Электрофорез побочные эффекты: Электрофорез: показания и противопоказания применения с эуфиллином, лидазой, карипазимом, кальцием хлоридом

• Диагностика
  • Компьютерная томография
  • МРТ диагностика
  • Медицинские манипуляции
  • Обследование организма
  • Эндоскопия (эндоскопические исследования)
  • Радионуклидная диагностика
  • Рентген (рентгенологические исследования)
  • Ультразвуковая диагностика (УЗИ)
• Лечение
  • Операции
  • Врачебные специальности
  • Лечение болезней
  • Обзор лекарственных средств
  • Нетрадиционная медицина
  • Стволовые клетки
  • Физиотерапия
  • Переливание крови
  • Трансплантация
• Болезни
  • Беременность, роды и послеродовой период
  • Синдромы
  • Хирургические болезни
  • Болезни зубов (стоматология)
  • Болезни молочных желез (маммология)
  • Болезни суставов, мышц и соединительной ткани (ревматология)
  • Рак (онкология)
  • Болезни иммунной системы (иммунология)
  • Болезни крови (гематология)
  • Болезни сердца и сосудов (кардиология)
  • Психическое здоровье (психиатрия)
  • Травмы и отравления
  • Болезни кожи и подкожной клетчатки (дерматология)
  • Болезни легких, бронхов и плевры (пульмонология)
  • Болезни уха, горла и носа (отоларингология)
  • Болезни эндокринной системы и нарушения обмена веществ (эндокринология)
  • Инфекции, передающиеся преимущественно половым путем (венерические болезни)
  • Гинекологические болезни (гинекология)
  • Болезни глаз (офтальмология)
  • Болезни детей (педиатрия)
  • Болезни печени и желчных путей
  • Болезни прямой кишки и анальной области
  • Болезни нервной системы (неврология)
  • Болезни желудочно-кишечного тракта (гастроэнтерология)
  • Инфекционные и паразитарные болезни
  • Болезни мочеполовой системы
• Анализы
  • Анализы на гормоны
  • Гематологические исследования
  • Генетические исследования
  • Определение наркотиков
  • Пренатальная диагностика
  • ПЦР (Полимеразная цепная реакция, ПЦР-диагностика)
  • Серологические исследования
  • Токсикологические исследования
  • Онкомаркеры
  • Диагностика аутоиммунных заболеваний

что это: показания к процедуре

Применяемый в рамках физиотерапии данный метод аппаратного введения лекарств помогает безболезненно доставить нужное средство непосредственно к патологическому очагу. Узнайте, какие медикаменты можно транспортировать в организм при помощи этой процедуры.

Что такое электрофорез

Тема благотворного влияния тока на здоровье человека поднималась научным сообществом с давних времен. Лекарственный электрофорез, который в медицине еще называют гальванофорезом, гальванизацией или ионофорезом, предполагает преобразование под воздействием электрических импульсов разных медикаментозных средств в мельчайшие частицы – ионы с дальнейшей доставкой последних в проблемные области. При аппаратном введении лекарственных препаратов большая их часть остается в слоях дермы. Остатки же транспортируются с кровью и лимфой по всему организму.

Показания и противопоказания

Данная процедура эффективна против целого ряда заболеваний. Недопонимание относительно того, электрофорез — что это, возникает у многих пациентов, впервые собирающихся пройти данную процедуру. Аппаратное введение лекарств рекомендуется при многих диагнозах: от нарушений опорно-двигательного аппарата до офтальмологических проблем. По этой причине вопрос, для чего нужен электрофорез, невозможно полностью раскрыть. Между тем для аппаратного введения медикаментов имеются некоторые ограничения. Противопоказания к электрофорезу следующие:

• патологии сосудов и сердца;
• онкологические заболевания;
• повышенная температура;
• воспалительные процессы в стадии обострения;
• экзема и дерматитные проявления;
• аллергия на вводимые во время процедуры лекарства

Электрофорез с эуфиллином

Аппаратное введение ионов этого лекарства помогает достичь бронхорасширяющего, противовоспалительного и болеутоляющего эффектов. Эуфиллин для электрофореза используется в виде 2-процентного раствора, который под влиянием тока проникает в слои дермы пациента. Оседание лекарства в подкожно-жировой клетчатке способствует его постепенному, дозированному поступлению в организм.

Стоит сказать, что за время процедуры происходит интенсивное насыщение хрящевой ткани больного активными компонентами препарата. Такая фармакология эуфиллина используется при лечении болезней опорно-двигательного аппарата: остеохондроза воротниковой зоны и поясничного отдела, межпозвоночной грыжи. Кроме того, его аппаратное введение применяется для улучшения мозгового и почечного кровообращения, лечения бронхита.

С лидазой

Указанное ферментное вещество участвует в расщеплении гиалуроновой кислоты, способствует более активному движению межсуставной жидкости. Лидаза для электрофореза выбирается с целью предупреждения и лечения спаечного процесса, воспалительных явлений разной локализации. Процедура способствует рассасыванию послеоперационных рубцов, восстановлению кожи после ожогов.

Аппаратное введение лидазы эффективно против негативных последствий пневмонии, туберкулеза, бронхита. Лечение отита и других воспалительных поражений ушей может осуществляться посредством одновременного использования эндоурального катафореза и внешнего анафореза. При этом раствором лидазы пропитывается только катод. Анод располагается на шее.

С карипазимом

Гальванический ток помогает транспортировать активное вещество препарата непосредственно к проблемной области. Электрофорез с карипазимом применяется для лечения патологий позвоночника и суставов. Процедура особенно эффективна при межпозвоночной грыже. Ткани, за счет которых образуется болезненное выпячивание в позвоночном столбе, под воздействием тока размягчаются, что уменьшает раздражительность нервных корешков и, как следствие, выраженность болевого синдрома.

С новокаином

Аппаратное введение этого анестезирующего медикамента осуществляется для получения обезболивающего эффекта. Электрофорез с новокаином показан при нейропатических синдромах, радикулите, остеохондрозе и других суставных патологиях. Особенно эффективно при этом применение физиотерапии совместно с лечебным массажем и другими мануальными процедурами.

С кальцием

Данный нутриент считается универсальным веществом для аппаратного введения. Так, ионофорез с хлоридом кальция применяется для лечения воспалений ротовой полости, миозитов, дисплазии тазобедренных суставов. Отдельно стоит упомянуть, что врачи назначают введение этого минерала аппаратным методом при патологиях свертываемости крови. Особенно важен кальций для грудничков. При нехватке этого элемента костная ткань ребенка развивается по неправильному алгоритму.

С гидрокортизоном

Аппаратное введение лекарственных средств группы глюкокортикостероидов применяется для купирования аллергических и аутоиммунных состояний. Электрофорез с гидрокортизоном часто используется в неврологической практике. Стоит отметить, то данная процедура помогает избавиться от экземы, дерматитных проявлений. В зависимости от степени повреждения кожных покровов, для аппаратного введения рекомендуется использовать крем либо эмульсию на основе гидрокортизона.

С магнезией

Под действием гальванического тока сульфат магния легко проникает сквозь клеточную мембрану. Достаточное количество этого нутриента в организме является залогом здоровья нервной, сердечно-сосудистой систем. Данный минерал участвует во многих химических реакциях, от него во многом зависит энергетический потенциал клетки. Электрофорез с магнезией борется с воспалениями, способствует нормализации сердечного ритма и артериального давления. Между тем сульфат магния запрещено применять при желудочных кровотечениях, патологиях почек и печени.

С прозерином

В инструкции к данному препарату указано, что он обладает высокой антихолинэстеразной активностью. По этой причине электрофорезом с прозерином лечат многие неврологические патологии, которые сопровождаются снижением тонуса мышц и нарушением проводимости электрических импульсов. Важно отметить, что схожим фармакологическим действием обладают и широко применяемые в физиотерапии препараты брома. Показаниями к назначению аппаратного введения прозерина служат:

• миастения;
• невриты разных частей тела;
• атония мочевого пузыря;
• восстановление после инсульта;
• перенесенные вирусные нейроинфекции.

С димексидом

Процедура помогает добиться антибактериального, противовоспалительного эффекта. С ее помощью проводят лечение остеохондроза, разных суставных патологий, гнойниковой инфекции в стадии ремиссии. Электрофорез с димексидом особенно полезен людям, которым по каким-либо причинам нельзя осуществлять пероральное или инъекционное введение антибактериальных средств. Важно отметить, что процедура практически не имеет побочных эффектов.

С лидокаином

Метод подразумевает местное аппаратное введение анестетика с целью обезболивания. Сравнивая эффекты, получаемые после транспортировки током новокаина и указанного препарата, можно сказать, что электрофорез с лидокаином отличается менее интенсивным воздействием на тканевые структуры. Показанием для такой доставки анестезирующего лекарственного средства в организм служит ярко выраженный болевой синдром разной этиологии.

С никотиновой кислотой

Аппаратное введение этого водорастворимого витамина, или ниацина, обеспечивает нормальное протекание окислительно-восстановительных реакций. Электрофорез с никотиновой кислотой может проводиться с разными целями. Установлено, что ниацин весьма полезен для пациентов, страдающих от сахарного диабета и сердечно-сосудистых заболеваний. Кроме того, аппаратное введение ионов никотиновой кислоты помогает уменьшить концентрацию липопротеинов и триглицеридов в крови.

С дибазолом

Миотропный спазмолитик используется для лечения артериальной гипертонии, облегчения передачи нервных импульсов в спинном мозге. Электрофорез с дибазолом нередко применяется как метод формирования неспецифической сопротивляемости организма к воздействию экзогенных раздражающих факторов. К тому же создание в дерме больного своеобразного дибазолового депо обеспечивает синтезирование его собственного интерферона на протяжении длительного времени.

Электрофорез при беременности

В период вынашивания ребенка иммунитет женщины падает, что может послужить пусковым механизмом развития многих заболеваний. Большая часть лекарственных средств во время эмбрионального развития плода противопоказана к применению, поэтому электрофорез при беременности является своеобразным выходом из положения для будущих мам. Помимо этого, несомненными преимуществами данной процедуры являются:

1. безопасность для ребенка;
2. обеспечение высокой локальной концентрации лекарств на фоне их минимальной дозировки.

