖ может быть положительным более чем у 25% людей. ^{33 , 35 , 36} Это еще больше подтолкнет неврологов к наблюдению за такими пациентами с целью выявления новых поражений на МРТ или клинических симптомов и признаков РС.

   Природа иммунного ответа csf

   Маловероятно, что каждая видимая олигоклональная полоса IgG представляет собой продукт одного клона В-клеток и что, если бы гели могли быть дополнительно разделены (например, 2-мерные гели), олигоклональные полосы, вероятно, разделились бы на несколько разных клонов. На сегодняшний день не было определенной ассоциации этих олигоклональных полос с каким-либо постоянным антигеном у пациентов с РС.Очевидно, что ^{9 , 12 , 37 , 38} , интратекальный синтез антител против многих различных антигенов вносит вклад в олигоклональные полосы IgG в спинномозговой жидкости, что определяется либо с помощью антиген-зависимых иммуноблотов ¹² , либо путем количественного определения с помощью индекс антител. ^{9 , 37} Но до настоящего времени не было определенной связи этих специфических антигенов с причиной РС. Некоторые конкретные наблюдения, такие как высокая частота (несмотря на низкую интенсивность) интратекальных антител против нейротропных вирусов в MS ^{9 , 37} , требуют дальнейшего обсуждения.Также очевидно, что многие из этих антител обладают низкой аффинностью. ^{12 , 39} Тот же самый образец, который постоянно наблюдался у человека в течение долгого времени, предполагает долгоживущий хронический интратекальный иммунный ответ, который, по-видимому, уникален для каждого человека. ^{14 , 32} Также невозможно устранить эти полосы после интенсивной иммуносупрессии, направленной на полную иммунную аблацию, например, при изучении аутологичной трансплантации костного мозга при РС. ^{40 , 41}

   Повышенные уровни иммуноглобулинов и олигоклональные полосы указывают на локализованную экспансию B-клеток в головном мозге. Анализ репертуара тяжелых цепей иммуноглобулина в В-клетках, полученных из спинномозговой жидкости, продемонстрировал как клональную экспансию, так и процесс соматической гипермутации. ⁴² Недавние исследования с использованием одноклеточной полимеразной цепной реакции для анализа перестроек как тяжелых, так и легких цепей продемонстрировали не только клональную экспансию клонов B-клеток, но также, что, вероятно, произошла ревизия рецепторов.Поскольку новые методы молекулярной биологии применяются для изучения В-клеток спинномозговой жидкости при РС, вполне вероятно, что явления повышенных уровней иммуноглобулинов и олигоклональных полос могут предоставить новые возможности для понимания патогенеза этого заболевания.

   Резюме и рекомендации

   После изучения всей доступной информации о качестве, чувствительности и специфичности анализа CSF для диагностики РС, этот комитет сделал ряд выводов и рекомендаций.«Новые диагностические критерии» ¹ для РС установили, что тестирование спинномозговой жидкости является неотъемлемой частью постановки диагноза РС. Этот комитет, в который входят некоторые из ведущих экспертов по анализу CSF, взял в качестве своего основного мандата определение наиболее приемлемого на сегодняшний день подхода к использованию CSF как части обследования пациента с подозрением на РС. Комитет согласился с 12 рекомендациями относительно анализа CSF, чтобы неврологи знали, чего ожидать, а специалисты по лабораторной медицине должны стремиться поддерживать минимально приемлемый стандарт (Таблица 3).

   • Единственный наиболее информативный анализ — это качественная оценка CSF на наличие IgG, лучше всего выполняемая с использованием IEF вместе с какой-либо формой иммунодетекции (блоттинг или фиксация). То, что этот метод должен стать золотым стандартом, недавно получил одобрение Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов.

   • Этот качественный анализ следует проводить с использованием неконцентрированной CSF и сравнивать непосредственно с анализом образца сыворотки одновременно в том же анализе на соседней дорожке.

   • В оптимальных сериях используются одинаковые количества IgG из парной пробы сыворотки и спинномозговой жидкости.

   • Распознанные положительный и отрицательный контроли следует запускать с каждым набором образцов и весь гель отбрасывать, если олигоклональные полосы в положительном контроле развиты слабо или отрицательные контроли развиты чрезмерно.

   • Отчеты о качественном анализе спинномозговой жидкости должны быть сделаны с точки зрения 1 из 5 распознанных паттернов окраски олигоклональных полос.

   • Устный перевод должен производиться лицом, имеющим опыт работы с используемой техникой.

   • Неврологам необходимо учитывать результаты всех других тестов, выполненных в рамках панели CSF (например, количество клеток, уровни белка, глюкозы и лактата и другие).

   • В некоторых случаях оценка с использованием легких цепей для иммунодетекции может помочь выявить сомнительные образцы олигоклональных IgG.

   • Следует рассмотреть возможность повторения люмбальной пункции и анализа спинномозговой жидкости, если клинические подозрения высоки, но результаты спинномозговой жидкости неоднозначны, отрицательны или показывают только одну полосу.

   • Количественный анализ IgG является информативным дополнительным тестом, но не считается заменой качественной оценки IgG, которая имеет наивысшую чувствительность и специфичность.

   • При выполнении необходимо использовать нелинейные формулы для измерения интратекальных уровней IgG, которые учитывают целостность BCB, также измеряя отношение альбумина в CSF к сыворотке (также известное как Q _alb ; мера «утечки BCB» »).

   • Лаборатории, выполняющие рутинный анализ CSF, должны быть такими, которые обеспечивают собственный внутренний контроль качества и участвуют во внешних средствах контроля оценки качества, чтобы гарантировать поддержание высокого стандарта надежности и производительности, как это рекомендовано в некоторых международных консенсусных документах. ^{6 , 21} Доступно по адресу: http://www.teamspace.net/CSF.

   Учитывая, что пациентам необходимо пройти люмбальную пункцию для получения спинномозговой жидкости, они заслуживают того, чтобы ее проанализировали таким образом, чтобы получить наиболее информативные результаты. Поэтому есть надежда, что неврологи потребуют, чтобы анализ спинномозговой жидкости проводился, по крайней мере, так, как это было описано ранее в данном документе, и чтобы лаборатории, проводящие анализ спинномозговой жидкости, знали об ожидаемых стандартах. Единственный способ добиться этого — это выяснить, какая лаборатория будет проводить анализ спинномозговой жидкости, и узнать об используемых анализах.Учитывая, что Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов признало первый критерий, должно стать легче найти лаборатории, отвечающие указанным критериям.

   Для корреспонденции: Марк С. Фридман, магистр, доктор медицинских наук, FRCPC, Департамент медицины (неврология), Университет Оттавы, Клиника исследования рассеянного склероза, Госпиталь Оттавы — Общий кампус, 501 Smyth Rd, Оттава, Онтарио, Канада K1H 8L6 ([email protected]).

   Принята к публикации : 30 декабря 2004 г.

   Вклад авторов: Концепция и дизайн исследования : Фридман, Томпсон, Дайзенхаммер, Джованнони, Кейр, Рак и Туртеллотт. Сбор данных : Фридман, Дайзенхаммер, Гримсли, Эман и Туртеллотт. Анализ и интерпретация данных : Фридман, Дайзенхаммер, Гримсли, Оман, Шариф, Синдик, Селлебьерг и Туртеллотт. Составление рукописи : Фридман, Томпсон, Джованнони, Гримсли и Туртеллотт. Критический пересмотр рукописи на предмет важного интеллектуального содержания : Фридман, Дайзенхаммер, Гримсли, Кейр, Оман, Раке, Шариф, Синдик, Селлебьерг и Туртеллотт. Статистический анализ : Deisenhammer. Получено финансирование : Racke. Административная, техническая и материальная поддержка : Фридман, Томпсон, Гримсли, Кейр, Рэк, Шариф и Туртеллотт. Наблюдение за учебой : Фридман, Томпсон и Джованнони.

   Благодарность: Разработка рукописи стала возможной благодаря образовательному гранту Консорциума клиник рассеянного склероза, Тинек, штат Нью-Джерси.

   1. Макдональд WICompston Аедан грамм и другие. Рекомендуемые диагностические критерии рассеянного склероза: рекомендации Международной группы по диагностике рассеянного склероза. Ann Neurol 2001; 50121-127PubMedGoogle ScholarCrossref 2.Tourtellotte WW Спинномозговая жидкость при рассеянном склерозе. В: Винкен П, Брюн GW, ред. Справочник по клинической неврологии . Том 9.Амстердам, Нидерланды: North-Holland Publishing Co; 1970: 324-382 Google Scholar3, Нельсон Нег-Олофссон OLarsson LÖhman S Диагностическая и прогностическая ценность лактата спинномозговой жидкости у детей с менингитом: его связь с современными методами диагностики. Acta Paediatr Scand 1986; 7552-57PubMedGoogle ScholarCrossref 4.Reiber HPeter JB Анализ спинномозговой жидкости — шаблоны данных и программы оценки, связанные с заболеванием. J Neurol Sci 2001; 184101-122PubMedGoogle ScholarCrossref 5.Reiber Хотто MTrendelenburg CWormek A Отчетность по данным спинномозговой жидкости — база знаний и программное обеспечение для интерпретации. Clin Chem Lab Med 2001; 39324- 332PubMedGoogle ScholarCrossref 6.Andersson Мальварес-Чермено JBernardi грамм и другие. Спинномозговая жидкость в диагностике рассеянного склероза: консенсус-отчет. J Neurol Neurosurg Psychiatry 1994; 57897-902PubMedGoogle ScholarCrossref 7. Оман S Обеспечение качества и обработка проб при исследовании спинномозговой жидкости. В: Томпсон EJ, Trojano M, Ливреа П., ред. Анализ спинномозговой жидкости при рассеянном склерозе . Нью-Йорк, Нью-Йорк: Springer Publishing Co Inc; 1996: 133-141, Google Scholar8, Лефверт. AKLink Производство H IgG в центральной нервной системе: критический обзор предлагаемых формул. Ann Neurol 1985; 1713-20PubMedGoogle ScholarCrossref 9.Reiber HUngefehr SJacobi C Интратекальный, полиспецифический и олигоклональный иммунный ответ при рассеянном склерозе. Mult Scler 1998; 4111-117PubMedGoogle ScholarCrossref 10.Тибблинг GLink HÖhman S Принципы анализа альбумина и IgG при неврологических расстройствах, I: установление контрольных значений. Scand J Clin Lab Invest 1977; 37385-390PubMedGoogle ScholarCrossref 11. Эман Сернеруд Дж. Форсберг п и другие. Сравнение семи формул и изоэлектрофокусирование для определения IgG, продуцируемого интратекально, при неврологических заболеваниях. Ann Clin Biochem 1992; 29405-410PubMedGoogle ScholarCrossref 12.Sindic CJMVan Антверпен MPGoffette S Интратекальный гуморальный иммунный ответ: лабораторный анализ и клиническое значение. Clin Chem Lab Med 2001; 39333-340PubMedGoogle ScholarCrossref 13.Keir GLuxton RWThompson EJ Изоэлектрическое фокусирование иммуноглобулина G спинномозговой жидкости: аннотированное обновление. Ann Clin Biochem 1990; 27436-443PubMedGoogle ScholarCrossref 14.Уолш MJStaugaitis Сапшак PTourtellotte WW Сверхчувствительное определение IgG в неконцентрированной спинномозговой жидкости с использованием окрашивания нитратом серебра после изоелективной фокусировки и иммунофиксации [аннотация]. Ann Neurol 1982; 1114Google Scholar15.Staugaitis СМСапшак PTourtellotte WWLee MMReiber H-O Изоэлектрическое фокусирование неконцентрированной спинномозговой жидкости: приложение к сверхчувствительному анализу олигоклонального иммуноглобулина G. Электрофорез 1985; 6287-291Google ScholarCrossref 16.Костулас VKLink HLefvert Полосы A-K олигоклонального IgG в спинномозговой жидкости: принципы демонстрации и интерпретации на основе результатов у 1114 неврологических пациентов. Arch Neurol 1987; 441041-1044PubMedGoogle ScholarCrossref 17.McLean BNLuxton RWThompson EJ Исследование иммуноглобулина G в спинномозговой жидкости у 1007 пациентов с подозрением на неврологическое заболевание с использованием изоэлектрического фокусирования и log IgG-индекса. Мозг 1990; 1131269-1289PubMedGoogle ScholarCrossref 18.Beer SRosler KMHess CW. Диагностическая ценность параклинических тестов при рассеянном склерозе: относительная чувствительность и специфичность для реклассификации в соответствии с критериями комитета Позера. J Neurol Neurosurg Psychiatry 1995; 59152-159PubMedGoogle ScholarCrossref 19. Паолино EFainardi ERuppi п и другие. Проспективное исследование прогностической ценности олигоклональных полос спинномозговой жидкости и МРТ при острых изолированных неврологических синдромах для последующего прогрессирования рассеянного склероза. J Neurol Neurosurg Psychiatry 1996; 60572-575 PubMedGoogle ScholarCrossref 20.Verbeek Mde Reus HPWeykamp CM Сравнение методов обнаружения полос олигоклонального IgG в спинномозговой жидкости и сыворотке: результаты голландского исследования контроля качества. Clin Chem 2002; 481578-1580PubMedGoogle Scholar21.Reiber Хомпсон Э.Дж.Гримсли грамм и др. Обеспечение качества анализа белков спинномозговой жидкости: международный консенсус по результатам группового обсуждения в Интернете. Clin Chem Lab Med . 2003; 41: 331-337. Доступно на: http://www.teamspace.net/CSF. Доступ 3 мая 2005 г. Google Scholar22.Link HLaurenzi MA Класс иммуноглобулинов и тип легкой цепи олигоклональных полос в спинномозговой жидкости при рассеянном склерозе, определяемый электрофорезом в агарозном геле и иммунофиксацией. Ann Neurol 1979; 6107-110PubMedGoogle ScholarCrossref 23. Рудик Р.А.Палант ABidlack JMHerndon RM Свободные легкие цепи каппа в спинномозговой жидкости при рассеянном склерозе. Ann Neurol 1986; 2063-69PubMedGoogle ScholarCrossref 24.Sindic CJMLaterre EC Олигоклональные свободные каппа- и лямбда-полосы в спинномозговой жидкости пациентов с рассеянным склерозом и другими неврологическими заболеваниями: иммуноаффинное исследование капиллярного блоттинга. J Neuroimmunol 1991; 3363-72 PubMedGoogle ScholarCrossref 25. Кракауэр MNielsen HSJensen JSellebjerg F Интратекальный синтез свободных легких цепей иммуноглобулина при РС. Acta Neurol Scand 1998; 98161-165PubMedGoogle ScholarCrossref 26.Goffette SSchluep MHenry ЧАС и другие. Обнаружение олигоклональных свободных каппа-цепей в отсутствие олигоклональных IgG в спинномозговой жидкости пациентов с подозрением на рассеянный склероз. J Neurol Neurosurg Psychiatry 2004; 75308-310PubMedGoogle ScholarCrossref 27.Zeman AZKidd DMcLean BN и другие. Исследование олигоклонального отрицательного рассеянного склероза. J Neurol Neurosurg Psychiatry 1996; 6027-30PubMedGoogle ScholarCrossref 28.Земан AMcLean BKeir грамм и другие. Значение сывороточных олигоклональных полос при неврологических заболеваниях. J Neurol Neurosurg Psychiatry 1993; 5632-35PubMedGoogle ScholarCrossref 29.Davies GKeir GThompson Э.Дж.Джиованнони G Клиническое значение интратекального моноклонального иммуноглобулина: последующее исследование. Неврология 2003; 601163-1166PubMedGoogle ScholarCrossref 30.Thompson AJMontalban XBarkhof F и другие.Диагностические критерии первичного прогрессирующего рассеянного склероза: позиционный документ. Ann Neurol 2000; 47831-835PubMedGoogle ScholarCrossref 31.Sharief MKThompson EJ Прогностическая ценность интратекального синтеза иммуноглобулинов и магнитно-резонансной томографии при острых изолированных синдромах для последующего развития рассеянного склероза. Ann Neurol 1991; 29147-151PubMedGoogle ScholarCrossref 32.Rolak LABeck RWPaty DW и другие.Группа исследования неврита зрительного нерва, ЦСЖ в испытании лечения острого неврита зрительного нерва. Неврология 1996; 46368-372PubMedGoogle ScholarCrossref 33.Tumani HTourtellotte WWPeter JBFelgenhauer K Острый неврит зрительного нерва: комбинированные иммунологические маркеры и магнитно-резонансная томография позволяют прогнозировать последующее развитие рассеянного склероза. J Neurol Sci 1998; 15544-49PubMedGoogle ScholarCrossref 34.Jin YPde Pedro-Cuesta JHuang YHSoderstrom M Прогнозирование рассеянного склероза в начале неврита зрительного нерва. Mult Scler 2003; 9135-141PubMedGoogle ScholarCrossref 35.Soderstrom MYa-Ping JHillert JLink H Неврит зрительного нерва: прогноз для рассеянного склероза на основании данных МРТ, спинномозговой жидкости и HLA. Неврология 1998; 50708-714PubMedGoogle ScholarCrossref 36.Zeman AZKeir GLuxton RThompson EJ Сывороточный олигоклональный IgG — частая и стойкая находка при рассеянном склерозе и имеет системный источник. QJM 1996; 89187-193PubMedGoogle ScholarCrossref 37.Ростасы KReiber HPohl D и другие. Chlamydia pneumoniae у детей с МС: частота и количество интратекальных антител. Неврология 2003; 61125-128PubMedGoogle ScholarCrossref 38.Vandvik BNorrby ENordal HJDegre M Олигоклональные антитела IgG к вирусу кори, выделенные из спинномозговой жидкости, экстрактов головного мозга и сывороток пациентов с подострым склерозом, панэнцефалитом и рассеянным склерозом. Scand J Immunol 1976; 5979-992PubMedGoogle ScholarCrossref 39.О’Коннор KCChitnis Т.Грифон DE и другие. Аутоантитела, реагирующие с основным белком миелина, в сыворотке и спинномозговой жидкости пациентов с рассеянным склерозом характеризуются низкими аффинными взаимодействиями. J Neuroimmunol 2003; 136140-148PubMedGoogle ScholarCrossref 40.Fassas APassweg JRAnagnostopoulos А и другие. Рабочая группа по аутоиммунным заболеваниям EBMT (Европейская группа по трансплантации крови и костного мозга): трансплантация гемопоэтических стволовых клеток при рассеянном склерозе: ретроспективное многоцентровое исследование. J Neurol 2002; 24-1097PubMedGoogle ScholarCrossref 41.Mancardi GLSaccardi RFilippi M и другие. Итальянская интергруппа GITMO-NEURO по трансплантации аутологичных гемопоэтических стволовых клеток при рассеянном склерозе: трансплантация аутологичных гемопоэтических стволовых клеток подавляет активность МРТ с усилением Gd при РС. Неврология 2001; 5762-68PubMedGoogle ScholarCrossref 42.Qin YDuquette Пчжан Y и другие. Клональная экспансия и соматическая гипермутация генов VH В-клеток спинномозговой жидкости при рассеянном склерозе. J Clin Invest 1998; 1021045-1050PubMedGoogle ScholarCrossref

   Протеом спинномозговой жидкости показывает нарушение развития нейронов при рассеянном склерозе.

