Палочка кокки в мазке: Кольпоскопия шейки матки, цены в Москве в клиниках Медок

какие анализы сдавать женщине перед беременностью

23 сентября, 2020 14582 0

Беременность и рождение ребенка – серьёзное событие в жизни каждой семьи, требующее определённой подготовки. Временный отказ от алкоголя и курения конечно являются обязательными. Но не все знают, что перед планированием малыша будущим родителям следует сделать ряд исследований и анализов. Эти превентивные меры нужны для того, чтобы беременность протекала максимально легко, а ребенок родился здоровым и крепким.

К одному из самых распространенных заблуждений относится миф, что готовиться к беременности должна только женская половина. 

Безусловно, вынашивание малыша является физиологическим стрессом для ее организма.

И прямая задача гинеколога – подвести пациентку к зачатию в лучшей физиологической форме. Однако и здоровье будущего отца имеет в планировании немаловажное значение. В первую очередь, это нужно для здоровья нового члена семьи. Поэтому обследование должны пройти оба партнера. Для этого врачами разработан специальный комплекс анализов для планирования беременности, в том числе генетических.

Итак, общие анализы для мужчин и женщин включают:

• исследование группы крови и резус-фактора. Выполняется в обязательном порядке, поскольку несовместимость может вызвать одно из самых серьезных осложнений беременности, — конфликт крови. На сегодняшний день пугаться данной проблемы не стоит. Существует специальная вакцина, предотвращающая конфликт матери и плода по резус-фактору. Однако врачи должны знать об этом заранее;

• общий анализ крови. По результатам данного лабораторного теста гинеколог сможет оценить состояние здоровья будущих родителей в целом. Сбой в каком-либо из показателей подскажет врачу: существуют ли в организме отклонения и где они локализованы. В случае неудовлетворительных результатов, доктор назначит дополнительные анализы или отправит на консультацию к другому специалисту;

• общий анализ мочи. Играет в планировании беременности ту же роль, что и общий анализ крови;

• биохимический анализ крови. Необходим для того, чтобы оценить состояние внутренних органов будущих матери и отца. Такое исследование выявит неполадки в работе самых важных органов пары: сердца, легких, печени, почек и поджелудочной железы. Особенно важно перед беременностью сделать этот тест женщине, поскольку в период вынашивания малыша могут проявиться скрытые заболевания, например, сахарный диабет или гипотиреоз;

• исследование методом ПЦР на TORCH-инфекции. Аббревиатура расшифровывается по первым буквам названий инфекций, вызывающих различные осложнения развития плода. Включает в себя анализы на антитела к токсоплазмозу, краснухе, цитомегаловирусу и герпесу. Все вышеуказанные заболевания должны быть вылечены заранее, поскольку в противном случае есть риск заражения плода, нарушения его развития и прерывания беременности.

Исследования при планировании беременности женщинам:

• гинекологический мазок методом ПЦР на инфекции, передающиеся половым путем. Выполняется для того, чтобы заранее пролечить все имеющиеся заболевания и воспаления. Любое из ЗППП препятствует благоприятному течению беременности и нормальному развитию плода в утробе;

• цитология мазка с шейки матки. Во время беременности в женском организме происходит гормональная перестройка, которая может быть толчком для развития ранее не проявляющих себя заболеваний. Так врач может определить, нет ли в органе патологически изменённых клеток, способных в дальнейшем развиться в злокачественное новообразование;

• анализ на свертываемость крови или коагулограмма. Имеет первостепенное значение в профилактике осложнений беременности, связанных с патологиями плаценты, в том числе с тромбозом ее сосудов;

• бактериологический анализ отделяемого влагалища. Исследование флоры требуется врачу для того, чтобы выяснить, в каком состоянии находится слизистая матки. Мазок на флору позволяет выявить уровень лейкоцитов и наличие патогенных микроорганизмов. Если они определяются, гинеколог назначит пациентке соответствующее лечение;

• анализ на уровень сахара в крови. Мы уже говорили, что беременность является определённым стрессом для организма. Сахарный диабет – одно из заболеваний, манифестация которого часто происходит в течении последующих 9 месяцев после зачатия. Поэтому важно заранее предотвратить его развитие. Диабет может негативно повлиять на развитие плода в утробе и стать причиной других осложнений.

Мы перечислили основную группу исследований, назначаемых при планировании беременности. Сделать эти анализы рекомендуют акушеры-гинекологи по всему миру. При желании можно расширить этот список другими, не менее информативными тестами. Так планирование зачатия и беременности можно дополнить исследованиями крови на гормоны и генетическими тестами.

(2 оценок, среднее 5 из 5)

Читайте также

зачем проводят анализ на хламидии, что показывает ПЦР

11 ноября, 2020 36949 0 Анализ на хламидии является неотъемлемой частью комплекса исследований на инфекции, передающиеся половым путем.  Здоровье женской репродуктивной системы напрямую зависит от наличия патогенных микроорганизмов в половых путях. Хламидия поражает урогенитальный тракт женского организма и вызывает воспалительные процессы, в том числе в фаллопиевых трубах. Такое заболевание может годами протекать бессимптомно и способствовать неуклонному развитию бесплодия. Хроническая инфекция провоцирует выделение плотного секрета и образование спаек в трубах. Непроходимость маточных труб может быть источником проблем с зачатием, а также таких тяжелых патологий как внематочная беременность. Самый надежный способ предотвратить развитие этой инфекции – сделать исследование ПЦР на хламидии.

Что такое хламидии?

В сфере акушерства и гинекологии представляет интерес только один вид инфекции – Chlamydia trachomatis. Микроорганизм относится к грамотрицательным облигатным внутриклеточным паразитам. Это одна из наиболее распространенных инфекций, передающихся половым путем. Каждый год хламидиозом заболевает около 100 миллионов жителей земного шара. Носителями инфекции является почти миллиард людей, что соответствует примерно одной восьмой части населения планеты. ПЦР исследования играют большую роль в профилактике дальнейшего распространения патогена. 

Жизненный цикл возбудителя располагает к хроническому течению заболевания и низкой восприимчивости к лечению антибактериальными препаратами. Внедряясь в клетку человеческого организма, хламидии начинают питаться ее содержимым. Там же происходит и их размножение. В случае разрушения больной клетки, в окружающие ткани мигрирует еще больше патогенов. Так поражается все больше и больше здоровых клеток. Заболевание склонно к скрытому течению. Это связано с тем, что микроорганизм способен к образованию особых L-форм. Для создания таких «спящих» форм требуются определенные для паразита условия. Это может быть малоэффективная антибактериальная терапия, переохлаждение или перегрев организма. В таком виде хламидии могут существовать внутри клеток длительное время, не вызывая отклика иммунной системы человека. При подавлении иммунитета происходит активизация инфекции и обратное преобразование микроорганизмов из L-форм. Выявить обычным методом скрытое заболевание достаточно сложно. Иммуногенность у патогена чрезвычайно низкая – антитела к Chlamydia trachomatis выявляются в анализах только у 50 % носителей. Поэтому наиболее эффективным методом считается ПЦР в режиме реального времени.

Наиболее частый способ заражения Chlamydia trachomatis – через незащищенный половой контакт, реже инфицирование происходит контактно-бытовым путем или через предметы личной гигиены. Именно поэтому в профилактике инфекции большую роль играют барьерные методы контрацепции и регулярные анализы на ИППП. Женщины более подвержены заражению чем мужчины. Инкубационный период заболевания варьируется от двух недель до одного месяца.  В первую очередь микроорганизм поражает слизистые половых органов и глаз. Процесс инфицирования начинается с присоединения элементарного тельца патогена к клетке эпителия конъюнктивы, уретры, эндометрия или эндоцервикса. В организме носителя хламидии могут существовать в двух формах: элементарных и ретикулярных телец. Первые, проникая в клетки эпителия, образуют колонию ретикулярных телец. Они размножаются внутри клетки, а после ее гибели поражают новые клетки.  Ориентировочно весь цикл развития составляет от 48 до 72 часов. 

Возможные симптомы заболевания, требующие проведения ПЦР теста:

• Зуд и жжение в половых органах
• Неприятные ощущения при мочеиспускании
• Боль при половом акте
• Обильные гнойные выделения
• Общее недомогание
• Беспричинная слабость и утомляемость
• Субфебрилитет 
• Изменение цвета мочи

Если все вышеуказанные симптомы наблюдаются у полового партнера, сдать мазок на ПЦР исследование должны оба. Лечение в данном случае тоже проходят оба партнера. 

Плюсы и минусы анализа ПЦР на хламидии

Существует несколько видов ПЦР. Они применяются в разных направлениях медицинской диагностики и научных исследований. Автором методики является американский ученый Кэри Муллис, по праву получивший за нее в 1993 году премию Нобеля по химии. 

Данный анализ осуществляется в режиме реального времени с детекцией и расшифровывается как «полимеразная цепная реакция». Этот метод по праву завоевал доверие акушеров-гинекологов по всему миру. Специфика ПЦР заключается в том, что биоматериал пациента изучается на предмет ДНК конкретного патогена. Вместе с этим берется под контроль КВМ (качество взятия материала), где оценивается количество содержания человеческой ДНК в биоматериале.

Информативность анализа позволяет использовать его в диагностике самых различных заболеваний, в том числе генетических. К главным достоинствам метода относится высокая степень достоверности. Если исследование ПЦР выполнено с соблюдением всех правил и требований, оно полностью исключает ложноположительный результат. 

У ПЦР множество плюсов, в том числе:

• Высокая точность выявления ДНК хламидии
• Возможность использования разных биологических материалов (мокрота, выделения, моча и т.д.)
• Возможность определения возбудителя скрытого и хронически протекающего заболевания
• Эффективность в выявлении предраковых и раковых клеток
• Эффективность в выявлении других патогенных возбудителей ИППП
• Высокая скорость исполнения (от одного рабочего дня)

Показания для анализа на хламидии

Для того, чтобы удостовериться в отсутствии скрытой инфекции, не нужно ждать появления симптомов. Анализы на ИППП рекомендуется проводить один раз в год в составе профилактического обследования.

В число прямых показаний к тесту на хламидии входят:

• Повышение температуры тела без ясных причин
• Необходимость дифференцирования ИППП
• Воспалительный процесс в органах малого таза
• Оценка эффективности лечения хламидиоза
• Подозрение на бесплодие
• Непроходимость маточных труб
• Планирование беременности 
• Беременность

Подготовка к анализу ПЦР

Анализ на хламидии может выполнятся разными способами, в том числе таким методом как ПЦР. Соответственно, подготовка при этом будет отличаться.
 
Мазок на ИППП, в том числе на хламидии, сдается на приеме у врача. Он берется в процессе осмотра на гинекологическом кресле. Приходить на прием и сдачу анализа следует в первой половине менструального цикла. Если обследование требуется сделать в срочном порядке, подойти к доктору можно в любой день, но не позже чем за 5 дней до очередной менструации. За один-два дня до сдачи ПЦР мазка необходимо воздержаться от половых контактов, интравагинального УЗИ и кольпоскопии. 

 Для того, чтобы результаты анализа были максимально точными, нужно учитывать, принимались ли накануне теста антибиотики. На фоне антибиотикотерапии мазок не выполняется, поскольку показания исследований любым методом будут недостоверными. В этом случае рекомендуется выдержать временной промежуток не менее одного месяца.

 Если врач выдал направление на анализ крови, сдавать биоматериал на хламидии следует утром натощак.

Расшифровка результатов ПЦР

Существует несколько видов исследований на хламидии. Интерпретировать результаты любого из проводимых методом ПЦР тестов должен лечащий врач. 

Срок выдачи анализов составляет один рабочий день. В бланке исследования на хламидии указывается, обнаружен или нет инфекционный агент в биоматериале. 

Результаты анализа выглядят так:

Обнаружено. В образце биоматериала зафиксирована ДНК, специфичная для возбудителя Chlamydia trachomatis; Не обнаружено. В образце биоматериала не зафиксирована ДНК, специфичная для возбудителя Chlamydia trachomatis. Если в урогенитальном тракте установлен воспалительный процесс, вполне вероятно, что он вызван именно данным возбудителем. Если же в мазке ПЦР найдено незначительное количество Chlamydia trachomatis, скорее всего воспаление спровоцировано другим патогеном. В этом случае может потребоваться дифференциальная диагностика заболевания и дополнительные анализы.

(12 оценок, среднее 4.17 из 5)

Читайте также

причины, симптомы, диагностика, лечение в НКЦ ОАО «РЖД», с филиалом ЦКБ № 1

Вагинит или кольпит — это воспаление влагалища, обычно вызываемое инфекцией. В норме во влагалище выявляется огромное количество разнообразных микроорганизмов. Подавляющее большинство из них (более 95%) – это лактобактерии. Они продуцируют молочную кислоту, что обуславливает кислую среду во влагалище, на фоне которой тормозится рост и развитие других бактерий. Даже в норме во влагалищном мазке можно увидеть уреаплазму и микроплазму, дрожжевые грибки типа кандида, кокки и палочки. Однако их концентрация крайне мала и не вызывает воспалительного ответа со стороны организма. 

При различных неблагоприятных условиях (снижение иммунитета, частая смена половых партнеров и пр), когда резко снижается количество «хороших» лактобактерий и возрастает число кокковой или бациллярной флоры, развивается воспаление – вагинит. Также вагинальные инфекции могут передаваться половым путем, хотя большинство из них не являются результатом венерических заболеваний. Спросите врача, нужно ли лечение вашему половому партнеру.

Большинство вагинальных инфекций излечимо, однако те из них, что относятся к инфекциям, передающимися половым путем, могут оказаться более серьезными и опасными, в том числе за счет последствий. Известны случаи, когда инфекция протекает без симптомов.

Причины: 

Наиболее распространенные причины вагинита — трихомоноз, дрожжевые инфекции (кандиды), хламидиоз. Также бывает дисбактериоз во влагалище, который приводит к так называемому бактериальному вагинозу. 

Симптомы:

• Необычные выделения из влагалища, нередко обильные.
• Зуд и раздражение влагалища.
• Покраснение наружных половых органов и стенок влагалища
• Боль во время полового акта.
• Неприятный запах из влагалища.
• Боль в нижней части живота.

Диагностика:

Во время гинекологического осмотра забирается мазок на флору, позволяющий определить наличие воспаления, исключить или подтвердить гонорею, трихомониаз, кандидоз. Анализ выделений методом ПЦР выявляет хламидии, вирусные инфекции. 

Лечение: 

Лечение по поводу уреаплазмы или микоплазмы назначается только, если по данным посева выявлен рост этих микроорганизмов в количестве более 10 в 5-й степени. Бакпосев из влагалища с определением чувствительности к антибиотикам позволяет не только определить специфический возбудитель, но и подобрать правильный антибиотик, который воздействует именно на него. На фоне приема антибиотиков всегда назначается профилактика грибковых инфекций. При кольпитах проводится как системная, так и местная терапия. Вторым этапом восстанавливается нормальная флора посредством приема препаратов с лактобактериями.

Лечение проводится строго под наблюдением врача.

Авторы Алекперова А.Ф., Касян В.Н. 

Для записи на прием обращайтесь по телефону: 

(495) 925-02-02 (круглосуточно)

Интимная тема — статьи от специалистов клиники «Мать и дитя»

Нормальная микрофлора

Микрофлора влагалища – это сообщество разных микроорганизмов, живущих в определенной среде. В норме 95% микрофлоры влагалища – это молочнокислые бактерии, палочки Дедерлейна (лактобактерии): они вырабатывают молочную кислоту и не дают возможности закрепиться и размножаться во влагалище нежелательным бактериям. Благодаря деятельности лактобактерий среда во влагалище кислая, именно такая среда подавляет рост различных болезнетворных микроорганизмов. Если по каким-то причинам среда становится щелочной, то ее защитные свойства снижаются и вероятность заболеть увеличивается. Остальные 5% микроорганизмов во влагалище – это условно патогенная флора: кишечная палочка, стафилококки, стрептококки, гарднерелла, грибы (условно патогенной флора называется потому что, присутствуя в организме в небольшом количестве, она не наносит ему вреда). При особых обстоятельствах (стресс, прием антибиотиков, снижение иммунитета, изменение гормонального фона) условно патогенные бактерии могут активизироваться и начать размножаться. Однако более неприятны для женщины те микроорганизмы, которые попадают во влагалище извне, например, во время полового акта. Самые частые опасные микроорганизмы – это гонококки, (вызывающие гонорею), трихомонады (из-за которых начинается трихомониаз), вирус герпеса, хламидии, микоплазмы.

Микрофлора и беременность

Во время беременности под влиянием гормонов флора влагалища меняется. Чаще всего в ней появляется избыточное количество микроорганизмов рода Candida – грибка, который входит в состав нормальной микрофлоры ротовой полости, влагалища и толстого кишечника большинства здоровых людей. Грибок может мирно обитать в организме человека, не доставляя ему абсолютно никаких неудобств.

У беременных женщин кандидоз встречается в 2–3 раза чаще, чем вне беременности. Основная причина – это повышение уровня женских половых гормонов, что и приводит к созданию благоприятных условий для размножения грибков. Во время беременности среда во влагалище становится более кислой, и именно в таких условиях легко размножаются грибки рода Candida.

Еще одна причина возникновения молочницы – снижение иммунитета в период ожидания малыша. Изменение иммунного статуса наблюдается у каждой беременной и не является патологией. Сам по себе плод чужероден для тканей матери и для того, чтобы иммунная система его «не замечала», природой запланировано закономерное снижение активности защитной системы материнского организма. Кроме того, прогестерон – гормон беременности, достигая высокого уровня, сам по себе оказывает иммуносупрессивное действие.

При кандидозе чаще всего женщину беспокоят обильные выделения творожистой консистенции (отсюда и название «молочница»), которые имеют кисловатый запах и раздражают кожу, что сопровождается зудом, чувством жжения. Уже по одним только этим признакам врач может заподозрить кандидоз влагалища. Почему же нет стопроцентной гарантии и уверенности в диагнозе? Все дело в том, что похожие симптомы (зуд, жжение, выделения) имеют и другие инфекционные заболевания, и чтобы точно знать, от чего лечить женщину, требуется сначала выявить возбудитель заболевания.

