Как работает электрофорез: Электрофорез с медикаментозными средствами, гомеопатическими препаратами

Электрофорез для детей на воротниковой зоне, также проведения электрофорез для грудничков в Евромед

Проведение лечебных процедур электрофорезом в Омске. Электрофорез — метод введения лечебных препаратов через кожный покров, под действием электрического поля. При этом лекарство вводится в наиболее химически активной форме.

• Консультация
• Диагностика
• Лечение

Электрофорез — это метод введения лекарственного вещества под действием электрического поля в организм. Лечение электрофорезом проводится как через кожные покровы (в неврологии, травматологии и др.), так и через слизистые оболочки (в стоматологии, оториноларингологии, гинекологии и др.). Вещество вводится непосредственно в очаг воспаления в малых, но достаточно эффективных дозах, накапливаясь в тканях и действуя продолжительное время.

Поэтому особенно актуален электрофорез для детей, т.к. дает возможность местно использовать лекарства, которые в раннем детском возрасте нельзя применять другими способами. При этом лекарство вводится в наиболее химически активной форме — в виде ионов – и не разрушается, как например, при введении через рот. При проведении электрофореза электрический ток благоприятно влияет на реактивность и иммунобиологический статус тканей.

Этот метод применяется применяется с самого раннего возраста — например, электрофорез для грудничков используется уже спустя 3-6 недель после рождения. Для детей до года при этой процедуре в качестве лекарственного вещества часто используется эуфиллин как средство, снимающее тонус гладкой мускулатуры и улучшающее кровообращение (в основном, проводится электрофорез на воротниковую зону).

В целом выбор зоны проведения электрофорез зависит от заболевания: так, электрофорез воротниковой зоны проводится при заболеваниях нервной или сосудистой системы, электрофорез конечностей — при заболеваниях суставов, электрофорез поясничной зоны — при гинекологических заболеваниях и т.п.

Вернуться на страницу:

Остались вопросы?

 

Электрофорез – эффективная и популярная физиотерапевтическая процедура

Электрофорез как метод физиотерапии популярен более 50-ти лет. За это время его основной принцип работы – использование постоянного тока и растворов лекарственных препаратов для ввода под кожу – не изменился, а только улучшился за счет модернизации аппаратов. При этом под кожу вводится не столько сам препарат, сколько его ионы, которые легче усваиваются и минимизируют аллергические реакции.

Незаменим электрофорез при различных заболеваниях у детей. Его рекомендует педиатр или узкий специалист после осмотра и получения результатов анализов, а назначает врач-физиотерапевт. Весомое преимущество, что электрофорез может назначаться детям от 1 месяца.

Проведение процедур в Первом детском медицинском центре проводится исключительно под контролем опытного врача-физиотерапевта и среднего медицинского персонала.

В каких заболеваниях помогает электрофорез как метод физиотерапии?

• Нарушение опорно-двигательного аппарата;
• Частые бронхиты острой и хронической формы, бронхиальная астма;
• Плеврит, трахеит;
• Нарушение работы нервной системы.

Также электрофорез как метод физиотерапии помогает в восстановлении после оперативных вмешательств и когда необходима реабилитация после растяжений, ушибов, вывихов, переломов.

Среди дополнительных преимуществ в методике выделяют рассасывание рубцов, уменьшение боли и очага воспаления, быстрая регенерация тканей.

Как правило, если диагностируется острый или хронический бронхит, тогда электрофорез как метод физиотерапии назначается как дополнительное средство к медикаментозному лечению, но с его помощью удается добиться высоких положительных результатов и закрепить полученный результат надолго.

Традиционно процедуры назначаются несколько раз в год в полном курсе из 10–12 сеансов

, которые проводятся ежедневно или через день. При этом врачи центра постоянно контролируют самочувствие ребенка и его реакцию на введение препарата через кожу.

Электрофорез как метод физиотерапии требует постоянного контроля над мощностью аппарата, а также количеством лекарственного средства, которое вводится через кожу и активно воздействует на проблемные органы и системы.

С какого возраста назначаются процедуры?

Начиная с 1-ого месяца при показаниях. Первые улучшения уже заметны после первых 3–5 процедур. Максимальная концентрация препарата, который вводится методом электрофореза для лечения плеврита, трахеита или воспаления наблюдается спустя 13–15 часов после введения. Это позволяет организму накапливать его и противостоять заболеванию.

Для поддержания организма в норме, а также с профилактическими целями электрофорез как метод физиотерапии назначает 1–2 раза в год для воздействия на проблемные зоны. Дополнительно с помощью аппаратного воздействия также можно лечить

глазные заболевания, например, миопию.

Препарат вводится в том месте, где необходима помощь, при этом существуют определенные ограничения для расположение электродов: область сердца.

Во время сеанса дети не капризничают, поскольку им оказывает внимание медицинский персонал, занимая их игрушками и рассказами. Проведение электрофореза как метода физиотерапии в центре разрешено вместе с родителями. Преимущество в том, что весь аппаратный комплекс лицензированный.

Комфортное и безболезненное лечение обеспечивает ввод препарата без инъекций; за счет гальванического тока улучшается кровоток, нормализуется давление, повышается тонус организма и его защитные свойства. Постепенно удается свести к минимуму проявления бронхоэктатической болезни, уменьшить частоту острых или хронических бронхитов.

Записаться к Врачу

УВЧ в детской физиотерапии

УВЧ (ультравысокочастотная терапия) — метод детской физиотерапии, при котором применяется воздействие…

Магнитотерапия в детской физиотерапии – эффективность и надежность

Магнитотерапия является одной из популярных процедур в детской физиотерапии. Магнитотерапия — метод лечебного…

ДМВ-физиотерапия: что это такое, как проводится и эффекты от процедуры

Детская физиотерапия в Саратове представлена широким спектром проводимых процедур. В данной статье мы…

Топ-5 наивных мифов о физиотерапии: разбираемся и развенчиваем

Достаточно часто, особенно от людей, которые никак не связаны с медициной, можно услышать, что физиотерапия…

Физиотерапия при ЗРР. Нормализация речевого развития у ребенка

Задержка речевого развития – не приговор, и если вовремя обратиться к профильным специалистам, сформировать…

Физиотерапия в педиатрии – помощь каждому ребенку

На разных возрастных этапах ребенку нужна комплексная детская физиотерапия для того, чтобы устранить…

Врач-физиотерапевт – кто это? Какие заболевания лечит физиотерапевт?

Детский врач-физиотерапевт – специалист с дипломом о высшем медицинском образовании, который не просто…

Амплипульстерапия как вид физиолечения заболеваний опорно-двигательной системы

Ответ на вопрос, чтo тaкoe aмплипyльcтepaпия, стоит начать с того, что это один из видов физиотерапии,…

Главные принципы физиопроцедур для детей

После назначения педиатра или узкопрофильных специалистов, детская физиотерапия должна на определенное…

Физиотерапия для детей

— Когда используется физиотерапия: во время острого периода болезни, подострый период или только с реабилитационной…

Первый детский медицинский центр

Здоровье детей – спокойствие родителей!