3. 1.

   Thompson, A. J. et al. Диагностика рассеянного склероза: пересмотр критериев Макдональда в 2017 г. Lancet Neurol. 17 , 162–173. https://doi.org/10.1016/s1474-4422(17)30470-2 (2018).

   Артикул PubMed Google ученый

4. 2.

   Chung, K. K. et al. 30-летнее клиническое и магнитно-резонансное обсервационное исследование рассеянного склероза и клинически изолированных синдромов. Ann. Neurol. 87 , 63–74. https://doi.org/10.1002/ana.25637 (2020).

   Артикул PubMed Google ученый

5. 3.

   Добсон Р. и Джованнони Г. Рассеянный склероз: обзор. Eur. J. Neurol. 26 , 27–40. https: // doi.org / 10.1111 / ene.13819 (2019).

   CAS Статья PubMed Google ученый

6. 4.

   Миллер Д., Баркхоф Ф., Монтальбан X., Томпсон А. и Филиппи М. Клинически изолированные синдромы, указывающие на рассеянный склероз, часть 1: естественное течение, патогенез, диагностика и прогноз . Lancet Neurol. 4 , 281–288. https://doi.org/10.1016/s1474-4422(05)70071-5 (2005).

   Артикул PubMed Google ученый

7. 5.

   Цунода, И. и Фудзинами, Р. С. Модели «наизнанку» и «снаружи внутрь» для вирусной демиелинизации: повреждение аксонов, запускающее демиелинизацию. Springer Semin. Immunopathol. 24 , 105–125. https://doi.org/10.1007/s00281-002-0105-z (2002).

   CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

8. 6.

   Stys, P. K., Zamponi, G. W., van Minnen, J. & Geurts, J. J. G. Пожалуйста, встаньте, настоящий рассеянный склероз? (том 13, стр 507, 2012). Нат. Rev. Neurosci. 13 , https://doi.org/10.1038/nrn3300 (2012).

9. 7.

   Stys, P. Патоэтиология рассеянного склероза: мы лаем не на то дерево? F1000Prime Reports 2 5 , 1–11, https://doi.org/10.12703/P5-20 (2013).

10. 8.

    Аль Султан, А.С. и Стис, П.К. Нам следует больше сосредоточиться на поиске терапевтических мишеней для невоспалительных повреждений при РС — Комментарий. Рассеянный склероз J. 24 , 1276–1277, https: // doi.org / 10.1177 / 1352458518771257 (2018).

11. 9.

    Барнетт, М. Х. и Принас, Дж. У. Рецидивирующий и ремиттирующий рассеянный склероз: патология новообразования. Ann. Neurol. 55 , 458–468. https://doi.org/10.1002/ana.20016 (2004 г.).

    Артикул PubMed Google ученый

12. 10.

    Уиллер, Д., Бандару, В. В. Р., Калабрези, П. А., Нат, А. и Хоги, Н. Дж. Дефект метаболизма сфинголипидов изменяет свойства нормального белого вещества при рассеянном склерозе. Мозг 131 , 3092–3102. https://doi.org/10.1093/brain/awn190 (2008 г.).

    Артикул PubMed PubMed Central Google ученый

13. 11.

    Poon, K. W. C. et al. Биохимические изменения липидов, обнаруженные в нормальном внешнем белом веществе хронического рассеянного склероза с помощью спектральной когерентной рамановской визуализации. Chem Sci 9 , 1586–1595. https://doi.org/10.1039/c7sc03992a (2018).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

14. 12.

    Шарма Р., Нараяна П. А. и Волински Дж. С. Аномалии серого вещества при рассеянном склерозе: спектроскопическая визуализация протонного магнитного резонанса. Рассеянный склероз 7 , 221–226. https://doi.org/10.1191/135245801680209312 (2001).

    CAS Статья PubMed Google ученый

15. 13.

    Yonar, D., Ocek, L., Tiftikcioglu, B. I., Zorlu, Y. & Severcan, F. Диагностика ремиттирующего и ремиттирующего рассеянного склероза спинномозговой жидкости с помощью инфракрасной спектроскопии с преобразованием Фурье в сочетании с многомерным анализом. Sci. Отчет 8 , https://doi.org/10.1038/s41598-018-19303-3 (2018).

16. 14.

    Huynh, J. L. et al. Различия на уровне всего эпигенома в свободных от патологии областях мозга, пораженного рассеянным склерозом. Нат. Neurosci. 17 , 121–130. https://doi.org/10.1038/nn.3588 (2014).

    CAS Статья PubMed Google ученый

17. 15.

    Тигесен, К., Ларсен, М. Р. и Финсен, Б. Протеомные признаки нейровоспаления при болезни Альцгеймера, рассеянном склерозе и ишемическом инсульте. Эксперт Рев. Протеомика 16 , 601–611. https://doi.org/10.1080/14789450.2019.1633919 (2019).

    CAS Статья PubMed Google ученый

18. 16.

    Opsahl, J. A. et al. Анализ спинномозговой жидкости человека без этикеток, направленный на различные стратегии нормализации и выявление групп белков, пораженных рассеянным склерозом. Протеомика 16 , 1154–1165. https://doi.org/10.1002/pmic.201500284 (2016).

    CAS Статья PubMed Google ученый

19. 17.

    Канехиса М. К пониманию происхождения и эволюции клеточных организмов. Protein Sci. 28 , 1947–1951. https://doi.org/10.1002/pro.3715 (2019).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

20. 18.

    Канехиса М., Фурумичи М., Сато Ю., Исигуро-Ватанабе М. и Танабе М. KEGG: интеграция вирусов и клеточных организмов. Nucleic Acids Res. 49 , D545 – D551 (2021 г.).

    Артикул Google ученый

21. 19.

    Канехиса, М. и Гото, С. KEGG: киото-энциклопедия генов и геномов. Nucleic Acids Res. 28 , 27–30. https://doi.org/10.1093/nar/28.1.27 (2000).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

22. 20.

    Stoop, M. P. et al. Снижение нейроаксональных белков в спинномозговой жидкости при первом приступе подозрения на рассеянный склероз. Proteomics Clin. Прил. 11 , https: // doi.org / 10.1002 / prca.201700005 (2017).

23. 21.

    Mosleth, E. F. et al. в Комплексная хемометрия: химический и биохимический анализ данных (редакторы Стивен Д. Браун, Рома Таулер и Беата Вальчак) 515–567 (Elsevier, 2020).

24. 22.

    Wold, S., Martens, H. & Wold, H. in Proceedings of Conference Matrix Pencils, Lecture Notes in Mathematics, (ed B. Kågstrom A. Ruhe) 286–293 (Springer, Heidelberg) 1983 г.).

25. 23.

    Мартенс, Х. и Мартенс, М. Модифицированная оценка неопределенности параметров при билинейном моделировании методом частичной регрессии наименьших квадратов (PLSR). Food Qual. Предпочитать. 11 , 5–16. https://doi.org/10.1016/s0950-3293(99)00039-7 (2000).

    Артикул Google ученый

26. 24.

    Pedregosa, F. et al. Scikit-learn: машинное обучение на Python. J. Mach. Учиться. Res. 12 , 2825–2830 (2011).

    MathSciNet МАТЕМАТИКА Google ученый

27. 25.

    Агравал, П., Навадкар, Р., Охха, Х., Кумар, Дж. И Саху, А. Стратегии уклонения от комплемента вирусов: обзор. Фронт. Microbiol. 8 , https://doi.org/10.3389/fmicb.2017.01117 (2017).

28. 26.

    Lukacsi, S. et al. Использование рецепторов комплемента во взаимодействии иммунных клеток и микробов. FEBS Lett. 594 , 2695–2713.https://doi.org/10.1002/1873-3468.13743 (2020).

    CAS Статья PubMed Google ученый

29. 27.

    Гуан Ю., Якимовски Д., Раманатан М., Вайншток-Гуттман Б. и Зивадинов Р. Роль вируса Эпштейна-Барра в рассеянном склерозе: от молекулярной патофизиологии до визуализации in vivo . Neural Regen. Res 14 , 373–386 (2019).

    Артикул Google ученый

30. 28.

    Култхард, Л. Г., Хоксворт, О. А., Конрой, Дж., Ли, Дж. Д. и Вудрафф, Т. М. Рецептор комплемента C3a модулирует пролиферацию нервных клеток-предшественников эмбриона и когнитивные функции. Мол. Иммунол. 101 , 176–181. https://doi.org/10.1016/j.molimm.2018.06.271 (2018).

    CAS Статья PubMed Google ученый

31. 29.

    Култхард, Л. Г., Хоксворт, О. А. и Вудрафф, Т. М. Дополнение: новый архитектор развивающегося мозга. Trends Neurosci. 41 , 373–384. https://doi.org/10.1016/j.tins.2018.03.009 (2018).

    CAS Статья PubMed Google ученый

32. 30.

    Хоксворт, О. А., Култхард, Л. Г. и Вудрафф, Т. М. Дополнение в фундаментальных процессах клетки. Мол. Иммунол. 84 , 17–25. https://doi.org/10.1016/j.molimm.2016.11.010 (2017).

    CAS Статья PubMed Google ученый

33. 31.

    Ли, Дж. Д., Култхард, Л. Г. и Вудрафф, Т. М. Нарушение регуляции комплемента в центральной нервной системе во время развития и болезни. Семин. Иммунол. 45 , https://doi.org/10.1016/j.smim.2019.101340 (2019).

34. 32.

    Magdalon, J. et al. Система комплемента в архитектуре мозга и нарушениях развития нервной системы. Фронт. Neurosci. 14 , https://doi.org/10.3389/fnins.2020.00023 (2020).

35. 33.

    Massagué, J. Передача сигналов TGFβ в контексте. Нат. Rev. Mol. Cell Biol. 13 , 617–630 (2012).

    Артикул Google ученый

36. 34.

    Мейерс, Э. А. и Кесслер, Дж. А. Передача сигналов семейства TGF-бета в нервной и нейрональной дифференцировке, развитии и функции. Cold Spring Harbor Perspect. Биол. 9 , https://doi.org/10.1101/cshperspect.a022244 (2017).

37. 35.

    Nakashima, H. et al. Каноническая передача сигналов TGF-бета негативно регулирует морфогенез нейронов посредством подавления CRMP2, опосредованного комплексом TGIF / Smad. J. Neurosci. 38 , 4791–4810. https://doi.org/10.1523/jneurosci.2423-17.2018 (2018).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

38. 36.

    Jain, M. et al. Митохондриальные активные формы кислорода регулируют передачу сигналов трансформирующего фактора роста бета. J. Biol. Chem. 288 , 770–777. https://doi.org/10.1074/jbc.M112.431973 (2013).

    CAS Статья PubMed Google ученый

39. 37.

    BarcellosHoff, M. H. & Dix, T. A. Редокс-опосредованная активация латентного трансформирующего фактора роста-бета 1. Мол. Эндокринол. 10 , 1077–1083. https://doi.org/10.1210/me.10.9.1077 (1996).

    CAS Статья Google ученый

40. 38.

    Borquez, D.A. et al. Анализ роли окислительно-восстановительной передачи сигналов в развитии нейронов. J. Neurochem. 137 , 506–517. https://doi.org/10.1111/jnc.13581 (2016).

    CAS Статья PubMed Google ученый

41. 39.

    Sies, H. Перекись водорода как центральная окислительно-восстановительная сигнальная молекула при физиологическом окислительном стрессе: окислительный эустресс. Редокс Биол. 11 , 613–619.https://doi.org/10.1016/j.redox.2016.12.035 (2017).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

42. 40.

    Sies, H., Berndt, C. & Jones, D.P. Окислительный стресс. Annu. Rev. Biochem. 86 , 715–748. https://doi.org/10.1146/annurev-biochem-061516-045037 (2017).

    CAS Статья PubMed Google ученый

43. 41.

    Сис, Х. и Джонс, Д. П. Активные формы кислорода (АФК) как плейотропные физиологические сигнальные агенты. Нат. Rev. Mol. Cell Biol. https://doi.org/10.1038/s41580-020-0230-3 (2020).

    Артикул PubMed Google ученый

44. 42.

    Урсини, Ф., Майорино, М. и Форман, Х. Дж. Редокс-гомеостаз: золотая середина здорового образа жизни. Редокс Биол. 8 , 205–215. https://doi.org/10.1016/j.редокс.2016.01.010 (2016).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

45. 43.

    Terzi, A. & Suter, D. M. Роль NADPH оксидазы в развитии нейронов. Free Radical Biol. Med. 154 , 33–47. https://doi.org/10.1016/j.freeradbiomed.2020.04.027 (2020).

    CAS Статья Google ученый

46. 44.

    Уотсон, Дж.D. Диабет 2 типа как редокс-болезнь. Ланцет 383 , 841–843. https://doi.org/10.1016/s0140-6736(13)62365-x (2014).

    Артикул PubMed Google ученый

47. 45.

    Молдогазиева Н. Т., Мохосоев И. М., Фельдман Н. Б. и Луценко С. В. Передача сигналов ROS и RNS: адаптивные окислительно-восстановительные переключатели посредством окислительных / нитрозативных модификаций белков. Free Radical Res. 52 , 507–543. https: // doi.org / 10.1080 / 10715762.2018.1457217 (2018).

    CAS Статья Google ученый

48. 46.

    Mullena, L., Mengozzia, M., Hanschmann, E.-M., Alberts, B. & Ghezzia, P. Как окислительно-восстановительное состояние регулирует иммунитет. Free Radical Biol. Med. 157 , 3–14 (2020).

    Артикул Google ученый

49. 47.

    Vicente-Gutierrez, C., Jimenez-Blasco, D. & Quintana-Cabrera, R.Переплетенные АФК и метаболическая передача сигналов на интерфейсе нейрон-астроцит. Neurochem. Res. https://doi.org/10.1007/s11064-020-02965-9 (2020).

    Артикул PubMed Google ученый

50. 48.

    Berndt, C., Wilmsa, C., Thauvin.M. И Vriz.S. in Окислительный стресс Eustress and Distress (ed Helmut Sies) Ch. 28, 565–582 (Academic Press, 2020).

51. 49.

    Прозоровски Т., Шнайдер Р., Berndt, C., Hartung, H.P. & Aktas, O. Редокс-регулируемая судьба нервных стволовых клеток-предшественников. Biochimica Et Biophys. Acta-General Subjects 1543–1554 , 2015. https://doi.org/10.1016/j.bbagen.2015.01.022 (1850).

    CAS Статья Google ученый

52. 50.

    Франко Р. и Варгас М. Р. Редокс-биология в неврологической функции, дисфункции и старении. Антиоксид. Редокс-сигнал. 28 , 1583–1586.https://doi.org/10.1089/ars.2018.7509 (2018).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

53. 51.

    Olguin-Albuerne, M. & Moran, J. Редокс-сигнальные механизмы в развитии нервной системы. Антиоксид. Редокс-сигнал. 28 , 1603–1625. https://doi.org/10.1089/ars.2017.7284 (2018).

    CAS Статья PubMed Google ученый

54. 52.

    Феррейра, А.С., Соуза, Н., Бесса, Дж. М., Соуза, Дж. К. и Маркес, Ф. Метаболизм и нейрогенез у взрослых: к пониманию роли липокалина-2 и окислительного стресса, связанного с железом. Neurosci. Biobehav. Ред. 95 , 73–84. https://doi.org/10.1016/j.neubiorev.2018.09.014 (2018).

    CAS Статья PubMed Google ученый

55. 53.

    Padureanu, R. et al. Взаимозависимость окислительного стресса и воспаления при рассеянном склерозе. J. Clin. Med. 8 , https://doi.org/10.3390/jcm8111815 (2019).

56. 54.

    Yoneyama, M., Kawada, K., Gotoh, Y., Shiba, T. & Ogita, K. Эндогенные активные формы кислорода необходимы для пролиферации нервных стволовых клеток / клеток-предшественников. Neurochem. Int. 56 , 740–746. https://doi.org/10.1016/j.neuint.2009.11.018 (2010).

    CAS Статья PubMed Google ученый

57. 55.

    Vicente-Gutierrez, C. et al. Астроцитарные митохондриальные АФК модулируют метаболизм мозга и поведение мышей. Нат. Метаб. 1 , 201–211. https://doi.org/10.1038/s42255-018-0031-6 (2019).

    CAS Статья PubMed Google ученый

58. 56.

    Цатмали, М., Уолкотт, Э. С., Макаренкова, Х. и Кроссин, К. Л. Активные формы кислорода модулируют дифференцировку нейронов в клональных кортикальных культурах. Мол. Клетка. Neurosci. 33 , 345–357. https://doi.org/10.1016/j.mcn.2006.08.005 (2006).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

59. 57.

    Цатмали, М., Уолкотт, Э. С. и Кроссин, К. Л. Новорожденные нейроны приобретают высокие уровни активных форм кислорода и повышенное содержание митохондриальных белков при дифференцировке от предшественников. Brain Res. 1040 , 137–150.https://doi.org/10.1016/j.brainres.2005.01.087 (2005).

    CAS Статья PubMed Google ученый

60. 58.

    Эстрада, С. П., Коваку, Р., Санкаварам, С. Р., Свенссон, М. и Брундин, Л. Окислительный стресс увеличивает нейрогенез и олигодендрогенез во взрослых нейральных клетках-предшественниках. Stem Cells Dev. 23 , 2311–2327. https://doi.org/10.1089/scd.2013.0452 (2014).