В гинекологии

Достижение терапевтического эффекта во время лечения болезней женской половой сферы сопряжено с некоторыми сложностями, связанными с точной постановкой диагноза и особенностями каждого отдельного клинического случая. Широко используемыми средствами для электрофореза в гинекологии являются растворы йода, магнезии и лидазы. Хороших результатов при лечении хронических воспалительных процессов с выраженным болевым синдромом помогает добиться аппаратное введение в нижнюю часть живота женщин йодистого калия.

Для детей

Маленькие пациенты в большинстве случаев проходят процедуру по методу Ратнера. Ученый предложил аппаратное введение эуфиллина и папаверина грудничкам с натальными цереброспинальными повреждениями. Электрофорез для детей постарше назначается при лечении бронхитов, диатеза. Методика часто используется при переломах конечностей. Насморк и другие проблемы с носовыми проходами лечатся эндоназальным введением растворов.

В стоматологии

Основным показанием для аппаратного введения лекарств в этой области медицины является инфицирование зубных каналов при периодонтите, пульпите. Методика проведения электрофореза в стоматологии предполагает целенаправленное транспортирование препаратов, благодаря которому происходит более активное восстановление поврежденных дентинных канальцев. Посредством такой доставки антибиотиков ликвидируется патогенный бактериальный фон, что предупреждает возникновение вторичного кариеса на запломбированном зубе.

В косметологии

Омоложение и оздоровление кожи при помощи тока можно проводить разными способами. Так, электрофорез в косметологии, или ионофорез, осуществляется посредством стационарных и лабильных электродов. Главным условием эффективного устранения проблем с кожными покровами является соблюдение полярности вводимого вещества. Отдельно стоит сказать о фонофорезе. Данная процедура предполагает введение витаминов и лекарственных препаратов в глубинные слои кожи при помощи испускаемых аппаратом ультразвуковых волн.

Домашний электрофорез

Процедуру можно также проводить самостоятельно посредством специальных приборов. Домашний электрофорез избавляет пациента от необходимости посещения медучреждения. Приборы для этой цели можно приобрести в аптечной сети по вполне доступным ценам. Осуществлять аппаратное введение лекарств в домашних условиях рекомендуется только после одобрения лечащего врача и ознакомления с инструкцией по тому, как делают электрофорез. В свободной продаже можно приобрести следующие приборы:

1. «Поток-1»
2. «Поток-БР»
3. «Элфор»
4. «АГН-32»

Побочные действия

В случае полного соблюдения всех условий правильного аппаратного введения медикаментов какие-либо негативные последствия, как правило, не возникают. Лекарственным электрофорезом, побочные действия которого обусловлены лишь индивидуальной непереносимостью применяемых во время сеанса препаратов, лечат даже грудничков. Вследствие этого не нужно сторониться ионофореза. Стоит ли говорить, что, помимо лечебного воздействия, вы ощутите еще и релаксационный эффект от процедуры.

Видео

КАК ДЕЛАТЬ ЭЛЕКТРОФОРЕЗ САМОСТОЯТЕЛЬНО Смотреть видео

Внимание! Информация, представленная в статье, носит ознакомительный характер. Материалы статьи не призывают к самостоятельному лечению. Только квалифицированный врач может поставить диагноз и дать рекомендации по лечению, исходя из индивидуальных особенностей конкретного пациента.

Побочные эффекты электрофореза, их профилактика и лечение. Электрофорез

Гальванизация – физиотерапевтический метод, при котором на тело пациента оказывается воздействие непрерывным электрическим током малой силы и напряжения.

Гальванический ток проникает в органы и ткани организма человека, стимулируя возникновение сложных физико-химических процессов.

Лечебный эффект

Механизм действия гальванизации заключается в непрерывном воздействии электрического тока небольшой силы и напряженности на отдельные участки тела и кожных покровов пациента. При воздействии тока на организм человека в клетках изменяется баланс ионов, и происходят физические и химические трансформации.

Применение гальванизации приводит к таким эффектам:

Основные параметры процедуры

Процедура гальванизации в физиотерапии может проводиться с различной дозировкой плотности, силы тока и по длительности воздействия. Для данного физиотерапевтического метода применяют ток невысокого напряжения (до 80 В) и незначительной силы (до 50 мА). Плотность тока варьируется от 0,01 мА/см2 до 0, 08 мА/см2.

Наиболее сильный ток применяют при терапевтическом воздействии на туловище и конечности (от 15 мА до 30 мА). При наложении электродов на область головы, лица, слизистых оболочек сила тока не превышает 5 мА.

Ток к телу пациента подводится при помощи электродов (свинцовые пластины толщиной до 1 мм, с влажной прокладкой, и подведенный к пластине шнур). Также электроды могут быть встроены в резервуар («ванночку»), применяемый для погружения в него части тела, требующей терапии. Гидрофильная прокладка и вода в резервуаре необходимы для предупреждения ожога кожных покровов пациента продуктами электролиза.

Электроды могут иметь прямоугольную форму, быть в виде полумаски (применение на лице), в виде «воротника» (для воздействия на верхнюю часть спины и надплечий), в виде воронки (для

показания и противопоказания, польза и вред

Механизм лечебного действия электрофореза

При контакте кожи с разноименными электродами образуются электромагнитные поля, стимулирующие образование новых ионов в лимфе и межклеточном пространстве. Электродные пластины фиксируются на участках кожи, где есть выходы сальных и потовых желез – в этой области осуществляется эффективное всасывание лекарственных средств .

Под катодом и анодом возникает одновременно несколько процессов:

• электродиффузия;
• поляризация;
• электроосмос.

В результате биохимического воздействия на нервные окончания, возникает ответная реакция организма – открываются поры, расширяются капиллярные сосуды, усиливается кровоток, активизируются обменные процессы ( резорбтивный эффект длится от 3 до 20 дней ).

В косметологической практике используются различные электролиты, обладающие оздоровительным, заживляющим, регенерирующим воздействием (на фирменных упаковках отмечен знак электрода, с которого должно вводиться под кожу средство).

По своему назначению препараты для электрофореза могут быть противовоспалительными, омолаживающими (нехирургический лифтинг), питательными, увлажняющими.

В лечебной косметологии активно используются такие препараты как гиалуроновая кислота, коллагеновые гели, маски на основе плацентарного состава, салициловая кислота, никотиновая кислота, антисептические эмульсии, лидаза.

С помощью электрофореза (альтернативное название процедуры – ионофорез) под кожу вводятся растворенные вытяжки из лекарственного растительного сырья, витамины, активные микроэлементы.

Электрофорез хорошо сочетается с талассотерапией , лечебным массажем , грязелечением и безинъекционной мезотерапией. Возможно проведение RF-лифтинга тела (что это такое), а также RF-лифтинга лица (фото до и после тут). Через день (в один день делать не рекомендуется) после сеанса электрофореза для усиления эффекта можно воспользоваться процедурами ультрафонофореза, гидромассажа с минеральным комплексом и лимфодренажным массажем.

Врач разрабатывает индивидуальную программу ухода за кожей, учитывая состояние кожных покровов, возраст, переносимость лекарственных компонентов, требования к эстетическому эффекту.

Поскольку ионофорез в сочетании с другими косметическими процедурами радикально улучшает кровообращение в периферических сосудах и оказывает противовоспалительное воздействие, уже через несколько сеансов кожа приобретает ровный матовый оттенок, исчезают участки с «жирным блеском» и шелушением.

Лечебные эффекты электрофореза складываются из эффектов гальванизации и фармакологических эффектов раствора лекарственного вещества.

Они таковы:

• на аноде: противовоспалительный, противоотёчный, обезболивающий, седативный;
• на катоде: сосудорасширяющий, миорелаксирующий, регенераторный, метаболический, секреторный.

Помимо терапевтических свойств лекарственного вещества, лечебные эффекты определяются форетической подвижностью в электромагнитном поле, характеристиками электрического тока, временем процедуры, количеством и концентрацией лекарственного вещества, видом растворителя, размером и зарядом ионов, а также областью его введения и общим состоянием пациента.

Постоянный ток, используемый для электрофореза, имеет следующие характеристики: низкое напряжение, не превышающее 80 В, и небольшая сила, не более 50 мА. При проведении процедуры электроды на теле пациента располагают продольно или поперечно. Подводимый к телу пациента ток дозируют по силе тока и его плотности – отношению силы тока к площади активного электрода.

Разрешённая плотность тока для процедуры электрофореза обычно не превышает 0,05 — 0,1 мА/см2. При общих и рефлекторно-сегментарных воздействиях плотность тока не должна превышать 0,05 мА/см2, при локальных процедурах — 0,1 мА/см2. Лекарственные вещества с помощью электрофореза вводятся с такого же полюса, каким обладает активный ион данного лекарственного препарата.

Растворы для электрофореза готовят на дистиллированной воде, концентрация растворов 1 — 5%. Для плохо растворимых веществ используют в качестве растворителя диметилсульфоксид (ДМСО). Некоторые лекарственные препараты (ферменты) не расщепляются на ионы и поэтому для их растворения используют буферные растворы: кислые и щелочные.

Все растворы для электрофореза хранятся не более 7 суток.

Лекарственный электрофорез осуществляют с помощью многоразовых пластинчатых электродов с гидрофильными прокладками или одноразовыми электродами для гальванизации. Особенность процедуры состоит в том, что под гидрофильной прокладкой на коже пациента размещают лекарственную прослойку, сделанную из фильтровальной бумаги или марли.

При электрофорезе одного лекарственного вещества (однополярный электрофорез) его раствором смачивают гидрофильную прокладку под одним электродом, а при использовании двух лекарственных веществ различной полярности (биполярный электрофорез) ими смачивают обе прокладки под катодом и анодом. Иногда используют раздвоенный электрод на одном полюсе.