Поделиться в соцсетях:

 

Топ-5 наивных мифов о физиотерапии: разбираемся и развенчиваем

Достаточно часто, особенно от людей, которые никак не связаны с медициной, можно услышать, что физиотерапия для детей – это просто метод, который работает на эффекте плацебо. Кроме субъективных факторов и личных позиций это больше ничем не подтверждено. Скорее наоборот, ежегодно ведутся исследования в разных странах при клиниках и университетах, подтверждающие эффективность физиотерапии.

Первый детский медицинский центр в Саратове это подтверждает и предлагает широкий спектр процедур детской физиотерапии, направленных на улучшение состояния, помощь при реабилитации, улучшение защитных свойств организма.

Полезна ли физиотерапии для детей? – Ответ на этот вопрос даст опытный педиатр, детский физиотерапевт и узкопрофильный специалист. Да,

польза от процедур на высоком уровне и подтверждается:

• минимизацией приема лекарственных аппаратов;
• помощью в восстановлении после операций и травм;
• повышением защитных свойств организма.

С учетом того, что детская физиотерапия практически не имеет противопоказаний, она назначается в разном возрасте и при этом практически не вызывает аллергических реакций или индивидуальных реакций непереносимости.

Опытный детский физиотерапевт развеивает основные мифы, которые связаны с детской физиотерапией, ведь предупрежден, значит, вооружен!

Физиотерапия является основным видом лечения детей

Это не правда. При помощи влияния тока, лазера, магнита улучшается проводимость кожи и слизистых, через которые поступает основной медицинский препарат. Первый эффект наступает уже спустя 3–5 процедур, а к концу сеанса достигает максимальной отметки.

Некоторые заболевания или склонность к ним принято дополнять комплексной детской физиотерапией. Например, склонность к образованию полипов в носу поддается лечению с помощью электрофореза, а быстрее восстановить перелом у ребенка помогут сеансы магнитотерапии. Однако, стоит отметить, что физиотерапия, как правило, назначается в качестве дополнительных процедур при лечении, а также при профилактике тех или иных заболеваний.

Лечиться можно исключительно физиотерапией

Это миф, на самом деле детская физиотерапия помогает улучшить и усилить эффект от основного препарата и назначается в комплексе с ЛФК, другими процедурами, медицинскими средствами. Все в комплекте приносит быстрый и продолжительный эффект.

Как может приносить пользу процедура детской физиотерапии, если она не ощущается?

Детский физиотерапевт и средний медицинский персонал, отвечающий за проведение сеансов, подбирает максимально допустимые дозы нагрузки

, чтобы не возникало аллергических реакций. Малые дозировки для детей с учетом их возраста – это ключевое правило безопасной и эффективной технологии проведения детской физиотерапии. В Первом детском медицинском центре в Саратове доступны разные аппараты для проведения процедур на основе:

• магнита;
• токов;
• лазера;
• ультразвука и др.

Физиотерапия безболезненна и безопасна, поэтому дети ее легко переносят. Плюс, что сам сеанс не длится долго, а значит, ребенок не заскучает и не устанет, когда ему будут прогревать коленный сустав или же делать ингаляцию. В специальном кабинете есть игрушки для отвлечения внимания. Опытный персонал поможет психологически настроиться на проведение процедуры.

Некоторые процедуры могут вызвать легкое пощипывание или небольшое раздражение в виде местной реакции, но, как правило, они не вызывают крайне дискомфортных ощущений.

Зачем выбирать детскую физиотерапию в центре, если есть домашние аналоги?

Прежде всего, аппаратный комплекс для медицинских центров – это бренды с мировым именем, которые уже успели заявить о себе, как о надежной технике для проведения детской физиотерапии. Все процедуры проводятся под тщательным контролем и сначала детский физиотерапевт подбирает необходимую концентрацию препарата или интенсивность воздействия. В домашних условиях без опыта и знаний это сделать нереально. Современная техника, которая находится в Первом детском медицинском центре, имеет цифровые пульты управления для того, чтобы подбирать и контролировать минимальные дозы, безопасные для ребенка. Через 3–4 процедуры с начала курса постепенно увеличивается интенсивность терапии, но только после контроля состояния ребенка. Это решение принимает исключительно детский физиотерапевт.

Детская физиотерапия полностью безопасна, подходит всем и не имеет противопоказаний?

Нет, это не так. Список противопоказаний есть, но он достаточно небольшой. Как правило, это:

• повышенная температура тела ребенка;
• общая слабость, озноб;
• воспалительные процессы в области, которая должна поддаваться аппаратному влиянию;
• нарушение сердечного ритма;
• гипертония 3 стадии;
• системные заболевания крови.

Особенности физиотерапии для детей сформированы таким образом, чтобы минимизировать риск индивидуальных проявлений непереносимости:

• покраснение;
• сухость кожи.

Методы физиотерапии, допустимые для детей, выбираются только медицинским персоналом, равным счетом, как и дозировки. Нельзя утверждать, что детская физиотерапия – это панацея от всех заболеваний, но при грамотном назначении, определении нужного вида процедуры, а также времени и режима удается заметно улучшить состояние здоровья. Плюс, некоторые аппаратные методики физиотерапии для детей назначаются для профилактики и поддержания организма.

В центре используются различные виды детской физиотерапии:

• магнито- и лазеротерапия;
• лечение ультразвуком;
• электрофорез и др.

Именно эти процедуры помогут в легком протекании комплекса лечения разных органов и систем. Для грудничков не обойтись без электрофореза для поддержания правильного развития конечностей, а также шейного отдела. Такие процедуры разрешены в возрасте с 1 месяца. Влияния на область коленей минимизирует риск развития дисплазии, а массаж спинного и шейного отдела минимизирует формирование кривошеи, а также развития пороков нервной системы.

Если же у ребенка часто наблюдаются простудные заболевания, то ингаляционные процедуры физиотерапии для детей помогут снизить частоту возникновения кашля или насморка, воспалительных процессов носоглотки.

Каждая процедура назначается детским физиотерапевтом с учетом возраста и показаний, а также диагноза от педиатра или узкого специалиста на основе осмотра и полученных результатов анализов. Специалист поможет сформировать правильный и грамотный режим дня во время проведения всего комплекса физиолечения для ребенка младшего школьного возраста, школьника, а также грудничка с учетом времени приема пищи, сна, стадии бодрствования.

Записаться к Врачу

УВЧ в детской физиотерапии

УВЧ (ультравысокочастотная терапия) — метод детской физиотерапии, при котором применяется воздействие…

Магнитотерапия в детской физиотерапии – эффективность и надежность

Магнитотерапия является одной из популярных процедур в детской физиотерапии. Магнитотерапия — метод лечебного…

ДМВ-физиотерапия: что это такое, как проводится и эффекты от процедуры

Детская физиотерапия в Саратове представлена широким спектром проводимых процедур. В данной статье мы…

Электрофорез – эффективная и популярная физиотерапевтическая процедура

Электрофорез как метод физиотерапии популярен более 50-ти лет. За это время его основной принцип работы…

Физиотерапия при ЗРР. Нормализация речевого развития у ребенка

Задержка речевого развития – не приговор, и если вовремя обратиться к профильным специалистам, сформировать…

Физиотерапия в педиатрии – помощь каждому ребенку

На разных возрастных этапах ребенку нужна комплексная детская физиотерапия для того, чтобы устранить…

Врач-физиотерапевт – кто это? Какие заболевания лечит физиотерапевт?