    CAS Статья Google ученый

61. 59.

    Le Belle, J.E. et al. Пролиферативные нервные стволовые клетки имеют высокие уровни эндогенных ROS, которые регулируют самообновление и нейрогенез PI3K / Akt-зависимым образом. Стволовые клетки клеток 8 , 59–71. https://doi.org/10.1016/j.stem.2010.11.028 (2011).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

62. 60.

    Дикинсон, Б. К., Пельтье, Дж., Стоун, Д., Шаффер, Д. В. и Чанг, К.Передача редокс-сигналов J. Nox2 поддерживает важные популяции клеток в головном мозге. Нат. Chem. Биол. 7 , 106–112. https://doi.org/10.1038/nchembio.497 (2011 г.).

    CAS Статья PubMed Google ученый

63. 61.

    Геллерт, М., Ханшманн, Э. М., Лепка, К., Берндт, С. и Лиллиг, К. Х. Редокс-регуляция динамики цитоскелета во время дифференцировки и де-дифференцировки. Biochim. et Biophys. Acta-General Subjects 1575–1587 , 2015.https://doi.org/10.1016/j.bbagen.2014.10.030 (1850 г.).

    CAS Статья Google ученый

64. 62.

    Munnamalai, V. & Suter, D. M. Активные формы кислорода регулируют динамику F-актина в конусах роста нейронов и рост нейритов. J. Neurochem. 108 , 644–661. https://doi.org/10.1111/j.1471-4159.2008.05787.x (2009).

    CAS Статья PubMed Google ученый

65. 63.

    Wilson, C. & Gonzalez-Billault, C. Регулирование динамики цитоскелета с помощью окислительно-восстановительной передачи сигналов и окислительного стресса: последствия для развития нейронов и трафика. Фронт. Клетка. Neurosci. 9 , https://doi.org/10.3389/fncel.2015.00381 (2015).

66. 64.

    Икбал, М. А. и Эфтекхарпур, Э. Регуляторная роль окислительно-восстановительного баланса в определении судьбы нервных клеток-предшественников. Stem Cells Int. 2017 , https://doi.org/10.1155/2017/27 (2017).

67. 65.

    Бекхаузер, Т. Ф., Фрэнсис-Оливейра, Дж. И Де Паскуале, Р. Активные формы кислорода: физиологические и физиопатологические эффекты на синаптическую пластичность. J. Exp. Neurosci. 10 , 23–48. https://doi.org/10.4137/jen.S39887 (2016).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

68. 66.

    Massaad, C. A. & Klann, E. Активные формы кислорода в регуляции синаптической пластичности и памяти. Антиоксид. Редокс-сигнал. 14 , 2013–2054 гг. https://doi.org/10.1089/ars.2010.3208 (2011).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

69. 67.

    Goodman, A. B. Ретиноидные рецепторы, переносчики и метаболизаторы в качестве терапевтических мишеней при позднем начале болезни Альцгеймера. J. Cell. Physiol. 209 , 598–603. https://doi.org/10.1002/jcp.20784 (2006).

    CAS Статья PubMed Google ученый

70. 68.

    Хаммерлинг, У. Ретинол как переносчик электронов в окислительно-восстановительной передаче сигналов, новый рубеж в исследованиях витамина А. Гепатобилиарная хирургия. Питание 5 , 15–28. https://doi.org/10.3978/j.issn.2304-3881.2016.01.02 (2016).

    Артикул Google ученый

71. 69.

    Kim, Y. K. & Hammerling, U. Митохондриальный сигнальный комплекс PKC дельта / ретинол осуществляет контроль в реальном времени на энергетический гомеостаз. Biochimica Et Biophysica Acta — молекулярная и клеточная биология липидов 1865 , https: // doi.org / 10.1016 / j.bbalip.2020.158614 (2020).

72. 70.

    Haushalter, C., Asselin, L., Fraulob, V., Dolle, P. & Rhinn, M. Ретиноевая кислота контролирует ранний нейрогенез в развивающейся коре головного мозга мыши. Dev. Биол. 430 , 129–141. https://doi.org/10.1016/j.ydbio.2017.08.006 (2017).

    CAS Статья PubMed Google ученый

73. 71.

    Ширер, К. Д., Стони, П. Н., Морган, П. Дж.И Маккаффери, П. Дж. Витамин для мозга. Trends Neurosci. 35 , 733–741. https://doi.org/10.1016/j.tins.2012.08.005 (2012).

    CAS Статья PubMed Google ученый

74. 72.

    Алмейда, А. С. и Виейра, Х. Л. А. Роль клеточного метаболизма и митохондриальной функции во время нейрогенеза взрослых. Neurochem. Res. 42 , 1787–1794. https://doi.org/10.1007/s11064-016-2150-3 (2017).

    CAS Статья PubMed Google ученый

75. 73.

    Dhungana, S. et al. Редокс-свойства человеческого трансферрина, связанного с его рецептором. Биохимия 43 , 205–209. https://doi.org/10.1021/bi0353631 (2004 г.).

    CAS Статья PubMed Google ученый

76. 74.

    Сильвестрофф, Л., Франко, П. Г. и Паскини, Дж.М. Нервные клетки и клетки-предшественники олигодендроцитов: влияние трансферрина на пролиферацию клеток. Asn Neuro 5 , 43-U64. https://doi.org/10.1042/an20120075 (2013).

    CAS Статья Google ученый

77. 75.

    Тонг, Л. Структура и функция биотин-зависимых карбоксилаз. Cell. Мол. Life Sci. 70 , 863–891. https://doi.org/10.1007/s00018-012-1096-0 (2013).

    CAS Статья PubMed Google ученый

78. 76.

    Роско Л., Смит В. Н., Ямазаки Р. и Хуанг Дж. К. Биоэнергетика олигодендроцитов в здоровье и болезнях. Невролог 25 , 334–343. https://doi.org/10.1177/10738584187

    (2019).

    CAS Статья PubMed Google ученый

79. 77.

    Сяо, В. С., Ван, Р. С., Хэнди, Д. Э. и Лоскальцо, Дж. Редокс-пары NAD (H) и NADP (H) и энергетический метаболизм клеток. Антиоксид. Редокс-сигнал. 28 , 251–272. https://doi.org/10.1089/ars.2017.7216 (2018).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

80. 78.

    Лабрусс-Ариас, Д., Мартинес-Руис, А. и Кальсада, М. Дж. Гипоксия и редокс-сигнализация при ремоделировании внеклеточного матрикса: от механизмов до патологических последствий. Антиоксид. Редокс-сигнал. 27 , 802–822. https://doi.org/10.1089/ars.2017.7275 (2017).

    CAS Статья PubMed Google ученый

81. 79.

    Лонг, К. Р. и Хаттнер, В. Б. Как внеклеточный матрикс формирует нервное развитие. Open Biol. 9 , https://doi.org/10.1098/rsob.180216 (2019).

82. 80.

    Yang, Y. et al. Паттерн экспрессии Follistatin-like 1 в развитии центральной нервной системы мышей. Gene Expr. Выкройки 9 , 532–540.https://doi.org/10.1016/j.gep.2009.07.001 (2009).

    CAS Статья PubMed Google ученый

83. 81.

    Xiang, S. T. et al. Нокдаун Follistatin-like 1 нарушает синаптическую передачу в гиппокампе и приводит к когнитивным нарушениям. Экспериментальная неврология 333 , https://doi.org/10.1016/j.expneurol.2020.113412 (2020).

84. 82.

    Bost, F., Diarra-Mehrpour, M.И Мартин, Дж. П. Семейство протеогликанов, ингибиторов интер-альфа-трипсина: группа белков, связывающих и стабилизирующих внеклеточный матрикс. Eur. J. Biochem. 252 , 339–346. https://doi.org/10.1046/j.1432-1327.1998.2520339.x (1998).

    CAS Статья PubMed Google ученый

85. 83.

    Wilson, E., Knudson, W. & Newell-Litwa, K. Гиалуронан регулирует формирование и функционирование синапсов в развивающихся нейронных сетях. Sci. Реп. 10 , https://doi.org/10.1038/s41598-020-73177-y (2020).

86. 84.

    Tsou, W. I. et al. Рецепторные тирозинкиназы , TYRO3, AXL и MER, демонстрируют различные паттерны и сложную регуляцию лиганд-индуцированной активации. J. Biol. Chem. 289 , 25750–25763. https://doi.org/10.1074/jbc.M114.569020 (2014).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

87. 85.

    Ферланд, G. Витамин К и нервная система: обзор его действия. Adv. Nutr. 3 , 204–212. https://doi.org/10.3945/an.111.001784 (2012).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

88. 86.

    Tamadon-Nejad, S., Ouliass, B., Rochford, J. & Ferland, G. Дефицит витамина K, вызванный варфарином, связан с когнитивными и поведенческими нарушениями, а также изменениями сфинголипидов мозга у крыс. Frontiers in Aging Neuroscience 10 , https://doi.org/10.3389/fnagi.2018.00213 (2018).

89. 87.

    Катлер Р. Г. и Маттсон М. П. Сфингомиелин и церамид как регуляторы развития и продолжительности жизни. мех. Aging Dev. 122 , 895–908. https://doi.org/10.1016/s0047-6374(01)00246-9 (2001).

    CAS Статья PubMed Google ученый

90. 88.

    Вон, Дж.S. & Singh, I. Передача сигналов сфинголипидов и окислительно-восстановительная регуляция. Free Radical Biol. Med. 40 , 1875–1888. https://doi.org/10.1016/j.freeradbiomed.2006.01.035 (2006).

    CAS Статья Google ученый

91. 89.

    Козлова И. и др. Молекулы клеточной адгезии и регуляция синтеза белков в нейронах. Frontiers in Molecular Neuroscience 13 , https://doi.org/10.3389/fnmol.2020.5

92. (2020).

93. 90.

    Сытник, В., Лещинская, И. и Шахнер, М. Молекулы адгезии нервных клеток суперсемейства иммуноглобулинов регулируют образование, поддержание и функцию синапсов. Trends Neurosci. 40 , 295–308. https://doi.org/10.1016/j.tins.2017.03.003 (2017).

    CAS Статья PubMed Google ученый

94. 91.

    Hsia, H.E. et al. Функции «дезинтегрина и металлопротеиназ (ADAM)’ ’в нервной системе млекопитающих». Cell. Мол. Life Sci. 76 , 3055–3081. https://doi.org/10.1007/s00018-019-03173-7 (2019).

    CAS Статья PubMed Google ученый

95. 92.

    Джоссин, Ю. Рилин Функции, механизмы действия и сигнальные пути во время развития и созревания мозга. Биомолекулы 10 , https://doi.org/10.3390/biom10060964 (2020).

96. 93.

    Talebian, S. et al. Оценка экспрессии сигнального пути RELN у пациентов с рассеянным склерозом. Иммунобиология 224 , 402–407. https://doi.org/10.1016/j.imbio.2019.02.007 (2019).

    CAS Статья PubMed Google ученый

97. 94.

    Goodman, C. S. et al. Единая номенклатура семафоринов коллапсинов. Ячейка 97 , 551–552. https://doi.org/10.1016/s0092-8674(00)80766-7 (1999).

    Артикул Google ученый

98. 95.

    Чжоу, Ю. П., Ганпут, Р. А. Ф. и Пастеркамп, Р. Дж. Семафорин, сигнализация: достигнутый прогресс и перспективы на будущее. Trends Biochem. Sci. 33 , 161–170. https://doi.org/10.1016/j.tibs.2008.01.006 (2008).

    CAS Статья PubMed Google ученый

99. 96.

    Орр, Б. О., Феттер, Р. Д. и Дэвис, Г.W. Ретроградная передача сигналов семафорин-плексин управляет гомеостатической синаптической пластичностью. Природа 550 , 109, https://doi.org/10.1038/nature24017 (2017).

100. 97.

     Oleari, R., Lettieri, A., Paganoni, A., Zanieri, L. & Cariboni, A. Передача сигналов семафорина в нейронах GnRH: от развития к заболеванию. Нейроэндокринология 109 , 193–199. https://doi.org/10.1159/000495916 (2019).

     CAS Статья PubMed Google ученый

101. 98.

     Hung, R.J. et al. Микал связывает семафорины с дизассемблированием F-актина. Природа 463 , 823–827. https://doi.org/10.1038/nature08724 (2010).

     ADS CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

102. 99.

     Гринцевич Э.Е. и др. Демонтаж F-актина посредством окислительно-восстановительной синергии между Mical и cofilin. Natu. Cell Biol. 18 , 876, https: // doi.org / 10.1038 / ncb3390 (2016).

103. 100.

     Ventura, A. & Pelicci, P. G. Зеленый свет для сигнализации окислительно-восстановительного потенциала? Science’s STKE 155 , pe44 (2002).

104. 101.

     Хунг, Р. Дж., Пак, К. В. и Терман, Дж. Р. Прямое окислительно-восстановительное регулирование сборки и разборки F-актина с помощью микрометра. Наука 334 , 1710–1713. https://doi.org/10.1126/science.1211956 (2011).

     ADS CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

105. 102.

     Kuramoto, T. et al. Аттрактин / красное дерево / дрожь играет решающую роль в миелинизации центральной нервной системы. Proc. Natl. Акад. Sci. США 98 , 559–564. https://doi.org/10.1073/pnas.98.2.559 (2001).

     ADS CAS Статья PubMed Google ученый

106. 103.

     Safarzadeh, E., Jadidi-Niaragh, F., Motallebnezhad, M. & Yousefi, M. Роль аденозиновых и аденозиновых рецепторов в иммунопатогенезе рассеянного склероза. Inflamm. Res. 65 , 511–520. https://doi.org/10.1007/s00011-016-0936-z (2016).

     CAS Статья PubMed Google ученый

107. 104.

     Давалос Д., Махаджан К. Р. и Трапп Б. Д. Отложение фибриногена в головном мозге играет ключевую роль в патофизиологии РС: да. Рассеянный склероз J. 25 , 1434–1435. https://doi.org/10.1177/1352458519852723 (2019).

     CAS Статья Google ученый

108. 105.

     Kular, L. et al. Метилирование ДНК как медиатор HLA-DRB1 (звезда) 15:01 и защитный вариант при рассеянном склерозе. Нат. Commun. 9 , https://doi.org/10.1038/s41467-018-04732-5 (2018).

109. 106.

     Anagnostouli, M. et al. HLA-DPB1 * 03 как аллель риска и HLA-DPB1 * 04 как защитный аллель как для раннего, так и для взрослого рассеянного склероза в эллинской когорте. Brain Sci. 10 , https://doi.org/10.3390 / brainsci10060374 (2020).

110. 107.

     Agostini, S. et al. Аллели HLA модулируют вирусную нагрузку EBV при рассеянном склерозе. J. Transl. Med. 16 , https://doi.org/10.1186/s12967-018-1450-6 (2018).

111. 108.

     Stys, P. Рассеянный склероз как нарушение неправильной укладки белков. J. Neurochem. 150 , 53–53 (2019).

     Google ученый

112. 109.

     Stys, P.К. Миелокортикальный рассеянный склероз: новый подтип заболевания ?. Lancet Neurol. 17 , 832–834. https://doi.org/10.1016/s1474-4422(18)30333-8 (2018).

     Артикул PubMed Google ученый

113. 110.

     Stys, P. K. & Tsutsui, S. Последние достижения в понимании рассеянного склероза. F1000Research 8 , 2100, https://doi.org/10.12688/f1000research.20906.1 (2019).

114. 111.

     Коуп, Э. К. и Гоулд, Э. Нейрогенез взрослых, глия и внеклеточный матрикс. Стволовые клетки клетки 24 , 690–705. https://doi.org/10.1016/j.stem.2019.03.023 (2019).

     CAS Статья PubMed Google ученый

115. 112.

     Бушам, Т. Дж., Эйхель, М. А., Симс, С. Б. и Вернер, Х. Б. Обращение к обороту миелина. Neural Regeneration Res. 14 , 2063–2066. https: // doi.org / 10.4103 / 1673-5374.262569 (2019).

     Артикул Google ученый

116. 113.

     Доррбаум, А. Р., Кочен, Л., Лангер, Дж. Д. и Шуман, Э. М. Локальные и глобальные влияния на обмен белков в нейронах и глии. Элиф 7 , https://doi.org/10.7554/eLife.34202 (2018).

117. 114.

     Lubetzki, C., Zalc, B., Williams, A., Stadelmann, C. & Stankoff, B. Ремиелинизация при рассеянном склерозе: от фундаментальных наук до клинического перевода. Lancet Neurol. 19 , 678–688 (2020).

     Артикул Google ученый

118. 115.

     Smilde, A. K. et al. ANOVA-одновременный компонентный анализ (ASCA): новый инструмент для анализа разработанных данных метаболомики. Биоинформатика 21 , 3043–3048. https://doi.org/10.1093/bioinformatics/bti476 (2005 г.).

     CAS Статья PubMed Google ученый

119. 116.

     Хотеллинг, Х. Самый предсказуемый критерий. J. Educ. Psychol. , 139–142 (1935).

120. 117.

     Лиланд, К. Х. и Фэргестад, Э. М. Тестирование эффектов экспериментальных факторов дизайна с использованием многофакторного анализа. Chemometrics Intell. Лаборатория. Syst. 96 , 172–181. https://doi.org/10.1016/j.chemolab.2009.01.007 (2009).

     CAS Статья Google ученый

121. 118.

     Langsrud, O.Ротационные испытания. Stat. Comput. 15 , 53–60. https://doi.org/10.1007/s11222-005-4789-5 (2005).

     MathSciNet Статья Google ученый

122. 119.

     Moen, B. et al. Исследовательский многофакторный подход к изучению глобальных механизмов выживания campylobacter jejuni в условиях окружающей среды. Appl Environ Microbiol. 71 , 2086. https://doi.org/10.1128/AEM.71.4.2086-2094.2005 (2005).

     CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

123. 120.

     Эфрон, Б. Джек-нож, бутстрап и другие планы передискретизации. , 92 (Общество промышленной и прикладной математики., 1982).

124. 121.

     Кортес, К. и Вапник, В. Сети опорных векторов. Мах. Учиться. 20 , 273–297 (1995).

     MATH Google ученый

125. 122.