Электроды фиксируют при помощи эластичных повязок, специальных мешочков или под весом тела больного. Во время процедуры пациент ощущает равномерное безболезненное покалывание или жжение.

В ванночку со встроенными электродами наливают необходимый раствор лекарственного вещества, после чего в неё погружают поражённую часть тела пациента и подключают аппарат. Чаще всего используются ванночки для верхних и нижних конечностей, ванночки для глаз.

Во время внутриполостного электрофореза полостной электрод обёртывают марлей или ватой, пропитанной раствором лекарственного вещества, который помещают внутрь полости (например, влагалища или прямой кишки), либо используют раздвоенный активный электрод для парных полостей (назальный, ушной электрофорез).

Перед процедурой электрофореза в организм вводят лекарственные препараты любым из традиционных способов (через рот, внутримышечно, внутривенно) и проводят гальванизацию поражённой области. Чаще всего внутритканевой электрофорез назначается при заболеваниях лёгких.

Электродрегинг

При электродренинге раствор лекарственного вещества, растворённого в ДМСО, не помещают на прокладку электрода, а наносят на кожу в пространстве между раздвоенным электродом. Третий электрод размещают поперечно к первым двум. Лекарственное вещество вводится током в организм человека не с прокладок, а с поверхности кожи, что уменьшает потерю лекарства.

ДМСО, обладая уникальной высокой транспортирующей способностью, повышает в 4 — 5 раз проницаемость тканей для медикаментов.

Курс лечения

Продолжительность процедуры электрофореза — 10 — 30 минут, общий курс составляет 10 — 20 процедур. Продолжительность процедуры и длительность курса лекарственного электрофореза зависит также от фармакологических свойств вводимых препаратов.

Повторный курс лекарственного электрофореза при необходимости назначают через месяц.

Положение — лёжа на животе. Первый электрод, напоминающий по форме воротник, располагают в области плечевого пояса и соединяют с анодом, второй электрод — в пояснично-крестцовой области, подключая к катоду. Лекарственные вещества вводят как с положительного, так и с отрицательного полюса, в зависимости от полярности ионов.

Данный вид электрофореза показан при вегетососудистой дистонии, гипертонической болезни, неврозах и др.

Положение — лёжа на спине. Один электрод, смоченный  раствором никотиновой кислоты, помещают на рукоятку грудины, второй, смоченный раствором эуфиллина, – на шейно-затылочную область. Данный вид электрофореза показан при нарушениях кровообращения в шейном отделе позвоночника, детском церебральном параличе.

Положение — лёжа. В зависимости от области поражения используют разные методики:

• два одинаковых по площади электрода фиксируют по бокам справа и слева и присоединяют к катоду и аноду;
• два одинаковых электрода фиксируют: один – на грудной клетке спереди, справа или слева, другой — поперечно на спине, соединяют с разными полюсами.

Раствор лекарственного вещества вводят однополярно или биполярно. Данный вид электрофореза показан при хронической обструктивной болезни лёгких, пневмониях в стадии пролиферации.

Положение — сидя или лёжа. Два одинаковых электрода располагают поперечно относительно сустава и подключают к катоду и аноду. Раствор лекарственного вещества вводят однополярно или биполярно. Данный вид электрофореза показан при деформирующих остеоартрозах, артритах, травмах суставов.

Электрофорез выполняется с использованием разных аппаратов, но самым известным является «Поток», который более 50 лет применяется в физиотерапии. Строение аппарата простое: отверстия для электродов, имеющие маркировку и -, кнопки для определения времени процедуры и регулятор силы тока.

Аппараты нового образца оснащаются цифровыми индикаторами и дисплеем («Элфор», «Элфор Проф» и др.)

• Снижение выраженности воспалительного процесса;
• Устранение отеков;
• Уменьшение болевого синдрома;
• Стимуляция выработки веществ с биологической активностью;
• Расслабление мышц с устранением повышенного тонуса;
• Успокаивающий эффект на ЦНС;
• Улучшение микроциркуляции крови;
• Ускорение регенерации тканей;
• Активация защитных сил.

Действие электрического тока приводит к тому, что лекарственный препарат преобразуется в ионы, имеющие электрический заряд, которые и проникают в кожу. Именно в коже остается основная часть препарата, чуть меньшая часть через лимфу и кровь транспортируется по всему организму.

Ионы с разным зарядом по-разному действуют на организм. Так, отрицательно заряженные ионы оказывают:

• секреторное воздействие, т.е. влияют на выработку веществ с биологической активностью и попаданию их в кровоток;
• расслабляющее действие в отношении гладкой мышечной ткани;
• сосудорасширяющий эффект;
• нормализующее действие на обмен веществ.

Ионы с положительным зарядом оказывают противоотечное, противовоспалительное, успокаивающее и обезболивающее действие.

Участки кожи, участвующие в транспортировке лекарства:

• выводные протоки потных и сальных желез;
• межклеточные области;
• волосяные фолликулы.

Эффективность элетрофореза напрямую зависит от полноты всасывания лекарственного средства, на которую оказывают влияние следующие факторы:

Физиотерапия электрофорез

Лечение при помощи различных сил природы, или физиотерапия, является одной из старейших областей медицины. Она изучает, как влияют на организм различные природные или созданные искусственно физические факторы и разрабатывает методы и средства их использования для лечения и профилактики различных заболеваний.
Среди основных направлений можно выделить:
• бальнеотерапию, или водолечение
• тепловое лечение;
• лечение путем механических воздействий;
• светолечение;
• электролечение.
Наибольшее число методов включает электролечение. Но, пожалуй, самым распространенным является электрофорез. Он занимает положение на стыке двух областей медицины, таких как физиотерапия и медикаментозное лечение, так как электрический ток используется для доставки в организм лекарственных веществ.

Сущность метода и его преимущества

Лекарственный электрофорез – метод лечения, который сочетает введение в организм определенных веществ с воздействием постоянного или переменного электрического тока. Изобретению такого метода способствовал ряд научных открытий и изобретений конца 18, начала 19 века, таких как гальванический элемент, теория электролитической диссоциации и т.д.
Электрофорезу в медицине нашлось применение с начала 19 века, когда впервые был использован для лечения. С тех пор метод электрофореза постоянно совершенствуется, сфера его использования расширяется. Физиотерапия – основное, но единственное место применения электрофореза. Он используется также в диагностике и биохимических исследованиях.
Электрофорез как способ лечения заключается в том, что между телом и электродом прибора помещается прокладка, смоченная лекарственным раствором. Под воздействием тока ионы вещества из раствора переносятся через протоки кожных желез или через слизистые оболочки в более глубокие ткани. Откуда затем разносятся по всему организму с кровотоком и лимфотоком.
Такой способ введения лекарств имеет ряд вполне очевидных преимуществ, если сравнивать с введением через рот или путем инъекций:
• отсутствует повреждение тканей и болевые ощущения;
• в пищеварительном тракте и крови не возникает лишком высокая концентрация лекарственного вещества, которая может нанести им вред;
• местное введение, при котором большая часть необходимого компонента скапливается непосредственно в области лечения;
• ионы, в виде которых препарат попадает в организм, являются наиболее активной формой вещества;
• длительность эффекта значительно дольше, чем при прочих методах лечения;
• риск возникновения побочных эффектов, напротив, уменьшается.
За все эти качества лекарственный электрофорез заслужил славу одного из самых безопасных консервативных методов лечения. Его эффективность очевидна для врачей, а вот многие пациенты склонны сомневаться, считая, что воздействие электрического тока может нанести вред. Попробуем развеять подобные предубеждения.

Насколько эффективен такой метод лечения

Чтобы понять, в чем заключается эффективность электрофореза, важно знать, какое именно воздействие он оказывает на организм. Оно будет комплексным. Лекарственное вещество, попадая в подкожные ткани, вызывает местный эффект, вступая в реакции обмена веществ.
Накапливаясь в строго определенном участке тела, действующее вещество образует там так называемое депо, откуда после этого оно будет медленно разноситься с током крови или лимфы, воздействуя уже на весь организм в целом. Такой эффект называется гуморальным, или системным.
Да и сам электрический ток оказывает положительное воздействие на ткани и нервную систему. Раздражение кожных рецепторов помогает изменить многие процессы, происходящие в тканях, нормализуя их и вызывая не только положительные изменения в них, но и общую реакцию организма.
Если же говорить о том, какие конкретно эффекты вызывает электрофорез, то можно назвать следующие:
• помогает уменьшить воспалительный процесс, доставляя лекарство непосредственно к поврежденной ткани или очагу воспаления;
• санирует ткани, если воспаление вызвано микробной инфекцией;
• снимает отеки за счет нормализации лимфотока;
• обезболивает, причем как за счет доставки соответствующего препарата, так и по причине уменьшения воспаления или отека, которые могут провоцировать появление боли;
• расширяет кровеносные и лимфатические сосуды, позволяя тканям получать в достаточном количестве питательные вещества и кислород, а также выводить продукты обмена;
• снимает спазмы мускулатуры, в том числе и гладкой внутренних органов, обеспечивая нормальную циркуляцию крови;
• нормализует работу желез внутренней секреции.
Однако, эффективность такой процедуры, как электрофорез будет неодинаковой у всех пациентов. Все это необходимо учитывать врачу, назначая пациенту электрофорез.
Существует ряд закономерностей, соблюдение которых позволит сделать лечение результативным:
• наибольший эффект дает применение растворов с небольшой концентрацией и высокой степенью чистоты;
• в организм попадает не более 10% вещества, нанесенного на прокладку;
• количество введенного вещества напрямую зависит от количества электричества, прошедшего через ткани, а также от размера молекул и заряда ионов;
• чем старше пациент, тем менее проницаема его кожа для лекарств;
• через слизистые оболочки поступает большее количество ионов, чем через кожу;
• не все участки кожи подходят для проведения электрофореза.