Исследование под микроскопом

Для того чтобы определить состав микрофлоры влагалища, а заодно и определить, в чем причина неприятных ощущений во влагалище, проводят бактериоскопию – оценку окрашенного мазка на флору под микроскопом.

Обычно это исследование назначают не менее двух-трех раз за всю беременность. Сначала мазок из влагалища берут при постановке на учет в женскую консультацию, потом его повторяют во время II–III триместра, и последний раз мазок берут перед родами, на 37–38-й неделе беременности. Почему нужно проводить бактериоскопию несколько раз? Некоторые влагалищные инфекции и заболевания часто являются причиной невынашивания ребенка или преждевременных родов. Также может произойти внутриутробное инфицирование или ребенок может заразиться инфекцией во время родов. Да и сама воспаленная слизистая родовых путей становится очень ранимой, и роды могут осложниться разрывами. Поэтому необходимо узнать об этих болезнях в начале беременности и вовремя их пролечить.

При сдаче мазка на флору надо предварительно подготовиться к анализу:

• Воздержаться от секса в течение двух суток перед процедурой.
• Отказаться от свечей, таблеток, мазей. Они могут повлиять на состав микрофлоры и исказить результаты.
• Не применять щелочных средств гигиены. Лучше всего провести ополаскивание без использования мыла и спринцевания.
• За два часа до взятия мазков воздержаться от мочеиспускания.

Мазок берется во время обычного гинекологического осмотра на кресле: врач специальной палочкой делает соскоб влагалищной слизи и наносит ее на предметное стекло. В лаборатории после высыхания секрета его покроют красителями и посмотрят под микроскопом. Благодаря этой процедуре врачи оценивают состав микрофлоры влагалища.

В норме в мазке можно обнаружить:

• Палочки Дедерлейна (их количество преобладает). Количество других микроорганизмов (кокков) – незначительно.
• Эпителиальные клетки (поверхностный слой стенок влагалища, которому свойственно шелушиться).
• Незначительное количество лейкоцитов (белых кровяных телец, которые ведут борьбу с различными возбудителями инфекций). Лейкоцитов в мазке должно быть до 20 в поле зрения микроскопа. Если же их число превышает допустимые нормы, значит, у женщины имеется какая-то инфекционная патология.
• Эритроциты (красные клетки крови) – их не должно быть больше 5 в поле зрения. Повышенное количество говорит о нарушении целостности сосудов.
• Слизь: ее количество должно быть умеренное.

Важно: Мазок на флору не выявляет таких инфекций, как микоплазма, уреаплазма и хламидии, их можно обнаружить только при посеве на скрытые инфекции. Также в мазке не определяются вирусы (герпеса, папилломы человека) – чтобы обнаружить эти заболевания, также потребуется дополнительное исследование.

Исследование микрофлоры влагалища – анализ хотя и очень простой, но необходимый, сделать его надо, даже если будущую маму ничего не беспокоит. Проводится бактериоскопия в любой женской консультации (бесплатно) или медицинском центре, а результаты будут готовы уже на следующий день.

ПАМЯТКА

Как снизить риск нарушения влагалищной микрофлоры

1. Совершать туалет половых органов лучше под проточной водой, струя воды должна быть направлена спереди назад, чтобы патогенные микроорганизмы из заднего прохода не попали во влагалище.
2. Не надо постоянно использовать моющие средства – они часто сушат и раздражают слизистую наружных половых органов и влагалища.
3. Ежедневные прокладки не должны иметь в своем составе отдушек (ароматических веществ): это снизит риск аллергических реакций. Менять прокладки следует каждые 3–4 часа.
4. У женщины должны быть личные средства гигиены: мочалка, отдельное полотенце для интимного ухода.
5. Белье не должно содержать синтетику – она не пропускает воздух и создает благоприятную среду для ускоренного размножения патогенных микроорганизмов.

Что обозначают кокки в мазке. Кокковая флора в мазке: диагностика, причины, лечение. Мазок на флору и стерильность: что показывает

Посещать докторов не любит большая часть людей. Но все мы прекрасно понимаем, что без этого не обойтись, все мы периодически болеем, и поэтому без помощи специалиста нам не справиться. Иногда, в независимости от наших желаний, нам в случае развития того или иного заболевания приходится сдавать анализы. Довольно часто назначается сдача мазка. Многие часто задаются вопросом: «Что это такое, кокки в мазке?». Об этом и пойдет речь в статье.

Нас окружает много различных микроорганизмов. Это и бактерии и вирусы и грибы. В повседневной жизни мы не обращаем на подобную микрофлору никакого внимания. Но до определенного момента, пока она не проникнет в организм. Одна из самых вредных и провоцирующих серьезные заболевания флор — кокковая. Под кокками подразумеваются бактерии, обладающие шарообразной формой и поражающие в большинстве случаев ЖКТ, дыхательную и половую систему. Эти микроорганизмы могут обнаружиться в организме как женщины и мужчины, так и ребенка. Нередко люди задаются вопросом, как выглядят кокки в мазке — что это такое вообще, и как с этим бороться. Обнаружение этих паторганизмов в мазке — новость не из приятных.

Весьма распространенной и вместе с этим довольно болезненной является стафилококковая инфекция. Вызвать ее может несколько микроорганизмов. Согласно статистическим данным, практически каждый новорожденный инфицируется стафилококком, но остается он в организме лишь у двадцати процентов населения планеты, 60% людей являются периодическими носителями стафилококка.

Когда речь идет о стафилококковой флоре, то имеется в виду золотистый стафилококк. Он на самом деле опасен, потому как устойчив как к антисептическим, так и антибактериальным препаратам. Он может спровоцировать развитие серьезных патологий. Эти микроорганизмы весьма активны и чрезвычайно устойчивы к воздействию извне. Так, к примеру, они могут сохранять активность после длительного воздействия ультрафиолета, температуры в 150 градусов.

Их нельзя уничтожить ни при помощи спирта, ни при помощи натрия хлорида или перекиси. Данная бактерия может спровоцировать развитие опасных недугов, в частности пневмонии, эндокардита, остеомиелита. Она же может привести к смерти. Нередко паторганизм поражает половую систему.

Наличие кокков в небольшой концентрации считается нормой. Это значит, что единичный стафилококк не опасен. Увеличение количества стафилококков требует незамедлительного лечения. Нередко в мазке на кокки обнаруживается еще один вид флоры — стрептококк. Иначе его называют грамположительной бактерией. Частое явление — выявление энтерококков. Эти микроорганизмы устойчивы к любым воздействиям, а их выявление сигнализирует о наличии воспалительного процесса в половой или мочеполовой системе.

Гонококк считается одним из самых болезнетворных представителей кокковой микрофлоры. Грамотрицательные бактерии могут провоцировать развитие различных патологий, в частности гонореи . Эта флора является исключительно патогенной. Это означает, что в мазке ее быть не должно. Вылечить патологию, вызванную кокковой флорой можно только с помощью антибактериальных препаратов. Терапией недуга, так же как и постановкой диагноза, может заниматься исключительно лечащий врач.

Заниматься самолечением, особенно при беременности, принимать какие-либо препараты, применять свечи категорически не рекомендуется. Так вы только навредите себе и усугубите состояние. Наличие палочек Додерлейна — вполне естественно. Эти бациллы поддерживают нормальную кислотную среду влагалища, а также противостоят различным инфекциям. Кокки в мазке, что это такое вам уже известно, могут спровоцировать развитие серьезной патологии. С целью предупреждения развития плачевных последствий врачи назначают забор мазка.

Флора влагалища позволяет сделать выводы относительно отсутствия или наличия патогенных микроорганизмов, к примеру, дрожжеподобных грибов рода Кандида, провоцирующих развитие кандидоза. Помимо этого, по результатам исследования можно определить наличие или отсутствие раковых клеток. Мазок является совершенно бесплатной манипуляцией. Результаты исследования покажут, есть ли какие нарушения в функционировании женской половой системы.

Мазок на флору и стерильность: что показывает?

Данное исследование способствует выявлению патогенной микрофлоры, провоцирующей возникновение различных болезней. Результат мазка на флору в 95% (показатель количества лактобактерий) сигнализирует о том, что здоровье женщины в порядке. Падение количества полезных бактерий сигнализирует об ослаблении защиты.

От концентрации во влагалище лактобактерий будет зависеть степень чистоты влагалища, всего их существует четыре:

1. Первая степень говорит об отличном состоянии половой системы. В данном случае должно обнаружиться преобладающее количество палочек Додерлейна. Иногда выявляется наличие эпителиальных клеток (в малой концентрации), а также лейкоцитов.
2. Что относительно второй степени, то она должна вызывать некую обеспокоенность. Помимо лактобактерий, обнаруживается наличие грамотрицательных организмов, которые могут спровоцировать появление патологии.
3. Третья степень характеризуется наличием большого количества эпителиальных клеток, а также пагубной микрофлоры и практически полным отсутствием палочек Додерлейна. Это плохой результат. Лечение должно быть незамедлительным.
4. Что касается четвертой степени, то она является критической. В мазке не обнаруживаются лактобактерии. Реакция мазка щелочная. Всю флору составляют патогенные организмы. Терапия должна быть серьезной и незамедлительной.

Виновниками выявленного во влагалище воспаления чаще всего являются коккобациллы — трихомонады или гарднереллы . Теперь вы знаете, что такое кокки в мазке, и самое главное вы знаете, как с этим бороться.

Обильная кокковая флора в мазке: симптомы и норма

Как уже упоминалось, в человеческом организме содержится значительное количество микроорганизмов. Кокки составляют условно-патогенную микрофлору. Они являются безвредными только в случае поддержания правильного баланса. Обильная кокковая флора в мазке может сигнализировать о серьезных проблемах со здоровьем.

В микрофлоре влагалища содержатся ацидофильные бактерии, некое количество бифидобактерий — 10% и пептострептококков — примерно 5%. Такая кокковая флора в мазке в такой концентрации считается вполне нормальной. В таком составе микрофлора продуцирует кислую среду, способствующую предотвращению различных патологий. Более того, такая флора способствует защите не только слизистых оболочек влагалища, но и всего организма.

Полезная микрофлора помогает в:

• поддержании кислотного баланса;
• уничтожении вредной микрофлоры;
• нормализации обменных процессов.

Если после проведения лабораторного исследования обнаружено, что кокковая флора в мазке превышает норму, это свидетельствует о повышенном уровне щелочи. При превышении микрофлорой нейтрального результата появляются грамположительные диплококки. В данном случае происходит снижение концентрации лактобактерий. Если же среда влагалища чрезмерно щелочная, отмечается гибель ацидофильных лактобактерий, а впоследствии замещение их кокками.

Обильная кокковая флора в мазке сигнализирует о развитии дисбактериоза влагалища, или же о наличии воспаления.

При игнорировании проявлений недуга, кокки начинают активно развиваться, а это в дальнейшем приводит к возникновению серьезных патологий, в частности эрозии шейки матки. Общеизвестно, что вышеуказанный недуг является причиной бесплодия. Крайне не желательно обильное выявление кокковой флоры в мазке при беременности, потому как это усложняет процесс вынашивания плода. Выявление обильной кокковой флоры в мазке может сигнализировать о серьезных проблемах.

Проникновение и размножение вредной флоры в большинстве случае происходит вследствие:

• несоблюдения гигиены;
• понижения иммунитета;
• длительного приема антибиотиков;
• ношения тесного синтетического белья;
• частого проведения спринцеваний;
• незащищенных половых связей.

Очевидным симптомом заселения обильного количества кокков является появление слишком выраженного неприятного запаха. Он схож с запахом испорченной рыбы. Помимо этого, часто поступают жалобы на появление зуда и жжения наружных половых органов, вагинальных выделений желтоватого окраса, ощущения дискомфорта после полового контакта.

У мужчин довольно редко возникают проявления заселения кокковой флоры. Однако может быть и такое, что мужчина жалуется на появление болевых ощущений в момент мочеиспускания, жжения и зуда, выделений из пениса желтой или зеленой окраски. Эти симптомы могут сигнализировать о гонококках или трихомонадах. Эти патологические организмы являются возбудителями патологий, передающихся ПП.

Важно также понимать, что обильная концентрация кокковой флоры в мазке — это уже повод задуматься над своим здоровьем и начать лечение. Однако помните о том, что терапия подбирается в зависимости от вида кокковой флоры в мазке. Заниматься самолечением не стоит. Прием того или иного препарата может назначить только врач и исключительно после расшифровки результатов анализов.

Кокки в мазке: чем лечить у женщин, мужчин, а также при беременности и у детей

Терапия патологии должна быть целесообразной и своевременной. Не стоит спрашивать: «Чем лечить кокки в мазке?» в интернете. Назначить терапию может только гинеколог. Врач назначит лечение после проведения необходимых обследований. Одно из самых основных — мазок на микрофлору. При нормальном состоянии здоровья в мазке обнаруживается небольшое количество кокков.

При наличии недуга в мазке помимо огромного количества кокков будут содержаться и другие инфекционные возбудители. Лечиться в любом случае должны оба партнера. Как правило, назначается применение антибиотиков: Метронидазола, Клиндамицина, препаратов, способствующих укреплению иммунной системы, антигистаминных средств. Если женщина беременна, назначают безопасные средства, не влияющие на развитие плода. О том, чем лечить кокки в мазке, спросите специалиста.

Не стоит также, если обнаружены кокки в мазке, лечить чем-то из нетрадиционных средств. Народные средства при нецелесообразном использовании могут навредить.

Теперь вы знаете, что делать, если выявлены кокки в мазке, чем лечить патологию. После курса терапии, а также полного восстановлении микрофлоры влагалища (должна преобладать палочка Додерлейна) вам остается только лишь придерживаться ряда рекомендаций, чтобы не заболеть снова.

1. Соблюдайте гигиену.
2. Носите белье из качественных натуральных материалов.
3. Избегайте незащищенных половых контактов.
4. Правильно питайтесь.
5. Вовремя лечите сопутствующие патологии.

Берегите себя, заботьтесь о своем здоровье и тогда у вас не будет поводов обращаться в больницу.

Во время осмотра у гинеколога женщинам довольно часто выполняется забор мазка из влагалища для дальнейшего анализа на патогенную флору.

В норме в организме человека обитает огромное количество различных бактерий. При этом, только некоторые из них способы стать причиной развивающегося заболевания.

Одними из наиболее часто выявляемых бактерий, которые обнаруживаются после гинекологического осмотра, являются кокки в мазке. Данные шаровидные микроорганизмы обитают в организме человека и становятся источником патогенной микрофлоры.

В том случае, если общий баланс стерильности в организме поддерживается в стабильности, кокки безвредны. Совершенно иная картина наблюдается при ослабленном иммунитете больного, который страдает от активной жизнедеятельности кокков. Особенно опасными они будут для женщин во время вынашивания ребенка.

Поможет лучше понять особенности кокков в мазке, и что это такое вообще, подробное описание данных бактерий, а также их разновидности.

Виды кокков, и в чем их опасность

Следует понимать, что у женщин могут быть обнаружены разные виды кокков. Довольно часто при этом выявляются стрептококки. Они становятся причиной воспаления в половых органах и дисбактериоза.

Еще одними часто выявляемыми бактериями являются энтерококки. Они свидетельствуют о несоблюдении женщиной необходимой личной гигиены. Данные виды кокков требуют обязательного лечения.

Следующими по частоте диагностирования являются гонококки. Данные бактерии часто становятся причиной острого воспаления.

При поражении инфекцией возможно обнаружение диплококков. Такие палочки провоцируют острое нарушение микрофлоры и могут стать источником затяжного воспаления.

Причины

Кокки в мазке способны повысить свою распространенность в микрофлоре вследствие следующих причин:

• Резкое снижение иммунной системы, которое может случиться при стрессе, плохом питании, болезни.
• Практика спринцевания, которое при отсутствии медицинской необходимости нарушает естественный баланс микрофлоры влагалища у женщин. Это довольно частая причина нарушения природной флоры влагалища.
• Ранняя половая жизнь, при которой у девушки еще не полностью сформирована природная защитная микрофлора влагалища.
• Несвоевременная замена прокладок, вследствие чего во влагалище развиваются бактерии.
• Использование некачественного синтетического белья.
• Несоблюдение нормальной интимной гигиены.
• Практика половых контактов без использования презерватива. Особенно опасным считается незащищенный секс с разными непроверенными партнерами. Это повышает риск не только нарушения в микрофлоре, но и также вероятность заражения рядом инфекционных половых болезней.
• Длительное лечение антибактериальными средствами. В таком случае у человека нарушается полезная микрофлора, что дает толчок к развитию кокков.

Помимо этого, выявление кокков у женщин возможно во время гормонального дисбаланса и беременности.

Симптомы

Первым характерным признаком кокков в микрофлоре является резкий запах из половых органов, напоминающий соленую рыбу. Также в подобном состоянии у женщины будут наблюдаться обильные слизистые выделения.

Во время интимной близости женщина может ощущать боль и дискомфорт.

Данные признаки должны стать сигналом к действию, а именно — обращению к гинекологу, ведь своевременное выявление и лечение недуга в разы повышает шанс на скорейшее выздоровление.

Кокковая флора в мазке: тактика лечения отклонения и профилактика его развития

Здоровая микрофлора во влагалище состоит из так называемых полезных лактобактерий и пептострептококков.

Основной задачей нормальной микрофлоры является создание особой кислотной среды, в которой не смогут размножаться патогенные бактерии. Также полезная микрофлора подавляет активность различных грибков, которые могут начать развиваться при снижении защитных сил организма.

О чем говорит наличие кокков

При нарушенной микрофлоре во влагалище наблюдается снижение количества лактобактерий. Это приводит к быстрому распространению болезнетворных микроорганизмов.

При щелочной среде лактобактерии погибают, а вместо них образуется многочисленная кокковая флора в мазке. В дальнейшем это становится причиной эндометрита и бесплодия.