     Chen, E. Y. et al. Enrichr: интерактивный и совместный инструмент анализа пополнения списка генов HTML5. BMC Bioinformatics 14 , https://doi.org/10.1186/1471-2105-14-128 (2013).

126. 123.

     Кулешов М.В. и др. Enrichr: обновление веб-сервера 2016 для комплексного анализа обогащения набора генов. Nucleic Acids Res. 44 , W90 – W97. https://doi.org/10.1093/nar/gkw377 (2016).

     CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

127. 124.

     Chen, J. J. & Li, L. Z. Множественный регрессионный анализ выявляет регуляторные сети MicroRNA у oryza sativa при стрессе засухи. Внутр. J. Genomics , 12, https://doi.org/10.1155/2018/9395261 (2018).

Протеом CSF при подтипах рассеянного склероза, связанных с транскриптомами поражения головного мозга

Дизайн исследования и участники

Мы исследовали протеом CSF в двухэтапном подходе с нецелевым (n = 169), а затем количественным целевым методом (n = 169). = 170) (Дополнительный рис.S1). Одни и те же образцы CSF использовались как для нецелевой, так и для целевой протеомики, за исключением того, что несколько дополнительных образцов были добавлены для когорты рецидивов в целевом анализе, в то время как целевые наборы данных здоровых контролей и NMOSD содержали меньше образцов (рис. 1).

Образцы спинномозговой жидкости были получены в результате регионального, национального и международного сотрудничества (Дания, Франция, Венгрия) от пациентов с впервые диагностированным нелеченым RRMS (возраст 33,6 ± 10 лет, 77% женщины) в период рецидива (n = 14) или ремиссии MS ( n = 33), нелеченый PPMS (n = 30, возраст 49 ± 8.6, 57% женщин), нелеченый SPMS (n = 26, возраст 45,9 ± 5,8 лет, 52% женщины), AD (n = 22, возраст 72,2 ± 7,9 года, 50% женщин), NMOSD AQP4-IgG ⁺ ( n = 14, возраст 47,9 ± 15,3 года, 78% женщин), NMOSD AQP4-IgG ^— (n = 5, возраст 26,8 ± 13,2, 90% женщины) и здоровые люди контрольной группы (n = 33, возраст 37,7 ± 12,9 лет, 62% женщин). Ни один из пациентов с РС не получал терапию, модифицирующую заболевание. Рецидив был подтвержден неврологами, и образцы были взяты не позднее, чем через месяц после появления первых симптомов рецидива.Пациенты с AQP4-IgG ^— NMOSD не получали иммуносупрессивные препараты, в то время как пациенты с AQP4-IgG ⁺ NMOSD получали азатиоприн или микофенолят мофетил. NMOSD был стабильным у всех пациентов.

Образцы

спинномозговой жидкости были получены с помощью люмбальной пункции, собраны в полипропиленовые пробирки и осторожно перемешаны. Образцы центрифугировали при 2000 × g в течение 10 минут при 4 ° C для удаления клеток и других нерастворимых материалов и хранили в полипропиленовых пробирках при -80 ° C в ожидании анализа.

Исследование было проведено в соответствии с одобрением Датского национального этического комитета (S-20120066), и от каждого участника было получено информированное согласие.

Подготовка образцов для протеомного открытия

Образцы спинномозговой жидкости каждой группы заболеваний были объединены в один из трех пулов образцов, что дало три технических повтора (дополнительный рисунок S1a). Белки осаждали этанолом / ацетоном, повторно растворяли в 7 М мочевине, 2 М тиомочевине, 20 мМ дитиотреитоле (DTT), и количество белка оценивали с помощью Qubit Protein Assay (Thermo Fisher Scientific).После алкилирования pH образцов доводили до 8, и белки расщепляли LysC (0,02 AU / мг белков) в течение 4 часов, а затем трипсином (соотношение 50: 1) в течение ночи при 37 ° C. Пептиды очищали с обращенной фазой (RP) с использованием самодельных колонок C8 / R2 и C18 / R3 (Applied BiosystemsTM). Очищенные пептиды повторно растворяли в 0,1% муравьиной кислоте. Количество пептида в каждом образце определяли анализом аминокислотного состава (AAA). Впоследствии равные количества каждого пула образцов были помечены одной из этикеток реагентов iTRAQ 8plex в соответствии с протоколом производителя.Основной образец пептида фракционировали с использованием хроматографии гидрофильного взаимодействия (HILIC), и каждую фракцию дополнительно разделяли обращенно-фазовой хроматографией перед идентификацией с помощью масс-спектрометрии (Q Exactive HF, Thermo Fisher Scientific). Три технических повтора пулов образцов были запущены отдельно (дополнительный рис. S2a).

Статистический анализ для выбора белков

Программное обеспечение Proteome Discoverer (дополнительное программное обеспечение PD, Thermo Scientific, v1.4) использовалось для обработки исходных файлов масс-спектрометрии (MS), идентификации белков и получения количественных данных, которые затем обрабатывались три параллельных подхода.

На основе ANOVA (дисперсионный анализ)

Для каждого пептида ANOVA выполнялся с пакетом lmPerm R для определения различий между группами. Впоследствии, чтобы определить, какие пары групп показали наибольшие различия, в качестве апостериорного анализа был проведен тест HSD Тьюки (честная значимая разница).

На основе Limma (линейные модели)

Линейная регрессия и дисперсионный анализ выполнялись с помощью пакета limma R. Соотношения конкретного белка между двумя сравниваемыми группами были log ₂ трансформированных, нормализованных к медиане, и 3 повтора были объединены в один, и белки были значимыми в соответствии с q-значениями (FDR <0.1). Полученные данные были визуализированы на графиках вулканов и тепловых картах с помощью Perseus ¹⁴ .

Дополнительный анализ трех повторов

Используя программное обеспечение PD, для каждого из трех наборов коэффициента вариации CV белков (от любой группы субъектов к здоровым субъектам) в наборе, а также отношения среднего содержания между наборы были рассчитаны. Белок был выбран для дальнейших анализов, если соотношение было больше (или меньше), чем 1 + 2xCV (или обратное).Впоследствии программное обеспечение PD рассчитало «глобальное» соотношение для белка на основе данных из трех наборов по сравнению со здоровыми образцами (и CV в объединенных наборах). Окончательно отбирали белки, если экспрессия белка была больше (или меньше), чем 1 + 2xCV (или обратная), по крайней мере, между двумя различными условиями, и постоянно изменялась как минимум в двух из трех наборов.

Линейный дискриминантный анализ (LDA)

Чтобы уменьшить любой возможный эффект партии, три пула были объединены после их индивидуального масштабирования (для каждого белка).Был проведен выбор признаков на основе F-теста, в котором учитывались только белки с FDR <0,05 (ANOVA). Затем набор белков-кандидатов был сокращен для коллинеарности путем итеративного удаления белка с наивысшим фактором увеличения дисперсии (VIF), пока не остались только белки с VIF <10. В результате было получено 11 белков, которые были использованы для проведения линейного дискриминантного анализа (LDA). Кроме того, тест также проводился только на образцах MS, в результате чего было выявлено 8 белков, ответственных за разделение на подгруппы в соответствии с LDA.

Анализ пути

После того, как данные были нормализованы для контрольных образцов, был использован анализ пути изобретательности (IPA) для определения молекулярных путей и выполнения функционального анализа между различными группами и подгруппами заболеваний.

Подготовка образцов для количественного анализа

ЦСЖ от каждого пациента осаждали этанолом / ацетоном, растворенным в мочевинном буфере, содержащем DTT, как описано в предыдущей статье с параллельным мониторингом реакции (PRM) ⁸ .Общее содержание белка оценивали с помощью AAA, и 10 мкг белков переваривали трипсином. После разложения смесь стандартов стабильных изотопов (SIS) добавляли в равном объеме к каждому образцу (как предварительно подготовленному ⁸ , так и дополнительным образцам). Пептиды в каждом образце были помечены одной из меток TMT 11plex. Объединенный образец был приготовлен путем смешивания небольшого количества примерно из половины всех доступных образцов. Этот объединенный образец был помечен меткой TMT 11plex 126. Впоследствии этот объединенный образец был разделен поровну на 17 образцов и смешан с десятью другими образцами пациентов случайным образом (дополнительный рис.S2b). Было 17 наборов TMT, каждый из которых содержал по крайней мере один (если есть) образец от каждой группы пациентов. Образцы были рандомизированы таким образом, чтобы каждый набор содержал представителя каждой группы пациентов, и каждый образец каждой группы пациентов был помечен другой меткой TMT.

Пептиды каждого набора фракционировали с помощью HILIC и анализировали тандемной масс-спектрометрией жидкостной хроматографии (ЖХ-МС / МС). Общее время выполнения метода ЖХ варьировалось от 67 до 143 мин в зависимости от интенсивности сигнала фракций HILIC.Большая часть пептидов отделилась во время линейного увеличения содержания растворителя B от 10 до 35% за от 38 до 120 минут (что соответствует общему времени работы). Настройки МС: Полная МС: разрешение 120 000, цель AGC 3e6, максимальное IT 100 мс, диапазон сканирования: 325–1600 m / z . Настройки MSMS: разрешение 60 000, цель AGC 1e5, максимальное IT 100 мс, окно изоляции 1,2 m / z , NCE: 32, верхние 15 самых интенсивных ионов с 2–4 зарядами (положительный режим), динамическое исключение 15–20 с.

Обработка данных и статистический анализ проверенных белков

Необработанные данные были обработаны с помощью программного обеспечения ProteomeDiscoverer (v2.3). Образцы, использованные для анализа, содержали стандарт SIS, добавленный в одинаковом количестве к каждому образцу и помеченный TMT вместе со всеми другими пептидами CSF. Каждая группа пациентов была установлена ​​как один из категориальных факторов, и каждый пациент в группе пациентов был установлен как биологическая копия. Образец пула был установлен как «Контроль», а образец каждого пациента был установлен как «Образец». Параметр масштабирования был установлен «По среднему контролю». Таким образом, образцы были нормализованы и масштабированы до пула (который является общим / идентичным образцом для 17 повторов).Программа рассчитала соотношения содержания белка между любой группой пациентов и здоровыми людьми в контрольной группе на основе белков, идентифицированных и количественно определенных в соответствующих образцах из всех 17 наборов. В альтернативном подходе количественные данные из ProteomeDiscoverer были извлечены и обработаны в Excel (Microsoft). Постоянное соотношение белков CSF и SIS использовали для расчета коэффициентов нормализации в каждом из 17 наборов TMT. Кроме того, эту SIS-нормализацию можно также использовать для корректировки нескольких образцов, содержащих менее 10 мкг белков и различный объем.После нормализации было рассчитано среднее соотношение для каждого белка (для каждой группы пациентов) на основе соотношений к соответствующему белку в объединенном образце. Значимость соотношений была подтверждена дисперсионным анализом с использованием программного обеспечения PRISM и PolySTest ¹⁵ .

Сигнатура поражения головного мозга человека

Недавно мы охарактеризовали и микродиссектировали 73 очага поражения в головном мозге 10 пациентов с прогрессирующим РС, охватывающие различные типы поражений: нормальное белое вещество (NAWM), активные, хронические активные, неактивные и восстанавливающиеся поражения; и в качестве контроля 25 областей белого вещества (WM) из пяти мозгов без неврологических заболеваний ^10,16 .Парное секвенирование следующего поколения было выполнено на общей РНК с последующей обработкой данных, выравниванием и статистическим анализом ^10,16 . Исчерпывающие данные транскриптома были использованы для создания онлайн-веб-инструмента (www.msatlas.dk) для изучения профилей РНК в эволюции поражений при прогрессирующем РС. Названия генов интересующего белка из данных протеома были загружены на msatlas.dk, и были созданы тепловые карты генов, присутствующих в головном мозге человека с РС ¹⁰ . Звезды добавлялись, когда была значительная разница (FDR <0.05) между типом поражения MS и контрольным WM из областей мозга, не связанных с неврологическими заболеваниями.

Иммуногистохимия и РНКоскопия хронического активного поражения головного мозга

Ткань мозга человека после смерти была предоставлена ​​Британским банком тканей для лечения рассеянного склероза (Британский многоцентровый комитет по этике исследований, MREC / 02/2/39), финансируемым Обществом рассеянного склероза Великобритании. и Северная Ирландия (зарегистрированная благотворительная организация 207 495). Свежезамороженные блоки, содержащие хронические активные очаги поражения от прогрессирующих пациентов с РС, разделяли (10 мкм), фиксировали PFA, блокировали в PBS с 10% нормальной лошадиной сывороткой (NHS) и иммуноокрашивали CHI3L1 кролика (моноклональные антитела) 1: 200 (Abcam. ) с последующим биотинилированным вторичным антителом (Jackson Immunoresearch Laboratories, Кембриджшир, Великобритания), окрашиванием авидином / биотином (Vector Laboratories, Burlingame, CA) и окрашиванием 3,3′-диаминобензидином (DAB) (Vector Laboratories, Burlingame, CA).Дуплексный анализ RNAscope 2.5 (ACD Biosystems) выполняли в соответствии с протоколом ACD для свежезамороженной ткани. Хронические активные поражения гибридизовали с двумя зондами мРНК на эксперимент. Hs-GFAP (Кат. № 311801) использовали в качестве маркера астроцитов вместе с Hs-CHI3L1 (Кат. № 408121). Зонды амплифицировали в соответствии с инструкциями производителя и помечали следующим красным или зеленым цветом для каждого эксперимента. Зонд Hs-CHI3L1 также был объединен с помощью иммуногистохимии (анти-GFAP и анти-MHCII, Abcam), как описано выше.

Биомаркеры спинномозговой жидкости при рассеянном склерозе: помимо нейровоспаления

128. 1. Comabella M, Montalban X. Биомаркеры жидкости организма при рассеянном склерозе. Lancet Neurol 2014; 13: 113-26.

     DOIPubMed

129. 2. Frisoni GB, Boccardi M, Barkhof F, Blennow K, Cappa S, et al. Стратегическая дорожная карта для ранней диагностики болезни Альцгеймера на основе биомаркеров. Ланцет Neurol 2017; 16: 661-76.

     DOIPubMed

130. 3. Teunissen CE, Malekzadeh A, Leurs C, Bridel C, Killestein J.Биомаркеры жидкостей организма при рассеянном склерозе — долгий путь к клиническому применению. Nat Rev Neurol 2015; 11: 585-96.

     DOIPubMed

131. 4. Джованнони Г. Биомаркеры спинномозговой жидкости рассеянного склероза. Dis Markers 2006; 22: 187-96.

     DOIPubMedPMC

132. 5. Цимссен Т., Акгюн К., Брюк В. Молекулярные биомаркеры при рассеянном склерозе. J Нейровоспаление 2019; 16: 272.

     DOIPubMedPMC

133. 6. Трапп Б.Д., Петерсон Дж., Рансохофф Р.М., Рудик Р., Мерк С. и др.Аксональная перерезка при рассеянном склерозе. N Engl J Med 1998; 338: 278-85.

     DOIPubMed

134. 7. Пресс-релиз FDA. FDA одобрило новый пероральный препарат для лечения рассеянного склероза. Доступно по адресу: http://www.fda.gov/news-events/press-announcements/fda-approves-new-oral-drug-treat-multiple-sclerosis. [Последний доступ 2 июля 2020 г.].

135. 8. Пресс-релиз FDA. FDA одобрило новый препарат для лечения рассеянного склероза. Доступно по адресу: http://www.fda.gov/news-events/press-announcements/fda-approves-new-drug-treat-multiple-sclerosis.[Последний доступ 2 июля 2020 г.].

136. 9. Коми Г. Индукция против эскалации терапии при рассеянном склерозе: практическое значение. Neurol Sci 2008; 29 Приложение 2: S253-5.

     DOIPubMed

137. 10. Джованнони Дж., Томич Д., Брайт Дж. Р., Гаврдова Э. «Нет явной активности заболевания»: использование комбинированных оценок в ведении пациентов с рассеянным склерозом. Mult Scler 2017; 23: 1179-87.

     DOIPubMedPMC

138. 11. Håkansson I., Tisell A, Cassel P, Blennow K, Zetterberg H, et al.Уровни нейрофиламентов, активность заболевания и объем мозга во время наблюдения за рассеянным склерозом. J Нейровоспаление 2018; 15: 209.

     DOIPubMedPMC

139. 12. Пандит Л. Нет доказательств активности заболевания (NEDA) при рассеянном склерозе — смещение стоек ворот. Ann Indian Acad Neurol 2019; 22: 261-3.

     DOIPubMedPMC

140. 13. Рабочая группа по биомаркерам FDA-NIH. ЛУЧШИЙ (биомаркеры, конечные точки и другие инструменты) ресурс [Интернет]. Доступно по адресу: https: // www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK338448/. [Последний доступ 2 июля 2020 г.].

141. 14. Rush CA, MacLean HJ, Freedman MS. Агрессивный рассеянный склероз: предлагаемое определение и алгоритм лечения. Nat Rev Neurol 2015; 11: 379-89.

     DOIPubMed

142. 15. Johanson CE, Duncan JA 3rd, Klinge PM, Brinker T., Stopa EG, et al. Множественность функций спинномозговой жидкости: новые проблемы для здоровья и болезней. Cerebrospinal Fluid Res 2008; 5:10.

     DOIPubMedPMC

143. 16.Добсон Р., Рамагопалан С., Дэвис А., Джованнони Г. Олигоклональные полосы спинномозговой жидкости при рассеянном склерозе и клинически изолированных синдромах: метаанализ распространенности, прогноза и влияния широты. J Neurol Neurosurg Psychiatry 2013; 84: 909-14.

     DOIPubMed

144. 17. Имрелл К., Ландтблом А.М., Хиллерт Дж., Мастерман Т. Рассеянный склероз с полосами спинномозговой жидкости и без них: клинически неотличимы, но иммуногенетически различимы. Неврология 2006; 67: 1062-4.

     DOIPubMed

145. 18. Андерссон М., Альварес-Черменьо Дж., Бернарди Дж., Когато И., Фредман П. и др. Спинномозговая жидкость в диагностике рассеянного склероза: консенсус-отчет. J Neurol Neurosurg Psychiatry 1994; 57: 897-902.

     DOIPubMedPMC

146. 19. Freedman MS, Thompson EJ, Deisenhammer F, Giovannoni G, Grimsley G, et al. Рекомендуемый стандарт анализа спинномозговой жидкости при диагностике рассеянного склероза: согласованное заявление. Arch Neurol 2005; 62: 865-70.