Детский врач-физиотерапевт – специалист с дипломом о высшем медицинском образовании, который не просто…

Амплипульстерапия как вид физиолечения заболеваний опорно-двигательной системы

Ответ на вопрос, чтo тaкoe aмплипyльcтepaпия, стоит начать с того, что это один из видов физиотерапии,…

Главные принципы физиопроцедур для детей

После назначения педиатра или узкопрофильных специалистов, детская физиотерапия должна на определенное…

Физиотерапия для детей

— Когда используется физиотерапия: во время острого периода болезни, подострый период или только с реабилитационной…

Первый детский медицинский центр

Здоровье детей – спокойствие родителей!

Поделиться в соцсетях:

 

Электрофорез. Где пройти лечение электрофорезом в Москве

Электрофорез

АО Семейный доктор — Электрофорез.Электрофорез – это физиотерапевтическая процедура, обеспечивающая лечебный эффект с помощью сочетания локального воздействия постоянного электрического тока и лекарственных препаратов, вводимых при помощи тока. Под воздействием электрического поля лекарство в виде заряженных частиц (ионов) проникает в кожу через устья сальных и потовых желёз, волосяные фолликулы и межклеточные промежутки. Основная часть введенного лекарства остаётся в области, подвергаемой воздействию, некоторая часть с током крови и лимфы разносится по всему организму.

Электрофорез имеет широкую сферу применения. С помощью электрофореза может вводиться достаточно широкий перечень лекарственных препаратов. Данный вид физиотерапии используется в лечении многих заболеваний. Обычно курс состоит из 10 сеансов электрофореза, проводимых ежедневно или через день. Продолжительность одного сеанса — 10-15 минут.

Если вы ищете, где пройти лечение электрофорезом в Москве, обратитесь в АО «Семейный доктор». Оплатив весь курс процедур сразу, вы получаете скидку на последнюю процедуру. При единовременной оплате 5-ти процедур скидка на последнюю составит 50%, при оплате 7-ми — 70%. При оплате 10-ти процедур электрофореза последняя будет для вас бесплатной

Ниже вы можете уточнить стоимость лечения электрофорезом (цену процедуры), а также выбрать поликлинику, находящуюся в наиболее удобном для вас районе Москвы. 

Уважаемые пациенты!
Обращаем ваше внимание, что указанные цены не являются окончательной стоимостью приёма.
Если манипуляция оказывается на приёме врача, то к стоимости манипуляции добавляется стоимость приёма (соответственно, стоимость приёма увеличивается на стоимость выполненных манипуляций).

Электрофорез

Цветной бульвар

Москва, Самотечная, 5

круглосуточно

Преображенская площадь

Москва, Б. Черкизовская, 5

Ежедневно

c 09:00 до 21:00

Выходной:

1 января 2020

Бульвар Дмитрия Донского

Москва, Грина, 28 корпус 1

Ежедневно

c 09:00 до 21:00

Мичуринский проспект

Москва, Большая Очаковская, 3

Ежедневно

c 09:00 до 21:00

Принцип работы электрофореза — статья для изучения у нас

И.Н. Ярухин, 30 августа, 2021

Физиотерапевтический метод воздействия гальванизацией называется лекарственным электрофорезом. Это восстановительная процедура, предполагающая выработку постоянного тока малой силы и напряжения. Ее альтернативное название – ионотерапия.

Что такое электрофорез и как он работает

Физиотерапевтический метод оказывает доказанное положительное влияние на организм. Как работает электрофорез? Он предполагает комплексное воздействие электрического поля и лекарственных веществ. Максимальный оздоравливающий эффект достигается при сочетании ионотерапии с магнитным, лазерным, ультразвуковым и световым лечением.

Каков принцип действия электрофореза? Электрическое поле переносит медицинские препараты в место поражения. Под действием тока лекарства распадаются на ионы и двигаются через органы и ткани. Они приближаются к противоположному электроду и преобразуются в атомы с высокой физико-химической активностью.

Какие лечебные эффекты можно получить после электрического воздействия:

• Восстановление иммунной защиты организма.
• Активизация обменных и физико-химических процессов.
• Нормализация функций желез внутренней секреции.
• Улучшение метаболизма клеток.
• Снижение воспалительных процессов.
• Обезболивание.

Перед началом сеанса необходимо определить методику. Выбирают общие и местные техники, среди которых полостная, внутритканевая, чрескожная и ванночковая. Электроды располагают поперечно, сегментарно, продольно или локально (на пораженные отделы позвоночника).

Для процедуры необходимо 2 и более электродов в зависимости от зоны обработки. Силу тока выбирают по индивидуальным показаниям. Она зависит от чувствительности человека. В ходе манипуляции можно повышать силу тока после привыкания.

Продолжительность одного сеанса составляет от 10 до 40 минут. Полный курс включает в себя 5-20 процедур. Их проводят ежедневно или с перерывом в один день.

Виды и особенности электрофореза

По технике проведения ионотерапия бывает:

• Гальваническая. Подача тока происходит постепенно. Электрод с зарядом «+» накладывают на больной участок, а электрод с зарядом «-» располагают в соответствии с указаниями схем руководства по эксплуатации прибора.
• Ванночковая. Электроды находятся в ванночке с лечебным веществом. Пациент опускает внутрь поврежденный участок. Такую методику часто используют при терапии конечностей.
• Полостная. Электрод располагают в полых органах (кишка, мочевой пузырь, желудок, матка). Второй электрод оставляют на поверхности тела.
• Внутритканевая. Пациенту вводят лечебный раствор в виде инъекции или через рот. Электроды находятся в точке воспаления.

Применяемые гальванические токи бывают:

• Диадинамическими.
• Выпрямленными.
• Синусоидальными.
• Модулированными.
• Флюктуирующими.

Особенности гальванического электрофореза определяются выбранными лекарственными препаратами. Врач рекомендует определенное средство или сочетание медикаментов в зависимости от показаний.

Их ионы вводят через протоки кожных желез. При этом средства сохраняют фармакологическую активность и положительное воздействие. Препарат равномерно распределяется в клетках тела и действует в течение срока до 20 дней.

Данная методика не имеет побочных эффектов, отмечается минимальный риск аллергических реакций. Она проходит полностью безболезненно. Лекарственное средство воздействует только на пораженную область. Эффект медикаментозных веществ не распространяется на другие сегменты тела и органы.