Лечение

Для выявления кокков женщине стоит обратиться к гинекологу, который выполнит забор мазка из влагалища с помощью специального прибора. Процедура может быть немного неприятной, однако боли обычно она не вызывает. В качестве материала для анализа используется слизь или выделения из влагалища.

Следует отметить, что в мазке здоровой женщины могут быть выявлены единичные кокки и это будет совершенно нормально, так как ее микрофлора способна самостоятельно бороться с ними.

В том случае, если изменение во флоре вызвано половой инфекцией, то мазок поможет выявить конкретного возбудителя болезни, будь то гонорея, трихомониаз и т.п.

Лечебная терапия подбирается для каждой пациентки отдельно, исходя из конкретного вида бактерии и первопричины ее активного размножения. Также гинеколог обязательно учитывает наличие у женщины дополнительных заболеваний, беременности, общего состояния здоровья.

Традиционное лечение кокков предусматривает назначение противобактериальных препаратов. Они могут быть в виде таблеток, вагинальных свечей или растворов.

Для укрепления иммунитета используются иммуномодуляторы.

При выявлении инфекционных процессов, вызванных хламидиями, цитомегаловирусом и т.п., назначаются антибиотики.

Профилактика

Уберечь себя от развития кокков в микрофлоре влагалища помогут следующие профилактические рекомендации:

• Иметь постоянного проверенного полового партнера, а при случайных сексуальных контактах обязательно пользоваться презервативом.
• Носить качественное удобное нижнее белье из хлопка. Что касается использования синтетических трусиков по типу стринг, то от них лучше отказаться.
• Дважды в день проводить личную гигиену интимной области с использованием жидкого мыла (с добавлением молочной кислоты).
• Каждые три часа менять прокладки, как ежедневные, так и для менструаций.
• Отказаться от курения, приема спиртного и минимизировать стрессы, которые, снижают иммунитет.
• При лечении антибиотиками следует обязательно принимать пробиотики, которые защитят микрофлору от поражения.
• Сбалансированно питаться. В рационе должны преобладать свежие овощи и фрукты, а также кисломолочные продукты.

Посещать гинеколога необходимо раз в полгода. Это позволит держать женское здоровье под контролем и вовремя выявить заболевания. Самым простым и доступным методом исследования в гинекологии является взятие гинекологического мазка.

Расшифровка такого анализа позволит врачу увидеть изменения в половой системе женщины, которые не видны при внешнем осмотре.

• Взятие мазка – процедура абсолютно безболезненная и по времени займет всего пару минут. Опасности для здоровья она не несет, может проводиться даже у беременных женщин.

Когда нужно сдавать мазок на флору?

Расшифровка анализ мазка на флору может поведать гинекологу о наличии половых инфекций, воспалительного процесса, гормональных расстройствах в организме женщины.

Мазок на флору (гинекологический мазок) обязательно проводится, если женщина предъявляет жалобы следующего характера:

1. Выделения необычного цвета из половых путей.
2. Боли в животе в покое или при половом контакте.
3. Чувство зуда и жжения в области половых органов.
4. Появление неприятного запаха у выделений.

Также мазки берутся при проведении профилактических осмотров.

Расшифровка результатов мазков

С помощью букв доктор отмечает место взятия мазка. Обычно используются буквы латинского алфавита: V, C, U.

Мазки берутся из трех точек: влагалище (V-vagina), шейка матки (C-cervix) и мочеиспускательное отверстие (U- uretra).

В расшифровке мазка на флору у женщин можно встретить странное слово «кокки». К коккам относятся микроорганизмы, имеющие округлую форму. Это группа условно-патогенных организмов, которые присутствуют в организме постоянно.

Однако находиться они должны в определенном количестве. Как только число их превышает допустимое, кокки могут вызывать неприятную симптоматику, обусловленную воспалением. В гинекологии это состояние зовется неспецифическим кольпитом.

Кокки подразделяют на две группы: грамположительные и грамотрицательные. Такое деление имеет важное диагностическое значение в определении патогенности микроорганизма, поселившегося во влагалище.

Кокковая флора в мазке, гр.+ или гр.- кокки

мазок на флору палочки кокки

Деление микробов на грамотрицательных и грамположительных появилось в микробиологии после того, как датский ученый по фамилии Грам выявил способность микроорганизмов окрашиваться в разные цвета, в зависимости от степени их устойчивости к антибиотикам.

При окраске препаратов использовался специальный краситель темно-синего или фиолетового цвета. Ученый заметил, что одни микробы окрашиваются в синий цвет, а другие в розовый, хотя краситель один и тот же.

После тщательных исследований было выявлено, что микробы, окрашенные в розовый или малиновый цвет, имеют меньшую чувствительность к антибиотикам. Чтобы наступила их гибель, следует приложить немалые усилия.

Микроорганизмы, которые хорошо окрашивались в синий цвет, получили название грамположительных (грам+), а те, что оставались розовыми — грамотрицательными(грам-).

Бледное окрашивание и устойчивость к антибактериальным препаратам объяснялась просто: у этих бактерий была толще оболочка. Строение стенки имеет более сложное строение, чем у грам(+) кокков, а значит, красителю или антибиотику гораздо труднее проникнуть в ее слои.

Для гинеколога важно такое разделение. Обнаружение грам(+) кокков в мазке допускается. К таким микроорганизмам относятся стафилококк и стрептококк, которые могут присутствовать во влагалище здоровой женщины.

Грам(-) кокки способны вызывать заболевания. Самыми распространенными представителями этой группы в гинекологии являются гонококки, возбудители гонореи.

Что такое палочки Дедерлейна?

Обязательным элементом женского здоровья является палочковая флора во влагалище. Палочки Дедерлейна – это обобщенное название, объединяющее крупные и неподвижные грамположительные палочки, обеспечивающие нормальную микрофлору женских половых органов.

Их можно встретить под названием лактобактерии или грамположительные палочки.

Палочки Дедерлейна играют важную роль в жизни женщины:

• Способствуют поддержанию кислой среды во влагалище, что обеспечивает тщательный отбор сперматозоидов во время оплодотворения.
• Как известно, сперматозоиды долго не живут в кислой среде. Поэтому первыми погибают неполноценные, ослабленные мужские клетки, что позволяет добраться к цели только самому сильному и выносливому.
• Подавляют развитие патогенных микроорганизмов посредством активации макрофагов.
• Выделяют перекись водорода — помогает «поддержанию чистоты» во влагалище.

В мазке здоровой женщины палочки Дедерлейна должны быть в большом количестве. Снижение их количества говорит о возможных проблемах с женским здоровьем.

Что такое лептотрикс (Leptotrix) в мазке?

Leptotrix относится к условно-патогенным микроорганизмам. Это грам(+) анаэробная палочка, населяющая водоемы. Под микроскопом лептотрикс имеет вид волоса – длинная и тонкая палочка.

Считается, что лептотриксы не передаются половым путем, а их присутствие в мазке не является поводом для переживаний, если других отклонений не обнаружено.

Особенностью этих бактерий является то, что они часто сопровождают другие патогенные микроорганизмы – трихомонады и хламидии. В таком случае доктор назначит лекарства для лечения сразу нескольких возбудителей.

Если лептотриксы выявлены при планировании беременности, лечение проводится в обязательном порядке. Выявлено, что они могут стать причиной выкидышей, вызывать воспалительные процессы в плодных оболочках, инфицировать ребенка.

анализ мазка

Получив результаты анализов, порою бывает очень трудно разобраться в цифрах и буквах, написанных врачом. На самом деле все не так уж сложно. Для того чтобы понять, имеете ли вы гинекологические заболевания, нужно при расшифровке анализа мазка на флору знать показатели нормы. Их немного.

В анализах мазка у взрослой женщины показатели нормы следующие:

1. Плоский эпителий (пл.эп.) – в норме его количество должно быть в пределах пятнадцати клеток в поле зрения. Если цифра больше, то это свидетельство воспалительных заболеваний. Если меньше – признак гормональных нарушений.
2. Лейкоциты (L) – допускается наличие этих клеток, так как они помогают бороться с инфекцией. Нормальным считается количество лейкоцитов во влагалище и мочеиспускательном отверстии не больше десяти, а в области шейки матки – до тридцати.
3. Палочки Дедерлейна – у здоровой женщины их должно быть много. Малое количество лактобацилл говорит о нарушенной микрофлоре влагалища.
4. Слизь – присутствовать должна, но только в небольшом количестве.

Присутствие в результатах анализа грибов рода Кандида, мелких палочек, грам(-) кокков, трихомонад, гонококков и других микроорганизмов, свидетельствует о наличии заболевания и требует более глубокого исследования и назначения лечения.

Таблица расшифровки нормы мазка у женщин (флора)

Степени чистоты влагалища

Часто доктор выписывает направление на анализ мазка на чистоту. С помощью этого метода выявляется «степень чистоты» влагалища. Всего их четыре. Нормальными являются только первая и вторая степени, третья и четвертая степени сигнализируют о наличии заболеваний половых путей.

1 степень – идеальный вариант, который, к сожалению, встречается нечасто. Лейкоциты в мазке не превышают допустимые нормы. Флора представлена большим числом палочек Дедерлейна, слизи и клеток слущенного эпителия в небольшом количестве.

2 степень – Наиболее распространенный вариант нормы, при котором лейкоциты в пределах нормы, слизь и эпителий в умеренном количестве. Появляется небольшое количество кокков или грибов Кандида, лактобактерии в большом количестве.

3 степень – в мазке определяется большое количество слизи и эпителиальных клеток. Полезных лактобацилл мало, вместо этого отмечается увеличенное количество грибков Кандида и патогенных микробов.

4 степень – лейкоцитов так много что доктор описывает их термином «сплошь». Очень большое число болезнетворных микроорганизмов. Палочки Дедерлейна отсутствуют. Слизь и эпителий в большом количестве.

Первая и вторая степени не требуют лечения, а последние две степени свидетельствуют о воспалительном процессе, вызванном тем или иным возбудителем, и требуют безотлагательной терапии.

Мазок на флору при беременности

За весь период беременности делается три раза, во время скрининговых обследований: в момент постановки на учет, на 30-й неделе и перед предполагаемой датой родов.

Анализ проводится с целью профилактики заболеваний половой сферы, которые могут осложнить роды или стать причиной заболеваний у новорожденного.

Показатели мазка беременной женщины отличаются от мазков небеременной количественным составом флоры.

В период вынашивания малыша количество палочек Дедерлейна увеличивается в десятки раз. Необходимо это для поддержания кислой среды, которая убийственно воздействует на патогенные микробы, защищая плод от проникновения инфекции.

Увеличивается и число клеток эпителия. Во время беременности в них накапливаются запасы гликогена, который используется лактобактериями в качестве питания.

В остальном отличий нет. Появление патогенных микроорганизмов также требует лечения, только методы терапии выбираются более щадящие (свечи, тампоны, мази).

Сохранение кислой среды в микрофлоре влагалища – это норма, но без развития в ней вредных бактерий. При обнаружении в мазке у женщин значительного количества кокков изменяется щелочной баланс, и не в лучшую сторону. Кокковая флора приводит к дисбалансу во влагалище. Врач диагностирует дисбактериоз часто в совокупности с в ней. Необходимо лечение, иначе впоследствии начнет развитие эндометриоз, появится эрозия шейки матки.

Разновидности бактерий

Лейкоциты призваны защищать организм от проникновения инфекции. Повышение их количества при взятии мазка говорит о развитии инфекции. При повышении кокковой флоры в мазке необходимо лечение, но в зависимости от разновидности бактерий, расселившихся во влагалище женщины. Бактерии бывают:

–гонококками;

–стрептококками;

–стафилококками;

–пневмококками;

–тетракокками.

Каковы симптомы при превышении нормы кокков?

Симптомов в течение длительного времени может и не быть. При развитии инфекции слизистая становится сухой, женщин беспокоит зуд и жжение, появляются выделения. При воспалении предстательной железы у мужчин микрофлора заражена гонококками, при взятии мазка из мочеиспускательного канала.

Кокковые бактерии или гонококки в мазке ведут к развитию гонореи у мужчин. Отекает тестикула, из пениса выделяется желтое, или зеленое содержимое, при мочеиспускании появляется режущая боль. Лечение необходимо.

Почему развивается кокковая инфекция?

Развитие дисбактериоза во влагалище возможно в результате:

• длительного приема антибиотиков, самолечения неправильными дозами;
• развития генитальных инфекций;
• злоупотребления спринцеванием. Полезная микрофлора вымывается и бактериям уже ничто не препятствует;
• раннего начала половой жизни, неразборчивых связей;
• незащищенного секса с партнером, зараженным гонококками;
• ношения стягивающего белья из синтетики.

Кокки в мазке приводят к неприятному запаху, часто густым и вязким, зуду, жжению, дискомфорту во время секса. Если при осмотре и взятии мазка гинеколог обнаружит условно патогенную флору, то ставит диагноз – кокковая флора.

В чем опасность кокков?

Кокки – это бактерии в форме рисовых зернышек. Они присутствуют в организме постоянно, но при превышении нормы провоцируют развитие воспалительного процесса. Кокковая флора распространяется не только на влагалище, но и кишечник, покровы кожи.

Расселение бактерий в секрете влагалища приводит к снижению и даже прекращению выработки эстрогенов, размножаются лактобактерии. Прекращение выработки гормонов в яичниках негативно влияет на репродуктивные органы, в результате – выкидыши, невынашиваемость беременности, бесплодие. При незначительном количестве кокков иммунная система еще функционирует, бактерии сильно не размножаются, микрофлора держится в равновесии.

При преобладании бактерий развивается воспаление и это уже повод обратиться к врачу. Развитию воспаления способствуют:

1. Нарушения гормональные, уменьшается число лактобактерий, нарушается регулярность менструального цикла.
2. Повреждения слизистой влагалища, приводящие к ослаблению ее защитных функций.
3. Инфекционные болезни иммунная система ослабевает, развитию бактерий ничто не препятствует.
4. Несоблюдение личной гигиены, патогенные бактерии начинают усиленно развиваться в питательной и благоприятной среде.

Диагностика заболевания

Диагноз ставится врачом при беседе с пациентом, наличии симптомов и жалоб. Основные симптомы, указывающие на наличие кокковой флоры:

• боли, неприятные ощущения во время полового акта;
• тяжесть, болезненность внизу живота;
• дискомфорт во влагалище, половых органах;
• выделения из влагалища, обильные и с неприятным запахом, гнойным оттенком.

Влагалищные выделения при осмотре врачом характерно изменяют цвет, слизистая раздражена, само влагалище воспалено, с ярко-малиновым, красным оттенком. Выделения могут содержать частички крови.

Все это симптомы острой стадии недуга. В хронической форме они менее выражены, сглажены. Точный диагноз врач поставит после исследования мазка, оценки его микрофлоры. Мазок после взятия наносится на предметное стекло, высушивается, окрашивается лаборантом для подсчета и выявления микроорганизмов. При большом и обильной кокковой флоре, слущенном эпителии ставится диагноз — неспецифический кольпит.

Как лечить кокки?

Лечение заключается в приеме препаратов местно,1- 2недели. Часто назначается Бетадин, но препарат имеет противопоказания, возможен зуд, расстройство слизистой влагалища. При повышенной гиперчувствительности к компонентам лечить Бетадином недуг не рекомендуется. Также при беременности, при кормлении грудью лечение должно проводиться только под контролем лечащего врача.

Кокковая флора лечится антибиотиками: Клиндамицином, Метронидазолом. Назначаются антимикробные препараты, свечи, спреи, вагинальные таблетки. Все лечение направлено на восстановление микрофлоры. Возможно дополнительное назначение иммуностимуляторов в виде свечей для повышения иммунитета и восстановления нормальной микрофлоры.

Для устранения неприятных симптомов назначаются антигистаминные средства, для восстановления флоры влагалища – пробиотики в качестве профилактики от молочницы, иных грибковых заболеваний, возможных начать свое развитие после прохождения курса лечения антибиотиками. Антибактериальная терапия назначается только в запущенных случаях. Если врач решит, что можно обойтись без нее, то назначит спринцевания антисептическими растворами, например, хлоргексидином, далее введение тампона во влагалище, пропитанного лактобациллом для уничтожения инфекции, имеющей место быть в водимом антисептическом растворе. Курс основного лечения – до 10 дней. Полезно проводить спринцевания с добавлением отвара календулы, чистотела, ромашки аптечной. При обнаружении кокковой инфекции часто обследуются оба партнера, она передается половым путем.

В мазке часто наблюдается слизь при превышении кокков в мазке. Слизь не патологична, но вместе с кокками свидетельствует о развитии кольпита или дисбактериоза. Неспецифический кольпит возникает при гормональном дисбалансе, лечение должно быть направлено на коррекцию гормонального фона. Женщинам в возрасте и при климаксе показаны препараты с содержанием эстрогена.

Кокковая флора при беременности опасна, приводит к развитию воспаления и становится опасной при отсутствии лечения, продвигается вверх, к матке развитие патологии может навредить плоду, лечение назначит врач. Для малыша оно должно быть максимально безопасным.

Как не допустить развитие кокковой флоры?

Микрофлора во влагалище будет в норме, если вести здоровый образ жизни, избегать стрессов, соблюдать интимную гигиену, пользоваться презервативами при случайном сексе.

Если поставлен диагноз — кокковая флора, лечение должно быть своевременным. Микробы чувствительны ко многим лекарствам, поэтому самолечение недопустимо. Назначит препараты только врач на основании результатов мазка. Если инфекцию не лечить, то заболевание переходит в хроническую форму, поражаются детородные органы, развивается бесплодие.

Интересное видео:

Посетить врача-гинеколога нужно обязательно при появлении выделений, иных неприятных симптомов: зуда, жжения. Сдавать мазок желательно регулярно, не реже 1-2 раза в год.

Кокковая флора приводит к дисбалансу во влагалище. Нормализовать флору – основное направление в лечении, профилактика возможных рецидивов в дальнейшем.

КТО СКАЗАЛ, ЧТО ВЫЛЕЧИТЬ БЕСПЛОДИЕ ТЯЖЕЛО?