     DOIPubMed

147. 20. Томпсон А.Дж., Банвелл Б.Л., Баркхоф Ф., Кэрролл В.М., Кутзи Т. и др. Диагностика рассеянного склероза: пересмотр критериев Макдональда в 2017 г. Ланцет Neurol 2018; 17: 162-73.

     DOIPubMed

148. 21. Schwenkenbecher P, Wurster U, Konen FF, Gingele S, Sühs KW, et al. Влияние критериев Макдональда 2017 г. на раннюю диагностику ремиттирующего рассеянного склероза. Передний Neurol 2019; 10: 188.

     DOIPubMedPMC

149. 22.Позер С.М., Пати Д.В., Шейнберг Л., Макдональд В.И., Дэвис Ф.А. и др. Новые диагностические критерии рассеянного склероза: рекомендации по протоколам исследований. Энн Нейрол 1983; 13: 227-31.

     DOIPubMed

150. 23. Макдональд В.И., Компстон ​​А., Эдан Г., Гудкин Д., Хартунг П. и др. Рекомендуемые диагностические критерии рассеянного склероза: рекомендации Международной группы по диагностике рассеянного склероза. Энн Нейрол 2001; 50: 121-7.

     DOIPubMed

151. 24.Polman CH, Reingold SC, Edan G, Filippi M, Hartung HP и др. Диагностические критерии рассеянного склероза: пересмотренные в 2005 г. «Критерии Макдональда». Энн Нейрол 2005; 58: 840-6.

     DOIPubMed

152. 25. Polman CH, Reingold SC, Banwell B, Clanet M, Cohen JA, et al. Диагностические критерии рассеянного склероза: редакция 2010 г. критериев Макдональда. Энн Нейрол 2011; 69: 292-302.

     DOIPubMedPMC

153. 26. Sandberg-Wollheim M, Olsson T. Олигоклональные полосы спинномозговой жидкости играют важную роль в диагностике рассеянного склероза, что необоснованно преуменьшается критериями Макдональда 2010: Да. Mult Scler 2013; 19: 714-6.

     DOIPubMed

154. 27. Arrambide G, Tintore M, Espejo C, Auger C, Castillo M, et al. Значение олигоклональных полос в диагностических критериях рассеянного склероза. Мозг 2018; 141: 1075-84.

     DOIPubMed

155. 28. Тинторе М., Ровира А., Бриева Л., Гриве Е., Харди Р. и др. Изолированные демиелинизирующие синдромы: сравнение олигоклональных полос спинномозговой жидкости и различных критериев МР-визуализации для прогнозирования конверсии в CDMS. Mult Scler 2001; 7: 359-63.

     DOIPubMed

156. 29. Тинторе М., Ровира А., Рио Дж., Тур С., Пелайо Р. и др. Добавляют ли олигоклональные полосы информацию к МРТ при первых приступах рассеянного склероза? Неврология 2008; 70: 1079-83.

     DOIPubMed

157. 30. Бойко А. Радиологически изолированный синдром с олигоклональными полосами в спинномозговой жидкости (RIS + OCB) можно отнести к группе высокого риска РС. Mult Scler 2020; 26: 869-70.

     DOIPubMed

158. 31. Махани Н., Лебрун С., Шива А., Нарула С., Вассмер Е. и др .; Observatoire Francophone de la Sclérose en Plaques (OFSEP), Société Francophone de la Sclérose en Plaques (SFSEP), Консорциум по радиологически изолированному синдрому (RISC) и Консорциум по педиатрическому радиологически изолированному синдрому (PARIS).Олигоклональные полосы повышают специфичность критериев МРТ для прогнозирования рассеянного склероза у детей с радиологически изолированным синдромом. Mult Scler J Exp Transl Clin 2019; 5: 2055217319836664.

     DOIPubMedPMC

159. 32. Матуте-Бланш К., Вильяр Л.М., Альварес-Черменьо Дж. К., Рейдак К., Евдошенко Е. и др. Легкая цепь нейрофиламента и олигоклональные полосы являются прогностическими биомаркерами при радиологически изолированном синдроме. Мозг 2018; 141: 1085-93.

     ДОИПубМед

160. 33.Прайс Г., Бейкер Д. Олигоклональные полосы при рассеянном склерозе; Функциональное значение и терапевтическое значение. Имеет ли значение специфика? Расстройство отношений Мульти-Склера 2018; 25: 131-7.

     DOIPubMed

161. 34. Рейдак К., Стельмасиак З., Гриб П. Кладрибин вызывает длительное исчезновение олигоклональных полос у пациентов с рецидивирующим рассеянным склерозом: 10-летнее обсервационное исследование. Расстройство отношения мультисклера 2019; 27: 117-20.

     DOIPubMed

162. 35. Манкузо Р., Франсиотта Д., Роварис М., Капуто Д., Сала А. и др.Влияние натализумаба на олигоклональные полосы в спинномозговой жидкости пациентов с рассеянным склерозом: продольное исследование. Mult Scler 2014; 20: 1900-3.

     DOIPubMed

163. 36. von Glehn F, Farias AS, de Oliveira AC, Damasceno A, Longhini AL, et al. Исчезновение олигоклональных полос спинномозговой жидкости после лечения пациентов с рассеянным склерозом натализумабом. Mult Scler 2012; 18: 1038-41.

     DOIPubMed

164. 37. Харрер А., Тумани Х., Ниндорф С., Лауда Ф., Гейс С. и др.Параметры спинномозговой жидкости, связанной с активностью В-клеток у пациентов с активным заболеванием во время терапии натализумабом. Mult Scler 2013; 19: 1209-12.

     DOIPubMed

165. 38. Koch M, Heersema D, Mostert J, Teelken A, De Keyser J. Олигоклональные полосы спинномозговой жидкости и прогрессирование инвалидности при рассеянном склерозе. Eur J Neurol 2007; 14: 797-800.

     DOIPubMed

166. 39. Link H, Tibbling G. Принципы анализа альбумина и IgG при неврологических расстройствах.III. Оценка синтеза IgG в центральной нервной системе при рассеянном склерозе. Scand J Clin Lab Invest 1977; 37: 397-401.

     DOIPubMed

167. 40. Mayringer I, Timeltaler B, Deisenhammer F. Корреляция между индексом IgG, олигоклональными полосами в спинномозговой жидкости и диагностикой демиелинизирующих заболеваний. Eur J Neurol 2005; 12: 527-30.

     DOIPubMed

168. 41. Link H, Huang YM. Олигоклональные полосы в спинномозговой жидкости рассеянного склероза: обновленная информация о методологии и клинической применимости. J Neuroimmunol 2006; 180: 17-28.

     DOIPubMed

169. 42. Lefvert AK, Link H. Производство IgG в центральной нервной системе: критический обзор предложенных формул. Энн Нейрол 1985; 17: 13-20.

     DOIPubMed

170. 43. Сенел М., Тумани Х., Лауда Ф., Пресслауэр С., Моджиб-Йездани Р. и др. Легкая цепь каппа иммуноглобулина спинномозговой жидкости при клинически изолированном синдроме и рассеянном склерозе. PLoS One 2014; 9: e88680.

     ДОИПубМедПМС

171. 44.Искьердо Дж., Ангуло С., Гарсия-Морено Дж. М., Гамеро М. А., Наварро Дж. И др. Интратекальный синтез IgG: маркер прогрессирования у пациентов с рассеянным склерозом. Acta Neurol Scand 2002; 105: 158-63.

     DOIPubMed

172. 45. Klein A, Selter RC, Hapfelmeier A, Berthele A, Müller-Myhsok B, et al. Параметры спинномозговой жидкости, связанные с ранней активностью МРТ у пациентов с РС. Neurol Neuroimmunol Neuroinflamm 2019; 6: e573.

     DOIPubMedPMC

173. 46. Gastaldi M, Zardini E, Franciotta D.Обновленная информация об использовании анализа спинномозговой жидкости в качестве диагностического инструмента при рассеянном склерозе. Expert Rev Mol Diagn 2017; 17: 31-46.

     DOIPubMed

174. 47. Hegen H, Walde J, Milosavljevic D, Aboulenein-Djamshidian F, Senel M, et al. Свободные легкие цепи в спинномозговой жидкости. Сравнение различных методов определения интратекального синтеза. Clin Chem Lab Med 2019; 57: 1574-86.

     DOIPubMed

175. 48. Каплан Б., Айзенбуд Б.М., Гольдерман С., Яскариев Р., Села Б.А.Мономеры свободных легких цепей в диагностике рассеянного склероза. J Neuroimmunol 2010; 229: 263-71.

     DOIPubMed

176. 49. Hassan-Smith G, Durant L, Tsentemeidou A, Assi LK, Faint JM, et al. Высокая чувствительность и специфичность повышенных свободных каппа легких цепей спинномозговой жидкости при подозрении на рассеянный склероз. J Neuroimmunol 2014; 276: 175-9.

     DOIPubMed

177. 50. Desplat-Jégo S, Feuillet L, Pelletier J, Bernard D, Chérif AA, et al. Количественная оценка свободных легких цепей иммуноглобулина в спинномозговой жидкости с помощью нефелометрии. J Clin Immunol 2005; 25: 338-45.

     DOIPubMed

178. 51. Duranti F, Pieri M, Centonze D, Buttari F, Bernardini S, et al. Определение κFLC и индекса κ в спинномозговой жидкости: действенная альтернатива для оценки интратекального синтеза иммуноглобулинов. J Neuroimmunol 2013; 263: 116-20.

     DOIPubMed

179. 52. Zeman D, Kušnierová P, Bartoš V, Hradílek P, Kurková B, et al. Количественное определение свободных легких цепей в спинномозговой жидкости надежно предсказывает их интратекальный синтез. Ann Clin Biochem 2016; 53: 174-6.

     DOIPubMed

180. 53. Pieri M, Storto M, Pignalosa S, Zenobi R, Buttari F, et al. Полезность индекса KFLC в диагностике рассеянного склероза: дальнейшее подтверждение. J Neuroimmunol 2017; 309: 31-3.

     DOIPubMed

181. 54. Crespi I, Vecchio D, Serino R, Saliva E, Virgilio E, et al. Индекс К является надежным маркером интратекального синтеза и альтернативой индексу IgG при диагностике рассеянного склероза. J Clin Med 2019; 8: 446.

     DOIPubMedPMC

182. 55. Puthenparampil M, Altinier S, Stropparo E, Zywicki S, Poggiali D, et al. Интратекальный синтез свободной легкой цепи K при рассеянном склерозе в клиническом начале связан с местной выработкой IgG и повышает диагностическую ценность исследования спинномозговой жидкости. Расстройство отношения мультисклера 2018; 25: 241-5.

     DOIPubMed

183. 56. Gaetani L, Di Carlo M, Brachelente G, Valletta F, Eusebi P, et al. Свободные легкие цепи спинномозговой жидкости по сравнению с олигоклональными полосами в качестве биомаркеров рассеянного склероза. Дж. Нейроиммунол 2020; 339: 577108.

     DOIPubMed

184. 57. Гуртнер К.М., Шоша Э., Брайант С.К., Андрегетто Б.Д., Мюррей Д.Л. и др. Идентификация свободных легких цепей CSF демиелинизирующего заболевания: сравнение с олигоклональными полосами и другими индексами CSF. Clin Chem Lab Med 2018; 56: 1071-80.

     DOIPubMed

185. 58. Presslauer S, Milosavljevic D, Huebl W., Aboulenein-Djamshidian F, Krugluger W, et al. Валидация легких цепей, свободных от каппа, в качестве диагностического биомаркера рассеянного склероза и клинически изолированного синдрома: многоцентровое исследование. Mult Scler 2016; 22: 502-10.

     DOIPubMed

186. 59. Leurs CE, Twaalfhoven H, Lissenberg-Witte BI, van Pesch V, Dujmovic I, et al. Легкие цепи, свободные от каппа, являются действенным инструментом диагностики рассеянного склероза: большое многоцентровое исследование. Mult Scler 2020; 26: 912-23.

     DOIPubMedPMC

187. 60. Макшаков Г., Назаров В., Кочетова О., Суркова Е., Лапин С. и др. Диагностическое и прогностическое значение концентрации свободных легких цепей иммуноглобулина в спинномозговой жидкости при клинически изолированном синдроме с конверсией в рассеянный склероз. PLoS One 2015; 10: e0143375.

     DOIPubMedPMC

188. 61. Presslauer S, Milosavljevic D, Huebl W., Parigger S, Schneider-Koch G, et al. Легкие цепи, свободные от каппа: диагностическая и прогностическая значимость при РС и СНГ. PLoS One 2014; 9: e89945.

     DOIPubMedPMC

189. 62. Presslauer S, Milosavljevic D, Brücke T., Bayer P, Hübl W. Повышенные уровни свободных от каппа легких цепей в спинномозговой жидкости подтверждают диагноз рассеянного склероза. J Neurol 2008; 255: 1508-14.

     DOIPubMed

190. 63. Ферраро Д., Тровати А., Бедин Р., Натали П., Франсиотта Д. и др. Цереброспинальная жидкость, свободные от каппа и лямбда легких цепей у пациентов с отрицательными олигоклональными полосами и подозрением на рассеянный склероз. Eur J Neurol 2020; 27: 461-7.

     DOIPubMed

191. 64. Vecchio D, Crespi I, Virgilio E, Naldi P, Campisi MP, et al. Легкие цепи, свободные от каппа, могут предсказать раннее течение болезни при рассеянном склерозе. Расстройство отношения мультисклера 2019; 30: 81-4.

     DOIPubMed

192. 65. Ринкер Дж. Р. 2-й, Тринкаус К., Кросс AH. Повышенное содержание свободных каппа-легких цепей в спинномозговой жидкости коррелирует с прогнозом инвалидности при рассеянном склерозе. Неврология 2006; 67: 1288-90.

     DOIPubMed

193. 66. Рудик Р.А., Медендорп С.В., Нейми М., Бойл С., Фишер Дж. Прогрессирование рассеянного склероза в исследовании естественного анамнеза: прогностическая ценность свободных каппа-легких цепей в спинномозговой жидкости. Mult Scler 1995; 1: 150-5.

     DOIPubMed

194. 67.Рэтбоун Э, Дюрант Л., Кинселла Дж., Паркер А.Р., Хассан-Смит Дж. И др. Соотношение легких цепей иммуноглобулина в спинномозговой жидкости позволяет прогнозировать прогрессирование рассеянного склероза. J Neurol Neurosurg Psychiatry 2018; 89: 1044-9.

     DOIPubMedPMC

195. 68. Felgenhauer K, Reiber H. Диагностическое значение индексов специфичности антител при рассеянном склерозе и заболеваниях нервной системы, вызванных вирусом герпеса. Clin Investigation 1992; 70: 28-37.

     ДОИПубМед

196. 69.Тумани Х., Туртеллотт В.В., Питер Дж. Б., Фельгенгауэр К.; Группа изучения неврита зрительного нерва. Острый неврит зрительного нерва: комбинированные иммунологические маркеры и магнитно-резонансная томография позволяют прогнозировать последующее развитие рассеянного склероза. J Neurol Sci 1998; 155: 44-9.

     DOIPubMed

197. 70. Brettschneider J, Tumani H, Kiechle U, Muche R, Richards G, et al. Антитела IgG к вирусу кори, краснухи и ветряной оспы предсказывают превращение в рассеянный склероз при клинически изолированном синдроме. PLoS One 2009; 4: e7638.

     DOIPubMedPMC

198. 71. Reiber H, Ungefehr S, Jacobi C. Интратекальный, полиспецифический и олигоклональный иммунный ответ при рассеянном склерозе. Mult Scler 1998; 4: 111-7.

     DOIPubMed

199. 72. Хоттенротт Т., Шорб Э., Фритч К., Дерш Р., Бергер Б. и др. Реакция MRZ и количественный интратекальный синтез IgG могут помочь отличить первичную лимфому центральной нервной системы от рассеянного склероза. J Neurol 2018; 265: 1106-14.

     DOIPubMed

200. 73. Jarius S, Eichhorn P, Franciotta D, Petereit HF, Akman-Demir G, et al. Реакция MRZ как высокоспецифичный маркер рассеянного склероза: переоценка и структурированный обзор литературы. Дж. Neurol 2017; 264: 453-66.

     DOIPubMed

201. 74. Франсиотта Д., Сальветти М., Лолли Ф., Серафини Б., Алоизи Ф. В-клетки и рассеянный склероз. Lancet Neurol 2008; 7: 852-8.

     ДОИПубМед

202. 75.Годек М.С., Ашер Д.М., Мюррей Р.С., Шин М.Л., Гринхэм Л.В. и др. Отсутствие геномных последовательностей вирусов кори, эпидемического паротита и краснухи в ткани мозга, пораженной рассеянным склерозом, по данным полимеразной цепной реакции. Энн Нейрол 1992; 32: 401-4.

     DOIPubMed

203. 76. Ibitoye R, Kemp K, Rice C, Hares K, Scolding N, et al. Биомаркеры, связанные с окислительным стрессом, при рассеянном склерозе: обзор. Biomark Med 2016; 10: 889-902.

     DOIPubMed

204. 77. Смит К.Дж., Лассманн Х. Роль оксида азота при рассеянном склерозе. Lancet Neurol 2002; 1: 232-41.

     DOIPubMed

205. 78. Ямасита Т., Андо Ю., Обаяши К., Учино М., Андо М. Изменения уровней нитритов и нитратов (NO2- / NO3-) в спинномозговой жидкости пациентов с рассеянным склерозом. J Neurol Sci 1997; 153: 32-4.

     DOIPubMed

206. 79. Милькович Дж., Друлович Дж., Трайкович В., Месарос С., Дуймович И. и др. Метаболиты оксида азота и интерлейкин-6 в спинномозговой жидкости пациентов с рассеянным склерозом. Eur J Neurol 2002; 9: 413-8.

     DOIPubMed

207. 80. Yuceyar N, Taşkiran D, Sağduyu A. Уровни нитритов и нитратов в сыворотке и спинномозговой жидкости у пациентов с ремиттирующим и вторично прогрессирующим рассеянным склерозом. Clin Neurol Neurosurg 2001; 103: 206-11.