Кому будет полезна процедура

Электрофорез могут назначать по медицинским или косметическим показаниям. Обычно его проходят при таких нарушениях здоровья как:

• Неврологические отклонения, включая воспаления, неврозы, органические патологии ЦНС, мигрень.
• Поражения сердечно-сосудистой системы, а именно, атеросклероз, ИБС, гипотония, гипертония.
• ЛОР заболевания, например, воспалительные явления в области ушей, носа и горла.
• Пульмонологические проблемы, в особенности, астма, бронхит, пневмония.
• Хирургические показания, в том числе, рубцы, ожоги, контрактуры, спаечные изменения тканей.
• Дерматологические болезни, например, постугревые рубцы, телеангиоэктазия, себорея.
• Стоматологические поражения, а именно, поражения слюнных желез, флюороз.
• Ортопедические нарушения, включая, остеоартроз, воспалительные заболевания суставов.
• Гинекологические патологии, к примеру, гипертонус или эрозия матки, сниженное кровообращение плаценты.
• Урологические отклонения, в особенности, спаечные процессы, воспаления органов мочеполовой системы.
• Педиатрические показания, в частности, родовые травмы, суставная дисплазия, неврологические болезни.

Противопоказания к прохождению электрофореза

Терапевтическая процедура не рекомендована, если у пациента диагностированы:

• Непереносимость тока или препаратов.
• Новообразования.
• Острые лихорадочные состояния.
• Гнойные процессы, дерматиты.
• Психические отклонения.
• Афазия.
• Склонность к кровотечениям.
• Сердечная недостаточность.
• Сниженная свертываемость крови.
• Бронхиальная астма в тяжелой форме течения.

Электрофорез не проводят при наличии у больного кардиостимулятора.

Существует множество центров лечения позвоночника, но именно клиника ПАЛИХА располагает всем необходимым для этого. От расходников, проверенных медицинских препаратов, высококлассных врачей до самого новейшего оборудования.

Проверил: И.Н. Ярухин

Как физиопроцедуры ускоряют процесс восстановления после травм?

Физиопроцедуры созданы, чтобы облегчить послеоперационную жизнь, улучшить состояние здоровья после получения различных травм, они способствуют в лечении некоторых заболеваний. Физиопроцедуры помогают снизить активность разных воспалительных процессов, стимулируют восстановительные возможности организма. Они снимают или уменьшают болевой синдром, способствуют улучшению работы систем крово- и лимфотворения. Процедуры могут быть направлены на устранение контрактур, восстановление иммунных систем организма.

 

Назначение физиопроцедур происходит строго индивидуально для каждого пациента его лечащим врачом. Врач подбирает необходимый комплекс процедур исходя из особенностей заболевания, возраста и состояния организма. Бывает и так, что физиопроцедуры позволяют побороть заболевание, которое не поддавалось лечению традиционными способами.

 

На какие задачи могут быть нацелены процедуры физиотерапии?

 

 

 

Самые распространенные физиотерапевтические методы:

●    Электрофорез;

●      Магнитотерапия;

●      Ультразвуковая терапия;

●      Лазерная терапия.

 

Электрофорез лекарственных веществ — это вид физиопроцедур, которыйоснован на использовании постоянного тока и вводимых с его помощью лекарственных веществ. Лекарство распадается на ионы, находясь в водном растворе. При пропускании тока через раствор, ионы лекарства начинают перемещаться, равномерно проникая в кожу человека, слизистую, межклеточную жидкость — так они проникают и распространяются по организму пациента.

 

Магнитотерапия — одно из недавних нововведений в области физиотерапии. Работает на воздействии переменного магнитного поля, как на весь организм в целом, так и на определённую его часть. Аппараты, снабженные компьютерным программным обеспечением, могут проводить непрерывный контроль, благодаря этому врач может составлять индивидуальные программы каждому пациенту.

 

Магнитотерапия облегчает боль, понижает артериальное давление, запускает восстановительные и регенеративные процессы. Обладает сильным противовоспалительным и противоотечным средством. Магнитотерапия нормализует кровеносные и лимфатические сосуды, улучшая работу вегетативной нервной системы. Такой вид терапии помогает в нормализации сна, улучшает психофизическое и эмоциональное состояние.

 

Лечение ультразвуком — такая терапия оказывает на организм механическое, физико-химическое и легкое тепловое воздействие. Благодаря свойствам ультразвука окислительно-восстановительные процессы в тканях происходят быстрее. Используется ультразвук при лечении внутренних болезней, при заболеваниях суставов, лор-органов.

 

 

 

Лазеротерапия – один из достаточно новых методов физиотерапии, который используется пока чуть более 30 лет. Свет излучаемый лазером, проникает на большую глубину и запускает обмен веществ в больных тканях, стимулируя весь организм. Лазер может устанавливаться внутривенно, чтобы непосредственно воздействовать на кровь. Внутрисосудистое внедрение лазера позволяет укрепить иммунитет, повысить транспортные функции крови, усиливает метаболизм.

 

 

 

Применение физиотерапии при восстановлении после травм, как и самостоятельно — очень полезно для человеческого организма. Помимо усиливающего эффекта от других методов лечения, физиотерапии снижают риск развития осложнений, позволяют уменьшить период восстановления, что благоприятно влияет на выздоровление организма.

 

Применяя физиотерапию, вы можете уменьшить дозу препаратов, используемых в лечении во время восстановления после травм, улучшить кровоснабжение, общий мышечный тонус, убрать воспаление и отёк. Можно разработать большой и разнообразный курс восстановления с применением физиотерапевтических методов, которые стоит применять при восстановлении после травм, а также для укрепления вашего здоровья в целом!

 

 

Что такое гель-электрофорез? | Факты

Электрофорез — это метод, обычно используемый в лаборатории для разделения заряженных молекул, таких как ДНК, по размеру.

• Гель-электрофорез — это метод, обычно используемый в лабораториях для разделения заряженных молекул, таких как ДНК, РНК и белки, в зависимости от их размера.
• Заряженные молекулы движутся через гель, когда через него пропускают электрический ток.
• Электрический ток пропускается через гель, так что один конец геля имеет положительный заряд, а другой конец — отрицательный.
• Движение заряженных молекул называется миграцией. Молекулы движутся навстречу противоположному заряду. Таким образом, молекула с отрицательным зарядом будет притягиваться к положительному концу (противоположности притягиваются!).
• Гель состоит из проницаемой матрицы, немного похожей на сито, через которую молекулы могут перемещаться при прохождении электрического тока.
• Более мелкие молекулы мигрируют через гель быстрее и, следовательно, перемещаются дальше, чем более крупные фрагменты, которые мигрируют медленнее и, следовательно, будут перемещаться на меньшее расстояние.В результате молекулы разделяются по размеру.

Гель-электрофорез и ДНК

• Электрофорез позволяет различать фрагменты ДНК разной длины.
• ДНК заряжена отрицательно, поэтому при приложении электрического тока к гелю ДНК будет перемещаться к положительно заряженному электроду.
• Более короткие нити ДНК проходят через гель быстрее, чем более длинные нити, в результате чего фрагменты выстраиваются по размеру.
• Использование красителей, флуоресцентных меток или радиоактивных меток позволяет увидеть ДНК на геле после их разделения. Они появятся на геле в виде полос.
• Маркер ДНК с фрагментами известной длины обычно пропускается через гель одновременно с образцами.
• Сравнивая полосы образцов ДНК с полосами маркера ДНК, вы можете определить приблизительную длину фрагментов ДНК в образцах.

Как проводится гель-электрофорез?