• Вы давно хотите зачать ребенка?
• Много способов перепробовано, но ничего не помогает…
• Диагностировали тонкий эндометрий…
• К тому же, рекомендованные лекарства почему-то не эффективны в Вашем случае…
• И сейчас Вы готовы воспользоваться любой возможностью, которая подарит Вам долгожданного малыша!

Микрофлора влагалища здоровой женщины представлена различными видами бактерий: полезными и условно-патогенными. В норме они находятся в определенном соотношении.

Если по какой-либо причине этот баланс нарушается, риск развития мочеполовых инфекций у женщины возрастает. Обильная кокковая флора часто наблюдается в результатах гинекологического мазка именно при таком дисбалансе.

• Показать всё

  1. Состав нормальной микрофлоры влагалища

  Золотым стандартом диагностики в гинекологии является исследование мазка, взятого из заднего свода влагалища и цервикального канала. В норме могут быть обнаружены:

  1. 1 Ацидофильные палочки Додерляйна (лактобактерии). В норме их количество должно составлять не менее 85-95% от всей флоры или 10 6 -10 8 копий в образце.
  2. 2 Бифидобактерии (около 10%).
  3. 3 Пептострептококки, эубактерии, превотеллы, бактероиды, фузобактерии и другие анаэробные бактерии (5%).
  4. 4 Другие кокки и грибы (в малом количестве).
  5. 5 Эпителий (немного, его количество зависит от фазы менструального цикла).
  6. 6 Лейкоциты (до 10 клеток).

  Такое соотношение микроорганизмов способно длительно поддерживать слабокислую среду, позволяет бороться с патогенными бактериями, обеспечивает естественное увлажнение и местный иммунитет. Состояние микрофлоры влагалища оценивается с помощью лабораторных методов и имеет свою условную классификацию.

  2. Степени чистоты влагалища

  Понятие о степенях чистоты было введено для того, чтобы своевременно выявить женщин из группы риска по воспалительным заболеваниям половых органов (вагинит, цервицит, эндометрит и так далее). Об этом подробнее можно прочитать в другой нашей статье (). Их выделяют на основании результатов :

  1. 1 Первая степень (второе название — нормоценоз): кислая среда. Нормальное количество лактобактерий, немного клеток эпителия, кокки отсутствуют. Встречается редко, как правило, наблюдается сразу после лечения, применения антибиотиков.
  2. 2 Вторая степень: кислая среда. Число лактобактерий несколько снижено, появляются лейкоциты (до 10) и мелкие диплококки. Количество кокков незначительное (один или два плюса).
  3. 3 Третья степень: среда становится слабокислой или щелочной. Количество палочек Додерляйна значительно ниже нормы, много эпителия, лейкоциты 10-30, кокковая или бациллярная флора преобладает, может обнаруживаться мицелий грибков. Это состояние и называют дисбиозом (дисбактериозом). Таким женщинам необходимо наблюдаться и вовремя получать лечение.
  4. 4 Четвёртая степень: щелочная среда. Лактобациллы могут вовсе отсутствовать, большое количество клеток эпителия, лейкоцитов (выше нормы), много кокков или других патогенных бактерий. Эта степень соответствует вагиниту, следовательно, лечение женщины обязательно.

  По мере сдвига pH в щелочную сторону меняется качество и количество флоры. Постепенно уменьшается уровень ацидофильных палочек, размножаются кокки, затем присоединяются грибы и другие бактерии.

  Щелочная среда губительна для палочек Додерляйна, что приводит к развитию .

  Стоит отметить, что в нормальных мазках могут встречаться следующие микроорганизмы: гемолитический стрептококк, золотистый, эпидермальный и сапрофитный стафилококк, пептококки, микрококки, зелёный стрептококк и другие. Все они в небольшом количестве не представляют угрозы для здоровья и являются условно-патогенными представителями влагалищной флоры.

  При 3-4 степени чистоты влагалища чаще всего можно обнаружить следующие виды кокков:

  1. 1 Стрептококки. Как уже говорилось выше, эти микроорганизмы допускаются в небольшом количестве, но усиленное их размножение приводит к возникновению воспалительного процесса — вагиниту.
  2. 2 Энтерококк фекальный. Часто встречается в кишечнике, при попадании в мочеполовые пути способен вызывать цистит или кольпит. Обнаружение его в мазках в большом количестве говорит о нарушении правил интимной гигиены, в том числе и во время секса.
  3. 3 Стафилококк – условно-патогенный микроорганизм, в норме обитающий на коже. При усиленном его размножении способен вызвать серьёзное воспаление с поражением наружных и внутренних половых органов.
  4. 4 встречается при с нарушением нормального состава микрофлоры слизистой.

  Существуют и другие кокки, они обычно вызывают .

  Важно! Если в гинекологическом мазке выявлен золотистый стафилококк, то есть вероятность его обнаружения и на слизистых верхних дыхательных путей (ротоглотка, полость носа).

  3. Причины появления кокков в гинекологическом мазке

  Кокковая флора в мазке у женщин может наблюдаться по нескольким причинам:

  • Несоблюдение женщиной правил личной гигиены. Сюда можно отнести неправильный и нерегулярный уход за половыми органами, редкая смена нижнего белья, постоянное использование ежедневных прокладок, применение щелочного мыла.
  • Длительное бесконтрольное употребление антибиотиков.
  • Частая смена половых партнёров, отказ от барьерных методов контрацепции, неправильное чередование анального, орального и вагинального секса в пределах одного полового акта, несоблюдение правил гигиены секса.
  • Злоупотребление спринцеваниями, особенно с антисептиками (вымывание нормальной микрофлоры).
  • Начало сексуальной жизни до 15 лет, отсутствие грамотности в плане интимной гигиены.
  • Гормональные изменения у женщин в период менопаузы, при беременности, нарушениях менструального цикла.
  • Общие соматические заболевания, хронические инфекции, прием глюкокортикоидов, которые ослабляют иммунитет.
  • Механическое повреждение слизистой оболочки (нарушение естественной барьерной функции).

  4. Какие симптомы могут наблюдаться?

  Активное размножение кокковой флоры рано или поздно приведёт к появлению клинических симптомов заболевания. Признаки воспалительного процесса во влагалище неспецифичны, то есть по ним нельзя определить, какие именно кокки размножаются в половых путях.

  Изменение состава микрофлоры женщина может заподозрить по следующим симптомам:

  • — эти симптомы могут отсутствовать.
  • Изменение характера (жёлтые, белые, серые или зеленоватые, обильные, густые).
  • во время полового акта и в нижних отделах живота.
  • , но может и отсутствовать.

  Симптомы кольпита достаточно яркие, не заметить их невозможно. Если игнорировать признаки заболевания, то инфекция может привести к следующим осложнениям:

  1. 1 Неспецифический цервицит (воспаление слизистой оболочки шейки матки).
  2. 2 , (появляются при снижении местного или общего иммунитета).
  3. 3 , часто развиваются на фоне , имеют хроническое течение с частыми рецидивами. Они связаны с половым актом, при котором происходит занос флоры из половых путей в уретру.
  4. 4 Присоединение патогенной флоры ( ,). Нарушение микрофлоры способствует при наличии инфицированного полового партнера.
  5. 5 Осложнения нормальной беременности.

  5. Мазки во время беременности

  В последнее время число воспалительных заболеваний и дисбиоза половых органов у беременных женщин увеличивается.

  Это может быть связано с бесконтрольным приемом некоторых антибиотиков, гормонов (контрацепция перед планированием или для лечения бесплодия), неправильным питанием, образом жизни, снижением иммунитета. Появление кокковой флоры в мазках у беременных резко повышает вероятность присоединения патогенной флоры, чему способствуют:

  • Изменение гормонального фона.
  • Ослабление местного иммунитета на фоне вынашивания ребёнка.

  Активное размножение условно-патогенных бактерий влечёт за собой развитие воспаления слизистой влагалища, шейки матки, мочевого пузыря. Опасность их заключается в повышении риска внутриутробной инфекции с задержкой развития плода, невынашивания и других осложнений.

  6. Методы диагностики

  Выявление кокков во влагалище у женщин возможно с помощью трех лабораторных анализов: , теста «Фемофлор» в модификации и бакпосева.

  Чаще всего у женщин используется простой мазок. Забор материала для исследования проводится из 2 или 3 точек: слизистая заднего свода влагалища, шейки матки и иногда уретры.

  Перед взятием материала не следует спринцеваться, применять свечи с антисептиками, принимать антибиотики, заниматься сексом, так как результат будет искажён.

  Биоматериал наносится на стерильные стёкла и изучается под микроскопом. При необходимости делается посев на питательные среды с определением чувствительности к антибиотикам.

  Иногда исследования лишь мазков на флору бывает недостаточно для постановки диагноза, поэтому прибегают к дополнительным обследованиям (Фемофлор, ПЦР в режиме реального времени, УЗИ, PAP-тест, кольпоскопия и др.).

  7. Препараты для лечения

  Лечение зависит от характера выявленной микрофлоры, симптомов заболевания и общего состояния женщины. При обнаружении большого количества кокков и лейкоцитов в мазке показана местная терапия в виде вагинальных свечей, овулей и капсул:

  1. 1 Гексикон (хлоргексидин в виде свечей).
  2. 2 Флуомизин (деквалиния хлорид).
  3. 3 Тержинан, Полижинакс.
  4. 4 Клиндамицин.
  5. 5 Макмирор (нифурантел).
  6. 6 Нео-Пенотран.
  7. 7 Бетадин (сейчас используется все реже, часто вызывает неприятные ощущения, зуд, жжение).
  8. 8 Местные антисептики в растворах — Мирамистин, Хлоргексидин.

  При тяжелом воспалительном процессе назначаются системные антибиотики: цефтриаксон, цефиксим, амоксиклав и др.

  Дополнительно могут быть назначены средства для восстановления нормальной вагинальной микрофлоры. Полноценных исследований по их применению не проводилось, однако этот вопрос активно изучается. Пробиотики не показаны при молочнице, так как могут спровоцировать ее рецидив.

  Местные пробиотики в виде вагинальных свечей или таблеток:

  1. 1 Вагинорм-С с аскорбиновой кислотой закисляет среду влагалища и нормализует состав микрофлоры, используют по 1 таблетке вагинально перед сном 6 дней.
  2. 2 Ацилакт с живыми ацидофильными бактериями по 1 свече 2 раза за день 7-10 дней.
  3. 3 Лактонорм по 1 вагинальной капсуле 2 раза в день 7 дней.

  После лечения повторно берутся мазки для контроля эффективности терапии. При отсутствии эффекта назначаются альтернативные схемы или продлевается основной курс антибиотиков в виде вагинальных форм.

  Лечиться можно амбулаторно, в домашних условиях. Из народных средств могут быть рекомендованы сидячие ванночки с ромашкой, календулой, раствором фурацилина.

  8. Профилактика

  Для предупреждения нарушений баланса микрофлоры половых путей нужно по возможности устранить все провоцирующие факторы:

  • Устранить гормональный дисбаланс (ЗГТ при климаксе, оральные контрацептивы по показаниям).
  • Соблюдать ежедневную интимную гигиену, а также во время менструации и секса. Отказаться от спринцеваний без назначения врача.
  • Использовать презервативы.
  • Вести здоровый образ жизни, быть активной, заниматься спортом или лечебной гимнастикой, правильно питаться, избегать частого употребления антибиотиков, беречь свой организм от инфекций.
  • Одним из способов профилактики также является регулярное посещение гинеколога и лечение хронических заболеваний не только половой системы, но и других органов.

U (0-1), V(0-1-2),C (3-4). п…

Выберите клинику из списка

Все клиники

Гинекологическое отделение

Центр вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО)

Родовое отделение

Клиника педиатрии

Клиника терапии

Клиника стоматологии, имплантологии и челюстно-лицевой хирургии

Клиника кардиологии и сердечно-сосудистой хирургии

Клиника неврологии и нейрохирургии

Клиника хирургии

Клиника травматологии и ортопедии

Клиника урологии

Клиника онкологии

Клиника оториноларингологии

Клиника офтальмологии и микрохирургии глаза

Клиника пластической и реконструктивной хирургии

Лабораторная служба

     Лаборатория медицинской генетики

     Клинико-диагностическая лаборатория

Клиника лучевой диагностики

Клиника восстановительного лечения

Медицинская помощь на дому

Мелкая палочка и кокки в мазке — Вопрос гинекологу

Если вы не нашли нужной информации среди ответов на этот вопрос, или же ваша проблема немного отличается от представленной, попробуйте задать дополнительный вопрос врачу на этой же странице, если он будет по теме основного вопроса. Вы также можете задать новый вопрос, и через некоторое время наши врачи на него ответят. Это бесплатно. Также можете поискать нужную информацию в похожих вопросах на этой странице или через страницу поиска по сайту. Мы будем очень благодарны, если Вы порекомендуете нас своим друзьям в социальных сетях.

Медпортал 03online.com осуществляет медконсультации в режиме переписки с врачами на сайте. Здесь вы получаете ответы от реальных практикующих специалистов в своей области. В настоящий момент на сайте можно получить консультацию по 71 направлению: специалиста COVID-19, аллерголога, анестезиолога-реаниматолога, венеролога, гастроэнтеролога, гематолога, генетика, гепатолога, гериатра, гинеколога, гинеколога-эндокринолога, гомеопата, дерматолога, детского гастроэнтеролога, детского гинеколога, детского дерматолога, детского инфекциониста, детского кардиолога, детского лора, детского невролога, детского нефролога, детского офтальмолога, детского психолога, детского пульмонолога, детского ревматолога, детского уролога, детского хирурга, детского эндокринолога, дефектолога, диетолога, иммунолога, инфекциониста, кардиолога, клинического психолога, косметолога, логопеда, лора, маммолога, медицинского юриста, нарколога, невропатолога, нейрохирурга, неонатолога, нефролога, нутрициолога, онколога, онкоуролога, ортопеда-травматолога, офтальмолога, паразитолога, педиатра, пластического хирурга, проктолога, психиатра, психолога, пульмонолога, ревматолога, рентгенолога, репродуктолога, сексолога-андролога, стоматолога, трихолога, уролога, фармацевта, физиотерапевта, фитотерапевта, флеболога, фтизиатра, хирурга, эндокринолога.

Мы отвечаем на 97.46% вопросов.

Оставайтесь с нами и будьте здоровы!

Дифференциальные методы окрашивания — Микробиология: лабораторный опыт

Просмотр бактериальных клеток

Микроскоп — очень важный инструмент в микробиологии, но есть ограничения, когда дело доходит до его использования для наблюдения за клетками в целом и бактериальными клетками в частности. Двумя наиболее важными проблемами являются разрешение и контраст. Разрешение — это ограничение, с которым мы ничего не можем поделать, поскольку большинство бактериальных клеток уже приблизились к пределу разрешения большинства световых микроскопов.Тем не менее, контраст можно улучшить либо с помощью оптической системы другого типа, например, фазового контраста или микроскопа с дифференциальным интерференционным контрастом, либо путем окрашивания клеток (или фона) хромогенным красителем, который не только добавляет контраст, но и дает им тоже цвет.

В микробиологии используется множество различных красителей и процедур окрашивания. Некоторые включают одно пятно и всего несколько шагов, в то время как другие используют несколько пятен и более сложную процедуру. Прежде чем вы сможете начать процедуру окрашивания, клетки должны быть закреплены (размазаны) и зафиксированы на предметном стекле.

Бактериальный мазок — это просто небольшое количество культуры, растекающееся очень тонкой пленкой на поверхности предметного стекла. Чтобы предотвратить вымывание бактерий во время этапов окрашивания, мазок может быть химически или физически «прикреплен» к поверхности предметного стекла. Тепловая фиксация — это простой и эффективный метод, который достигается путем кратковременного пропускания предметного стекла через пламя горелки Бунзена, в результате чего биологический материал становится более или менее прочно прикрепленным к поверхности стекла.

Термофиксированные мазки готовы к окрашиванию. При простом окрашивании в мазок добавляются красители, которые либо притягиваются зарядом (катионный краситель, такой как метиленовый синий или кристаллический фиолетовый), либо отталкиваются зарядом (анионный краситель, такой как эозин или тушь). Катионные красители связывают бактериальные клетки, что хорошо видно на ярком фоне. Анионные красители отталкиваются клетками, поэтому клетки становятся яркими на окрашенном фоне. Примеры того и другого см. На рисунках 1 и 2.

Рисунок 1. Отрицательное окрашивание Cyptococcus neoformans , инкапсулированных дрожжей. Рисунок 2. Положительное окрашивание на Staphylococcus aureus.

Вероятно, наиболее важной особенностью, которая становится очевидной при окрашивании бактериальных клеток, является их клеточная морфология (не путать с морфологией колоний, которая представляет собой появление бактериальных колоний на чашке с агаром). Большинство гетеротрофных и культивируемых бактерий имеют несколько основных форм: сферические клетки (кокки / кокки), палочковидные клетки (палочки / бациллы) или палочковидные клетки с изгибами или изгибами (вибрионы и спириллы соответственно).Существует большее разнообразие форм среди архей и других бактерий, встречающихся в экосистемах, отличных от человеческого тела.

Часто бактерии создают определенные структуры клеток, которые образуются в результате бинарного деления бактериями во время их размножения. Договоренности особенно очевидны с неподвижными бактериями, потому что клетки имеют тенденцию оставаться вместе после завершения процесса деления. И форма, и расположение клеток являются характеристиками, которые можно использовать для различения бактерий.Наиболее часто встречающиеся формы бактерий (кокки и бациллы) и их возможное расположение показаны на рисунках 3 и 4.

Рисунок 3. Возможное расположение бактериальных клеток для кокков. Рисунок 4. Возможное расположение бактериальных клеток для бацилл.