     DOIPubMed

208. 81. Джованнони Дж., Хилес С., Сильвер Н., О’риордан Дж., Миллер Р. и др. Повышенный уровень нитратов и нитритов в сыворотке крови у пациентов с рассеянным склерозом. J Neurol Sci 1997; 145: 77-81.

     ДОИПубМед

209. 82.Haghikia A, Kayacelebi AA, Beckmann B, Hanff E, Gold R и др. Концентрация гомоаргинина, аргинина, асимметричного и симметричного диметиларгинина, нитрита и нитрата в сыворотке и спинномозговой жидкости у пациентов с рассеянным склерозом и оптическим невромиелитом. Аминокислоты 2015; 47: 1837-45.

     DOIPubMed

210. 83. Джованнони Г., Сильвер NC, О’Риордан Дж., Миллер Р.Ф., Хилес С.Дж. и др. Повышенное содержание метаболитов оксида азота в моче у пациентов с рассеянным склерозом коррелирует с ранним и рецидивирующим заболеванием. Mult Scler 1999; 5: 335-41.

     DOIPubMed

211. 84. Calabrese V, Scapagnini G, Ravagna A, Bella R, Foresti R, et al. Синтаза оксида азота присутствует в спинномозговой жидкости пациентов с активным рассеянным склерозом и связана с увеличением содержания нитротирозина и S-нитрозотиолов в спинномозговой жидкости, а также с изменениями уровней глутатиона. J. Neurosci Res 2002; 70: 580-7.

     DOIPubMed

212. 85. Хуа Л.Л., Лю Дж.С., Броснан К.Ф., Ли СК.Селективное ингибирование глиальной индуцируемой синтазы оксида азота интерфероном-бета: последствия для рассеянного склероза. Ann Neurol 1998; 43: 384-7.

     DOIPubMed

213. 86. Данилов А.И., Андерссон М., Баванд Н., Виклунд Н., Олссон Т. и др. Определение метаболитов оксида азота выявляет постоянное воспаление при рассеянном склерозе. J Neuroimmunol 2003; 136: 112-8.

     DOIPubMed

214. 87. Giovannoni G, Miller DH, Losseff NA, Sailer M, Lewellyn-Smith N, et al.Сывороточные маркеры воспаления и клинические / МРТ-маркеры прогрессирования болезни при рассеянном склерозе. J Neurol 2001; 248: 487-95.

     DOIPubMed

215. 88. Tavazzi B., Batocchi AP, Amorini AM, Nociti V, D’Urso S, et al. Сывороточный метаболический профиль пациентов с рассеянным склерозом. Mult Scler Int 2011; 2011: 167156.

     DOIPubMedPMC

216. 89. Свеннингссон А., Петерсон А.С., Андерсен О., Ханссон Г.К. Метаболиты оксида азота в спинномозговой жидкости пациентов с рассеянным склерозом связаны с клиническим течением заболевания. Неврология 1999; 53: 1880-2.

     DOIPubMed

217. 90. Акар Г., Идиман Ф., Идиман Е., Киркали Г., Чакмакчи Х. и др. Оксид азота как маркер активности при рассеянном склерозе. J Neurol 2003; 250: 588-92.

     DOIPubMed

218. 91. Селлебьерг Ф., Джованнони Дж., Хэнд А., Мадсен Х., Дженсен С. и др. Уровни метаболитов оксида азота в спинномозговой жидкости позволяют прогнозировать ответ на лечение метилпреднизолоном при рассеянном склерозе и неврите зрительного нерва. J Neuroimmunol 2002; 125: 198-203.

     DOIPubMed

219. 92. Rejdak K, Eikelenboom MJ, Petzold A, Thompson EJ, Stelmasiak Z, et al. Метаболиты оксида азота в спинномозговой жидкости связаны с активностью и прогрессированием рассеянного склероза. Неврология 2004; 63: 1439-45.

     DOIPubMed

220. 93. Мерри К., Доддс Р., Литтлвуд А., Гоуэн М. Экспрессия мРНК остеопонтина остеокластами и остеобластами при моделировании кости взрослого человека. J Cell Sci 1993; 104: 1013-20.

     ПабМед

221. 94.Дель Прете А., Скутера С., Соццани С., Муссо Т. Роль остеопонтина в формировании дендритных клеток иммунных ответов. Cytokine Growth Factor Rev 2019; 50: 19-28.

     DOIPubMed

222. 95. Муругайян Г., Миттал А., Вайнер Х.Л. Повышенная экспрессия остеопонтина в дендритных клетках усиливает продукцию IL-17 CD4 + Т-клетками при экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите и рассеянном склерозе. J Immunol 2008; 181: 7480-8.

     DOIPubMedPMC

223. 96. Брайч М., Константинеску К.С.Роль остеопонтина в экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите (EAE) и рассеянном склерозе (MS). Целевые показатели лекарств от аллергии на воспаление 2010; 9: 249-56.

     DOIPubMed

224. 97. Сато В., Томита А., Итикава Д., Лин Ю., Кишида Н. и др. CCR2 (+) CCR5 (+) Т-клетки продуцируют матриксную металлопротеиназу-9 и остеопонтин в патогенезе рассеянного склероза. Дж. Иммунол 2012; 189: 5057-65.

     DOIPubMedPMC

225. 98. Chabas D, Baranzini SE, Mitchell D, Bernard CC, Rittling SR, et al.Влияние провоспалительного цитокина остеопонтина на аутоиммунное демиелинизирующее заболевание. Наука 2001; 294: 1731-5.

     DOIPubMed

226. 99. Синклер С., Мирахур М., Кирк Дж., Фаррелл М., Маккуэйд С. Повышение уровня остеопонтина и альфа-бета-кристаллина в белом веществе рассеянного склероза, которое выглядит нормально: иммуногистохимическое исследование с использованием тканевых микрочипов. Neuropathol Appl Neurobiol 2005; 31: 292-303.

     ДОИПубМед

227. 100.Vogt MH, Lopatinskaya L, Smits M, Polman CH, Nagelkerken L. Повышенные уровни остеопонтина при активном ремиттирующем рассеянном склерозе. Энн Нейрол 2003; 53: 819-22.

     DOIPubMed

228. 101. Ага Э., Зардуи А., Сагазаде А., Ахмади М., Тафахори А. и др. Остеопонтин (ОПН) как биомаркер спинномозговой жидкости и крови при рассеянном склерозе: систематический обзор и метаанализ. PLoS One 2018; 13: e01

     .

     DOIPubMedPMC

229. 102. Shimizu Y, Ota K, Ikeguchi R, Kubo S, Kabasawa C, et al.Уровни остеопонтина в плазме связаны с активностью заболевания у пациентов с рассеянным склерозом и оптическим невромиелитом. J Neuroimmunol 2013; 263: 148-51.

     DOIPubMed

230. 103. Чоудхури С.А., Лин Дж., Садик С.А. Специфичность и корреляция с активностью заболевания уровней остеопонтина в спинномозговой жидкости у пациентов с рассеянным склерозом. Arch Neurol 2008; 65: 232-5.

     DOIPubMed

231. 104. Comabella M, Pericot I, Goertsches R, Nos C, Castillo M, et al.Уровни остеопонтина в плазме при рассеянном склерозе. J Neuroimmunol 2005; 158: 231-9.

     DOIPubMed

232. 105. Vogt MH, Floris S, Killestein J, Knol DL, Smits M, et al. Уровни остеопонтина и повышенная активность заболевания у пациентов с ремиттирующим рассеянным склерозом. J Neuroimmunol 2004; 155: 155-60.

     DOIPubMed

233. 106. Wen SR, Liu GJ, Feng RN, Gong FC, Zhong H, et al. Повышенные уровни IL-23 и остеопонтина в сыворотке и спинномозговой жидкости пациентов с рассеянным склерозом. J Neuroimmunol 2012; 244: 94-6.

     DOIPubMed

234. 107. Кивисакк П., Хили BC, Франсуа К., Ганди Р., Голипур Т. и др. Оценка уровней циркулирующего остеопонтина в неотобранной когорте пациентов с рассеянным склерозом: актуальность для развития биомаркеров. Mult Scler 2014; 20: 438-44.

     DOIPubMed

235. 108. Брейч М., Нунан Р., Нипел Дж., Эдвардс Л.Дж., Константинеску К.С. Повышенный уровень остеопонтина в спинномозговой жидкости у пациентов с рассеянным склерозом. Arch Neurol 2008; 65: 633-5.

     DOIPubMed

236. 109. Vogt MH, ten Kate J, Drent RJ, Polman CH, Hupperts R. Повышенные уровни остеопонтина в плазме у пациентов с рассеянным склерозом коррелируют с маркерами, специфичными для костей. Mult Scler 2010; 16: 443-9.

     DOIPubMed

237. 110. Бёрнсен Л., Хадеми М., Олссон Т., Соренсен П.С., Селлебьерг Ф. Концентрации остеопонтина в спинномозговой жидкости повышаются во время приступов рассеянного склероза. Mult Scler 2011; 17: 32-42.

     DOIPubMed

238. 111. Szalardy L, Zadori D, Simu M, Bencsik K, Vecsei L, et al. Оценка биомаркеров дегенерации нейронов и нейровоспаления в спинномозговой жидкости пациентов с рассеянным склерозом — остеопонтин как потенциальный маркер клинической тяжести. J Neurol Sci 2013; 331: 38-42.

     DOIPubMed

239. 112. Dianzani C, Vecchio D, Clemente N, Chiocchetti A, Martinelli Boneschi F, et al. Распутывание внеклеточной динамики цепи протеасома-остеопонтин при рассеянном склерозе. Ячейки 2019; 8: 262.

     DOIPubMedPMC

240. 113. Runia TF, van Meurs M, Nasserinejad K, Hintzen RQ. Нет доказательств связи уровней остеопонтина в плазме с активностью заболевания при рассеянном склерозе. Mult Scler 2014; 20: 1670-1.

     DOIPubMed

241. 114. Zhao Q, Cheng W, Xi Y, Cao Z, Xu Y, et al. IFN-β регулирует дифференцировку Th27 частично за счет ингибирования остеопонтина при экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите. Мол, Иммунол 2018; 93: 20-30.

     DOIPubMed

242. 115. Hong J, Hutton GJ. Регуляторные эффекты интерферона-β на экспрессию остеопонтина и интерлейкина-17 при рассеянном склерозе. J Interferon Cytokine Res 2010; 30: 751-7.

     DOIPubMed

243. 116. Iaffaldano P, Ruggieri M, Viterbo RG, Mastrapasqua M, Trojano M. Улучшение когнитивных функций связано со снижением уровня остеопонтина в плазме в рецидивирующем рассеянном склерозе, полученном при лечении Натализумабом. Иммунное поведение мозга 2014; 35: 176-81.

     DOIPubMed

244. 117. Мас А., Мартинес А., де лас Херас В., Бартоломе М., де ла Конча Э. Г. и др. Полиморфизм 795CT в гене остеопонтина не связан с рассеянным склерозом в испанской популяции. Mult Scler 2007; 13: 250-2.

     DOIPubMed

245. 118. Biernacka-Lukanty J, Michalowska-Wender G, Michalak S, Raczak B., Kozubski W, et al. Полиморфизм гена остеопонтина и клиническое течение рассеянного склероза в польском населении. Folia Neuropathol 2015; 53: 343-6.

     DOIPubMed

246. 119. Caillier S, Barcellos LF, Baranzini SE, Swerdlin A, Lincoln RR и др .; Группа генетики рассеянного склероза. Полиморфизмы остеопонтина и течение болезни при рассеянном склерозе. Genes Immun 2003; 4: 312-5.

     DOIPubMed

247. 120. Chiocchetti A, Comi C, Indelicato M, Castelli L, Mesturini R, et al. Гаплотипы гена остеопонтина коррелируют с развитием и прогрессированием рассеянного склероза. J Neuroimmunol 2005; 163: 172-8.

     DOIPubMed

248. 121. Коми С., Каппеллано Дж., Чиоккетти А., Орильери Е., Буттини С. и др. Влияние вариаций гена остеопонтина на развитие и прогрессирование рассеянного склероза. Clin Dev Immunol 2012; 2012: 212893.

     DOIPubMedPMC

249. 122. Londoño AC, Mora CA. Роль CXCL13 в формировании третичного лимфоидного органа мозговых оболочек при рассеянном склерозе. F1000Res 2018; 7: 514.

     DOIPubMedPMC

250. 123. Serafini B, Rosicarelli B, Magliozzi R, Stigliano E, Aloisi F.Обнаружение эктопических В-клеточных фолликулов с зародышевыми центрами в мозговых оболочках у пациентов с вторичным прогрессирующим рассеянным склерозом. Brain Pathol 2004; 14: 164-74.

     DOIPubMed

251. 124. Багаева Л.В., Рао П., Пауэрс Дж. М., Сегал Б. М.. Хемокиновый лиганд 13 CXC играет роль в экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите. J Immunol 2006; 176: 7676-85.

     DOIPubMed

252. 125. Krumbholz M, Theil D, Cepok S, Hemmer B, Kivisäkk P, et al. Хемокины при рассеянном склерозе: повышающая регуляция CXCL12 и CXCL13 по-разному связана с привлечением иммунных клеток ЦНС. Мозг 2006; 129: 200-11.

     DOIPubMed

253. 126. Bai Z, Chen D, Wang L, Zhao Y, Liu T и др. Спинномозговая жидкость и цитокины крови как биомаркеры рассеянного склероза: систематический обзор и метаанализ 226 исследований с 13 526 пациентами с рассеянным склерозом. Front Neurosci 2019; 13: 1026.

     DOIPubMedPMC

254. 127. Селлебьерг Ф., Бёрнсен Л., Хадеми М., Кракауэр М., Олссон Т. и др. Повышение концентрации хемокина CXCL13 в спинномозговой жидкости при активном МС. Неврология 2009; 73: 2003-10.

     DOIPubMed

255. 128. Khademi M, Kockum I., Andersson ML, Iacobaeus E, Brundin L, et al. Спинномозговая жидкость CXCL13 при рассеянном склерозе: предполагаемый прогностический маркер течения заболевания. Mult Scler 2011; 17: 335-43.

     DOIPubMed

256. 129. Иранский DN. Регулируемое производство CXCL13 в центральной нервной системе. J Clin Cell Immunol 2016; 7: 460.

     ДОИПубМедПМС

257. 130.Бретчнайдер Дж., Червоняк А., Сенель М., Фанг Л., Кассубек Дж. И др. Хемокин CXCL13 является прогностическим маркером клинически изолированного синдрома (CIS). PLoS One 2010; 5: e11986.

     DOIPubMedPMC

258. 131. Piccio L, Naismith RT, Trinkaus K, Klein RS, Parks BJ, et al. Изменения уровней В- и Т-лимфоцитов и хемокинов при лечении ритуксимабом при рассеянном склерозе. Arch Neurol 2010; 67: 707-14.

     DOIPubMedPMC

259. 132. Romme Christensen J, Ratzer R, Börnsen L, Lyksborg M, Garde E, et al.Натализумаб при прогрессирующем РС: результаты открытого исследования фазы 2А, подтверждающего концепцию. Неврология 2014; 82: 1499-507.

     DOIPubMed

260. 133. Ремпе Р.Г., Харц А.М.С., Бауэр Б. Матричные металлопротеиназы в мозговом и гематоэнцефалическом барьере: универсальные разрушители и производители. J Cereb Blood Flow Metab 2016; 36: 1481-507.

     DOIPubMedPMC

261. 134. Wang Y, Wu H, Wu X, Bian Z, Gao Q. Интерлейкин 17A способствует инвазивности рака желудка через экспрессию NF-κB-опосредованных матриксных металлопротеиназ 2 и 9. PLoS One 2014; 9: e96678.

     DOIPubMedPMC

262. 135. Moon SK, Cha BY, Kim CH. ERK1 / 2 опосредует TNF-альфа-индуцированную экспрессию матриксной металлопротеиназы-9 в клетках гладких мышц сосудов человека посредством регуляции NF-kappaB и AP-1: вовлечение ras-зависимого пути. J. Cell Physiol 2004; 198: 417-27.

     DOIPubMed

263. 136. Пауэлл В.С., Финглтон Б., Уилсон К.Л., Бутби М., Матрисиан Л.М. Металлопротеиназа матрилизин протеолитически генерирует активный растворимый лиганд Fas и усиливает апоптоз эпителиальных клеток. Current Biology 1999; 9: 1441-7.

     DOIPubMed

264. 137. Ву М.С., Пак Дж.С., Чой И.Ю., Ким В.К., Ким Х.С. Ингибирование MMP-3 или -9 подавляет индуцированную липополисахаридом экспрессию провоспалительных цитокинов и iNOS в микроглии. J Neurochem 2008; 106: 770-80.

     DOIPubMed

265. 138. Agrawal S, Anderson P, Durbeej M, van Rooijen N, Ivars F, et al. Дистрогликан выборочно расщепляется на базальной мембране паренхимы в местах экстравазации лейкоцитов при экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите. J Exp Med 2006; 203: 1007-19.

     DOIPubMedPMC

266. 139. Nygårdas PT, Hinkkanen AE. Повышение активности MMP-8 и MMP-9 в спинном мозге мышей BALB / c коррелирует с тяжестью экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита. Clin Exp Immunol 2002; 128: 245-54.

     DOIPubMedPMC

267. 140. Бюлер Л.А., Самара Р., Гусман Э., Уилсон К.Л., Крижанак-Бенгез Л. и др. Матричная металлопротеиназа-7 облегчает иммунный доступ к ЦНС при экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите. BMC Neurosci 2009; 10: 17.

     DOIPubMedPMC

268. 141. Fainardi E, Castellazzi M, Tamborino C, Trentini A, Manfrinato MC, et al. Возможное значение уровней спинномозговой жидкости и сыворотки крови и интратекального синтеза металлопротеиназы-2 активного матрикса (ММП-2) как маркеров ремиссии заболевания у пациентов с рассеянным склерозом. Mult Scler 2009; 15: 547-54.

     DOIPubMed

269. 142. Трентини А., Кастеллацци М., Червеллати С., Манфринато М.С., Тамборино С. и др.Взаимодействие между матричной металлопротеиназой-9, матричной металлопротеиназой-2 и интерлейкинами у пациентов с рассеянным склерозом. Dis Markers 2016; 2016: 3672353.