Подготовка геля

• Гели агарозы обычно используются для визуализации фрагментов ДНК.Концентрация агарозы, используемой для приготовления геля, зависит от размера фрагментов ДНК, с которыми вы работаете.
• Чем выше концентрация агарозы, тем плотнее матрица и наоборот. Меньшие фрагменты ДНК разделяются при более высоких концентрациях агарозы, в то время как более крупные молекулы требуют более низкой концентрации агарозы.
• Для получения геля порошок агарозы смешивают с буфером для электрофореза и нагревают до высокой температуры до тех пор, пока весь порошок агарозы не расплавится.
• Расплавленный гель затем выливают в лоток для отливки геля, и на одном конце помещают «гребешок», чтобы сделать лунки для образца, в который будет помещен образец.
• Когда гель остынет и затвердеет (теперь он будет непрозрачным, а не прозрачным), гребешок удаляется.
• Сейчас многие люди используют готовые гели.
• Затем гель помещают в емкость для электрофореза, и буфер для электрофореза наливают в емкость до тех пор, пока поверхность геля не будет покрыта. Буфер проводит электрический ток.Тип используемого буфера зависит от приблизительного размера фрагментов ДНК в образце.

Подготовка ДНК к электрофорезу

• Краситель добавляется к образцу ДНК перед электрофорезом, чтобы увеличить вязкость образца, что предотвратит его выплытие из лунок и так, чтобы миграция образца через гель видно.
• Маркер ДНК (также известный как стандарт размера или лестница ДНК) загружается в первую лунку геля.Фрагменты в маркере имеют известную длину, поэтому их можно использовать для приблизительного определения размера фрагментов в образцах.
• Подготовленные образцы ДНК затем переносятся в оставшиеся лунки геля.
• Когда это будет сделано, крышка помещается на резервуар для электрофореза, проверяя правильность ориентации геля, положительного и отрицательного электродов (мы хотим, чтобы ДНК перемещалась через гель к положительному концу).

Разделение фрагментов

• Затем включается электрический ток, так что отрицательно заряженная ДНК перемещается через гель к положительной стороне геля.
• Более короткие участки ДНК перемещаются быстрее, чем более длинные, поэтому перемещайтесь дальше во время прохождения тока.
• Расстояние, на которое ДНК мигрировала в геле, можно оценить визуально, отслеживая миграцию красителя загрузочного буфера.
• Электрический ток остается включенным достаточно долго, чтобы гарантировать, что фрагменты ДНК перемещаются по гелю достаточно далеко, чтобы разделить их, но не настолько долго, чтобы они стекали с конца геля.

Иллюстрация оборудования для электрофореза ДНК, используемого для разделения фрагментов ДНК по размеру.Гель находится в резервуаре с буфером. Образцы ДНК помещают в лунки на одном конце геля, и через гель пропускают электрический ток. Отрицательно заряженная ДНК движется к положительному электроду. Изображение предоставлено: Genome Research Limited

Визуализация результатов

• После того, как ДНК прошла достаточно далеко по гелю, электрический ток отключается, и гель удаляется из емкости для электрофореза.
• Для визуализации ДНК гель окрашивают флуоресцентным красителем, который связывается с ДНК, и помещают на ультрафиолетовый трансиллюминатор, который показывает окрашенную ДНК в виде ярких полос.
• В качестве альтернативы краситель можно смешать с гелем перед его заливкой.
• Если гель растекся правильно, будет видна полосатая структура маркера ДНК / стандарта размера.
• Затем можно оценить размер ДНК в вашем образце, представив горизонтальную линию, проходящую поперек полос маркера ДНК. Затем вы можете оценить размер ДНК в образце, сопоставив их с ближайшей полосой в маркере.

Иллюстрация, показывающая полосы ДНК, разделенные на геле.Длина фрагментов ДНК сравнивается с маркером, содержащим фрагменты известной длины. Изображение предоставлено: Genome Research Limited

Эта страница последний раз обновлялась 21.07.2021

Как работает электрофорез | Sciencing

Гель-электрофорез, часто также называемый электрофорезом ДНК или просто электрофорезом, — это метод, который используется для разделения фрагментов ДНК (и других заряженных молекул) по размеру. Обычно это делается с помощью геля агарозы и электрического заряда, чтобы отделить фрагменты друг от друга.

У этого метода есть несколько приложений, включая исследование ДНК, снятие отпечатков пальцев ДНК, криминологию, а также различные медицинские приложения.

Что такое гель-электрофорез?

Гель-электрофорез — это метод, позволяющий ученым разделять заряженные молекулы по размеру. Это включает ДНК, РНК и белки.

Помните, что ДНК и РНК имеют небольшой отрицательный заряд благодаря отрицательно заряженным молекулам кислорода в сахарно-фосфатной основе молекулы.Белки могут иметь ряд зарядов в зависимости от аминокислот в полипептидной цепи.

Компоненты электрофореза

Для проведения электрофореза сначала необходимо приготовить гель. Это можно сделать практически в любой лаборатории; Наиболее распространены агарозные гели. Чтобы сделать гель, порошок агарозы смешивают со специальным буфером, называемым буфером для электрофореза. Затем эту смесь нагревают до растворения агарозы и полностью смешивают с буферным раствором.

Обратите внимание, что некоторые протоколы электрофореза требуют добавления бромистого этидия (Et-Br).Это окрашивает любую ДНК, используемую в электрофорезе, чтобы вы могли видеть положение фрагментов в УФ-свете.

Формование геля

Затем его выливают в прямоугольную форму, называемую лотком для заливки геля. Наряду с формой, которая создает прямоугольный гель, используемый для электрофореза, на одном из концов геля помещается гребешок. Эта гребенка создает лунки, в которые загружаются образцы, которые вы хотите разделить с помощью электрофореза. Вы можете увидеть картинку здесь.

После затвердевания геля гребенку из лунок удаляют и гель помещают в специальный резервуар для электрофореза.Другой буфер заполняется в резервуар до тех пор, пока небольшой слой буфера полностью не покроет агарозный гель.

Этот резервуар вырабатывает электрический ток (от 50 до 150 В) через буферный раствор и, в свою очередь, через гель агарозы. Лунки с агарозным гелем помещают на отрицательном конце тока (катод ), а другой конец геля на положительном конце тока (анод ).

Как работает электрофорез?

Перед тем, как электрический ток будет пропущен через резервуар и гель, ваши образцы загружаются в лунки.Это делается с помощью микропипетки. «Маркерный» образец, также известный как «лестница ДНК», представляет собой образец с известными размерами фрагментов ДНК, который может помочь вам сравнить ваши образцы и понять размеры исследуемого образца.

Часто следящий краситель (также называемый загрузочным красителем) добавляется к каждому образцу, чтобы помочь вам загрузить образец в лунки. Краситель также помогает отслеживать движение образцов через гель.

Так как же на самом деле образцы проходят через гель и разделяются по размеру? Это связано с электрическим током , который проходит через агарозный гель, а также с размером / структурой фрагментов и агарозного геля.