Может ли эта процедура быть вредной

Как и любая медицинская манипуляция, электрофорез может нанести вред при несоблюдении противопоказаний к его применению или нарушении техники проведения процедуры. Для того, чтобы исключить подобную ситуацию, нужно следовать указаниям врача и соблюдать все его рекомендации.
Безусловно, электрофорез будет вреден и даже опасен при следующих заболеваниях и состояниях:
• любые злокачественные новообразования, независимо от их расположения;
• почечная и сердечная недостаточность;
• острые заболевания, воспалительные или гнойные;
• повышенная температура тела или лихорадочное состояние;
• некоторые психические заболевания;
• бронхиальная астма;
• заболевания кожи, такие как экзема и дерматит;
• атеросклероз, гипертония и некоторые другие патологии сосудов;
• склонность к возникновению кровотечений;
• нарушение свертываемости крови;
• ранки, ссадины или другие повреждения кожи в местах проведения процедуры;
• изменение чувствительности кожи.
К числу противопоказаний для электрофореза относят также беременность и период менструации. Но иногда такая процедура не приносит вред, а напротив служит для предупреждения преждевременных родов или снятия сильной боли. Но решение о том, стоит ли назначать электрофорез в подобной ситуации решает только врач, опираясь на полную информацию о здоровье пациентки.
Для беременных женщин есть и дополнительные противопоказания для проведения электрофореза:
• тошнота и рвота, вызванные токсикозом;
• состояние плода, препятствующее процедуре
• патологии почек;
• высокий риск кровотечений;
• эклампсия.

К чему ведет несоблюдение техники проведения процедуры

Как бы не была безопасна физиотерапия, не стоит забывать, что электрический ток, даже такой слабый, который использует лекарственный электрофорез, явление достаточно опасное. И несоблюдение мер безопасности и рекомендаций по проведению сеанса может привести к печальным последствиям. Одним из них является ожог от электрофореза.
Одной из причин его появления является соприкосновение кожи непосредственно с электродом. Для того, чтобы не допустить подобного повреждения используются специальные прокладки. Они изготавливаются из нескольких слоев гидрофильного материала, чаще всего для этой цели используют белую фланель.
Размер прокладки должен быть больше, чем поверхность электрода. Она должна выступать за его края не менее, чем на сантиметр. Назначение такой прокладки не только не допустить ожога, но и снизить сопротивление кожи, обеспечить наилучший контакт между ней и электродом.
Прокладка смачивается раствором лекарственного средства или дистиллированной водой, в зависимости от того, как проводится процедура, и помещается на кожу. Жидкость должна быть теплой, чтобы вызвать расширение пор кожи. После этого на ней располагается электрод. При накладывании электрода необходимо внимательно следить, чтобы он не выступал за края прокладки и не соприкасался с кожей.
Проводя электрофорез необходимо контролировать силу тока и те ощущения, которые испытывает пациент. Допускается легкое покалывание, но нельзя доводить до жжения и боли. Это может стать второй причиной появления ожога. Если такие ощущения появились, необходимо отключить ток и выяснить причину появления столь сильной реакции.

Другие причины негативной реакции

Как правило, побочные эффекты, возникающие после процедуры, связаны с индивидуальной непереносимостью вводимого лекарственного вещества или электрического тока. Об этом стоит сообщить врачу заранее, иначе вред от такой процедуры будет значительно больше, чем ожидаемая польза.
Аллергическая реакция на препарат может быть довольно серьезной. Непереносимость электрического ока проявляется, чаще всего, в появлении кожной сыпи. Иногда наличие такой реакции выявляется уже после проведения процедуры. В этом случае необходимо прекратить сеансы и выбрать другой способ лечения.
У маленьких детей электрофорез может вызывать различные реакции, в том числе он могут стать более нервными, раздражительными, начать плакать. Это может быть связано не столько с самой процедурой, сколько в непривычной пугающей обстановкой. Но в любом случае, при появлении такой реакции о целесообразности дальнейших процедур лучше посоветоваться с врачом.
Иногда электрофорез может вызывать боли после проведения процедуры. Но такое явление тоже, как правило, связано с непереносимостью препарата. Или с обострением заболевания, которое может быть спровоцировано процедурой. В подобном случае также необходима консультация врача.
В целом же, несмотря на подобные индивидуальные проявления, электрофорез является одним из самых безопасных и малотравматичных способов лечения и профилактики многих заболеваний, травм и патологий развития. Для минимизации любых возможных неблагоприятных последствий необходимо соблюдать рекомендации врача, правила безопасного обращения с электроприборами и требования гигиены.

Электрофорез как физиотерапевтическая процедура

Электрофорез относится к самой распространенной методике, которая практикуется в физиотерапии. Применяется он как для оказания местного и общего эффекта на больной орган и весь организм человека, так и для введения в организм через кожу и слизистые оболочки лекарственных средств.

Принцип действия

Электрофорез как метод физиотерапии основан на принципе электролитической диссоциации, при которой происходит распад лекарственного средства на ионы и проникновение их внутрь организма человека через потовые или, что бывает реже, сальные железы.

Попадая в эпидермис, вещество с током крови или лимфы доставляется по всему организму, но при этом большая часть оседает в месте приложения.

Электрофорез имеет особенности дозировки, которые обусловлены плотностью тока и длительностью воздействия. Детям и людям пожилого возраста рекомендовано использование этой физиотерапевтической методики в той дозировке, которая составляет приблизительно ¾ от той, которую используют для лечения взрослого человека.

В зависимости от вида патологического процесса, общего состояния организма и возраста пациента процедуру проводят ежедневно, или через день, курсом от 10 до 20 сеансов. Если существует необходимость, то ее можно повторить, но не ранее, чем через 2-3 месяца.

Преимущество

Широкое использование процедуры при различных заболеваниях объясняется тем, что она:

1. Не приносит болезненных ощущений.
2. Практически не вызывает непредсказуемых эффектов и аллергических реакций.
3. Позволяет длительно сохранять терапевтическое действие препарата (эффект депонирования).
4. Доставляет лекарство прямо на место воздействия.
5. Введение вещества осуществляется в его активной ионной форме.
6. Действующее вещество не проходит через желудок или кишечник, и в полном объеме доставляется к больному органу.

Недостатком такого метода является то, что не каждое средство лечения имеет химическую структуру, которая позволяет использовать подобную методику.

Показания к проведению

Электрофорез имеет широкий спектр показаний для лечения различного вида патологических состояний.

Бронхо-легочная система

1. Бронхиальная астма.
2. Воспаление легких.
3. Острый или хронический бронхит.
4. Бронхоэктатическая болезнь.
5. Плеврит.
6. Воспаление трахеи.

Желудочно-кишечный тракт

1. Хронический гастрит.
2. Язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки.
3. Воспаление желчного пузыря.
4. Панкреатит.
5. Колит.

    

ЛОР-патология

1. Ринит.
2. Фарингит.
3. Отит.
4. Воспаление гайморовой и фронтальной пазухи.
5. Тонзиллит.

Болезни сердца и сосудов

1. Гипертония в начальной стадии.
2. Гипотония.
3. Невыраженная форма варикоза.
4. Стенокардия без развития сердечной недостаточности.
5. Мерцательная аритмия.

Мочеполовая система

1. Воспаление мочевого пузыря, уретры.
2. Пиелонефрит.
3. Аднексит.
4. Эндометриоз.
5. Простатит.
6. Вагинит.

Нервная система

1. Межпозвоночная грыжа.
2. Невралгия.
3. Радикулит.
4. Посттравматическое состояние при повреждении головного или спинного мозга.
5. Парез или паралич.
6. Нарушение сна.

Опорно-двигательный аппарат

1. Артрит.
2. Остеохондроз.
3. Перелом.
4. Вывих или растяжение.
5. Суставные контрактуры.

    

Кроме того, часто электрофорез назначается при болезнях глаз, стоматологических заболеваниях. Нередко успешным бывает использование данной методики во время реабилитационного периода после хирургического вмешательства.

В некоторых случаях существуют показания для применения методики у детей грудного возраста. Им электрофорез назначается при следующих состояниях:

1. Сниженный или повышенный мышечный тонус.
2. Некоторые незначительные неврологические отклонения.
3. Ряд заболеваний, связанных с опорно-двигательным аппаратом.
4. некоторые болезни с болевым синдромом.
5. Диатез.
6. Воспаления ЛОР-органов.
7. Ожоги.

Противопоказания и побочные действия

Использование такой методики, как электрофорез противопоказано в следующих случаях:

1. Непереносимость электрического тока.
2. Острый период любого заболевания.
3. Тяжелое общее состояние.
4. Лихорадка, повышение температуры выше 38 градусов.
5. Нарушения в системе свертывания крови.
6. Туберкулез в открытой форме.
7. Психические отклонения.
8. Злокачественные новообразования.
9. Выраженные гнойные процессы (фурункул, карбункул).
10. Сердечно-сосудистая, печеночная и почечная недостаточность.
11. При наличии кардиостимулятора.
12. Бронхиальная астма.
13. Острый вирусный гепатит.
14. Нарушения целостности кожного покрова в местах наложения электродов.

К относительным противопоказаниям относятся: беременность, гипертоническая болезнь, возраст до 2 лет.

На данный момент не отмечается каких-либо побочных действий при использовании такой методики, как электрофорез, иногда могут возникать аллергические проявления на введение того или иного лекарственного средства, или покраснение в месте наложения электродов при слишком длительном воздействии.

Как проводится

Электрофорез осуществляется при помощи специальных аппаратов. Каждый из них имеет два электрода, со знаками «плюс» и «минус», регулятор силы подаваемого на них тока, а также устройство для задавания определенного времени.

Перед тем, как пройти процедуру, больной обязательно должен получить направление врача. Участок тела, на который накладываются электроды, должно быть чистым, без повреждений, новообразований или гнойничков.

Каждый электрод имеет две пластины, перед их установлением на определенное место, размещают прокладки. Они смачиваются в физрастворе или воде. После чего на них, после его подготовки, наносится лекарственное средство. Флакон с ним разбавляется 0,9% хлоридом натрия, с добавлением противовоспалительного и анальгезирующего средства. Часто с этой целью берется димексид. Готовый состав равномерно распределяется по всей прокладке, и она подкладывается под положительный электрод.