     DOIPubMedPMC

270. 143. Liuzzi GM, Trojano M, Fanelli M, Avolio C, Fasano A, et al. Интратекальный синтез матриксной металлопротеиназы-9 у пациентов с рассеянным склерозом: значение для патогенеза. Mult Scler 2002; 8: 222-8.

     DOIPubMed

271. 144. Ли MA, Palace J, Stabler G, Ford J, Gearing A и др.Уровни желатиназы B, ТИМП-1 и ТИМП-2 при рассеянном склерозе. Продольное клиническое и МРТ-исследование. Мозг 1999; 122: 191-7.

     DOIPubMed

272. 145. Lichtinghagen R, Seifert T, Kracke A, Marckmann S, Wurster U, et al. Экспрессия матричной металлопротеиназы-9 и ее ингибиторов в мононуклеарных клетках крови пациентов с рассеянным склерозом. J Neuroimmunol 1999; 99: 19-26.

     DOIPubMed

273. 146. Waubant E, Goodkin DE, Gee L, Bacchetti P, Sloan R, et al.Уровни MMP-9 и TIMP-1 в сыворотке связаны с активностью МРТ при рецидивирующем рассеянном склерозе. Неврология 1999; 53: 1397-401.

     DOIPubMed

274. 147. Fainardi E, Castellazzi M, Bellini T, Manfrinato MC, Baldi E, et al. Уровни спинномозговой жидкости и сыворотки, а также интратекальное производство металлопротеиназы-9 активного матрикса (MMP-9) как маркеры активности заболевания у пациентов с рассеянным склерозом. Mult Scler 2006; 12: 294-301.

     ДОИПубМед

275. 148.Лепперт Д., Форд Дж., Стейблер Дж., Григар С., Линерт С. и др. Матричная металлопротеиназа-9 (желатиназа B) избирательно повышается в спинномозговой жидкости во время рецидивов и стабильных фаз рассеянного склероза. Мозг 1998; 121: 2327-34.

     DOIPubMed

276. 149. Benesová Y, Vasku A, Novotná H, Litzman J, Stourac P, et al. Матриксная металлопротеиназа-9 и матриксная металлопротеиназа-2 как биомаркеры различных течений рассеянного склероза. Mult Scler 2009; 15: 316-22.

     ДОИПубМед

277. 150.Линдберг Р.Л., Де Гроот С.Дж., Монтань Л., Фрейтаг П., ван дер Валк П. и др. Профиль экспрессии матриксных металлопротеиназ (ММП) и их ингибиторов (ТИМП) в поражениях и нормальном белом веществе рассеянного склероза. Мозг 2001; 124: 1743-53.

     DOIPubMed

278. 151. Энтони Д.К., Фергюсон Б., Матызак М.К., Миллер К.М., Эсири М.М. и др. Дифференциальная экспрессия матриксной металлопротеиназы при рассеянном склерозе и инсульте. Neuropathol Appl Neurobiol 1997; 23: 406-15.

     PubMed

279. 152. Galboiz Y, Shapiro S, Lahat N, Rawashdeh H, Miller A. Матричные металлопротеиназы и их тканевые ингибиторы как маркеры подтипа заболевания и ответа на терапию интерфероном-бета у пациентов с рецидивирующим и вторично-прогрессирующим рассеянным склерозом. Энн Нейрол 2001; 50: 443-51.

     DOIPubMed

280. 153. Бернал Ф., Элиас Б., Хартунг Х.П., Кизейер, Британская Колумбия. Регулирование матриксных металлопротеиназ и их ингибиторов интерфероном-бета: продольное исследование у пациентов с рассеянным склерозом. Mult Scler 2009; 15: 721-7.

     DOIPubMed

281. 154. Комабелла М., Рио Дж., Эспехо С., Руис де Вилья М., Аль-Заят Х. и др. Изменения матричных металлопротеиназ и их ингибиторов при лечении бета интерфероном при рассеянном склерозе. Clin Immunol 2009; 130: 145-50.

     DOIPubMed

282. 155. Баласа Р., Бьянка С., Септимиу В., Юниус С., Адина Х. и др. Панель матричных металлопротеиназ у пациентов с рассеянным склерозом, получавших натализумаб: возможный ответ для пациентов, не отвечающих на натализумаб. Цели лекарственного средства, направленного на неврологическое расстройство ЦНС 2018; 17: 464-72.

     DOIPubMed

283. 156. Кастеллацци М., Беллини Т., Трентини А., Дельбу С., Элия Ф. и др. Уровни желатиназ в сыворотке крови у больных рассеянным склерозом в течение 21 месяца терапии Натализумабом. Dis Markers 2016; 2016: 8434209.

     DOIPubMedPMC

284. 157. Fissolo N, Pignolet B, Matute-Blanch C, Triviño JC, Miró B и др .; Биомаркеры и ответ на натализумаб для лечения рассеянного склероза (BIONAT) m Best EScalation Treatment in Multiple Sclerosis (BEST-MS) и Сеть Société Francophone de la Sclérose En Plaques (SFSEP).Матриксная металлопротеиназа 9 снижена у пациентов с рассеянным склерозом, леченных натализумабом, с риском прогрессирующей мультифокальной лейкоэнцефалопатии. Энн Нейрол 2017; 82: 186-95.

     DOIPubMed

285. 158. Коэн С.Р., Брукс Б.Р., Херндон Р.М., Маккханн Г.М. Диагностический показатель активной демиелинизации: основной белок миелина спинномозговой жидкости. Энн Нейрол 1980; 8: 25-31.

     DOIPubMed

286. 159. Whitaker JN, Lisak RP, Bashir RM, Fitch OH, Seyer JM, et al.Иммунореактивный основной белок миелина в спинномозговой жидкости при неврологических расстройствах. Энн Нейрол 1980; 7: 58-64.

     DOIPubMed

287. 160. Stadelmann C, Timmler S, Barrantes-Freer A, Simons M. Миелин в центральной нервной системе: структура, функция и патология. Physiol Rev 2019; 99: 1381-431.

     DOIPubMed

288. 161. Whitaker JN. Основной белок миелина в спинномозговой жидкости и других жидкостях организма. Mult Scler 1998; 4: 16-21.

     DOIPubMed

289. 162. Meinl E, Hohlfeld R. Иммунопатогенез рассеянного склероза: MBP и другие. Clin Exp Immunol 2002; 128: 395-7.

     DOIPubMedPMC

290. 163. Olsson T, Sun J, Hillert J, Höjeberg B, Ekre HP, et al. Повышенное количество Т-клеток, распознающих множественные эпитопы основных белков миелина при рассеянном склерозе. Eur J Immunol 1992; 22: 1083-7.

     DOIPubMed

291. 164. Ким YC, Zhang AH, Yoon J, Culp WE, Lees JR, et al.Сконструированные MBP-специфические человеческие Treg улучшают MOG-индуцированный EAE за счет инициируемого IL-2 ингибирования эффекторных Т-клеток. J Autoimmun 2018; 92: 77-86.

     DOIPubMedPMC

292. 165. Whitaker JN. Фрагменты миелиновых энцефалитогенных белков спинномозговой жидкости больных рассеянным склерозом. Неврология 1977; 27: 911-20.

     DOIPubMed

293. 166. Селлебьерг Ф., Кристиансен М., Нильсен П.М., Фредериксен Дж.Л. Цереброспинальная жидкость: показатели активности заболевания у пациентов с рассеянным склерозом. Mult Scler 1998; 4: 475-9.

     DOIPubMed

294. 167. Noppe M, Crols R, Andries D, Lowenthal A. Определение в спинномозговой жидкости человека глиального фибриллярного кислого белка, S-100 и основного белка миелина как показателей неспецифической или специфической патологии центральной нервной ткани. Clinica Chimica Acta 1986; 155: 143-50.

     DOIPubMed

295. 168. Lamers KJ, de Reus HP, Jongen PJ. Основной белок миелина в спинномозговой жидкости как индикатор активности болезни при рассеянном склерозе. Mult Scler 1998; 4: 124-6.

     DOIPubMed

296. 169. Barkhof F, Frequin ST, Hommes OR, Lamers K, Scheltens P, et al. Соответствующая триада гадолиний-DTPA MRI, EDSS и CSF-MBP у пациентов с рецидивирующим рассеянным склерозом, получавших высокие дозы метилпреднизолона внутривенно. Неврология 1992; 42: 63-7.

     DOIPubMed

297. 170. Zhou Y, Simpson S Jr, Charlesworth JC, van der Mei I., Lucas RM, et al; Группа следователей AUSLONG. Вариация в гене MBP предсказывает течение болезни при рассеянном склерозе. Brain Behav 2017; 7: e00670.

     DOIPubMedPMC

298. 171. Белогуров А. Младший, Захаров К., Ломакин Ю., Сурков К., Автушенко С. и др. Пептиды основного липосомального миелина, нацеленные на CD206, у пациентов с рассеянным склерозом, резистентных к терапии первой линии, модифицирующей заболевание: первое исследование с участием людей, подтверждающее концепцию повышения дозы. Neurotherapeutics 2016; 13: 895-904.

     DOIPubMedPMC

299. 172. Warren KG, Catz I, Ferenczi LZ, Krantz MJ. Внутривенный синтетический пептид MBP8298 замедлил прогрессирование заболевания в когорте пациентов с прогрессирующим рассеянным склерозом, определенной HLA класса II: результаты 24-месячного двойного слепого плацебо-контролируемого клинического исследования и 5 лет последующего лечения. Eur J Neurol 2006; 13: 887-95.

     DOIPubMed

300. 173. Установление толерантности при РС с пептид-связанными мононуклеарными клетками периферической крови (ETIMS). Доступно по адресу: https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT01414634. [Последний доступ 7 июля 2020 г.].

301. 174. Безопасность, переносимость и эффективность CGP77116 у пациентов с рассеянным склерозом (MS). Доступно по адресу: https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT00001781. [Последний доступ 7 июля 2020 г.].

302. 175.Тумани Х., Хартунг Х.П., Хеммер Б., Теуниссен С., Дайзенхаммер Ф. и др .; Исследовательская группа BioMS. Биомаркеры спинномозговой жидкости при рассеянном склерозе. Neurobiol Dis. 2009; 35: 117-27.

     DOIPubMed

303. 176. Zołtowska A, Stepiński J, Lewko B, Serkies K, Zamorska B, et al. Молекула адгезии нервных клеток в карциномах молочной железы, толстой кишки и легких. Arch Immunol Ther Exp (Warsz) 2001; 49: 171-4.

     PubMed

304. 177. Massaro AR. Роль NCAM в ремиелинизации. Neurol Sci 2002; 22: 429-35.

     DOIPubMed

305. 178. Massaro AR, Sbriccoli A, Tonali P. Реактивные астроциты в острых бляшках рассеянного склероза являются PSA-NCAM-положительными. Neurol Sci 2002; 23: 255-6.

     DOIPubMed

306. 179. Le Gal La Salle G, Rougon G, Valin A. Эмбриональная форма молекулы поверхности нервных клеток (E-NCAM) в гиппокампе крысы и ее повторная экспрессия на глиальных клетках после индуцированного каиновой кислотой эпилептического статуса. J. Neurosci 1992; 12: 872-82.

     DOIPubMedPMC

307. 180. Gnanapavan S, Grant D, Illes-Toth E, Lakdawala N, Keir G, et al. Молекула адгезии нервных клеток — описание метода иммуноферментного анализа спинномозговой жидкости и доказательства снижения уровней при отдельных неврологических расстройствах. J Neuroimmunol 2010; 225: 118-22.

     DOIPubMed

308. 181. Axelsson M, Dubuisson N, Novakova L, Malmeström C, Giovannoni G, et al. Уровни NCAM в спинномозговой жидкости регулируются модифицирующими заболевание терапиями. Acta Neurol Scand 2019; 139: 422-7.

     DOIPubMed

309. 182. Массаро А.Р., Альбрехтсен М., Бок Э. N-CAM в спинномозговой жидкости: маркер синаптического ремоделирования после острой фазы рассеянного склероза? Ital J Neurol Sci 1987; Suppl 6: 85-8.

     PubMed

310. 183. Massaro AR. Есть ли показатели ремиелинизации в крови или спинномозговой жидкости больных рассеянным склерозом? Mult Scler 1998; 4: 228-31.

     DOIPubMed

311. 184. Пол А., Комабелла М., Ганди Р. Биомаркеры при рассеянном склерозе. Cold Spring Harb Perspect Med 2019; 9: a029058.

     DOIPubMedPMC

312. 185. Корреале Дж., Фиол М. Влияние хитиназы на иммунный клеточный ответ при оптическом нейромиелите и рассеянном склерозе. Mult Scler 2011; 17: 521-31.

     DOIPubMed

313. 186. Каннеганти М., Камба А., Мизогучи Э. Роль хитотриозидазы (хитиназы 1) в нормальных и болезненных условиях. J Epithel Biol Pharmacol 2012; 5: 1-9.

     ДОИПубМедПМС

314. 187.Де Фино С., Луккини М., Луккетти Д., Носити В., Лосавио Ф.А. и др. Прогностическая ценность множественного анализа CSF при рассеянном склерозе: опыт единого центра. Расстройство отношений мультисклера 2019; 35: 176-81.

     DOIPubMed

315. 188. Новакова Л., Аксельссон М., Хадеми М., Зеттерберг Х., Бленнов К. и др. Биомаркеры спинномозговой жидкости как показатель активности заболевания и эффективности лечения ремиттирующего рассеянного склероза. J Neurochem 2017; 141: 296-304.

     ДОИПубМед

316. 189.Селлебьерг Ф., Бёрнсен Л., Аммитцбёлль С., Нильсен Дж. Э., Винтер-Йенсен Т. и др. Определение активного прогрессирующего рассеянного склероза. Mult Scler 2017; 23: 1727-35.

     DOIPubMed

317. 190. Комабелла М., Фернандес М., Мартин Р., Ривера-Валлве С., Боррас Е. и др. Уровни хитиназы 3-подобного 1 в спинномозговой жидкости связаны с преобразованием в рассеянный склероз. Мозг 2010; 133: 1082-93.

     DOIPubMed

318. 191. Borràs E, Cantó E, Choi M, Maria Villar L, Álvarez-Cermeño JC, et al.Классификатор на основе белков для прогнозирования перехода от клинически изолированного синдрома к рассеянному склерозу. Mol Cell Proteomics 2016; 15: 318-28.

     DOIPubMedPMC

319. 192. Канто Э, Тинторе М., Вильяр Л. М., Коста С., Нуртдинов Р. и др. Хитиназа 3-подобный 1: прогностический биомаркер при клинически изолированных синдромах. Мозг 2015; 138: 918-31.

     DOIPubMed

320. 193. Matute-Blanch C, Río J, Villar LM, Midaglia L, Malhotra S, et al. Хитиназа 3-подобная 1 связана с ответом на лечение интерфероном-бета при рассеянном склерозе. J Neuroimmunol 2017; 303: 62-5.

     DOIPubMed

321. 194. Lovett-Racke AE, Yang Y, Racke MK. Th2 по сравнению с Th27: релевантны ли цитокины Т-клеток при рассеянном склерозе? Biochim Biophys Acta 2011; 1812: 246-51.

     DOIPubMedPMC

322. 195. Longbrake EE, Racke MK. Почему терапия антителами к IL-12 / IL-23 неэффективна при рассеянном склерозе? Expert Rev Neurother 2009; 9: 319-21.

     DOIPubMed

323. 196. Куа Д.Дж., Шерлок Дж., Чен Ю., Мерфи Калифорния, Джойс Б. и др.Интерлейкин-23, а не интерлейкин-12, является критическим цитокином для аутоиммунного воспаления головного мозга. Nature 2003; 421: 744-8.

     DOIPubMed

324. 197. Сегал Б.М., Константинеску К.С., Райчаудхури А., Ким Л., Фиделус-Горт Р. и др. Повторные подкожные инъекции нейтрализующего антитела IL12 / 23 p40, устекинумаба, пациентам с ремиттирующим рассеянным склерозом: фаза II, двойное слепое, плацебо-контролируемое, рандомизированное исследование с диапазоном доз. Ланцет Neurol 2008; 7: 796-804.

     DOIPubMed

325. 198. Матусевичюс Д., Кивисакк П., Хе Б., Костулас Н., Озенци В. и др. Экспрессия мРНК интерлейкина-17 в крови и мононуклеарных клетках спинномозговой жидкости увеличивается при рассеянном склерозе. Mult Scler 1999; 5: 101-4.

     DOIPubMed

326. 199. Lock C, Hermans G, Pedotti R, Brendolan A, Schadt E, et al. Генный микроматричный анализ поражений рассеянного склероза дает новые цели, подтвержденные при аутоиммунном энцефаломиелите. Nat Med 2002; 8: 500-8.

     ДОИПубМед

327. 200.Brucklacher-Waldert V, Stuerner K, Kolster M, Wolthausen J, Tolosa E. Фенотипическая и функциональная характеристика клеток Т-хелперов 17 при рассеянном склерозе. Мозг 2009; 132: 3329-41.

     DOIPubMed

328. 201. Гаврдова Е., Белова А., Голобородько А., Тиссерант А., Райт А. и др. Активность секукинумаба, анти-IL-17A-антитела, на поражениях головного мозга при RRMS: результаты рандомизированного исследования, подтверждающего концепцию. Дж. Neurol 2016; 263: 1287-95.

     ДОИПубМед

329. 202.Ишизу Т., Осоэгава М., Мэй Ф.Дж., Кикучи Х., Танака М. и др. Интратекальная активация оси IL-17 / IL-8 при оптико-спинальном рассеянном склерозе. Мозг 2005; 128: 988-1002.

     DOIPubMed

330. 203. Росси С., Мотта С., Студер В., Барбьери Ф., Буттари Ф. и др. Фактор некроза опухоли повышен при прогрессирующем рассеянном склерозе и вызывает эксайтотоксическую нейродегенерацию. Mult Scler 2014; 20: 304-12.

     DOIPubMed

331. 204. Тренова А.Г., Славов Г.С., Драганова-Филипова М.Н., Матева Н.Г., Манова М.Г. и др.Уровни циркуляции интерлейкина-17А, фактора некроза опухоли альфа, интерлейкина-18, интерлейкина-10 и когнитивные способности пациентов с ремиттирующим рассеянным склерозом. Neurol Res 2018; 40: 153-9.