Дифференциальные методы окрашивания

В микробиологии методы дифференциального окрашивания используются чаще, чем простые окрашивания, как средство сбора информации о бактериях. Методы дифференциального окрашивания, которые обычно требуют более одного окрашивания и нескольких этапов, называются таковыми, потому что они позволяют дифференцировать типы клеток или клеточные структуры.Самым важным из них является окраска по Граму. Другие методы дифференциального окрашивания включают окрашивание эндоспор (для выявления бактерий, образующих эндоспоры), кислотостойкое окрашивание (для отличия видов Mycobacterium от других бактерий), метахроматическое окрашивание для выявления гранул, накапливающих фосфат, и окрашивание капсул (для идентификации инкапсулированные бактерии). Мы будем выполнять процедуры окрашивания по Граму и эндоспор в лаборатории и просматривать подготовленные слайды, которые выделяют некоторые другие клеточные структуры, присутствующие в некоторых бактериях.

Краска по грамму

Рисунок 5. Бактерии, окрашенные по Граму.

В 1884 году врач Ганс Кристиан Грам изучал этиологию (причину) респираторных заболеваний, таких как пневмония. Он разработал процедуру окрашивания, которая позволила ему идентифицировать бактерии в легочной ткани, взятой у умерших пациентов, как этиологический агент фатальной пневмонии. Хотя метод окрашивания по Граму мало помог в лечении болезни, он значительно упростил диагностику причины смерти человека при вскрытии.Сегодня мы используем технику окрашивания по Граму, чтобы помочь в идентификации бактерий, начиная с предварительной классификации на одну из двух групп: грамположительных или грамотрицательных .

Дифференциальный характер окраски по Граму основан на способности некоторых бактериальных клеток сохранять первичное окрашивание (кристаллический фиолетовый), сопротивляясь процессу обесцвечивания. Окрашивание по Граму включает четыре этапа. Сначала клетки окрашивают кристаллическим фиолетовым с последующим добавлением фиксирующего агента для окрашивания (йода).Затем применяется спирт, который выборочно удаляет пятно только с грамотрицательных клеток. Наконец, добавляется вторичный краситель, сафранин, который окрашивает обесцвеченные клетки в розовый цвет.

Хотя в то время Грам не знал этого, основное различие между этими двумя типами бактериальных клеток — это их клеточные стенки. Стенки грамотрицательных клеток имеют внешнюю мембрану (также называемую оболочкой), которая растворяется во время мытья спиртом. Это позволяет красителю кристаллического фиолетового ускользнуть. Только обесцвеченные клетки поглощают розовый краситель сафранин, что объясняет разницу в цвете между двумя типами клеток.По завершении процедуры окрашивания по Граму грамположительные клетки выглядят пурпурными, а грамотрицательные — розовыми.

При интерпретации мазка, окрашенного по Граму, необходимо также описать морфологию (форму) клеток и их расположение. На рисунке 5 представлены два различных типа бактерий, которые можно различить по реакции окрашивания по Граму, а также по их форме и расположению. Ниже опишите эти характеристики для обеих бактерий:

	Грамположительные бактерии:	Грамотрицательные бактерии:
Морфология
Расположение

Кислотостойкое пятно

Некоторые бактерии производят воскообразное вещество миколиевую кислоту , когда они конструируют свои клеточные стенки.Миколиновая кислота действует как барьер, защищающий клетки от дегидратации, а также от фагоцитоза клетками иммунной системы хозяина. Этот восковой барьер также предотвращает проникновение пятен в клетку, поэтому окраска по Граму не работает с микобактериями, такими как Mycobacterium , которые являются патогенами людей и животных. Для этих бактерий используется метод окрашивания кислоты — fast .

Рисунок 6. Кислотоустойчивые бациллы в мокроте.

Для проведения кислотостойкого окрашивания термофиксированный мазок заливают основным красителем карбол фуксином, а предметное стекло нагревают на водяной бане с паром.Тепло «плавит» восковую клеточную стенку и позволяет клеткам поглощать краситель. Затем слайду дают остыть и добавляют раствор кислоты и спирта в качестве обесцвечивающего средства. Клетки, которые являются «кислотоустойчивыми» из-за миколовой кислоты в их клеточной стенке, сопротивляются обесцвечиванию и сохраняют первичное окрашивание. Все остальные типы клеток обесцвечиваются. Затем метиленовый синий используется в качестве контрастного красителя. В конце концов, кислотоустойчивые бактерии (КУБ) будут окрашены в ярко-розовый цвет, а все другие типы клеток станут синими.

Методы окрашивания для выделения определенных клеточных структур

Капсула : полисахаридная слизь, окружающая некоторые виды бактерий и несколько типов эукариотических микробов, лучше всего визуализируется при отрицательном окрашивании клеток. В этом методе бактерии сначала смешиваются с пятном, а затем капля смеси распределяется по поверхности предметного стекла в виде тонкой пленки. При использовании этого метода капсулы выглядят как прозрачный слой вокруг бактериальных клеток с темным фоном.

Метахроматические гранулы или другие внутрицитоплазматические тельца : Некоторые бактерии могут содержать накопительные тельца, которые могут окрашиваться. Одним из примеров является грамположительная палочка Corynebacterium , которая накапливает фосфат в структурах, называемых «волютин», или метахроматических гранулах, находящихся внутри клеточной мембраны. Для визуализации внутрицитоплазматических тел у бактерий используются различные методы окрашивания, которые часто дают ключ к идентификации при наблюдении в клетках.

Эндоспорное пятно

Эндоспоры — это спящие формы живых бактерий, и их не следует путать с репродуктивными спорами, продуцируемыми грибами. Эти структуры производятся несколькими видами грамположительных бактерий, почти всеми бациллами, в ответ на неблагоприятные условия окружающей среды. Две распространенные бактерии, продуцирующие эндоспоры, — это Bacillus или Clostridum . Оба живут в основном в почве и как симбионты растений и животных и производят эндоспоры, чтобы выжить в быстро и часто меняющейся среде.

Процесс эндоспоруляции (образование эндоспор) включает несколько этапов. После того, как бактериальная клетка реплицирует свою ДНК, образуются слои пептидогликана и белка, окружающие генетический материал. После полного формирования эндоспора высвобождается из клетки и может бездействовать в течение нескольких дней, недель или лет. Когда преобладают более благоприятные условия окружающей среды, эндоспоры прорастают и возвращаются к активной работе в качестве вегетативных клеток.

Зрелые эндоспоры обладают высокой устойчивостью к условиям окружающей среды, таким как тепло и химические вещества, что позволяет бактериям выжить в течение очень длительного времени.Эндоспоры, образовавшиеся миллионы лет назад, были успешно возвращены к жизни, просто обеспечив их водой и пищей.

Поскольку оболочка эндоспор очень устойчива к окрашиванию, был разработан специальный метод, чтобы их было легче увидеть в светлопольном микроскопе. Этот метод, получивший название «краситель эндоспор » , использует либо тепло, либо длительное время воздействия, чтобы побудить эндоспоры принять первичное пятно, обычно водорастворимый краситель, такой как малахитовый зеленый, поскольку эндоспоры проницаемы для воды.После этапа обесцвечивания, который удаляет краситель из вегетативных клеток в мазке, наносится контрастирующий сафранин для обеспечения цвета и контраста. При окрашивании этим методом эндоспоры становятся зелеными, а вегетативные клетки окрашиваются в розовый цвет, как показано на Рисунке 7.

Рисунок 7. Бактериальные клетки с эндоспорами, окрашенные методом окраски эндоспор. Рисунок 8. Бациллы с эндоспорами, просматриваемые с помощью фазово-контрастной микроскопии.

Хотя сами эндоспоры устойчивы к методу окрашивания по Граму, бактериальные клетки, захваченные в процессе создания этих структур, могут быть окрашены.В этом случае эндоспоры выглядят как четкие овальные или сферические области внутри окрашенной клетки. Эндоспоры также можно непосредственно наблюдать в клетках с помощью фазово-контрастной микроскопии, как показано на Рисунке 8.

Поскольку многие методы дифференциального окрашивания требуют нескольких этапов и длительного времени, мы не будем выполнять все методы дифференциального окрашивания, описанные выше.

Предварительно окрашенные слайды будут использоваться для визуализации бактериальных капсул, метахроматических гранул и кислотоустойчивых бацилл.Возьмите по одному слайду каждой из трех бактерий, перечисленных в таблице ниже. Просматривая эти слайды, обращайте внимание на «выделенные» структуры. У вашего изолята из окружающей среды может быть одна или несколько из этих клеточных функций, и умение распознавать их поможет в идентификации. Все это следует рассматривать с помощью масляной иммерсионной линзы объектива.

Бактерии	Пятно	Описание или эскиз ячеек с указанным признаком
Flavobacterium capsulatum	Капсульное пятно
Corynebacterium diphtheriae	Метиленовый синий (метахроматические гранулы)
Mycobacterium tuberculosis	Кислотостойкое пятно

Пятно по грамму

Все процедуры окрашивания следует проводить над раковиной.Будет продемонстрирована процедура окрашивания по Граму, а обзор представлен в таблице 1.

Таблица 1. Этапы процедуры окрашивания по Граму.
Шаг	Процедура	Результат
Первичная окраска (кристально-фиолетовый)	Добавьте несколько капель кристаллического фиолетового в мазок и оставьте на 1 минуту. Промойте предметное стекло водой.	И грамположительные, и грамотрицательные клетки будут окрашены в пурпурный цвет кристаллическим фиолетовым красителем.
Протрава (йод)	Добавьте несколько капель йода в мазок и оставьте на 1 минуту. Промойте предметное стекло водой.	Йод «устанавливает» кристаллический фиолетовый цвет, поэтому оба типа бактерий останутся фиолетовыми.
Обесцвечивание (этанол)	Добавьте капли этанола одна на a время , пока сток не станет прозрачным.Промойте предметное стекло водой.	Грамположительные клетки сопротивляются обесцвечиванию и остаются пурпурными. Краситель высвобождается из грамотрицательных клеток.
Контрастное пятно (сафранин)	Добавьте несколько капель сафранина в мазок и оставьте на одну минуту. Промойте предметное стекло водой и просушите салфеткой.	Грамотрицательные клетки будут окрашены сафранином в розовый цвет. Этот краситель не действует на грамположительные клетки, которые остаются фиолетовыми.

Волонтер из вашего лабораторного стола должен получить культуры бактерий, которые вы будете использовать в этой лаборатории, в соответствии с указаниями вашего инструктора.Одна из культур будет грамположительной бактерией, а другая — грамотрицательной. Ниже напишите названия бактерий, которые вы будете использовать, вместе с BSL для каждой культуры:

__________________________________________________________________________________

Возьмите два предметных стекла и приготовьте мазок каждой из двух бактериальных культур, по одному на предметное стекло, как показано. Дайте ПОЛНОСТЬЮ высохнуть на воздухе и закрепите при нагревании. Окрашивайте оба мазка методом окраски по Граму.Наблюдайте за предметными стеклами с помощью светового микроскопа при увеличении в 1000 раз и запишите свои наблюдения в таблице ниже.

Название культуры	Реакция окрашивания по Граму	Морфология клетки	Расположение

Пятно по Граму «Заключительный осмотр»: приготовьте мазок, содержащий смесь грамположительных И грамотрицательных бактерий, добавив небольшое количество каждой бактерии в одну каплю воды на предметном стекле.Тепло зафиксируйте мазок и окрасите его по Граму. Вы должны быть в состоянии определить реакцию окрашивания по Граму, клеточную морфологию и расположение ОБЕИХ бактерий в этом смешанном мазке. Ваш преподаватель может попросить показать этот слайд и предложить конструктивный комментарий.

Эндоспорное пятно

Лишь несколько родов бактерий продуцируют эндоспоры, и почти все они являются грамположительными бациллами. Наиболее заметными являются виды Bacillus и Clostridium , которые естественным образом обитают в почве и являются обычными загрязняющими веществами на поверхности.Рост Clostridium spp. обычно ограничивается анаэробной средой; Bacillus spp. может расти как в аэробных, так и в анаэробных условиях. Эндоспорообразующие бактерии отличаются от других групп грамположительных бацилл и различаются по их эндоспорам.

Обзор процедуры окрашивания эндоспор представлен в таблице 2.

Таблица 2. Этапы процедуры окрашивания эндоспор.
Шаг	Процедура	Результат
Первичная морилка (малахитовый зеленый)	Добавьте несколько капель малахитового зеленого в мазок и оставьте на 10 минут.Если пятно начинает высыхать, добавьте дополнительные капли.	Вегетативные клетки немедленно поглощают первичное пятно. Эндоспоры устойчивы к окрашиванию, но со временем впитывают краситель.
Обесцвечивание (вода)	Промойте предметное стекло под слабой струей воды в течение 10-15 секунд.	После окрашивания эндоспоры остаются зелеными. Тщательное ополаскивание водой обесцвечивает вегетативные клетки.
Контрастное пятно (сафранин)	Добавьте несколько капель сафранина в мазок и оставьте на 1 минуту.Промойте предметное стекло и промокните насухо.	Обесцвеченные вегетативные клетки принимают контрастное пятно и становятся розовыми; эндоспоры светло-зеленые.

После окрашивания эндоспоры обычно выглядят как светло-зеленые овальные или сферические структуры, которые можно увидеть внутри или за пределами вегетативных клеток, которые выглядят розовыми.

Форма и расположение эндоспор внутри бактериальных клеток, а также то, расширяет ли спорангий (D) или не расширяет (ND) стороны клетки, являются важными характеристиками, которые помогают в дифференциации между видами (см. Рисунок 9) .

Рисунок 9

1. Овальный, центральный, не растянутый (ND)
2. Овальный, концевой, ND (и параспоральный кристалл)
3. Овальный, концевой, растянутый (D)
4. Овальный, центральный, D
5. Сферический, концевой, D
6. Овальный, боковой, D

Эндоспоры довольно устойчивы к большинству процедур окрашивания; однако в мазках с обычным окрашиванием они могут быть видны как «очертания» с чистым пространством внутри. Если вы наблюдаете «очертания» или то, что кажется «призраками» клеток в мазке, окрашенном по Граму, грамположительных бацилл, то также следует выполнить окрашивание эндоспор, чтобы подтвердить наличие или отсутствие эндоспор.

Волонтер из вашего лабораторного стола должен получить бактериальные культуры для окрашивания эндоспор в соответствии с указаниями вашего инструктора. Обратите внимание, что все это будут виды Bacillus . Приготовьте мазки и прокрасьте каждый, используя технику окрашивания эндоспор. Посмотрите на слайды и обратите внимание на форму и расположение эндоспоры, а также на внешний вид спорангия (опухший или не опухший) в таблице ниже:

Название культуры	Форма эндоспоры	Расположение	Спорангий

Кроме того, выберите ОДНУ из указанных выше культур и окрасите ее по Граму.Запишите свои результаты ниже в отведенных местах:

Название культуры, окрашенной по Граму: __________________________________________________

Реакция окрашивания по Граму и клеточная морфология: ______________________________________

Видны ли эндоспоры в мазке, окрашенном по Граму? _________________ Если вы видите эндоспоры, опишите, как они выглядят в препарате, окрашенном по Граму, и чем он похож и отличается от того, что вы видите в препарате, окрашенном по Граму.

2.1: Размеры, формы и расположение бактерий

Задачи обучения

1. Перечислите три основные формы бактерий.
2. Перечислите и опишите 5 различных расположений кокков.
3. Определите и дайте аббревиатуру для метрической единицы длины, называемой микрометром, и укажите средний размер бактерии в форме кокуса и бактерии в форме палочки.
4. Перечислите и опишите 2 различных вида бацилл.
5. Перечислите и опишите 3 различные спиральные формы бактерий.

Бактерии — прокариотические, одноклеточные, микроскопические организмы (были обнаружены исключения, которые могут достигать размеров, видимых невооруженным глазом. К ним относятся Epulopiscium fishelsoni , бактерии в форме бациллы, которые обычно имеют диаметр 80 микрометров (мкм). и длиной 200-600 мкм, и Thiomargarita namibiensis , сферическая бактерия диаметром от 100 до 750 мкм.)

1. обычно намного меньше, чем эукариотические клетки.
2. очень сложные, несмотря на свои небольшие размеры.Несмотря на то, что бактерии являются одноклеточными организмами, они могут общаться друг с другом посредством процесса, называемого распознаванием кворума. Таким образом, они могут функционировать как многоклеточная популяция, а не как отдельные бактерии. Это будет обсуждаться более подробно в Блоке 2.

Чтобы просмотреть красивую интерактивную иллюстрацию, сравнивающую размер клеток и микробов, см. Ресурсы по размеру и масштабированию клеток в Университете Юты.

Форма бактериальных клеток определяется в первую очередь белком MreB.MreB образует спиральную полосу — простой цитоскелет — вокруг внутренней части клетки прямо под цитоплазматической мембраной. Считается, что он определяет форму путем привлечения дополнительных белков, которые затем управляют определенным паттерном роста бактериальных клеток. Например, бактерии, имеющие форму бациллы, у которых есть инактивированный ген MreB, приобретают кокковидную форму, а кокковидные бактерии, естественно, лишены гена MreB. Большинство бактерий имеют одну из трех основных форм: кокк, палочка или палочка и спираль .

Кокк

Кокки — это бактерии сферической или овальной формы, имеющие одно из нескольких различных расположений (рис. \ (\ PageIndex {2} \). 1.1) в зависимости от их плоскостей деления.

Рисунок \ (\ PageIndex {2} \). 1.1: Расположение кокковых бактерий. изображение использовано с разрешения Марианы Руис.

а. Разделение в одной плоскости дает образование либо диплококка, либо стрептококка.

диплококк : кокки, расположенные попарно (см. Рисунок \ (\ PageIndex {2} \))

— снимок сканирующего электронного микроскопа Streptococcus pneumoniae , диплококка; любезно предоставлено CDC
— сканирующая электронная микрофотография Neisseria , диплококка; любезно предоставлено компанией Dennis Kunkel’s Microscopy

streptococcus : кокки, расположенные в цепочки (см. рисунок \ (\ PageIndex {3} \))

— снимок сканирующего электронного микроскопа стрептококка Streptococcus pyogenes ; любезно предоставлено Dennis Kunkel’s Microscopy
— просвечивающая электронная микрофотография Streptococcus с веб-страницы Рокфеллеровского университета.
— сканирующая электронная микрофотография энтерококка

б. Дивизия в двух самолетов производит тетрадную компоновку.