Для улучшения кровообращения под отрицательный полюс кладется гидрофильная прокладка с раствором 2% эуфиллина. Кроме того, он помогает при спазме мышц, снимая его и облегчая боль.

Прокладки кладутся на тело, и к ним присоединяют электроды.

Препараты могут поступать как с положительного электрода (анафорез), так и с отрицательного (катафорез).

Через положительный полюс существует возможность введения алоэ, атропина, дикаина, витамина B1, кодеина, лидазы, лидокаина, папаверина, платифиллина, эфуфиллина.

Отрицательный полюс используется в том случае, когда необходимо ввести баралгин, аскорбиновую кислоту, гепарин, бром, йод, панангин, стрептоцид, танин.

Следует отметить, что эуфиллин, трипсин, лидаза вводятся с любого электрода.

Эффекты при лечении

Электрофорез при его использовании дает следующие эффекты:

1. Уменьшает воспаление.
2. Снимает отечность.
3. Убирает болевой синдром.
4. Снимает мышечный тонус при его повышении.
5. Помогает успокоиться при нервном напряжении.
6. Улучшает кровообращение в местном капиллярном русле.
7. Повышает регенеративную способность тканей.
8. Активизирует выработку биологически активных веществ.
9. Способствует повышению защитных сил в организме.

Что такое гель-электрофорез? | Факты

Электрофорез — это метод, обычно используемый в лаборатории для разделения заряженных молекул, таких как ДНК, по размеру.

• Гель-электрофорез — это метод, обычно используемый в лабораториях для разделения заряженных молекул, таких как ДНК, РНК и белки, в зависимости от их размера.
• Заряженные молекулы движутся через гель, когда через него пропускают электрический ток.
• Через гель подается электрический ток, так что один конец геля имеет положительный заряд, а другой конец — отрицательный.
• Движение заряженных молекул называется миграцией. Молекулы движутся навстречу противоположному заряду. Таким образом, молекула с отрицательным зарядом будет тянуться к положительному концу (противоположности притягиваются!).
• Гель состоит из проницаемой матрицы, немного похожей на сито, через которую молекулы могут перемещаться при прохождении электрического тока.
• Более мелкие молекулы мигрируют через гель быстрее и, следовательно, перемещаются дальше, чем более крупные фрагменты, которые мигрируют медленнее и, следовательно, преодолевают меньшее расстояние.В результате молекулы разделяются по размеру.

Гель-электрофорез и ДНК

• Электрофорез позволяет различать фрагменты ДНК разной длины.
• ДНК заряжена отрицательно, поэтому при приложении электрического тока к гелю ДНК будет перемещаться к положительно заряженному электроду.
• Более короткие нити ДНК проходят через гель быстрее, чем более длинные нити, в результате чего фрагменты располагаются по размеру.
• Использование красителей, флуоресцентных меток или радиоактивных меток позволяет видеть ДНК на геле после их разделения. Они появятся на геле в виде полос.
• Маркер ДНК с фрагментами известной длины обычно пропускается через гель одновременно с образцами.
• Сравнивая полосы образцов ДНК с полосами на маркере ДНК, вы можете определить приблизительную длину фрагментов ДНК в образцах.

Как проводится гель-электрофорез?

Подготовка геля

• Гели агарозы обычно используются для визуализации фрагментов ДНК.Концентрация агарозы, используемой для приготовления геля, зависит от размера фрагментов ДНК, с которыми вы работаете.
• Чем выше концентрация агарозы, тем плотнее матрица и наоборот. Меньшие фрагменты ДНК разделяются при более высоких концентрациях агарозы, в то время как более крупные молекулы требуют более низкой концентрации агарозы.
• Чтобы сделать гель, порошок агарозы смешивают с буфером для электрофореза и нагревают до высокой температуры, пока весь порошок агарозы не расплавится.
• Расплавленный гель затем выливают в лоток для отливки геля, и на одном конце помещают «гребешок», чтобы сделать лунки для образца, в который будет добавлена ​​пипетка.
• Когда гель остынет и затвердеет (теперь он будет непрозрачным, а не прозрачным), гребешок удаляется.
• Сейчас многие люди используют готовые гели.
• Затем гель помещают в емкость для электрофореза, и буфер для электрофореза наливается в емкость до тех пор, пока поверхность геля не будет покрыта. Буфер проводит электрический ток.Тип используемого буфера зависит от приблизительного размера фрагментов ДНК в образце.

Подготовка ДНК к электрофорезу

• Краситель добавляется к образцу ДНК перед электрофорезом, чтобы увеличить вязкость образца, что предотвратит его выплытие из лунок и так, чтобы миграция образца через гель видно.
• Маркер ДНК (также известный как стандарт размера или лестница ДНК) загружается в первую лунку геля.Фрагменты в маркере имеют известную длину, поэтому их можно использовать для приблизительного определения размера фрагментов в образцах.
• Подготовленные образцы ДНК затем пипеткой вносятся в оставшиеся лунки геля.
• Когда это будет сделано, крышка помещается на резервуар для электрофореза, чтобы убедиться, что ориентация геля, положительного и отрицательного электродов правильная (мы хотим, чтобы ДНК перемещалась по гелю к положительному концу).

Разделение фрагментов

• Затем включается электрический ток, так что отрицательно заряженная ДНК перемещается через гель к положительной стороне геля.
• Более короткие участки ДНК перемещаются быстрее, чем более длинные, поэтому перемещайтесь дальше во время прохождения тока.
• Расстояние, на которое ДНК мигрировала в геле, можно определить визуально, наблюдая за миграцией красителя загрузочного буфера.
• Электрический ток остается включенным достаточно долго, чтобы гарантировать, что фрагменты ДНК перемещаются по гелю достаточно далеко, чтобы разделить их, но не настолько долго, чтобы они стекали с конца геля.

Иллюстрация оборудования для электрофореза ДНК, используемого для разделения фрагментов ДНК по размеру.Гель находится в резервуаре с буфером. Образцы ДНК помещают в лунки на одном конце геля, и через гель пропускают электрический ток. Отрицательно заряженная ДНК движется к положительному электроду. Изображение предоставлено: Genome Research Limited

Визуализация результатов

• После того, как ДНК прошла достаточно далеко по гелю, электрический ток отключается, и гель удаляется из емкости для электрофореза.
• Для визуализации ДНК гель окрашивают флуоресцентным красителем, который связывается с ДНК, и помещают на ультрафиолетовый трансиллюминатор, который показывает окрашенную ДНК в виде ярких полос.
• В качестве альтернативы краситель можно смешать с гелем перед его заливкой.
• Если гель растекся правильно, будет видна полосатая структура маркера ДНК / стандарта размера.
• После этого можно судить о размере ДНК в вашем образце, представив горизонтальную линию, проходящую поперек полос маркера ДНК. Затем вы можете оценить размер ДНК в образце, сопоставив их с ближайшей полосой в маркере.

Иллюстрация, показывающая полосы ДНК, разделенные на геле.Длина фрагментов ДНК сравнивается с маркером, содержащим фрагменты известной длины. Изображение предоставлено: Genome Research Limited

Эта страница последний раз обновлялась 25.01.2016

Что такое электрофорез? | Cleaver Scientific

Электрофорез — это электрокинетический процесс, при котором заряженные частицы в жидкости разделяются с помощью поля электрического заряда. Это наиболее часто используется в науках о жизни для разделения молекул белка или ДНК и может быть достигнуто с помощью нескольких различных процедур в зависимости от типа и размера молекул.Процедуры в чем-то различаются, но для всех нужен источник электрического заряда, поддерживающая среда и буферный раствор. Электрофорез используется в лабораториях для разделения молекул по размеру, плотности и чистоте.

Как это работает?

К молекулам приложено электрическое поле, и, поскольку они сами электрически заряжены, на них действует сила. Чем больше заряд молекулы, тем больше сила, приложенная электрическим полем, и, следовательно, тем дальше через поддерживающую среду молекула будет двигаться относительно своей массы.

Некоторые примеры применения электрофореза включают анализ ДНК и РНК, а также электрофорез белков, который представляет собой медицинскую процедуру, используемую для анализа и разделения молекул, обнаруженных в образце жидкости (чаще всего в образцах крови и мочи).

Виды электрофореза

В качестве поддерживающей среды для электрофореза обычно используются различные типы гелей, которые могут иметь форму пластин или трубок, в зависимости от того, что более выгодно. Гелевые пластины позволяют одновременно обрабатывать множество образцов и поэтому часто используются в лабораториях.Однако гели для пробирок дают лучшее разрешение результатов, поэтому их часто выбирают для электрофореза белков.

Агарозный гель обычно используется для электрофореза ДНК. Он имеет крупнопористую структуру, позволяющую более крупным молекулам легко перемещаться, но он не подходит для секвенирования более мелких молекул.

Электрофорез в полиакриламидном геле (PAGE) имеет более четкое разрешение, чем в агарозном геле, что делает его более подходящим для количественного анализа. Это позволяет определить, как белки связываются с ДНК.Его также можно использовать для понимания того, как бактерии становятся устойчивыми к антибиотикам с помощью анализа плазмид.

2D-электрофорез разделяет молекулы по оси x и оси y: одна разделяет их по заряду, а другая по размеру.

Электрофорез ДНК в агарозном геле

В этой статье обсуждаются основы электрофореза в агарозном геле, включая то, как он работает, как работает оборудование и его различные применения. Чтобы следовать этой статье, вам будет полезно базовое понимание структуры ДНК и белков.

Содержание

Электрофорез в агарозном геле — один из наиболее часто выполняемых лабораторных методов в биологических науках. Исследователи используют этот метод для разделения биологических молекул в зависимости от их размера. Способность разделять молекулы по размеру может быть полезна в ряде исследовательских приложений, таких как идентификация неизвестных образцов по сравнению с известными результатами или выполнение контроля точности или качества во время других процедур.