Заряд и размер Определите полосы ДНК

Помните, что в целом заряд ДНК составляет отрицательных . Таким образом, когда эти образцы помещаются в лунки, которые находятся рядом с отрицательным концом электрического тока, это приведет к тому, что отрицательно заряженная ДНК отодвинется на от катода (отрицательный заряд) и переместится на к аноду (положительный заряд). на противоположном конце.

Помимо этого движения образцов, электрофорез также разделяет образцы и фрагменты в этих образцах по размеру.Это связано с тем, что более мелких молекул и фрагментов могут двигаться быстрее и легче через гель, в то время как более крупные молекулы и фрагменты перемещаются медленнее . Это означает, что мелкие фрагменты будут двигаться к концу геля быстрее, чем более крупные, и в результате каждый фрагмент разделяется по размеру.

После прохождения геля в течение примерно часа (в большинстве протоколов) заряд отключается и гель анализируется. Вы увидите отчетливую прямоугольную полосу, часто называемую полосой ДНК или полосой белка, в различных точках геля.Каждая полоса представляет собой один фрагмент, который двигался по гелю.

Применение и использование электрофореза

В лаборатории есть множество применений электрофореза. Вот лишь некоторые из них:

• Дактилоскопия ДНК для мест совершения преступлений и генетического тестирования
• Тестирование продуктов полимеразной цепной реакции
• Анализ генов для медицинских целей
• Сравнение ДНК между видами или потомками
Анализ эволюционных и таксономических отношений между видами
• Понимание того, где рестриктазы разрезают разные участки ДНК
• Тестирование отцовства
• Тестирование устойчивости к антибиотикам

Электрофорез в агарозном геле

Примечания

7 Электрофорез

Мы используем электрофорез для разделения нуклеиновых кислот или белков по размеру и / или заряду, в зависимости от того, что мы добавили в наши решения (больше проблема с SDS-PAGE; см. Главу 7).По сути, при гель-электрофорезе вы помещаете свои образцы в гелевую матрицу, и ваши отрицательно заряженные нуклеиновые кислоты (отрицательно заряженные из-за их фосфатной «основы») отталкиваются от отрицательного полюса ваших электродов к положительному полюсу на другом конце электрода. гель. Более крупные РНК и ДНК (и белки в SDS-PAGE) труднее проходят через гелевый матрикс, и поэтому вы можете разделить свои РНК / ДНК / белки по размеру. Кроме того, это единственный способ проверить результаты конечной ПЦР (см. Раздел ПЦР в главе 4).По моему опыту, использование гелей для электрофореза — это баланс между эффективностью и красотой: запуск геля при более высоком напряжении будет перемещать образцы по гелю быстрее, но получающиеся полосы с большей вероятностью будут размазаны (и если вы установите достаточно высокое напряжение, вы растопите гель и разрушите всю свою тяжелую работу). Запустите гели при более низком напряжении, и вы получите более красивую картинку, но вам придется подождать.

У меня есть опыт работы с тремя типами гель-электрофореза: электрофорез в агарозном геле, денатурирующий (формальдегидный) гель-электрофорез и электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE).Гели агарозы дешевы и могут использоваться для исследования стабильности РНК или ДНК. Денатурирующий гель-электрофорез можно использовать с РНК для нозерн-блоттинга, но в большинстве случаев в нем нет необходимости, если вашей целью является исследование стабильности РНК, которую можно исследовать с помощью электрофореза в агарозном геле. Хотя для электрофореза в агарозном геле можно приготовить растворы без РНКазы, я считаю, что это необходимо только для загрузочного буфера и воды, но не для геля или буфера. Растворы без РНКазы необходимы, если кто-то решает провести нозерн-блоттинг, которые не обсуждаются в этой книге.SDS-PAGE наиболее полезен для разделения белков и поэтому обсуждается в главе 7.

При электрофорезе в агарозном геле используется один из двух буферов: трис-ацетат-EDTA (TAE) или трис-борат-EDTA (TBE). TBE имеет более высокую буферную емкость, чем TAE. Компоненты буфера TBE выпадают в осадок из раствора при хранении в более высоких концентрациях (например, 10-кратный раствор), поэтому я держу 0,5-кратный запас и избегаю проблем с осаждением и стабильностью.

Визуализация результатов электрофореза в агарозном геле обычно выполняется одним из двух способов: включение ДНК-связывающего флуорофора в раствор геля или сохранение этого флуорофора в буферном растворе, промывание в нем агарозного геля и использование этого раствора для многократного использования. гели.В обоих случаях вы будете использовать ультрафиолетовый свет, чтобы возбудить флуорофор и увидеть результаты эксперимента. Наиболее распространенным ДНК-связывающим флуорофором является бромид этидия (EtBr). EtBr токсичен, и ваш местный совет по охране окружающей среды и безопасности дает рекомендации, как с ним обращаться; делай то, что они тебе говорят. Другой распространенный флуорофор, который я использую, — SYBR Safe ™ ¹ (Invitrogen). SYBR Safe ™ лучше справляется с тестами на токсичность на лабораторных животных, чем EtBr, но употребление чего-либо, связывающего ДНК, — не лучшая идея.По моему опыту, SYBR Safe ™ со временем разлагается в свободном растворе, но не в накопленном 10 000-кратном концентрате. Таким образом, я получаю стабильные результаты, добавляя SYBR Safe ™ (или EtBr) в раствор геля после того, как он достаточно остынет, перед заливкой геля. Когда флуорофор находится в свободном растворе, необходимо инкубировать гели в течение более длительных периодов времени, чтобы получить эквивалентное окрашивание в повторно используемом растворе; однако, если вы исследуете гели на флуоресценцию, вы не можете сказать, является ли отсутствие флуоресценции результатом того, что эксперимент не сработал, вы недостаточно долго инкубировали в растворе или вам нужно приготовить свежий раствор флуорофора. .Кроме того, промывание в растворе флуорофора обычно требует промывки в воде, чтобы уменьшить фоновый шум, и вы можете оставить его в воде на столько времени, чтобы вымыть флуорофор. В целом, я думаю, что включение флуорофора в гель — это правильный выбор, и вы со временем будете использовать его меньше, если не будете менять раствор для окрашивания каждые пару дней.

Хороший справочник по этому разделу — книга Кэти Баркер At the Bench . ²

Определение и объяснение электрофореза

Электрофорез — это термин, используемый для описания движения частиц в геле или жидкости в относительно однородном электрическом поле.Электрофорез можно использовать для разделения молекул на основе заряда, размера и сродства связывания. Этот метод в основном применяется для разделения и анализа биомолекул, таких как ДНК, РНК, белки, нуклеиновые кислоты, плазмиды и фрагменты этих макромолекул. Электрофорез — это один из методов, используемых для идентификации исходной ДНК, как при проверке отцовства, так и в судебной медицине.

Электрофорез анионов или отрицательно заряженных частиц называется анафорезом . Электрофорез катионов или положительно заряженных частиц называется катафорезом .

Электрофорез был впервые обнаружен в 1807 году Фердинандом Фредериком Ройссом из Московского государственного университета, который заметил, что частицы глины мигрировали в воде, находящейся под постоянным электрическим полем.