тетрада : кокки, расположенные в квадратах по 4 (см. Рисунок \ (\ PageIndex {4} \))

— микрофотография с помощью сканирующего электронного микроскопа Micrococcus luteus , показывающая несколько тетрад

c. Отделение в трех самолетов производит сарчиновую компоновку.

sarcina : кокки, расположенные кубиками по 8 штук (см. Рисунок \ (\ PageIndex {5} \))

d.Разделение на случайных плоскостей дает расположение стафилококка.

staphylococcus : кокки, расположенные неправильными, часто похожими на виноград гроздьями (см. Рисунок \ (\ PageIndex {6} \))

— негативное изображение Staphylococcus aureus
— сканирующая электронная микрофотография Staphylococcus aureus , стафилококк; любезно предоставлено Dennis Kunkel’s Microscopy
— Сканирующая электронная микрофотография метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus (MRSA); любезно предоставлено CDC

Средний кокк около 0.Диаметр 5-1,0 микрометра (мкм). (Микрометр равен 1/1 000 000 метра.)

Исключения из вышеперечисленных форм

Есть исключения из трех основных форм кокка, палочки и спирали. К ним относятся покрытые оболочкой, стебельчатые, нитчатые, квадратные, звездчатые, веретенообразные, лопастные, трихомообразующие и плеоморфные бактерии.

Ультрамелкие бактерии

Ультрамелкие бактерии (150 могут поместиться в одной кишечной палочке) были обнаружены в грунтовых водах, которые были пропущены через фильтр с размером пор 0.2 микрометра мкм). Они показали среднюю длину , всего 323 нанометра (нм) и среднюю ширину 242 нм . Они содержат ДНК, в среднем 42 рибосомы на бактерию, и обладают пили. Считается, что они используют эти пили для прикрепления к другим бактериям, из которых они извлекают питательные вещества. Поскольку соотношение поверхности к объему даже больше, чем у бактерий более традиционного размера, они могут быть лучше спроектированы так, чтобы поглощать дефицитные питательные вещества из более бедной питательными веществами среды.

Сводка

1. Бактерии бывают трех основных форм: кокк, палочка и спираль.
2. В зависимости от плоскостей деления форма кокка может иметь несколько различных форм: диплококк, стрептококк, тетрада, сарцина и стафилококк.
3. Бацилла может иметь форму отдельной палочки, стрептобациллы или коккобациллы.
4. Форма спирали может проявляться в нескольких формах: вибрион, спириллум и спирохета.
5. Метрическая единица измерения микрометр (1/1 000 000 или 10 ^-6 метра) используется для измерения размера бактерий.

Авторы и авторство

10 шт. Мазок кокка, грамположительные пятна — Готовые предметные стекла — 75 x 25 мм — Классная упаковка, 10 предметных стекол в кейсе для хранения — Биология и микроскопия

---

Депозит без импортных сборов и 14 долларов США.82 Доставка в РФ Подробности

• Убедитесь, что это подходит введя номер вашей модели.
• Классная упаковка из десяти подготовленных слайдов с мазком на грамположительный кокк.
• Каждый слайд имеет ширину 75 мм и длину 25 мм.
• Слайды поставляются в ящике для хранения из полистирола.
• Отлично подходит для изучения характерных размеров и сферической формы кокковых бактерий.

]]>

---

Характеристики продукта

Номер детали	BS18012-10
Размер	Упаковка из 10 шт.
Код UNSPSC	41110000

Спецификация для этого семейства продуктов

Фирменное наименование	EISCO
Вес изделия	1.60 унций
Кол-во позиций	1
Номер детали	BS18012PARENT
Код UNSPSC	41000000

---

Принцип

, процедура, применение • Microbe Online

Последнее обновление: 18 июня 2021 г.

Простое окрашивание можно использовать как быстрый и простой способ определения формы, размера и расположения клеток бактерий.В соответствии со своим названием, простое пятно — это очень простая процедура окрашивания, включающая один раствор красителя. Для окрашивания бактериальных клеток можно использовать любой основной краситель, такой как метиленовый синий, сафранин или кристаллический фиолетовый.

Эти пятна легко выделяют гидроксид-ион или поглощают ион водорода, что оставляет пятно положительно заряженным. Поскольку поверхность большинства бактериальных клеток и цитоплазмы заряжена отрицательно, эти положительно заряженные пятна легко прилипают к поверхности клетки. После окрашивания можно оценить морфологию бактериальных клеток (форму и расположение).

Процедура

Простая процедура окрашивания

Приготовление мазка

1. С помощью стерилизованной петли для посева перенесите петлю жидкой суспензии, содержащей бактерии, на предметное стекло (чистое обезжиренное микроскопическое предметное стекло) или перенесите изолированную колонию с планшета для культивирования на предметное стекло. горка с каплей воды.
2. Рассеяните бактерии на петле в капле воды на предметном стекле и распределите каплю по площади размером с монету. Это должен быть тонкий ровный мазок.
3. Дайте мазку полностью высохнуть.
4. Осторожно зафиксируйте пятно нагреванием, пропустив нижнюю часть предметного стекла через пламя горелки два или три раза. Фиксирует ячейку в слайде. Не перегревайте предметное стекло, так как это приведет к деформации бактериальных клеток.

Окрашивание

1. Покройте мазок метиленовым синим и дайте красителю остаться в мазке примерно в течение одной минуты (время окрашивания здесь не критично; где-то от 30 секунд до 2 минут должно дать приемлемое пятно, чем дольше вы оставите в нем краситель, тем темнее будет пятно).
2. Используя промывочную бутылку с дистиллированной водой, осторожно смойте излишки метиленового синего с предметного стекла, направляя легкую струю воды по поверхности предметного стекла.
3. Смойте также любое пятно, попавшее на нижнюю часть предметного стекла.
4. Снова пропитайте мазок, но на этот раз йодом. Йод закрепит пятно.
5. Вымойте лишний йод проточной водой из-под крана. Тщательно промыть. (Вы можете не упомянуть шаги 4 и 5 в некоторых учебниках)
6. Протрите заднюю часть предметного стекла и промокните окрашенную поверхность библейской бумагой или бумажным полотенцем.
7. Поместите окрашенный мазок на предметный столик микроскопа стороной для мазка вверх и сфокусируйте мазок с помощью объектива 10X.
8. Выберите область мазка, в которой клетки хорошо распределены в монослое. Отцентрируйте исследуемую область, нанесите иммерсионное масло прямо на мазок и сфокусируйте мазок под маслом с помощью объектива 100X.

Слева: кокки в скоплении; Справа: бациллы (Источник изображения: microrao.com )

Результаты

Бактериальные клетки обычно окрашиваются равномерно, и цвет клетки зависит от типа используемого красителя.Если используется метиленовый синий, некоторые гранулы внутри клеток некоторых бактерий могут быть более окрашенными, чем остальная часть клетки, что связано с присутствием различных химических веществ.

Использует

В диагностической микробиологической лаборатории обычно не используются простые методы окрашивания. Дифференциальное окрашивание, такое как окрашивание по Граму и окрашивание AFB , обычно используется для идентификации и дифференциации бактериальных изолятов. Простое окрашивание может быть полезно в следующих случаях.

1. Для дифференциации бактерий от дрожжевых клеток : при посеве эндоцервикального мазка на кровяном агаре и Staphylococcus spp, и дрожжевые клетки могут давать похожие на вид колонии в кровяном агаре (обычная ошибка для нового технолога или микробиолога с меньшим опыт). Может оказаться полезным выполнение мокрого монтажа или простое окрашивание изолятом.
2. Для предположительной идентификации бактериального изолята
   Из-за повсеместного присутствия Bacillus spp могут присутствовать в качестве контаминанта в чашках для культивирования.В некоторых случаях (например, рост в кровяном агаре , но отсутствие роста в агаре МакКонки ) определение формы бактерий (палочка или кокки) может помочь устранить изолят как возможные контаминанты (например, Bacillus spp) или дальнейший процесс как потенциальный возбудитель (кокки).

По теме

Привет, спасибо, что посетили мой блог. Я Танкешвар Ачарья. Ведение блога — моя страсть. Я работаю ассистентом. Профессор и микробиолог отделения микробиологии и иммунологии Академии наук о здоровье Патана, Непал.Если вы хотите, чтобы я писал о каких-либо сообщениях, которые вы сочли запутанными / сложными, пожалуйста, укажите в комментариях ниже.

Пятна — Ресурсный центр микробиологии

---

Подготовка мазка

Большинство бактерий не только очень маленькие, но и очень прозрачные, и их трудно рассмотреть под микроскопом без предварительного окрашивания. Вы должны прочно прикрепить бактерии к предметному стеклу, прежде чем сможете их окрасить. При подготовке предметного стекла к окрашиванию необходимо учитывать два важных момента:

1. Бактерии должны быть равномерно и слегка рассеяны.Если на слайде слишком много бактерий, они образуют большой шар, и вы не сможете увидеть морфологию отдельных клеток. Большие капли клеток также не окрашиваются должным образом и могут привести к ошибочным результатам из-за неправильного окрашивания.
2. Бактерии должны быть прочно прикреплены к предметному стеклу, чтобы они не смывались во время процедуры окрашивания. Все процедуры, которые прикрепляют бактерии к предметному стеклу, приводят к некоторым морфологическим изменениям. Клетки обычно уменьшаются в размерах и демонстрируют некоторые изменения формы и внеклеточного матрикса.

Вы будете готовить предметные стекла для окрашивания как с поверхностей бульона, так и с агара. Хотя цели одинаковы для обоих: равномерно и слегка распределенные клетки, прочно прикрепленные к поверхности предметного стекла, методы немного различаются. Окрашивание — это такое же искусство, как и наука. Несомненно, вам потребуется несколько попыток, прежде чем вы добьетесь успеха.

Материалы

• Чистые предметные стекла
• Инокуляционные петли или иглы
• Стерильная вода
• Маркировочная ручка
• Ассорти бульонных и тарелочных культур

Меры безопасности

Будьте осторожны с аэрозолями при переносе бактерий с петли на предметное стекло.Петля очень гибкая, и с нее легко избавиться от петли, полной организмов. Не думайте, что ваш организм мертв. Фиксация тепла или метанола не гарантирует гибели организма. Выбросьте готовые слайды в ведро с дезинфицирующим средством на вашей скамейке.

Общие положения

Вы стремитесь получить легкую суспензию клеток, которая оставит на вашем слайде слабый мутный осадок. На слайде много места; используй это! Лучше сначала нарисовать круг в нижней части слайда, чтобы вы знали, где искать мазок.Очень легко запутаться, на какой стороне предметного стекла находится ваш мазок. Обязательно отметьте дальний край слайда. Делайте это последовательно на одном конце слайда, чтобы лучше сориентировать слайд.

Наберитесь терпения и дайте слайду высохнуть на воздухе перед тем, как прикрепить его к слайду. Если ваше слайд мокрое и вы закрепите его нагреванием, бактерии закипят и морфология клеток будет потеряна. Если ваше слайд мокрый и закрепите его в метаноле, он, скорее всего, смоет слайд.Слишком толстый мазок, скорее всего, смоет предметное стекло независимо от метода фиксации.

Мазок из бульона

Бульонные культуры обычно легче работать, потому что клетки уже разведены в бульоне. Обязательно тщательно перемешайте культуральную пробирку, чтобы бактерии оставались в бульоне.

1. Обозначьте свой слайд. С соблюдением правил асептики перенесите полную петлю организма в центр слайда.
2. Используйте плоскую часть петли, чтобы размазать каплю бульона по слайду.Используйте спиральные круговые движения, чтобы распределить каплю. Поскольку бульон полон белка, мазок обычно остается растянутым, а не шариками на поверхности предметного стекла.
3. Отложите слайд для сушки на воздухе. Это займет как минимум несколько минут. Не торопитесь с этим шагом.

Мазок с пластины

Петлей можно убрать множество организмов. Вы можете использовать иглу для посева, чтобы перенести свой организм на предметное стекло. Обязательно используйте стерильную воду для разбавления образцов.Обычная водопроводная вода или деионизированная вода в ваших бутылях для полоскания часто заражены бактериями.

1. Обозначьте свой слайд. С соблюдением правил асептики перенесите полную петлю стерильной воды в центр предметного стекла.
   • Это служит как для разведения бактерий, так и для распространения.
2. Выберите хорошо изолированную колонию.
3. Проколите его стерильной иглой или слегка зачерпните край колонии стерильной петлей.
4. Поместите иглу / петлю в центр капли и круговыми движениями по спирали распределите бактерии на предметном стекле.
5. Отложите слайд для сушки на воздухе. Это займет как минимум несколько минут. Не торопитесь с этим шагом.

Фиксация

Процедура фиксации одинакова независимо от источника мазка, чашки или бульона. Есть два метода прикрепления бактерий к предметному стеклу: фиксация тепла или фиксация метанолом. Термофиксация используется только для организмов BSL1. Организмы, с которыми мы будем работать, относятся к BSL2, поэтому вам нужно будет использовать метод фиксации метанолом. Тепловая фиксация предметного стекла может привести к образованию аэрозолей, а в случае организмов BSL2 нам необходимо максимально предотвратить это.Фиксация метанолом вызывает меньшие изменения клеточной морфологии и не создает аэрозолей.

Пожалуйста, будьте осторожны при работе с метанолом, если вы забудете, что зафиксировали его метанолом, и ваше предметное стекло не полностью высохло, оставшийся метанол загорится.

Крепление метанола (BSL2)

1. Убедитесь, что слайд полностью высох. Установите его на стойку для окрашивания над раковиной.
2. Осторожно залейте предметное стекло 95% метанолом. Оставьте на две минуты.
3. Наклоните предметное стекло и слейте метанол.
   • Коснитесь краем предметного стекла бумажным полотенцем, чтобы удалить излишки метанола.
4. Отложите предметное стекло для просушки на воздухе перед окрашиванием.

---

Простое пятно

Простые пятна — это всего лишь: добавьте одно пятно на фиксированное предметное стекло, дайте ему отстояться, смойте, дайте высохнуть и просмотрите. Это быстрая процедура определения присутствия и морфологии бактерий в клинических образцах, таких как стул и выделения.

Метиленовый синий используется для определения морфологии веретенообразных и спирохет при инфекциях полости рта.Это также предпочтительный краситель для идентификации метахроматических гранул в Corynebacterium diphtheriae . Гранулы будут окрашивать в более глубокий синий цвет, чем у окружающих синих бактерий. Остальные виды Corynebacterium не имеют метахроматических гранул. Подойдут любые базовые красители, такие как метиленовый синий, кристаллический фиолетовый, малахитовый зеленый или сафранин.

Основные (катионные или положительно заряженные) красители связываются с отрицательно заряженными компонентами клеточной мембраны и цитоплазмы.

Материалы

• Метиленовый синий
• Сафранин
• Кристально-фиолетовый
• Малахитовый зеленый
• Стойки для окрашивания
• Ящики для микроинструментов
• Готовые предметные стекла для мазков

Общие положения

Окрашивание — это отчасти искусство, а отчасти наука. Нет никаких жестких правил для времени окрашивания и полоскания. Указанное время — это рекомендации, которые обычно работают хорошо. Вам нужно будет поэкспериментировать с тем, что работает с вашими бактериями, и с методами, которые вы используете.

Очень важно записывать в своей лабораторной книжке именно то, что вы делаете, и наблюдаемые результаты. Вы будете повторять эти окрашивания позже в семестре, и вы не хотите тратить свое время на повторное изобретение своей успешной процедуры окрашивания. Каждому участнику лабораторного стола будет полезно выбрать другое пятно, чтобы вы могли увидеть, как все они выглядят.

Простая процедура окрашивания

1. Поместите тщательно подготовленные фиксированные слайды для мазков на подставку для пятен над раковиной.
   • Делайте по одному слайду за раз.
   • Покройте мазок любым доступным вам основным красителем.
   • Достаточно краски, чтобы покрыть мазок. Пятно не должно стекать с предметного стекла.
2. Оставьте пятно на 1-5 минут.
3. Возьмитесь прищепкой за длинный конец предметного стекла, наклоните предметное стекло над раковиной и смойте пятно струей воды из бутылки для стирки.
   
   • Обязательно распылите средство над мазком и дайте ему стечь.
   • Если вы распыляете непосредственно на мазок, вы можете смыть его с предметного стекла.
   • Полощите, пока вода не станет прозрачной или не станет слегка окрашенной.
4. Коснитесь краем предметного стекла бумажным полотенцем, чтобы удалить излишки воды. Теперь вы можете дать ему высохнуть на воздухе. Или вы можете высушить его промокательной бумагой, поместив ее в книгу для промокательной бумаги и слегка надавив. Хотя этот метод быстрее, вы также можете удалить плохо прилипший мазок.
5. Просмотрите слайд под масляной иммерсией и запишите свои наблюдения в лабораторную книгу.
6. Выбросьте использованные окрашенные предметные стекла в ведро с дезинфицирующим средством в раковине.

---

Отрицательное пятно

Отрицательные пятна даже проще, чем простые пятна, потому что вам не нужно делать мазок. Капля клеток распределяется на предметном стекле и просматривается без фиксации. Пятно представляет собой суспензию углерода, содержащегося в индийских чернилах или нигрозине. Углеродные частицы заряжены отрицательно, как и клеточная мембрана. Фон выглядит черным или окрашенным в цвет сепии, а клетки остаются прозрачными, поскольку они отталкивают краситель.

Некоторые положительно заряженные тельца включения, например сера, могут окрашивать. Это окрашивание дает точную информацию о морфологии клеток и наличии капсул, поскольку клетки не фиксируются. Размер клеток кажется немного больше, потому что любые внеклеточные покрытия или выделения на внешней стороне клеточной мембраны также не окрашиваются. Отрицательные окраски полезны для быстрого определения присутствия Cryptococcus neformans , возбудителя криптококциза, в спинномозговой жидкости.Этот метод также используется при окрашивании на эндоспоры и капсулы.