Электрофорез в агарозном геле чаще всего используется для разделения молекул ДНК и поэтому часто используется во время методов манипуляции с ДНК или исследований, включающих идентификацию людей на основе их уникальной последовательности ДНК.Ниже мы обсудим лишь некоторые из применений электрофореза ДНК в агарозном геле, как он работает и какое оборудование требуется для выполнения этого метода.

имеет отчетливую химическую структуру, в которой азотистые основания, буквы кода ДНК, соединены основной цепью из сахара, дезоксирибозы и фосфатной группы. Эта структура показана на рисунке 1. Как видно на рисунке, основа ДНК содержит отрицательный заряд для каждого присутствующего азотистого основания, что делает отношение массы к заряду ДНК одинаковым для разных размеров фрагментов.Из-за этого отрицательного заряда, когда мы прикладываем электрическое поле к раствору, содержащему ДНК, молекулы ДНК будут перемещаться к положительно заряженному электроду.

Гелевая матрица

При электрофорезе в агарозном геле мы вводим гелевую матрицу, представляем несколько слоев сит или сетки, через которые ДНК перемещается по градиенту напряжения к положительному электроду. Эта матрица создает сопротивление и означает, что более мелкие молекулы мигрируют быстрее, а более крупные — медленнее.Разница в скорости миграции заключается в том, как мы разделяем молекулы ДНК разных размеров, чтобы определить их длину. Гелевая матрица создается путем растворения природного полисахарида, называемого агарозой, полученного из типа морских водорослей, в проводящем буфере, обычно содержащем около 1% агарозы, и позволяя ему затвердеть в геле. Размер пор в этой гелевой матрице хорошо подходит для разделения ДНК, и на скорость миграции можно влиять, увеличивая или уменьшая процентное содержание агарозы в смеси.

Запуск геля

Для типичной процедуры электрофореза в агарозном геле матрица геля отливается в виде горизонтальной пластины. Пластиковые гребни используются для создания углублений или лунок, в которые загружается ДНК. Перед загрузкой ДНК смешивается с загрузочным красителем, который утяжеляет образец в растворе, чтобы он не покидал лунку, а также включает видимый маркер для отслеживания хода выполнения.Неизвестные образцы часто обрабатываются вместе с ДНК-лестницей, содержащей известные длины ДНК для сравнения. Затем гель помещают в контейнер, называемый резервуаром или ящиком для геля, наполненный проводящим буферным раствором с контролируемым pH, обычно трис-ацетат-ЭДТА или трис-борат-ЭДТА, и по всей длине геля прикладывают электрическое поле. Процесс представлен на рисунке 2.

Скорость движения через гель определяется градиентом напряжения, то есть напряжением между электродами.Требуемая напряженность поля связана с размером используемого резервуара с гелем, и требуемое напряжение может быть рассчитано с помощью простого уравнения E = V / d, где E — напряженность поля, V — напряжение и d — расстояние в см между электродами. Горизонтальные резервуары с гелем обычно работают при 5-10 В / см, поэтому, если в вашем резервуаре расстояние между электродами 10 см, вы должны запускать гель при 50-100 В. Точное значение зависит от ваших образцов и должно быть определено эмпирически.

Чтобы применить это электрическое поле, мы используем источник постоянного тока.Большинство источников питания для электрофореза могут быть настроены на обеспечение постоянного тока или постоянного напряжения, каждый из которых имеет свои преимущества и недостатки. Однако, поскольку для электрофореза в агарозном геле используется непрерывная буферная система, то есть анод, катод и гелевый буфер одинаковы, изменение этих параметров даст одинаковые результаты. Мы можем просто установить источник питания на постоянное напряжение в зависимости от размера резервуара, как описано выше.

Одной из потенциальных проблем является выделение тепла из-за протекания тока через систему, которое может быть особенно высоким для резервуаров большего размера, требующих более высокого напряжения.По этой причине рекомендуется использовать какую-либо форму охлаждения, либо пассивную в виде охлаждающего блока, либо активную, такую ​​как рециркуляционный охладитель, для более крупных систем электрофореза.

Визуализация ДНК

После того, как ДНК переместилась через гель, ее нужно визуализировать, чтобы мы могли определить длину и количество молекул в образце.Поскольку ДНК не видна невооруженным глазом, мы окрашиваем ее либо цветным красителем, например, метиленовым синим, либо, чаще, флуоресцентным красителем, например бромидом этидия. Флуоресцентные пятна дают гораздо лучший уровень обнаружения при визуализации гелей. На рынке представлен широкий спектр пятен, некоторые из которых добавляются в гель перед заливкой, а некоторые используются для окрашивания геля после цикла. Какое бы краситель вы ни использовали, следующим шагом будет создание изображения в системе документации геля.

или для краткости гелевые документы используют высокочувствительные камеры для захвата изображений гелей агарозы.Часто эти системы оснащены трансиллюминаторами ультрафиолетового или синего света, которые используются для возбуждения флуоресцентных пятен, которые затем излучают свет, который может быть захвачен камерой. Все гелевые документы будут поставляться с источником освещения в той или иной форме, фильтром для удаления фонового света и камерой для обнаружения сигнала. Помимо этих основ, существует огромное количество доступных гелевых документов, от базовых систем вытяжки до систем со встроенными ПК и сенсорными экранами. Сделав снимок, вы можете проанализировать его на основе структуры полос ДНК, чтобы определить их длину и количество присутствующей ДНК.

Демонстрация видео

Приложения

Учитывая простую природу этого метода, ученые смогли применить его в широком спектре исследований, некоторые из которых обсуждаются ниже.

Молекулярное клонирование

Вероятно, наиболее частым применением электрофореза в агарозном геле является молекулярное клонирование. Это конструкция рекомбинантных молекул ДНК, которые интегрируются в различные организмы для создания генетических модификаций.Цель этих модификаций варьируется и может включать производство определенной биомолекулы, например производство инсулина в фармацевтическом производстве. Другие применения молекулярного клонирования включают добавление слитых флуоресцентных белков к существующим клеточным белкам для изучения их местоположения в клетках и создание новых генетических цепей для выполнения определенных функций, таких как расщепление токсинов.

Каким бы ни был желаемый конечный продукт, электрофорез является ключевым этапом как в производстве, так и в контроле качества фрагментов ДНК, используемых при молекулярном клонировании.Электрофорез можно использовать для анализа фрагментов, созданных полимеразной цепной реакцией (ПЦР) или рестрикционным гидролизом, чтобы убедиться, что они имеют правильный размер. Его также можно использовать для очистки фрагментов путем нанесения их на гель с последующим вырезанием интересующей полосы и очисткой ДНК от агарозы.

Генетический отпечаток

В сочетании с ПЦР электрофорез в агарозном геле может быть мощным методом идентификации людей на основе их генетического кода. Геном человека содержит множество участков с короткими повторами, количество которых у разных людей различается.Путем нацеливания на эти области с помощью конкретных праймеров ПЦР можно создать профиль полосы на геле для электрофореза, соответствующий этим областям, который является уникальным для данного человека. Этот метод, известный как дактилоскопия ДНК, может использоваться в таких областях, как судебная экспертиза для уголовных расследований, генеалогия и тестирование отцовства.

Диагностика

Электрофорез может использоваться в ряде диагностических тестов, в первую очередь при скрининге генетических нарушений, а также для выявления аномальных белков.ДНК может быть извлечена из пациентов или даже из эмбрионов для предимплантационного скрининга и подвергнута ПЦР и электрофорезу в агарозном геле для подтверждения наличия определенных генов или генетических аномалий. Электрофорез в агарозном геле также может применяться к некоторым белкам, например, для изучения химического состава крови с целью определения пригодности определенных медицинских методов лечения.

Широкий спектр приложений, как академических, так и клинических, делает электрофорез в агарозном геле чрезвычайно важным методом.Хотя недавнее появление технологий секвенирования следующего поколения может заменить многие из текущих применений агарозных гелей, их простота использования и универсальность означают, что этот метод, вероятно, сохранится в обозримом будущем.

Оборудование для электрофореза в агарозном геле

Популярность электрофореза в агарозном геле отчасти объясняется его простотой. Требуемое оборудование прост в использовании и требует небольшого обучения для правильной работы.Основные компоненты обсуждаются ниже.

Бак для геля / Коробка для геля

Бак для геля, также называемый контейнером для геля, является основным компонентом системы горизонтального электрофореза в агарозном геле. Как правило, резервуар для геля состоит из пластикового контейнера с приподнятой центральной платформой, где гель помещается на вспомогательную опору, называемую лотком для геля. На обоих концах резервуара закреплены электроды, сделанные из инертного проводящего материала, чаще всего платины, и подключены к разъемам для подключения к источнику питания.Наконец, на резервуар с гелем закрывается крышка, предотвращающая доступ к камере, когда на буфер подается высокое напряжение.

Cleaver Scientific производит резервуары с гелем различных размеров для различных применений и может производить системы для нишевых приложений по индивидуальному заказу. Взгляните на таблицу выбора и просмотрите страницы наших продуктов для получения дополнительной информации.

Блок питания

Чтобы приложить к гелю электрическое поле, вам понадобится источник питания для электрофореза. Эти источники питания специально изготовлены для электрофореза и имеют очень стабильные выходы напряжения и тока для предотвращения колебаний скорости миграции.Хороший источник питания позволяет вам устанавливать постоянный ток или напряжение в зависимости от требований эксперимента, а более продвинутые источники питания позволяют программировать отдельные шаги при различных значениях параметров.

В Cleaver Scientific имеется ряд источников питания для электрофореза для всех областей применения. Серия источников питания PowerPRO — это универсальная серия, предназначенная для питания как горизонтальных, так и вертикальных емкостей для электрофореза multiSUB. Каждый блок питания имеет 2 шт.4-дюймовый ЖК-дисплей. Доступны варианты постоянного напряжения, тока и мощности, а также предварительно запрограммированные или запрограммированные пользователем условия, позволяющие пользователям сохранять и повторять свои эксперименты для исключительной воспроизводимости.