     DOIPubMed

332. 205. Пегоретти В., Барон В., Ламан Дж. Д., Эйзель УЛМ. Селективная модуляция сигналов TNF-TNFR: идеи для лечения рассеянного склероза. Front Immunol 2018; 9: 925.

     DOIPubMedPMC

333. 206. Caminero A, Comabella M, Montalban X.Фактор некроза опухоли альфа (TNF-α), анти-TNF-α и демиелинизация снова: текущая история. J Neuroimmunol 2011; 234: 1-6.

     DOIPubMed

334. 207. Brambilla R, Ashbaugh JJ, Magliozzi R, Dellarole A, Karmally S, et al. Ингибирование растворимого фактора некроза опухоли является терапевтическим средством при экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите и способствует сохранению аксонов и ремиелинизации. Мозг 2011; 134: 2736-54.

     DOIPubMedPMC

335. 208. Ng LG, Sutherland AP, Newton R, Qian F, Cachero TG, et al.Фактор активации В-клеток, принадлежащий к семейству TNF (BAFF) -R, является основным рецептором BAFF, способствующим костимуляции BAFF циркулирующих Т- и В-клеток. J. Immunol. 2004; 173: 807-17.

     DOIPubMed

336. 209. Каннел К., Алнек К., Вахтер Л., Гросс-Паю К., Уибо Р. и др. Изменения уровней фактора активации B-клеток крови (BAFF) при рассеянном склерозе: признак результата лечения. PLoS One 2015; 10: e0143393.

     DOIPubMedPMC

337. 210. Friede RL, Samorajski T.Калибр аксона, связанный с нейрофиламентами и микротрубочками в волокнах седалищного нерва крыс и мышей. Anat Rec 1970; 167: 379-87.

     DOIPubMed

338. 211. Varhaug KN, Torkildsen Ø, Myhr KM, Vedeler CA. Легкая цепь нейрофиламента как биомаркер рассеянного склероза. Передний Neurol 2019; 10: 338.

     DOIPubMedPMC

339. 212. Rosengren LE, Karlsson JE, Karlsson JO, Persson LI, Wikkelsø C. Пациенты с боковым амиотрофическим склерозом и другими нейродегенеративными заболеваниями имеют повышенные уровни белка нейрофиламентов в спинномозговой жидкости. J Neurochem 1996; 67: 2013-8.

     DOIPubMed

340. 213. De Schaepdryver M, Jeromin A, Gille B, Claeys KG, Herbst V, et al. Сравнение повышенного содержания тяжелых цепей фосфорилированных нейрофиламентов в сыворотке и спинномозговой жидкости пациентов с боковым амиотрофическим склерозом. J Neurol Neurosurg Psychiatry 2018; 89: 367-73.

     DOIPubMed

341. 214. Файф И. Болезнь Альцгеймера: свет нейрофиламентов в крови свидетельствует о дегенерации Альцгеймера. Nat Rev Neurol 2017; 13: 257.

     DOIPubMed

342. 215. Meeter LH, Dopper EG, Jiskoot LC, Sanchez-Valle R, Graff C, et al. Легкая цепь нейрофиламента: биомаркер генетической лобно-височной деменции. Энн Клин Перевод Нейрол 2016; 3: 623-36.

     DOIPubMedPMC

343. 216. Mages B, Aleithe S, Altmann S, Blietz A, Nitzsche B, et al. Нарушение целостности нейрофиламентов и морфологии нейронов в различных моделях фокальной ишемии головного мозга и ткани инсульта человека. Front Cell Neurosci 2018; 12: 161.

     DOIPubMedPMC

344. 217. Byrne LM, Rodrigues FB, Blennow K, Durr A., ​​Leavitt BR, et al. Легкий белок нейрофиламента в крови как потенциальный биомаркер нейродегенерации при болезни Хантингтона: ретроспективный когортный анализ. Ланцет Neurol 2017; 16: 601-9.

     DOIPubMedPMC

345. 218. Bridel C, van Wieringen WN, Zetterberg H, Tijms BM, Teunissen CE, et al; Группа НФЛ. Диагностическое значение светового белка нейрофиламентов спинномозговой жидкости в неврологии: систематический обзор и метаанализ. JAMA Neurol 2019; 76: 1035-48.

     DOIPubMedPMC

346. 219. Бергман Дж., Дринг А., Зеттерберг Х., Бленноу К., Норгрен Н. и др. Свет нейрофиламентов в спинномозговой жидкости и сыворотке является чувствительным маркером повреждения белого вещества аксонов при РС. Neurol Neuroimmunol Neuroinflamm 2016; 3: e271.

     DOIPubMedPMC

347. 220. Новакова Л., Зеттерберг Х., Сундстрём П., Аксельссон М., Хадеми М. и др. Мониторинг активности заболевания при рассеянном склерозе с использованием сывороточного белка нейрофиламентов. Неврология 2017; 89: 2230-7.

     DOIPubMedPMC

348. 221. Kuhle J, Barro C, Disanto G, Mathias A, Soneson C, et al. Легкая цепь нейрофиламентов сыворотки при раннем рецидивирующем ремиттирующем РС повышена и коррелирует с уровнями спинномозговой жидкости и показателями тяжести заболевания на МРТ. Mult Scler 2016; 22: 1550-9.

     DOIPubMed

349. 222. Kuhle J, Barro C, Andreasson U, Derfuss T, Lindberg R, et al. Сравнение трех аналитических платформ для количественной оценки легкой цепи нейрофиламентов в образцах крови: ELISA, электрохемилюминесцентный иммуноанализ и Simoa. Clin Chem Lab Med 2016; 54: 1655-61.

     DOIPubMed

350. 223. Disanto G, Barro C, Benkert P, Naegelin Y, Schädelin S, et al; Швейцарская когортная исследовательская группа по рассеянному склерозу. Свет нейрофиламентов сыворотки: биомаркер повреждения нейронов при рассеянном склерозе. Энн Нейрол 2017; 81: 857-70.

     DOIPubMedPMC

351. 224. Teunissen CE, Iacobaeus E, Khademi M, Brundin L, Norgren N, et al. Комбинация N-ацетиласпартата спинномозговой жидкости и нейрофиламентов при рассеянном склерозе. Неврология 2009; 72: 1322-9.

     DOIPubMed

352. 225. Kuhle J, Leppert D, Petzold A, Regeniter A, Schindler C, et al. Тяжелая цепь нейрофиламента в спинномозговой жидкости коррелирует с рецидивами и инвалидностью при рассеянном склерозе. Неврология 2011; 76: 1206-13.

     DOIPubMed

353. 226. Норгрен Н., Сундстрём П., Свеннингссон А., Розенгрен Л., Стигбранд Т. и др. Нейрофиламент и глиальный фибриллярный кислый белок при рассеянном склерозе. Неврология 2004; 63: 1586-90.

     DOIPubMed

354. 227. Цай Л., Хуанг Дж. Легкая цепь нейрофиламента как биологический маркер рассеянного склероза: исследование метаанализа. Neuropsychiatr Dis Treat 2018; 14: 2241-54.

     DOIPubMedPMC

355. 228. Мартин С.Дж., МакГлассон С., Хант Д., Оверелл Дж. Легкая цепь нейрофиламентов спинномозговой жидкости при рассеянном склерозе и ее подтипах: метаанализ исследований случай-контроль. J Neurol Neurosurg Psychiatry 2019; 90: 1059-67.

     ДОИПубМедПМС

356. 229.Куле Дж., Нурбахш Б., Грант Д., Морант С., Барро С. и др. Нейрофиламент сыворотки связан с прогрессированием атрофии головного мозга и инвалидностью на ранних стадиях рассеянного склероза. Неврология 2017; 88: 826-31.

     DOIPubMedPMC

357. 230. Quintana E, Coll C, Salavedra-Pont J, Muñoz-San Martín M, Robles-Cedeño R, et al. Когнитивные нарушения на ранних стадиях рассеянного склероза связаны с высокими уровнями в спинномозговой жидкости хитиназы 3-подобного 1 и легкой цепи нейрофиламентов. Eur J Neurol 2018; 25: 1189-91.

     DOIPubMed

358. 231. Kuhle J, Plavina T, Barro C, Disanto G, Sangurdekar D, et al. Уровни света нейрофиламентов связаны с долгосрочными последствиями рассеянного склероза. Mult Scler 2019; DOI: 10.1177 / 1352458519885613.

     DOIPubMed

359. 232. Ферраро Д., Гвиччарди С., Де Биази С., Пинти М., Бедин Р. и др. Плазменные нейрофиламенты коррелируют с инвалидностью у пациентов с прогрессирующим рассеянным склерозом. Acta Neurol Scand 2020; 141: 16-21.

     ДОИПубМед

360. 233.Дисанто Дж., Адиутори Р., Добсон Р., Мартинелли В., Далла Коста Дж. И др .; Международная группа по изучению клинически изолированного синдрома. Уровни легких цепей нейрофиламентов в сыворотке повышены у пациентов с клинически изолированным синдромом. J Neurol Neurosurg Psychiatry 2016; 87: 126-9.

     DOIPubMed

361. 234. Мартинес М.А., Олссон Б., Бау Л., Матас Э., Кобо Кальво Б. и др. Глиальные и нейрональные маркеры в спинномозговой жидкости предсказывают прогрессирование рассеянного склероза. Mult Scler 2015; 21: 550-61.

     DOIPubMedPMC

362. 235. Modvig S, Degn M, Roed H, Sørensen TL, Larsson HB, et al. Уровни хитиназы 3-подобного 1 и легкой цепи нейрофиламента в спинномозговой жидкости предсказывают развитие рассеянного склероза и инвалидность после неврита зрительного нерва. Mult Scler 2015; 21: 1761-70.

     DOIPubMed

363. 236. Силлер Н., Куле Дж., Мутураман М., Барро С., Uphaus Т. и др. Легкая цепь нейрофиламентов сыворотки является биомаркером острого и хронического повреждения нейронов при раннем рассеянном склерозе. Mult Scler 2019; 25: 678-86.

     DOIPubMed

364. 237. Вархауг К.Н., Барро К., Бьёрневик К., Мир К.М., Торкильдсен Ø и др. Легкая цепь нейрофиламента позволяет прогнозировать активность заболевания при ремиттирующем РС. Neurol Neuroimmunol Neuroinflamm 2018; 5: e422.

     DOIPubMedPMC

365. 238. Читнис Т., Гонсалес С., Хили BC, Саксена С., Россо М. и др. Уровни легких цепей нейрофиламентов в сыворотке коррелируют с 10-летними результатами МРТ при рассеянном склерозе. Энн Клин Перевод Нейрол 2018; 5: 1478-91.

     DOIPubMedPMC

366. 239. Axelsson M, Malmeström C, Gunnarsson M, Zetterberg H, Sundström P, et al. Иммуносупрессивная терапия снижает повреждение аксонов при прогрессирующем рассеянном склерозе. Mult Scler 2014; 20: 43-50.

     DOIPubMed

367. 240. Новакова Л., Аксельссон М., Хадеми М., Зеттерберг Х., Бленнов К. и др. Биомаркеры воспаления и дегенерации спинномозговой жидкости как показатели эффективности финголимода при рассеянном склерозе. Mult Scler 2017; 23: 62-71.

     DOIPubMed

368. 241. Kuhle J, Malmeström C, Axelsson M, Plattner K, Yaldizli O, et al. Сравнение легких и тяжелых субъединиц нейрофиламентов в качестве терапевтических биомаркеров при рассеянном склерозе. Acta Neurol Scand 2013; 128: e33-6.

     DOIPubMed

369. 242. Gunnarsson M, Malmeström C, Axelsson M, Sundström P, Dahle C, et al. Натализумаб заметно снижает повреждение аксонов при рецидивирующем рассеянном склерозе. Энн Нейрол 2011; 69: 83-9.

     ДОИПубМед

370. 243.Акгюн К., Кречманн Н., Хаасе Р., Прошманн Ю., Китцлер Х. Х. и др. Профилирование индивидуальных клинических ответов с помощью высокочастотной оценки нейрофиламентов сыворотки при РС. Neurol Neuroimmunol Neuroinflamm 2019; 6: e555.

     DOIPubMedPMC

371. 244. Испытание традиционной и ранней агрессивной терапии рассеянного склероза (TREAT-MS). Доступно по адресу: https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT03500328. [Последний доступ 9 июля 2020 г.].

372. 245. Джейнвей К.А. младший, Трэверс П., Уолпорт М., Шломчик М.Дж.Иммунобиология: иммунная система в здоровье и болезни. 5-е издание. Нью-Йорк: наука о гирляндах; 2001. Доступно по адресу: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK27162/. [Последний доступ 9 июля 2020 г.].

373. 246. Шариф М.К., Кейр Г., Томпсон Э.Дж. Интратекальный синтез IgM при неврологических заболеваниях: сравнение обнаружения олигоклональных полос и количественной оценки. J Neurol Sci 1990; 96: 131-42.

     DOIPubMed

374. 247. Villar LM, Masjuan J, González-Porqué P, Plaza J, Sádaba MC, et al.Интратекальный синтез IgM является прогностическим фактором рассеянного склероза. Энн Нейрол 2003; 53: 222-6.

     DOIPubMed

375. 248. Мандриоли Дж., Сола П., Бедин Р., Гамбини М., Мерелли Э. Многофакторный прогностический индекс при рассеянном склерозе. Олигоклональные группы IgM в спинномозговой жидкости и клинические особенности для прогнозирования развития заболевания. Дж. Neurol 2008; 255: 1023-31.

     DOIPubMed

376. 249. Магранер MJ, Bosca I, Simó-Castelló M, García-Martí G, Alberich-Bayarri A, et al.Атрофия головного мозга и нагрузка поражения связаны с липид-специфическими олигоклональными полосами IgM в спинномозговой жидкости при клинически изолированных синдромах. Нейрорадиология 2012; 54: 5-12.

     DOIPubMed

377. 250. Вильяр Л.М., Садаба М.К., Ролдан Э., Масьюан Дж., Гонсалес-Порке П. и др. Интратекальный синтез олигоклональных IgM против липидов миелина предсказывает агрессивное течение болезни при РС. Дж. Клин Инвест 2005; 115: 187-94.

     DOIPubMedPMC

378. 251. Durante L, Zaaraoui W., Rico A, Crespy L., Wybrecht D., et al.Интратекальный синтез IgM, измеренный после первого демиелинизирующего события, указывающего на рассеянный склероз, связан с последующим увеличением поражения мозга при МРТ. Mult Scler 2012; 18: 587-91.

     DOIPubMed

379. 252. Boscá I., Magraner MJ, Coret F, Alvarez-Cermeño JC, Simó-Castelló M, et al. Риск рецидива после клинически изолированного синдрома связан с характером олигоклональных полос. J Neuroimmunol 2010; 226: 143-6.

     ДОИПубМед

380. 253.Ферраро Д., Симоне А.М., Бедин Р., Галли В., Витетта Ф. и др. Полосы олигоклональных IgM в спинномозговой жидкости предсказывают раннюю конверсию в клинически определенный рассеянный склероз у пациентов с клинически изолированным синдромом. J Neuroimmunol 2013; 257: 76-81.

     DOIPubMed

381. 254. Эспиньо М., Абраира В., Арройо Р., Бау Л., Камара С. и др. Оценка воспроизводимости определения полосы олигоклонального IgM для его применения в повседневной клинической практике. Clin Chim Acta 2015; 438: 67-9.

     DOIPubMed

382. 255. Sola P, Mandrioli J, Simone AM, Ferraro D, Bedin R, et al. Первичный прогрессирующий и рецидивирующий рассеянный склероз: наличие и прогностическая ценность олигоклональных IgM в спинномозговой жидкости. Mult Scler 2011; 17: 303-11.

     DOIPubMed

383. 256. Bosca I, Villar LM, Coret F, Magraner MJ, Simó-Castelló M, et al. Ответ на интерферон при рассеянном склерозе связан с липид-специфическими олигоклональными полосами IgM. Mult Scler 2010; 16: 810-5.

     DOIPubMed

384. 257. Selter RC, Biberacher V, Grummel V, Buck D, Eienbröker C, et al. Лечение натализумабом снижает сывороточные уровни IgM и IgG у пациентов с рассеянным склерозом. Mult Scler 2013; 19: 1454-61.

     DOIPubMed

385. 258. Вильяр Л.М., Гарсия-Санчес М.И., Коста-Фроссард Л., Эспиньо М., Рольдан Е. и др. Иммунологические маркеры оптимального ответа на натализумаб при рассеянном склерозе. Arch Neurol 2012; 69: 191-7.

     ДОИПубМед

386. 259.Хол Э.М., Пекни М. Глиальный фибриллярный кислотный белок (GFAP) и система промежуточных филаментов астроцитов при заболеваниях центральной нервной системы. Curr Opin Cell Biol 2015; 32: 121-30.

     DOIPubMed

387. 260. Bélanger M, Magistretti PJ. Роль астроглии в нейропротекции. Dialogues Clin Neurosci 2009; 11: 281-95.

     PubMedPMC

388. 261. Ян З., Ван К.К. Глиальный фибриллярный кислый белок: от сборки промежуточных филаментов и глиоза до нейробиомаркера. Trends Neurosci 2015; 38: 364-74.

     DOIPubMedPMC

389. 262. Liddelow SA, Guttenplan KA, Clarke LE, Bennett FC, Bohlen CJ, et al. Нейротоксические реактивные астроциты индуцируются активированной микроглией. Природа 2017; 541: 481-7.

     DOIPubMedPMC

390. 263. Махад Д.Х., Трапп Б.Д., Лассманн Х. Патологические механизмы прогрессирующего рассеянного склероза. Ланцет Neurol 2015; 14: 183-93.

     DOIPubMed

391. 264. Абдельхак А., Хоттенротт Т., Моренас-Родригес Э., Суарес-Кальвет М., Зеттл Великобритания и др.Маркеры глиальной активации в спинномозговой жидкости и сыворотке от пациентов с первичным прогрессирующим рассеянным склерозом: потенциал сывороточного GFAP в качестве маркера тяжести заболевания? Передний Neurol 2019; 10: 280.

     DOIPubMedPMC

392. 265. Rosengren L, Lycke J, Andersen O. Глиальный фибриллярный кислый белок в спинномозговой жидкости пациентов с рассеянным склерозом: связь с неврологическим дефицитом.