Ключевые выводы: электрофорез

• Электрофорез — это метод, используемый для разделения молекул в геле или жидкости с помощью электрического поля.
• Скорость и направление движения частицы в электрическом поле зависит от размера молекулы и электрического заряда.
• Обычно электрофорез используется для разделения макромолекул, таких как ДНК, РНК или белки.

Как работает электрофорез

В электрофорезе есть два основных фактора, которые определяют, насколько быстро частица может двигаться и в каком направлении. Во-первых, имеет значение плата за образец. Отрицательно заряженные частицы притягиваются к положительному полюсу электрического поля, а положительно заряженные частицы — к отрицательному. Нейтральные частицы могут быть ионизированы, если поле достаточно сильное.В противном случае это не повлияет.

Другой фактор — размер частиц. Маленькие ионы и молекулы могут перемещаться через гель или жидкость намного быстрее, чем более крупные.

В то время как заряженная частица притягивается к противоположному заряду в электрическом поле, существуют и другие силы, которые влияют на движение молекулы. Трение и сила электростатического замедления замедляют продвижение частиц через жидкость или гель. В случае гель-электрофореза концентрацию геля можно контролировать для определения размера пор гелевой матрицы, который влияет на подвижность.Также присутствует жидкий буфер, который контролирует pH окружающей среды.

Когда молекулы протягиваются через жидкость или гель, среда нагревается. Это может денатурировать молекулы, а также повлиять на скорость движения. Напряжение регулируется, чтобы попытаться свести к минимуму время, необходимое для разделения молекул, сохраняя при этом хорошее разделение и сохраняя нетронутыми химические частицы. Иногда электрофорез проводят в холодильнике, чтобы компенсировать жару.

Типы электрофореза

Электрофорез включает в себя несколько связанных аналитических методов.Примеры включают:

• аффинный электрофорез — Аффинный электрофорез — это тип электрофореза, при котором частицы разделяются на основе комплексообразования или биоспецифического взаимодействия
• капиллярный электрофорез — Капиллярный электрофорез — это тип электрофореза, используемый для разделения ионов в зависимости от радиуса , заряд и вязкость. Как следует из названия, эта техника обычно выполняется в стеклянной трубке. Он дает быстрые результаты и высокое разрешение разделения.
• гель-электрофорез — Гель-электрофорез — это широко используемый тип электрофореза, при котором молекулы разделяются движением через пористый гель под действием электрического поля. Двумя основными гелевыми материалами являются агароза и полиакриламид. Гель-электрофорез используется для разделения нуклеиновых кислот (ДНК и РНК), фрагментов нуклеиновых кислот и белков.
• иммуноэлектрофорез — Иммуноэлектрофорез — это общее название, данное множеству электрофоретических методов, используемых для характеристики и разделения белков на основе их реакции на антитела.
• электроблоттинг — Электроблоттинг — это метод, используемый для выделения нуклеиновых кислот или белков после электрофореза путем переноса их на мембрану. Обычно используются полимеры поливинилиденфторид (ПВДФ) или нитроцеллюлоза. После извлечения образца его можно дополнительно проанализировать с помощью красителей или зондов. Вестерн-блоттинг — это одна из форм электроблоттинга, используемая для обнаружения определенных белков с использованием искусственных антител.
• Гель-электрофорез в импульсном поле — Электрофорез в импульсном поле используется для разделения макромолекул, таких как ДНК, путем периодического изменения направления электрического поля, приложенного к гелевой матрице.Причина изменения электрического поля заключается в том, что традиционный гель-электрофорез не может эффективно разделить очень большие молекулы, которые все стремятся мигрировать вместе. Изменение направления электрического поля дает молекулам дополнительные направления движения, так что у них есть путь через гель. Напряжение обычно переключается между тремя направлениями: одно проходит вдоль оси геля, а два — под углом 60 градусов в каждую сторону. Хотя этот процесс занимает больше времени, чем традиционный гель-электрофорез, он лучше разделяет большие фрагменты ДНК.
• изоэлектрическая фокусировка — Изоэлектрическая фокусировка (IEF или электрофокусировка) — это форма электрофореза, при которой молекулы разделяются по разным изоэлектрическим точкам. ИЭФ чаще всего выполняется с белками, потому что их электрический заряд зависит от pH.

Что такое электрофорез? — Cleaver Scientific

Электрофорез — это электрокинетический процесс, при котором заряженные частицы в жидкости разделяются с помощью поля электрического заряда. Это наиболее часто используется в науках о жизни для разделения молекул белка или ДНК и может быть достигнуто с помощью нескольких различных процедур в зависимости от типа и размера молекул.Процедуры в чем-то различаются, но все они нуждаются в источнике электрического заряда, поддерживающей среде и буферном растворе. Электрофорез используется в лабораториях для разделения молекул по размеру, плотности и чистоте.

Как это работает?

К молекулам приложено электрическое поле, и, поскольку они сами электрически заряжены, на них действует сила. Чем больше заряд молекулы, тем больше сила, приложенная электрическим полем, и, следовательно, тем дальше через поддерживающую среду молекула будет двигаться относительно своей массы.

Некоторые примеры применения электрофореза включают анализ ДНК и РНК, а также электрофорез белков, который представляет собой медицинскую процедуру, используемую для анализа и разделения молекул, обнаруженных в образце жидкости (чаще всего в образцах крови и мочи).

Типы электрофореза

В качестве поддерживающей среды для электрофореза обычно используются различные типы гелей, которые могут иметь форму пластин или пробирок, в зависимости от того, что более выгодно. Гелевые пластины позволяют одновременно обрабатывать множество образцов и поэтому часто используются в лабораториях.Однако гели для пробирок дают лучшее разрешение результатов, поэтому их часто выбирают для электрофореза белков.

Агарозный гель обычно используется для электрофореза ДНК. Он имеет крупнопористую структуру, позволяющую более крупным молекулам легко перемещаться, но он не подходит для секвенирования более мелких молекул.

Электрофорез в полиакриламидном геле (PAGE) имеет более четкое разрешение, чем в агарозном геле, что делает его более подходящим для количественного анализа. Это позволяет определить, как белки связываются с ДНК.Его также можно использовать для понимания того, как бактерии становятся устойчивыми к антибиотикам с помощью анализа плазмид.

2D-электрофорез разделяет молекулы по оси x и оси y: одна разделяет их по заряду, а другая — по размеру.

Гель-электрофорез — определение, цель и этапы

Гель-электрофорез Определение

Гель-электрофорез — это процедура, используемая для разделения биологических молекул по размеру. Разделение этих молекул достигается помещением их в гель с небольшими порами и созданием электрического поля поперек геля.Молекулы будут двигаться быстрее или медленнее в зависимости от их размера и электрического заряда.

Обзор гель-электрофореза

Процесс гель-электрофореза работает, потому что отрицательно заряженные молекулы удаляются от отрицательного полюса электрического тока, а молекулы меньшего размера будут двигаться быстрее, чем молекулы большего размера. Таким образом, разделение по размерам достигается в пуле молекул, проходящих через гель. Гель работает аналогично сите, разделяя частицы по размеру.Электрофорез перемещает частицы, используя свой собственный электрический заряд, через сито.