Gel

Для заключительного этапа техники, получения изображения геля, вам понадобится система документации геля, как описано выше. В Cleaver Scientific есть целый ряд документации по гелям для любого бюджета и требований. Взгляните на наше руководство по выбору, чтобы найти лучший вариант для вас, и просмотрите страницы наших продуктов для получения дополнительной информации.

Реагенты для электрофореза в агарозном геле

Для проведения эксперимента по гель-электрофорезу вам потребуются как оборудование, так и реагенты. Основные реагенты, необходимые для электрофореза в агарозном геле:

• Порошок агарозы для изготовления геля
• Запас буфера для рабочего буфера
• Загрузка красителя для смешивания с ДНК
• Лестницы ДНК для сравнения длин ДНК
• Окрашивание ДНК для визуализации ДНК

Cleaver Scientific поставляет все эти реагенты, в том числе runSAFE, нетоксичную окраску ДНК, которая работает с синим светом для повышения эффективности клонирования и безопасности использования.

Обзор электрофореза | Thermo Fisher Scientific

Изучить: протеиновые гели Изучить: камеры для электрофореза

Что такое белковый электрофорез?

Белковый электрофорез — это стандартный лабораторный метод, при котором заряженные молекулы белка переносятся через растворитель под действием электрического поля.И белки, и нуклеиновые кислоты можно разделить с помощью электрофореза, который является простым, быстрым и чувствительным аналитическим инструментом. Большинство биологических молекул несут чистый заряд при любом pH, кроме их изоэлектрической точки, и будут мигрировать со скоростью, пропорциональной их плотности заряда. Подвижность молекулы в электрическом поле будет зависеть от следующих факторов: напряженности поля, суммарного заряда молекулы, размера и формы молекулы, ионной силы и свойств матрицы, через которую мигрирует молекула (например,г., вязкость, размер пор). Полиакриламид и агароза — это две поддерживающие матрицы, обычно используемые в электрофорезе. Эти матрицы служат пористой средой и ведут себя как молекулярное сито. Агароза имеет большой размер пор и подходит для разделения нуклеиновых кислот и крупных белковых комплексов. Полиакриламид имеет меньший размер пор и идеально подходит для разделения большинства белков и более мелких нуклеиновых кислот.

Существует несколько форм электрофореза в полиакриламидном геле (PAGE), и каждая форма может предоставить различные типы информации об интересующих белках.Денатурирующий и восстанавливающий ПААГ с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE) с прерывистой буферной системой является наиболее широко используемым методом электрофореза и разделяет белки в основном по массе. Неденатурирующий PAGE, также называемый нативным PAGE, разделяет белки в соответствии с их соотношением масса / заряд. Двумерный (2D) PAGE разделяет белки по нативной изоэлектрической точке в первом измерении и по массе во втором измерении.

SDS-PAGE разделяет белки в основном по массе, потому что ионный детергент SDS денатурирует и связывается с белками, делая их равномерно отрицательно заряженными.Таким образом, при приложении тока все SDS-связанные белки в образце будут мигрировать через гель к положительно заряженному электроду. Белки с меньшей массой проходят через гель быстрее, чем белки с большей массой, из-за просеивающего эффекта гелевой матрицы. После разделения с помощью электрофореза белки могут быть обнаружены в геле с различными пятнами, перенесены на мембрану для обнаружения вестерн-блоттингом и / или удалены и извлечены для анализа с помощью масс-спектрометрии. Таким образом, электрофорез в протеиновом геле является фундаментальным этапом многих видов протеомного анализа.

Посмотрите это краткое видео об электрофорезе в протеиновом геле с помощью SDS-PAGE.

Что такое полиакриламидные гели?

Полиакриламид — предпочтительный материал для приготовления электрофоретических гелей для разделения белков по размеру.Полиакриламидные гели получают путем смешивания акриламида с бисакриламидом с образованием сшитой полимерной сетки при добавлении полимеризующего агента, персульфата аммония (APS). ТЕМЕД (N, N, N ’, N’-тетраметилендиамин) катализирует реакцию полимеризации, способствуя выработке свободных радикалов с помощью APS. На этом этапе он становится полиакриламидом.

Полимеризация и сшивание акриламида. Отношение бисакриламида (N, N’-метилендиакриламида) к акриламиду, а также общая концентрация обоих компонентов влияет на размер пор и жесткость конечной гелевой матрицы. Это, в свою очередь, влияет на диапазон размеров белков (молекулярных масс), которые могут быть определены.

Пример рецепта традиционного полиакриламидного геля: 10% мини-гель трис-глицина для SDS-PAGE:

• 7.5 мл 40% раствора акриламида
• 3,9 мл 1% раствора бисакриламида
• 7,5 мл 1,5 М трис-HCl, pH 8,7
• Добавьте воды в 30 мл
• 0,3 мл 10% APS
• 0,3 мл 10% SDS
• 0,03 мл ТЕМЕД

Размер пор, созданных в геле, обратно пропорционален процентному содержанию (концентрации) полиакриламида. Например, 7% -ный полиакриламидный гель имеет более крупные поры, чем 12% -ный полиакриламидный гель. Гели с низким процентным содержанием используются для растворения крупных белков, а гели с высоким процентным содержанием — для растворения мелких белков.«Градиентные гели» специально подготовлены для того, чтобы иметь низкий процент полиакриламида вверху (начало пути пробы) и высокий процент внизу (конец), что позволяет разделить более широкий диапазон размеров белков.

Гели для электрофореза изготавливаются в буферах, которые позволяют электрическому току проходить через матрицу. Приготовленный раствор заливается в тонкое пространство между двумя стеклянными или пластиковыми пластинами, образующими кассету. Этот процесс называется отливкой геля. После полимеризации геля кассету устанавливают (обычно вертикально) в устройство так, чтобы верхний и нижний края соприкасались с буферными камерами, содержащими катод и анод соответственно.Текущий буфер содержит ионы, которые проводят ток через гель. Когда белки загружаются в лунки на верхнем крае и подается ток, белки протягиваются током через матрицу и разделяются просеивающими свойствами геля.

Для получения оптимального разрешения белков поверх разделяющего геля наносят укладывающийся гель. Укладывающий гель имеет более низкую концентрацию акриламида (например, 7% для большего размера пор), более низкий pH (например, 6,8) и другое содержание ионов.Это позволяет белкам в загруженном образце концентрироваться в одну плотную полосу в течение первых нескольких минут электрофореза перед попаданием в разрешающуюся часть геля. Укладывающий гель не требуется при использовании градиентного геля, так как градиент сам выполняет эту функцию.

Выполняется электрофорез в полиакриламидном геле. Подготовленные кассеты с гелем вставляются в резервуар для геля, в данном случае в резервуар для мини-геля Invitrogen, который одновременно содержит два мини-геля. После заполнения лунок образцами белка гели погружают в проводящий рабочий буфер и подают электрический ток, обычно на 20-40 минут. Продолжительность анализа зависит от размера и процентного содержания геля и химического состава геля.

SDS-PAGE (денатурирующий) vs.native-PAGE

SDS-PAGE

В SDS-PAGE гель заливают буфером, содержащим додецилсульфат натрия (SDS), анионный детергент. SDS денатурирует белки, оборачиваясь вокруг основы полипептида. При нагревании образца белка между 70-100 ° C в присутствии избытка SDS и тиолового реагента дисульфидные связи расщепляются, и белок полностью диссоциирует на его субъединицы.В этих условиях большинство полипептидов связывают SDS в постоянном массовом соотношении (1,4 г SDS: 1 г полипептида). Собственные заряды полипептида незначительны по сравнению с отрицательными зарядами, обеспечиваемыми связанным детергентом, так что комплексы SDS-полипептид имеют по существу такой же отрицательный заряд и форму. Следовательно, белки мигрируют через гель строго в соответствии с размером полипептида с очень небольшим влиянием различий в составе. Простота и скорость этого метода, а также тот факт, что требуется только количество белка в микрограммах, сделали SDS-PAGE наиболее широко используемым методом определения молекулярной массы в образце полипептида.Белки практически из любого источника легко растворяются с помощью SDS, поэтому этот метод обычно применим.

Когда набор белков известной массы обрабатывается вместе с образцами в одном и том же геле, они обеспечивают эталон, по которому может быть определена масса образцов белков. Эти наборы эталонных белков называются маркерами массы или маркерами молекулярной массы (маркерами MW), белковыми лестницами или стандартами размера, и они коммерчески доступны в нескольких формах.

В нативном ПААГ белки разделяются в соответствии с суммарным зарядом, размером и формой их нативной структуры.Электрофоретическая миграция происходит потому, что большинство белков несут чистый отрицательный заряд в щелочных рабочих буферах. Чем выше плотность отрицательного заряда (больше зарядов на молекулярную массу), тем быстрее будет мигрировать белок. В то же время сила трения гелевой матрицы создает эффект просеивания, регулируя движение белков в соответствии с их размером и трехмерной формой. Маленькие белки сталкиваются только с небольшой силой трения, в то время как более крупные pro

Гель-электрофорез Обзор | Science Primer

Электрофорез — это движение заряженных частиц в электрическом поле.Поскольку сахарно-фосфатная основа ДНК ^* имеет отрицательный заряд, можно использовать электрофорез, чтобы протянуть ДНК через электрическое поле к положительному электроду цепи. Молекулярные биологи использовали это поведение для разработки методов разделения, очистки и анализа фрагментов ДНК. Существует огромное количество вариантов гель-электрофореза, включая SDS-PAGE, секвенирование ДНК, 2D-гель-электрофорез, DGGE и многие другие. Детали каждого из этих методов различаются, но все они используют тот факт, что заряженные частицы, такие как ДНК, мигрируют, когда их помещают в электрическое поле.И что направление миграции зависит от заряда частицы.

На этой иллюстрации показаны различные компоненты установки для гель-электрофореза и описаны шаги, необходимые для подготовки геля и образцов ДНК для анализа с использованием этой методики.