Материалы

• Краситель нигрозин
• Ассорти культур

Общие положения

Так же, как и при приготовлении мазка, нужно небольшое количество организма. Если у вас слишком много организмов, вы не сможете увидеть морфологию отдельных клеток. Также важно не употреблять слишком много нигрозина. Если он будет слишком толстым, фон будет выглядеть потрескавшимся, как лужи грязи, высыхающие на солнце.Вы хотите получить светлый фильм. Ваш инструктор продемонстрирует вам эту технику.

Процедура отрицательного окрашивания

1. Обозначьте свой слайд. Если вы работаете с бульонной культурой, поместите полную петлю организмов примерно на три четверти пути с левой стороны слайда. Если вы работаете с культурой на планшете, добавьте на предметное стекло каплю стерильной воды и разведите в ней свой организм, не растекая капли.
2. Нанесите одну или две капли нигрозина на другое предметное стекло.Используйте стерилизованную петлю, чтобы набрать петлю, полную нигрозина. Тщательно перемешайте его с каплей клеток, не растекая каплю слишком сильно.

3. Возьмите правый конец слайда в правую руку; левой рукой возьмите другой слайд под углом 45 ° или меньше к первому слайду, сразу после капли нигрозина / клеток.
4. Переместите наклонный слайд назад по поверхности первого слайда, пока он не коснется только капли нигрозина и клеток. Подождите, пока капиллярный эффект протянет жидкость вдоль передней кромки наклонного предметного стекла.
5. Протолкните угловую направляющую по поверхности плоской направляющей. Большую часть нигрозина следует оставить на исходном месте. Выбросьте предметное стекло в ведро с дезинфицирующим средством.
6. Отложите окрашенное предметное стекло в сторону, чтобы оно высохло на воздухе, прежде чем наблюдать за ним в масляной ванне. Обязательно начинайте рассматривать слайд с участка с тусклым серым фоном.
7. Запишите свои наблюдения в лабораторную книгу.
8. Выбросьте использованные окрашенные предметные стекла в ведро с дезинфицирующим средством.

Особое примечание

Нигрозин очень легко снимается с предметного стекла и попадает на масляную иммерсионную линзу.Не забудьте тщательно очистить масляную линзу, когда закончите. Затем очистите его снова. После того, как он высохнет на линзе, его будет очень трудно удалить, и это ухудшит вашу способность (и других микро-студентов, использующих этот телескоп) четко видеть через линзу.

---

Пятно по грамму

Окраска по Граму — наиболее распространенная дифференциальная окраска, используемая в микробиологии. Для дифференциальных красок используется более одного красителя. Уникальные клеточные компоненты бактерий определяют, как они будут реагировать на различные красители.Процедура окрашивания по Граму практически не изменилась с момента ее разработки в 1884 году. Практически все бактерии можно разделить на две группы: грамотрицательные и грамположительные. Некоторые бактерии являются грамм-переменными. Trichomonas , Strongyloides , некоторые грибы и некоторые цисты простейших также имеют реакцию Грама. Очень маленькие бактерии или бактерии без клеточной стенки, такие как Treponema , Mycoplasma , Chlamydia или Rickettsia , не имеют грамм-реакции.Характеристика любых новых бактерий должна включать их грамм-реакцию.

Обычно дифференциальное пятно состоит из четырех компонентов; первичное пятно, протрава, закрепляющая пятно, обесцвечивающее средство для удаления основного пятна и контр-пятно. При окраске по Граму первичная окраска — кристально-фиолетовый. Это придает ячейке интенсивный фиолетовый цвет. Протравливание, йод, образует комплекс с кристаллическим фиолетовым внутри клеточной стенки. Затем ячейку промывают обесцвечивателем по Граму или 95% этанолом.Грамположительные клетки сохранят комплекс красителя и останутся пурпурными. Краситель вымывается из грамотрицательных клеток. Контркрашивание, сафранин, используется для окрашивания клеток, потерявших первичное пятно, иначе они останутся бесцветными, и вы не сможете их увидеть.

Большой комплекс йод-кристаллический фиолетовый сохраняется в клеточных стенках грамположительных клеток из-за молекулярной структуры многих слоев пептидогликана в клеточной стенке. Существует много сшитых тейхоевых кислот, и комплекс йод-краситель физически не может выйти.Кроме того, в мембране меньше липидов, и обесцвечивающий агент также не может добраться до нее. Грамотрицательные клетки имеют внешнюю мембрану и только один слой пептидогликана с большим количеством липидов. Краситель кристаллический фиолетовый легко вымывается.

Общие положения

Точность окрашивания по Граму зависит от целостности клеточной стенки бактерий. Есть множество вещей, которые могут повлиять на целостность клеточной стенки; старые клетки (т.е. культуры старше 24 часов), образец взят от кого-то, кто лечился антибиотиками, нацеленными на эту клеточную стенку, такими как пенициллин, с клетками грубо обращались или вы их фиксировали перегревом.В этих условиях грамположительные клетки будут считаться грамотрицательными. Если вы обесцвечиваете слишком долго, грамположительные клетки будут выглядеть как грамотрицательные. И наоборот, если вы недостаточно обесцвечиваете, грамположительные будут выглядеть грамположительными. Единственный способ, которым вы можете доверять своим результатам, — это всегда проводить известные грамположительные и известные грамотрицательные результаты на одном и том же слайде. Если они окрашивают так, как предполагалось, вы можете быть уверены, что результат вашего неизвестного образца надежен.

Для правильного окрашивания по Граму требуется практика.Не ожидайте, что с первой попытки получите хорошее окрашивание по Граму. Лучше всего удерживать слайд прищепкой; Ваши перчатки станут довольно психоделическими, как и все, к чему вы прикасаетесь!

Процедура окрашивания по Граму

1. Обозначьте свой слайд. Подготовьте мазки на слайде с грамотрицательным слева, неизвестным в середине и грамположительным справа.
   
   • Не забудьте поправить слайд метанолом!
2. Положите слайд на штатив для окрашивания и покройте мазки кристально-фиолетовым на 1 минуту.
   
   • Используйте ровно столько красителя, чтобы полностью покрыть мазок, но не настолько, чтобы оно стекало или капало с предметного стекла.
3. Наклоните слайд, слейте кристаллический фиолетовый цвет и ненадолго промойте водой из промывочной бутылки.
   
   • Помните, что не распыляйте непосредственно на мазки, иначе вы их смоете.
4. Залейте предметное стекло йодной протравкой на 1 минуту.
5. Наклоните предметное стекло, слейте излишки йода и аккуратно обесцвечивайте с помощью обесцвечивающего средства Грама, пока оно не станет прозрачным.
   
6. Наклоните слайд на бумажных полотенцах, чтобы удалить излишки красителя.
7. Залейте слайд сафранином на 1 минуту.
8. Наклоните предметное стекло, чтобы слить излишки сафранина, и осторожно промойте водой, пока он не станет прозрачным.
9. Дать слайду высохнуть на воздухе
10. Наблюдать при погружении в масло.
    • Грамположительный контроль должен быть фиолетовым, а грамотрицательный контроль — розовым.
11. Выбросьте использованное предметное стекло в ведро с дезинфицирующим средством.

---

Капсульный краситель (клебсиелла)

Краситель Congo Red Capsule Stain

Краситель Congo Red Capsule — это модификация отрицательного окрашивания на нигрозин, которое вы, возможно, делали ранее. Бактерии поглощают краситель конго красный, и фон окрашивается кислотным красителем фуксин. Слои капсулы или слизи из высокогидратированных полимеров исключают оба красителя. Фон станет синим, бактериальные клетки — розовыми, а прозрачные ореолы — это капсулы.

Клинически капсулы некоторых высокопатогенных бактерий (т.д .: пневмококки, Haemophilis influenzae и менингококки), можно различить с помощью антисыворотки, специфичной для этого типа капсул. Бактерии суспендируют в антисыворотке, а затем смешивают с метиленовым синим. В ходе процедуры окрашивания антисывороткой бактерии будут выглядеть синими, окруженными прозрачным ореолом, а затем окруженными тонкой синей линией там, где антисыворотка прикрепилась к капсуле.

Материалы

• Морилка Congo Red
• Кислотный фуксиновый краситель
• Кислотный спирт
• Klebsiella pneumoniae посев
• Enterobacter aerogenes Культура

Процедура окрашивания красной капсулы Конго

1. Поместите полную петлю Congo Red на горку
2. Добавьте небольшое количество вашего организма в каплю Congo Red.
   
   • Хорошо распределите суспензию микроорганизмов / красителя на предметном стекле
3. Дайте слайду полностью высохнуть на воздухе.
   
4. Зафиксируйте засохшее предметное стекло кислотным спиртом на 15 секунд.
5. Промойте дистиллированной водой и покройте предметное стекло кислотным фуксином на 1-5 минут.
6. Промойте водой и дайте высохнуть на воздухе.
7. Осмотрите слайд под масляной иммерсией.
   
   • Клетки окрашиваются в красный / розовый цвет, а капсулы выглядят как бесцветные ореолы на темно-синем фоне.

---

Эндоспорное пятно Виртца

Образование эндоспор характерно для видов Clostridum и Bacillus spp. Способность концентрироваться и покрывать свою протоплазму позволяет им выжить в неблагоприятных условиях окружающей среды, с которыми они сталкиваются в своей почвенной среде обитания. Это также позволяет спорам сопротивляться окрашиванию. «Живые» организмы легко визуализировать с помощью простых красителей и красителей по Граму.

Эндоспоры обычно обладают высокой преломляющей способностью, свет, падающий на них, отклоняется.Многие виды Bacillus имеют тела включения, которые обладают высокой рефрактильностью. Эти тельца включения могут выглядеть как эндоспоры при регулярном окрашивании. Присутствие эндоспор необходимо подтверждать с помощью красителей, специфичных для эндоспор. Наличие, характерная форма и положение эндоспор требуют специальных процедур для проникновения через слой эндоспор. Большинство пятен на эндоспоре связано с нагреванием предметных стекол, при этом они постоянно увлажняются красителем. Хотя он быстрее, он производит летучие химические вещества и представляет собой большой беспорядок.Те же результаты можно получить, оставив краситель на предметном стекле в течение 30 минут. Рекомендуется сначала запустить этот слайд и поработать над другим пятном, пока вы ждете, пока краситель проникнет в эндоспору.

Общие положения

Вы будете использовать вид Bacillus для окраски эндоспор. Форма и положение спор B. cereus очень похожи на споры B. anthracis . Bacillus не начинает образовывать споры, пока не закончится еда.Если культуры слишком молодые, вы в основном увидите только розовые палочки бактерий. Если культуры слишком старые, вы в основном увидите только маленькие зеленые овалы эндоспор. В идеале вы должны видеть зеленые овальные тела эндоспоры, окруженные розовой вегетативной бактериальной клеткой. Для получения наилучших результатов выберите образец из середины колонии с помощью прямой посевной иглы. Край колонии все еще активно растет и будет иметь мало эндоспор.

Материалы

• Малахитовое зеленое пятно (5%)
• Сафранин (0.25%) — пятно контрацептора
• Bacillus spp. тарелка

Процедура окрашивания эндоспор Wirtz

1. Сделайте мазок на Bacillus и зафиксируйте метанолом.
2. Залейте мазок малахитовым зеленым пятном.
3. Дайте пятну отстояться не менее 30 минут .
   
   • Добавьте еще пятна, если оно начнет сохнуть.
4. Промойте предметное стекло дистиллированной водой.
5. Залейте предметное стекло сафранином (0,25%) на 1-5 минут.
6. Промойте предметное стекло дистиллированной водой и дайте высохнуть на воздухе.
7. Наблюдать при погружении в масло.
   
   • Эндоспоры имеют голубой цвет, а бактериальные клетки розовые.

a Мазок, окрашенный по Граму, показывающий рост грамположительных кокков в биологических тканях …

Контекст 1

… средний возраст шести гренландских детей с CSOM составлял 12 лет (диапазон 9-15 лет), Wve из них были девушки. Средний возраст четырех детей с КОМЭ составлял 3 года (от 2 до 5 лет), двое из них были девочками.Всего у 10 детей было взято 13 образцов. Образцы были собраны с двух сторон у трех детей с КОМЭ. В таблице 1 показаны результаты исследований культуры, микроскопии и PNA-FISH. Морфологические свидетельства образования био-WIM, наблюдаемые под микроскопом, были обнаружены в Wve из шести (83%) образцов CSOM, но ни в одном из семи образцов COME. Четверо из шести (66%) детей с CSOM показали соответствие между положительными культурами S. aureus из отореи, микроскопическими значениями грамположительных кокков в биологических слоях в мазках, окрашенных по Граму, и микроскопическими значениями PNA-FISH, специфичными для видов. .aureus Xuorescence в биологических слоях в мазках, окрашенных PNA-FISH (см. рис. 1; табл. 1). Stenotrophomonas maltophilia была обнаружена в одном образце CSOM путем культивирования, а грамотрицательные палочки были подтверждены микроскопией в биоплёнке. Универсальный эубактериальный зонд PNA-FISH также оказался положительным на палочки. E. coli культивировали в последнем образце CSOM, но морфология bioWlm не была убедительно обнаружена ни при окрашивании по Граму, ни при исследовании PNA-FISH. У всех пациентов с СОМЭ были отрицательные посевы на бактерии, за исключением одного ребенка, у которого мы культивировали отрицательные коагулазы.b BioWlms S. aureus (стрелки) при оторее от пациента с CSOM, о чем свидетельствует гибридизация видоспецифической пептидной нуклеиновой кислоты Xuorescence in situ (PNA-FISH). c Трехмерное изображение после окрашивания PNA-FISH бактерий и биологических пленок (стрелки) в оторее от пациента с CSOM. Слайд исследовали с помощью конфокальной лазерной сканирующей микроскопии (CLSM) с использованием системы Zeiss LSM 510 (Carl Zeiss GmbH, Йена, Германия), оснащенной аргоновым лазером и гелий-неоновым лазером для возбуждения ксуорофоров. Смоделированные проекции Xuorescence bioWlms были созданы с использованием программного пакета IMARIS (Bitplane AG).Изображения были дополнительно обработаны для отображения с использованием программного обеспечения PhotoShop (Adobe) для стафилококков с обеих сторон. BioWlm не был морфологически распознан ни в одном из семи образцов COME двумя методами …

Контекст 2

… поскольку большие или маленькие скопления бактерий, встроенные в матрицу, теперь были продемонстрированы в большинстве верхних дыхательных путей человека. инфекционные заболевания тракта, например, COME, rAOM, холестеатомы, аденоиды при хроническом рините, хроническом тонзиллите, а также хронический синусит решетчатой ​​и верхней челюсти [12,13, [20] [21] [22].BioWlm обычно содержится в аспиратах, например, из легкие больных муковисцидозом [23]. Поэтому в настоящем исследовании была предпринята попытка найти биопсию в аспиратах из среднего уха и в биоптатах среднего уха пациентов, страдающих от CSOM или COME. Формирование BioWlm было морфологически обнаружено с помощью иммерсионной микроскопии и конфокальной лазерной сканирующей микроскопии при оторее у детей с CSOM и в биопсиях среднего уха взрослых с CSOM. Недавно с использованием методов, сопоставимых с настоящим исследованием, биологические пленки были также обнаружены в клинических образцах от пациентов с хроническими ранами и с почти таким же микроскопическим видом, как в этом исследовании (см. Рис.1, 2) [19]. Положительная корреляция наблюдалась между бактериями в культуре и бактериями, обнаруженными в биологических слоях с помощью метода PNA-FISH при оторее у детей с CSOM. Напротив, положительная корреляция между культурой S. aureus из среднего уха и видоспецифическим PNA-FISH для S. aureus в биоптатах среднего уха наблюдалась только у двух пациентов Wve с CSOM. Биопсии среднего уха, использованные в этом исследовании, хранились в биобанке перед анализом, и это могло вызвать систематическую ошибку при обнаружении видоспецифичных бактерий.Chole и Faddis [12] представили на холестеатомах доказательства того, что несколько видов бактерий могут расти в биологических слоях в виде смешанных бактериальных консорциумов. Наши результаты подтверждают это Wnding, поскольку зонд PNA-FISH на эубактерии был положительным у четырех пациентов Wve, у которых культивировали S. aureus. Однако доказательства возможной связи между причиной и следствием по-прежнему отсутствуют в отношении присутствия биопсии при оторее и при биопсиях слизистой оболочки среднего уха от пациентов с CSOM. BioWlms не были обнаружены морфологически в семи образцах клея от четырех детей с COME.Hall-Stoodley с соавторами [13] с помощью конфокальной лазерной сканирующей микроскопии обнаружили свидетельство биопсии слизистой оболочки в 92% биопсий среднего уха у 26 детей, которым была установлена ​​тимпаностомическая трубка по поводу COME и rAOM. Шесть из 27 эВузий среднего уха были положительными на бактериальный патоген, а 24 из 24 (100%) были положительными по ПЦР по крайней мере для одного патогена. В нашем исследовании у нас не было этического разрешения на получение экспериментальной биопсии среднего уха у гренландских детей с КОМЭ, и мы не проводили ПЦР-анализ на потенциальные бактерии, потому что мы не исследовали биопсию биопсии в образцах клея.Вместо этого положительные образцы культур и морфологические свидетельства биопсии были обнаружены в отореи у шести детей с CSOM и в восьми из десяти биопсий среднего уха у взрослых гренландцев с CSOM. Это подтверждает гипотезу, выдвинутую Hall-Stoodley et al. [13], что хронические заболевания среднего уха являются биологическими …