Когда исследователи пытаются различить разные сегменты ДНК, например, процесс прост. Образцы загружаются в каналы в начале геля. Каждая молекула ДНК имеет одинаковый заряд (-1), потому что ДНК образована одними и теми же 4 нуклеотидами и всегда несет слегка отрицательный заряд независимо от ее размера. Следовательно, каждая молекула ДНК будет иметь одинаковую силу, протягивая ее через гель.

Однако размер каждой молекулы препятствует ее прохождению через гель. Большие молекулы ударяются о части гелевой матрицы и замедляются. Небольшие молекулы ДНК могут скользить между различными компонентами гелевой матрицы и быстро переходить на другую сторону геля. По прошествии определенного времени можно увидеть агрегацию окрашенных молекул ДНК в различных областях геля в зависимости от того, как далеко они переместились во время гель-электрофореза. Это позволяет исследователям идентифицировать сегменты и сравнивать ДНК разных организмов.

Для чего используется гель-электрофорез?

Цель гель-электрофореза — визуализировать, идентифицировать и различать молекулы , которые были обработаны с помощью предыдущего метода, такого как ПЦР, ферментативное расщепление или экспериментальные условия. Часто смеси нуклеиновых кислот или белков, собранные в предыдущем эксперименте / методе, подвергаются гель-электрофорезу для определения идентичности или различения молекул.

Этапы гель-электрофореза

Общие этапы стандартного протокола гель-электрофореза ДНК:

1.Подготовка образцов для анализа

ДНК выделяется и предварительно обрабатывается (например, ПЦР, ферментативное расщепление) и смешивается с некоторым основным синим красителем, чтобы помочь визуализировать движение образца через гель.

2. Готовят раствор агарозного геля TAE.

Буфер TAE обеспечивает источник ионов для создания электрического поля во время электрофореза. Отношение веса к объему агарозы в буфере TAE используется для приготовления раствора.Например, если требуется 1% гель агарозы, 1 г агарозы добавляют к 100 мл TAE. Используемый процент агарозы определяется ожидаемым размером ДНК. Если кто-то хочет разделить пул полос ДНК меньшего размера (<500 п.н.), готовится гель с более высоким процентным содержанием агарозы (> 1%). Более высокий процент агарозы создает более плотное сито для увеличения разделения небольших различий в длине ДНК. Раствор агароза-ТАЕ нагревают до растворения агарозы.

3.Отливка геля

Раствор TAE агарозы выливают в лоток для отливки , который после охлаждения и затвердевания раствора геля образует пластину геля с рядом лунок наверху.

4. Установка камеры для электрофореза

Твердый гель помещают в камеру, заполненную буфером TAE. Гель располагается так, чтобы лунки камеры находились ближе всего к отрицательному электроду камеры.

5. Загрузка геля

Лунки гелевой камеры загружаются образцами ДНК, и обычно лестница ДНК также загружается в качестве эталона для размеров.

6. Электрофорез

Отрицательный и положительный выводы подключены к камере и к источнику питания, на котором устанавливается напряжение. При включении источника питания создается электрическое поле. , и отрицательно заряженные образцы ДНК начинают мигрировать через гель от отрицательного электрода к положительному.

7. Остановка электрофореза и визуализация ДНК

После того, как синий краситель в образцах ДНК прошел через гель достаточно далеко, питание отключают, гель удаляют и помещают в раствор бромистого этидия.Бромид этидия внедряется между ДНК и виден в ультрафиолетовом свете. Иногда бромид этидия добавляют непосредственно в раствор агарозного геля на этапе 2. Гель, окрашенный бромидом этидия, затем подвергается воздействию УФ-излучения и делается снимок. На каждой дорожке, соответствующей лунке камеры, визуализируется полос ДНК. Также визуализируется загруженная лестница ДНК и можно оценить длину полос ДНК. Пример приведен на рисунке ниже.

Гель-электрофорез

Типы гель-электрофореза

Существует два типа гель-электрофореза: нативный и денатурирующий. Электрофорез в нативном геле обычно пытается сохранить РНК или белок в его нативной структуре при прохождении через гель. Денатурирующий гель-электрофорез пытается восстановить наиболее линейную структуру РНК или белка до или во время гель-электрофореза.

Денатурация РНК или белка достигается добавлением восстанавливающего агента к образцу, гелю и / или буферу. Восстанавливающий агент разделяет связи в молекуле РНК или белка и тем самым уменьшает ее вторичную структуру. Вторичная структура белка или РНК будет нелинейным образом влиять на скорость его миграции через гель. Однако денатурированная линейная форма РНК или белка будет мигрировать пропорционально своему линейному размеру (парам оснований или килодальтонам). Денатурирующий гель-электрофорез часто более точен для определения размера, тогда как нативный гель-электрофорез обычно используется для идентификации более крупных белковых комплексов.

Примеры гель-электрофореза

• TAE-электрофорез в агарозном геле чаще всего используется для ДНК.
• TBE и денатурирующий PAGE (электрофорез в полиакриламидном геле) являются общими для разделения РНК.
• SDS PAGE — это денатурирующий гель-электрофорез, обычно используемый для идентификации и разделения белков.

Тест

Гель-электрофорез | BioNinja

Понимание:

• Гель-электрофорез используется для разделения белков или фрагментов ДНК в соответствии с размером

Гель-электрофорез — это лабораторный метод, используемый для разделения и выделения белков или фрагментов ДНК в зависимости от массы / размера

• Образцы помещаются в блок из геля и прикладывается электрический ток, который заставляет образцы перемещаться через гель
• Меньшие образцы менее затруднены гелевой матрицей и, следовательно, будут быстрее перемещаться через гель
• Это приводит к разделению образцов разных размеров при их перемещении с разной скоростью

Обзор гель-электрофореза

Хотя и ДНК, и белки разделяются в соответствии с одним и тем же основным процессом, между двумя протоколами существуют различия.

Разделение ДНК

• ДНК можно разрезать на фрагменты с помощью рестрикционной эндонуклеазы — разные образцы ДНК будут генерировать фрагменты разной длины
• Фрагменты разделяются, потому что ДНК отрицательно заряжена из-за присутствия фосфатной группы (PO ₄ ^3–) на каждом нуклеотиде
• Образцы ДНК помещают в гель агарозы и размер фрагмента рассчитывают путем сравнения с известным отраслевые стандарты
• Специфические последовательности могут быть идентифицированы путем включения комплементарного зонда гибридизации с радиоактивной меткой, переноса разделенных последовательностей на мембрану и последующей визуализации с помощью авторадиографии (Саузерн-блоттинг)

Электрофорез в агарозном геле (ДНК)

Разделение белков

• Белки могут складываться в различные формы (влияющие на размер) и иметь положительные и отрицательные области (без четкого заряда)
• Белки должны быть сначала обработаны анионным детергентом (SDS) в для линеаризации и придания однородного отрицательного заряда
• Образцы белка помещают в гель из полиакриламида и сравнивают размеры с известными промышленными стандартами
• Разделенные белки переносятся на мембрану, а затем целевые белки идентифицируются путем окрашивания специфическими моноклональными антителами ( Вестерн-блоттинг)

Электрофорез в полиакриламидном геле (белки)

.