Щелкните объекты и шаги, чтобы перейти к процессу настройки гель-электрофореза:

Гель
В основе техники лежит гель.Это матрица, которая содержит поры, через которые ДНК вытягивается при приложении электрического тока. Без геля вся ДНК направилась бы прямо к положительному электроду (называемому анодом). Размер пор определяет скорость движения ДНК. Чем меньше поры, тем медленнее движется ДНК. Длина фрагментов ДНК влияет на скорость, с которой они протягиваются через гель. Более длинные фрагменты движутся медленнее.

Для электрофореза используется ряд различных матриц.Агароза — одна из самых распространенных. Гели агарозы нетоксичны, относительно недороги и просты в приготовлении. Чем выше концентрация ^* агарозы в геле, тем меньше поры. Относительно высокая концентрация 1% агарозы используется для разделения небольших фрагментов ДНК, в то время как более низкие концентрации используются для разделения больших фрагментов. Для более сложной работы или для отделения более крупных фрагментов ДНК можно использовать полиакриламид. Полиакриламид обеспечивает более высокое разрешение по сравнению с агарозой и может использоваться в более разнообразных условиях, но имеет недостаток в том, что он токсичен.

Лунки
Лунки — это небольшие углубления, созданные в геле при его изготовлении. Лунки равномерно расположены вдоль стороны геля, ближайшей к отрицательному электроду. Равномерный, линейный интервал между лунками обеспечивает одинаковую начальную позицию для образцов. Лунки также позволяют помещать образцы в гель, так что при приложении тока образцы протягиваются через середину геля, а не через верх.

Буфер для бега ^*
Раствор используется для проведения электрического тока через гель и помогает поддерживать постоянную среду во время бега.Решение называется работающим буфером. Буферизация необходима для поддержания постоянного pH и обеспечения ионов в растворе, чтобы облегчить прохождение электричества. Тепло генерируется путем приложения тока к гелю, рабочий буфер также помогает сохранять гель холодным. Это особенно важно для гелей агарозы, потому что они плавятся, если становятся слишком горячими.

Коробка для геля
Коробка для геля — это контейнер, в котором хранится гель, погруженный в рабочий буфер. Он спроектирован так, что когда ток подается через электроды, прикрепленные к коробке, ток протекает через гель, создавая электрическое поле, необходимое для того, чтобы подтолкнуть отрицательно заряженные молекулы ДНК к положительному электроду.

Электропитание и источник питания
Сила, необходимая для вытягивания ДНК через гель, обеспечивается электричеством. Источник питания берет стандартное электричество переменного тока, доступное из стенной розетки, и преобразует его в односторонний постоянный ток, необходимый для создания электрического поля через гель. Источники питания также обеспечивают механизм для контроля количества и силы (силы тока и напряжения), находящихся в поле. Чем ниже напряжение, тем медленнее будет мигрировать ДНК.

По прошествии достаточного времени вся ДНК в образце в конечном итоге дойдет до конца геля и попадет в окружающий буфер. Это делает продолжительность включения тока важным параметром. Большинство источников питания имеют таймер для включения питания через заданный интервал.

Образец и подготовка образцов
С помощью методов гелевого электрофореза анализируют различные материалы. Для целей этого обсуждения мы предполагаем, что образцы представляют собой линейные цепи двухцепочечной ДНК.В этом случае основным фактором, влияющим на миграцию цепей ДНК, является их длина. Другие типы материалов, которые обычно наносят на гели, — это ДНК-плазмиды, РНК и белки.

Загрузочный краситель ^*
Загрузочный краситель представляет собой цветной буфер, смешанный с ДНК перед нанесением на гель. Загрузочный краситель содержит относительно высокую концентрацию глицерина или сахарозы. Это делает раствор более плотным, чем окружающий рабочий буфер, так что, когда образец помещается пипеткой поверх лунки, он погружается в лунку.Он также содержит небольшое количество красителя (обычно бромфенолового синего). Окрашивание образца обеспечивает быстрое подтверждение того, что образцы погрузились в лунки, и позволяет легко отслеживать, какие лунки уже были загружены.

В диапазоне pH, в котором гели забуферены, бромфеноловый синий имеет отрицательный заряд, поэтому он мигрирует в том же направлении, что и ДНК. Это дает дополнительное преимущество, обеспечивая визуальную индикацию прогресса миграции ДНК. Это чрезвычайно полезно, потому что сама ДНК не видна во время работы геля.Визуализация ДНК после прогона геля требует отдельного этапа, который включает окрашивание геля чем-то, что связывается с ДНК, делая его видимым.

Стандарты ДНК
Из-за множества факторов, которые влияют на скорость миграции ДНК через гель, оценка точной длины полосы в геле должна выполняться относительно положения других полос в том же геле. Стандарт (также часто называемый «лестницей ДНК») помещается в одну из лунок. Сравнивая движение фрагментов известной длины в стандарте с фрагментами в образцах, можно сделать точную оценку длины цепей ДНК в образцах.Стандарт обрабатывают так же, как и образцы: смешивают с загрузочным красителем и добавляют в одну из лунок в геле.

При наличии всех вышеперечисленных материалов для создания геля необходимо выполнить следующие действия:

1. Подготовьте контейнер с гелем, добавив достаточное количество рабочего буфера, чтобы гель полностью погрузился в него после того, как он будет помещен в контейнер. Буфер не нужно заменять каждый раз при запуске нового геля, но процесс электрофореза разрушает буфер, поэтому рекомендуется его часто заменять.
2. Поместите гель в коробку для геля, убедившись, что гель полностью погружен в буфер, а лунки правильно ориентированы (ближе всего к отрицательному, обычно черному, электроду).
3. Добавьте краситель в образцы и стандарты.
4. Внесите пипеткой небольшой объем образца / стандарта ( ^* ) в каждую лунку.
5. Подключите электроды источника питания к любому концу коробки с гелем.

Гель готов к работе.

Многие факторы влияют на миграцию заряженных частиц в электрическом поле.Для того чтобы гель-электрофорез ДНК работал как способ последовательного разделения полимеров ДНК в зависимости от их длины, необходимо изменять условия, чтобы создать как можно более постоянную среду. Факторы, влияющие на миграцию, включают ионный состав и pH рабочего буфера; температура геля; напряжение, приложенное к гелю, и пористость гелевой матрицы. Контролируя все эти другие факторы, можно использовать гель-электрофорез для разделения цепей ДНК в зависимости от их длины.

В то время как тип геля, предварительная и постобработка, а также факторы, влияющие на направление и скорость миграции, варьируются от приложения к применению, твердое понимание основного электрофореза в агарозном геле линейных цепей ДНК, описанного выше, обеспечивает основу для понимания другого электрофореза. методы могут быть построены.

Проверьте свое понимание этого материала с помощью этих концептуальных вопросов.

Обзор видео

Связанное содержимое

• Иллюстрации
• Наборы задач

Электрофорез

Краткое содержание курса

Щелкните ссылки ниже, чтобы просмотреть выбранные страницы из этого курса.

• Основные принципы электрофореза
• Введение
• Принцип электрофореза
• Амфотерный
• Изоэлектрическая точка (pI)
• Подвижность или скорость миграции белка
• Определение скорости миграции
• с изоэлектрической точкой (pI) 7,0?
• ПИ белка составляет 9,2. Этот белок помещают в электрическое поле, где буфер устанавливает pH на 10,0.Выберите правильное утверждение относительно t …
• Что из перечисленного ниже замедлит миграцию растворенных веществ при электрофорезе?
• Электрофорез и буферы
• Роль буферов
• Буферы и pH
• Белки в буфере с pH, установленным на 8,6, станут анионами и переместятся на положительно заряженный электрод.
• Образцы для электрофореза
• Образцы
• После просмотра информации об образцах для электрофореза выберите одно правильное утверждение.
• Электрофорез и вспомогательные среды
• Типы поддерживающих сред
• Агарозный гель
• Полиакриламидные гели
• Существует несколько различных типов сред, которые можно использовать в электрофорезе. В большинстве методов сегодня используется гель (ацетат целлюлозы, агароза или полиакрил …
• Приборы для электрофореза
• Оборудование для электрофореза
• Автоматизация
• Автоматизированные системы электрофореза включают только автоматическое добавление реагентов, добавление реагентов разделенных фрагментов, и обнаружение o…
• Типы электрофореза
• Визуализация и обнаружение
• Методы визуализации и обнаружения
• Пятна и красители
• Денситометрия
• Методы визуализации правильного обнаружения
методы, используемые в электрофорезе?
• Технические аспекты и устранение неисправностей электрофореза
• Возобновление электрофореза
• Ссылки

Дополнительная информация

Целевая аудитория : Технологи и техники клинических лабораторий, а также другой медицинский персонал, заинтересованный в этом предмете.Этот курс также подходит для студентов клинических лабораторных исследований и ординаторов-патологов.

Информация об авторе : Мэри Эллен Коэнн, MS, MLS (ASCP) — почетный адъюнкт-профессор Медицинской школы Университета Западной Вирджинии, Программа медицинских лабораторных исследований. За свою карьеру в качестве медицинского технолога и преподавателя она была руководителем лаборатории и менеджером, а также занимала несколько преподавательских должностей. Она является автором многочисленных статей для лабораторных публикаций и глав учебников, а также часто выступает на лабораторных семинарах и практикумах.Г-жа Коэнн имеет степень магистра медицинских технологий.

Информация для рецензента : Лесли Ловетт, MS, MT (ASCP) является координатором клинического образования Программы медицинских лабораторных технологий и профессором Пирпонского муниципального и технического колледжа в Западной Вирджинии. Она имеет степень магистра медицинских технологий и степень доктора фармакологии и токсикологии.

Описание курса : В этом курсе обсуждаются многие типы и применения электрофореза в клинической лаборатории.Даны определения общеупотребительных терминов и описаны процедуры, включая объяснения различных электрофоретических схем. Обсуждение новых методов молекулярной диагностики, включающих электрофорез, завершает этот более глубокий взгляд на электрофорез.