Контекст 3

… исследование состояло из двух частей. В первую часть мы включили десять детей с CSOM или COME, наблюдаемых в амбулаторной клинике в Центре здравоохранения Аммассалик в Восточной Гренландии.Центр обслуживает около 3000 человек. Каждый год датский специалист по оториноларингологии посещает район и проводит специализированные обследования и лечение, включая незначительные операции, такие как канальцевание, аденоидэктомия и тонзилэктомия. Шесть детей с CSOM в течение многих лет были известны с повторяющимися эпизодами длительной отореи. Четверо детей с СОМЭ ранее наблюдались с несколькими эпизодами острой ОМ и частыми инфекциями верхних дыхательных путей, и им было назначено лечение канальцами и аденоидэктомией.Выполнена стерильная аспирация отореи и эВузии среднего уха. Мазки готовили сразу на предметных стеклах и подвергали нагреванию. Кроме того, два предметных стекла были обработаны формальдегидом. Излишки материала хранили в пробирках и замораживали при -20 ° C, поскольку температура -80 ° C не была доступна. Мазки посевов были получены из отореи среднего уха у шести пациентов с CSOM после очистки слухового прохода и из eVusions среднего уха у четырех пациентов с COME. Мазки хранили в транспортной среде Стюарта до культивирования на 5% датском кровяном агаре и шоколадном агаре (Государственный институт сыворотки, Копенгаген, Дания) в Департаменте клинической микробиологии, Ригшоспиталет, Копенгаген, Дания.Было выполнено окрашивание по Граму и обычная микроскопия. На предметных стеклах применяли общую бактериальную и видоспецифическую пептидную нуклеиновую кислоту Xuorescence гибридизацию in situ (PNA-FISH ™, AdvanDx Inc., Woburn, MA, США) для S. aureus, коагулазонегативных стафилококков и E. coli [ 17,18]. Все лабораторные исследования проводились вслепую. Присутствие bioWlm оценивалось с помощью иммерсионной микроскопии и основывалось на типичном внешнем виде бактерий в агрегатах, встроенных в матрицу и окруженных ею, как это видно при окрашивании по Граму и PNA-FISH (см. Рис.1а, б) и были дополнительно подтверждены с помощью конфокальной лазерной сканирующей микроскопии (КЛСМ) с использованием Leica TCS SP5 (Leica Microsystems, Германия) (см. Рис. 1в). Этот метод был сопоставим с обнаружением биопсии в аспирате легких пациентов с кистозным W-брозом и в биопсиях хронических ран …

Контекст 4

… исследование состояло из двух частей. В первую часть мы включили десять детей с CSOM или COME, наблюдаемых в амбулаторной клинике в Центре здравоохранения Аммассалик в Восточной Гренландии.Центр обслуживает около 3000 человек. Каждый год датский специалист по оториноларингологии посещает район и проводит специализированные обследования и лечение, включая незначительные операции, такие как канальцевание, аденоидэктомия и тонзилэктомия. Шесть детей с CSOM в течение многих лет были известны с повторяющимися эпизодами длительной отореи. Четверо детей с СОМЭ ранее наблюдались с несколькими эпизодами острой ОМ и частыми инфекциями верхних дыхательных путей, и им было назначено лечение канальцами и аденоидэктомией.Выполнена стерильная аспирация отореи и эВузии среднего уха. Мазки готовили сразу на предметных стеклах и подвергали нагреванию. Кроме того, два предметных стекла были обработаны формальдегидом. Излишки материала хранили в пробирках и замораживали при -20 ° C, поскольку температура -80 ° C не была доступна. Мазки посевов были получены из отореи среднего уха у шести пациентов с CSOM после очистки слухового прохода и из eVusions среднего уха у четырех пациентов с COME. Мазки хранили в транспортной среде Стюарта до культивирования на 5% датском кровяном агаре и шоколадном агаре (Государственный институт сыворотки, Копенгаген, Дания) в Департаменте клинической микробиологии, Ригшоспиталет, Копенгаген, Дания.Было выполнено окрашивание по Граму и обычная микроскопия. На предметных стеклах применяли общую бактериальную и видоспецифическую пептидную нуклеиновую кислоту Xuorescence гибридизацию in situ (PNA-FISH ™, AdvanDx Inc., Woburn, MA, США) для S. aureus, коагулазонегативных стафилококков и E. coli [ 17,18]. Все лабораторные исследования проводились вслепую. Присутствие bioWlm оценивалось с помощью иммерсионной микроскопии и основывалось на типичном внешнем виде бактерий в агрегатах, встроенных в матрицу и окруженных ею, как это видно при окрашивании по Граму и PNA-FISH (см. Рис.1а, б) и были дополнительно подтверждены с помощью конфокальной лазерной сканирующей микроскопии (КЛСМ) с использованием Leica TCS SP5 (Leica Microsystems, Германия) (см. Рис. 1в). Этот метод был сопоставим с обнаружением биопсии в легочных аспиратах пациентов с кистозным W-брозом и в биопсиях хронических ран …

Дерматологическая диагностика: кожная цитология — современная ветеринарная практика

---

Крис Ридер, DVM, DACVD
BluePearl Veterinary Partners, Франклин, Теннесси

Цитология — один из наиболее важных, но часто недостаточно используемых инструментов в ветеринарии.Это быстрое, легкое и недорогое средство сбора огромного количества диагностической информации, во многом такое же, как и анализ фекальных фекалий, мазков крови и химического анализа сыворотки / общего анализа крови. Согласно Christopher et al. В журнале Американской ветеринарной медицинской ассоциации : «Кожная / подкожная цитология наиболее точна для диагностики поражений, тогда как цитология печени наименее точна». ¹ Более того, Ruocco et al сообщают, что «эксфолиативная цитология для диагностических целей редко используется в дерматологии, несмотря на быстрые и надежные результаты, которые эта процедура может предложить во многих клинических условиях.” ² Знание того, как брать цитологические образцы и как интерпретировать эти образцы, может иметь решающее значение для здоровья животного, ведения болезней и общего благополучия.

ПОЛУЧЕНИЕ ОБРАЗЦОВ

Ушной канал

Лучше всего получить материал из уха с помощью аппликатора с ватным наконечником; однако здоровье уха может ограничивать доступ к участкам отбора проб. Например, если у собаки терминальная стадия пролиферативного заболевания уха, степень стеноза может сделать невозможным введение аппликатора в слуховой проход.Красный резиновый катетер 5-французского размера можно использовать для получения образцов из более стенозированных слуховых проходов. Если у собаки открытый слуховой проход с разрывом или отсутствием барабанной перепонки, возможен забор из среднего уха. В этих случаях можно использовать красный резиновый катетер или катетер «томат» для получения образца, когда пациент находится под общей анестезией. Если барабанная перепонка не повреждена, потребуется миринготомия с использованием спинномозговой иглы. Конкретные методы миринготомии можно найти в Mueller and Kirk’s Small Animal Dermatology , 7-е издание.

• Попробуйте взять образец на стыке вертикального и горизонтального каналов. Это примерно самая дальняя часть уха, которую можно увидеть без отоскопа.
• Раскатайте этот материал на предметном стекле. Мне нравится писать «R» для правого и «L» для левого слайда на слайде , чтобы обозначить сторону, с которой был взят каждый образец (, рис. 1, ).

РИСУНОК 1. Цитология уха: правый и левый маркеры.

Griffin et al. Обнаружили, что термическая фиксация по сравнению с отсутствием термической фиксации отического экссудата на предметных стеклах перед окрашиванием не увеличивала и не уменьшала количество дрожжевых организмов Malassezia , обнаруженных при цитологической оценке. ³ Я предпочитаю фиксировать предметное стекло, а затем окрашивать его быстрым красителем (например, DiffQuik).

Складки кожи когтя

Существуют два метода отбора проб из складок когтей (области кутикулы):

• Использование края предметного стекла для извлечения мусора (обычно воскообразного вещества) путем соскабливания от дистального к проксимальному движению под углом от 30 ° до 45 °.
• С помощью аппликатора с ватным наконечником, сломанного пополам. У палочки должен быть скошенный край.С помощью скошенного края аккуратно соскоблите или извлеките материал вокруг проксимальных кожных складок когтей / когтей и вотрите его о предметное стекло (, рис. 2, ). Этот метод может быть предпочтительнее использования предметного стекла непосредственно в этих областях, что может быть затруднительно и может привести к поломке предметного стекла. Количество материала / мусора будет очень небольшим.

РИСУНОК 2. Складки лапки для отбора проб.

Предметное стекло следует зафиксировать нагреванием и использовать для подготовки быстрое окрашивание.

Поверхность кожи

По моему опыту, цитология кожи — это диагностический тест, который чаще всего пропускают в повседневных обращениях. Я считаю, что мазки прямого впечатления приносят наибольшее удовлетворение.

• Возьмите образец, соскребая кожу краем предметного стекла под углом от 30 ° до 45 ° (, рис. 3, ). Этот метод полезен для лап, брюшной полости, пустул, папул, складок лица и других областей.

РИСУНОК 3. Соскоб кожи

• Рассмотрите возможность использования ленты, которая, как правило, более полезна в очень сухих или труднодоступных для слайда областях, таких как межпальцевые промежутки, складки лица или хвоста, а также периокулярные области.

1. Используя прозрачную ленту целлофанового типа, прижмите липкую часть непосредственно к интересующей области.
2. Окрасьте образец только на , используя краситель и контрастный краситель (красный и фиолетовый), затем прикрепите ленту непосредственно к предметному стеклу для оценки.
3. Обратите внимание, что фиксатор удалит липкую часть вместе с образцом.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ ЦИТОЛОГИЧЕСКИХ РЕЗУЛЬТАТОВ

Базовая микроскопия

Всегда начинайте с малой мощности! Самая частая ошибка при просмотре цитологических препаратов — это прямое увеличение в 100 раз.Начиная с 4 × позволяет идентифицировать определенные области слайда для исследования при более высоком увеличении. Это также позволяет наблюдать находки, которые могут быть упущены при 100-кратном увеличении, такие как акантолитические клетки и клещей Demodex ( Фигуры 4, и 5 ).

С увеличением увеличения должна увеличиваться и интенсивность света. При поиске клещей Demodex или спор грибов опустите конденсатор, чтобы интенсивность света не «прожигала» эти организмы.

РИСУНОК 4. Акантолитические клетки.

РИСУНОК 5. Клещ Demodex.

Воспалительные клетки

Воспалительные клетки обнаруживаются почти при всех цитологических исследованиях кожи и иногда при цитологии слухового прохода и складок копыта. Наличие различных воспалительных клеток может указывать на подозрение на определенные заболевания, такие как комплексная пузырчатка, кожная волчанка, кожно-слизистая пиодермия или даже аллергия.

Нейтрофилы

Нейтрофилы — это клетки острого воспаления, которые уничтожают инфекционные организмы и являются основным компонентом гноя.Необходимо сканировать внутриклеточные бактерии, потому что присутствие этих бактерий соответствует истинному определению кожной инфекции . Присутствие множества бактерий без внутриклеточных бактерий может быть результатом иммуносупрессии (например, болезнь Кушинга, гипотиреоз, неоплазия) или избыточного бактериального роста. В свете текущих опасений по поводу устойчивости к противомикробным препаратам я рекомендую лечить эти случаи местно с помощью противомикробных препаратов (например, хлоргексидина, микронизированного серебра, Triz EDTA) в качестве первого шага.Нейтрофилы высвобождают много протеолитических ферментов, ответственных за воспаление и повреждение тканей ( Рисунок 6, ).

РИСУНОК 6. Нейтрофилы.

Эозинофилы

Эозинофилы заполнены красными (эозинофильными) гранулами ( Рисунок 7, ). Эозинофилы продуцируют множество цитокинов и медиаторов для уничтожения микроорганизмов и привлечения других клеток, таких как тучные клетки. Эти клетки также фагоцитируют и способны поглощать бактерии и грибки.Обнаружение эозинофилов при цитологическом исследовании кожи предполагает наличие паразитов, грибов или пищевых аллергий . Эозинофилы редко обнаруживаются у собак с атопическим дерматитом, хотя они часто встречаются у кошек.

РИСУНОК 7. Эозинофилы.

Лимфоциты

Лимфоциты обычно обнаруживаются позже в ходе кожных заболеваний и обычно не обнаруживаются в больших количествах. Могут быть видны мелкие, средние и большие лимфоциты. Эти клетки направляют деятельность других клеток (например, нейтрофилов, эозинофилов, кератиноцитов) посредством высвобождения различных молекул обмена сообщениями или цитокинов.Большие лимфоциты иногда обнаруживаются у собак с кожной лимфомой (, рис. 8, ).

РИСУНОК 8. Атипичные лимфоциты (соответствующие кожной лимфоме).

Тучные клетки

Тучные клетки также обнаруживаются позже в процессе болезни ( Рисунок 9 ). Они являются основными продуцентами гистамина и в значительной степени вовлечены в аллергические кожные заболевания. Обычно они наблюдаются только на изъязвленных участках опухолей тучных клеток дермы.

РИСУНОК 9. Тучная клетка (в центре).

Ядерный поток

Когда клетки разрываются во время отбора образцов, при цитологическом исследовании часто можно увидеть ядерное содержимое (ДНК). Ядерный поток выглядит как тонких нитей эозинофильного материала ( Рисунок 10, ). Это не указывает ни на что, кроме разрыва клеток во время сбора образца. Он может помочь выявить споры грибов, бактерии и дрожжи, поэтому ищите эти организмы в областях с большим количеством ядерных потоков.

РИСУНОК 10. Ядерная потоковая передача.

Паразиты

Demodex, Otodectes , чесотка или другие клещи могут быть видны на цитологических препаратах, если инфекция достаточно серьезна. Это крупные организмы, которые лучше всего оценивать при увеличении от 4 до 10. Они встречаются нечасто, но при обнаружении имеют диагностическое значение.

Грибы

Споры грибов дерматофитов (стригущий лишай) можно увидеть внутри нейтрофилов, они могут быть свободными или могут присутствовать в ядерном потоке.Эти очень маленькие круглые организмы имеют четкий ореол и базофильный центр ( Рисунок 11, ). Они примерно вдвое меньше среднего эритроцита.

Вставка T1703C10Fig11.jpg

Дрожжи

Видны два рода дрожжей: Malassezia видов более распространены в Соединенных Штатах, чем видов Candida , которые, как правило, более распространены в Европе. Malassezia видов были описаны как базофильные организмы, имеющие форму арахиса, снеговика, отпечатка стопы или кегли для боулинга .Эти организмы определяются как почкующиеся дрожжи с широким основанием.

РИСУНОК 11. Споры грибов

Бактерии

Бактерии — самые распространенные инфекционные организмы, которые я обнаруживаю при цитологическом исследовании. Наиболее распространены две различные формы: кокки и палочки. Кокки — это круглые базофильные бактерии, обнаруживаемые индивидуально, группами или большими группами. ( Рисунок 10, ). Если обнаружены внутриклеточные кокки, это настоящая инфекция. Стержни часто встречаются по отдельности или в наборах по 2 вставленных встык, называемых диплоидными стержнями ( Рисунок 12, ).Кокки чаще всего представляют собой виды стафилококков или стрептококков . Палочки часто представляют собой видов Escherichia coli , видов Pseudomonas или видов Klebsiella . Помните, быстрые пятна окрашивают все бактерии в фиолетовый цвет ; они не отличают грамположительные бактерии от грамотрицательных. Бактериальные посевы следует проводить всякий раз, когда при цитологии видны палочки. Бактерии всегда попадают в фокус и выходят из него, когда используется точная фокусировка микроскопа, тогда как гранулы меланина обладают огнеупорными / отражающими свойствами.

РИСУНОК 12. Палочки с воспалительными клетками.

Гранулы меланина

Гранулы меланина обычно принимают за бактерии и обычно видны на пигментированных участках кожи. Они имеют оттенка от золотистого до коричневого, в основном стержневидные; они имеют качество преломления / отражения при входе и выходе из точного фокуса ( Рисунок 13 ). Гранулы меланина обычно прикреплены к кератиноцитам, но на слайде их можно увидеть свободными.

РИСУНОК 13. Гранулы меланина.

Кератиноциты

Большинство кератиноцитов имеют восьмиугольную или квадратную форму и имеют плоскую форму . Кератиноциты могут обладать некоторыми интересными особенностями, которые могут быть нормальными или ненормальными, такими как включение кератогиалиновых гранул или округлых акантолитических клеток.

Гранулы кератогиалина

Эти гранулы присутствуют в незрелых клетках кожи в зернистом слое и участвуют в «цементировании» клеток вместе, когда они полностью созреют.У всех видов есть эти гранулы, которые можно увидеть в кератиноцитах, которые хронически раздражены (например, у собак / кошек с аллергией). Кератогиалиновые гранулы представляют собой большие эозинофильные гранулы. У собак есть круглые гранулы, а у кошек — стержневидные. гранулы (похожи на эозинофилы; Рисунок 14 ).

Акантолитические клетки

Эти кератиноциты утратили свои межклеточные связи в более глубоких слоях эпидермиса и обычно обнаруживаются у животных с иммуноопосредованными заболеваниями, такими как пузырчатка.Иногда эти клетки могут развиваться из-за тяжелых бактериальных инфекций и дерматофитии. Акантолитические клетки имеют форму «жареного яйца», с глубоко базофильным центрально расположенным ядром ( Рисунок 4 ). Их очень важно распознать, и они считаются ненормальными для любого животного.

РИСУНОК 14. Гранулы кератогиалина.

Ссылки

1. Кристофер М.М., Хотц С.С., Шелли С.М., Пион П.Д. Использование цитологии как метода диагностики в ветеринарной практике и оценка коммуникации между практикующими ветеринарными врачами и ветеринарными клиническими патологами. JAVMA 2008; 232 (5): 747-754.
2. Ruocco E, Brunetti G, Vecchio M Del, Ruocco V. Практическое использование цитологии для диагностики в дерматологии. J Eur Acad Dermatol Venereol 2011; 25 (2): 125-129.
3. Гриффин Дж. С., Скотт Д. В., Эрб Г. Н.. Malassezia Наружный отит у собак: эффект термофиксации отического экссудата для цитологического анализа. J Vet Med 2007; 54 (8): 393-448.

Крис Ридер , DVM, DACVD, окончил Колледж ветеринарной медицины Обернского университета и имеет сертификат ветеринарной дерматологии.Доктор Ридер опубликовал несколько статей как на национальном, так и на международном уровне и любит читать лекции по дерматологии для местной и национальной аудитории. Он работал в нескольких комитетах Американского колледжа ветеринарной дерматологии, в том числе в аттестационной комиссии и специальной экзаменационной комиссии. Особые интересы доктора Редера включают наружный отит, дерматопатологию и иммуноопосредованные кожные заболевания.

.