Необратимо ингибирует фосфолипазу: Аспирин – антиагрегант в практике лечения сердечно–сосудистых заболеваний | Шилов А.М.

— ингибирование — Биохимия

В медицине активно разрабатываются и используются соединения, изменяющие активность ферментов с целью регуляции скорости метаболических реакций и уменьшения синтеза определенных веществ в организме.

Подавление активности ферментов обычно называют ингибированием, однако это не всегда корректно. Ингибитором называется вещество, вызывающее специфичное снижение активности фермента. Таким образом, неорганические кислоты и тяжелые металлы ингибиторами не являются, а являются инактиваторами, так как снижают активность многих ферментов, т.е. действуют неспецифично.

В научной деятельности для более точного описания процессов ингибирования пользуются кинетикой Михаэлиса-Ментен и ее терминами — максимальная скорость (Vmax) и константа Михаэлиса (Km).

Можно выделить два основных направления ингибирования

• по прочности связывания фермента с ингибитором ингибирование бывает обратимым и необратимым.
• по отношению ингибитора к активному центру фермента ингибирование делят на конкурентное и неконкурентное.

Необратимое ингибирование

При необратимом ингибировании происходит связывание или разрушение функциональных групп фермента, необходимых для проявления его активности.

Например, вещество диизопропилфторфосфат прочно и необратимо связывается с гидроксигруппой серина в активном центре фермента ацетилхолинэстеразы, гидролизующей ацетилхолин в нервных синапсах. Ингибирование этого фермента предотвращает распад ацетилхолина в синаптической щели, в результате чего медиатор продолжает оказывать воздействие на свои рецепторы, что бесконтрольно усиливает холинергическую регуляцию.

Аналогично диизопропилфторфосфат ингибирует химотрипсин и другие протеазы, имеющие в активном центре серин (сериновые протеазы).

Диизопропилфторфосфат относится к нервно-паралитическим ядам, аналогичным образом действуют боевые фосфоорганические вещества (зарин, зоман). Сюда же относится вещество «малатион», включенный в инсектициды (карбофос, дихлофос) и превращающийся в организме насекомых в ингибитор ацетилхолинэстеразы, а в организме животных и человека разрушающийся до безвредных продуктов.

Механизм необратимого ингибирования ацетилхолинэстеразы

Еще один пример связан с ингибированием ацетилсалициловой кислотой (аспирином) ключевого фермента синтеза простагландинов – циклооксигеназы. Эта кислота входит в состав противовоспалительных средств и используется при воспалительных заболеваниях и лихорадочных состояниях. Присоединение ацетильной группы к гидроксильной группе серина в активном центре фермента вызывает инактивацию последнего и прекращение синтеза простагландинов.

Механизм необратимого ингибирования циклооксигеназы

Третьим показательным примером необратимого ингибирования является влияние антибиотика пенициллина на фермент транспептидазу, сшивающую цепи пептидогликана как последний шаг в синтезе клеточной стенки бактерий.

Обратимое ингибирование

При обратимом ингибировании происходит непрочное связывание ингибитора с функциональными группами фермента, вследствие чего активность фермента постепенно восстанавливается.

Примером обратимого ингибитора может служить прозерин, связывающийся с ферментом ацетилхолинэстеразой в ее активном центре. Группа ингибиторов холинэстеразы (прозерин, дистигмин, галантамин) используется при миастении, после энцефалита, менингита, травм ЦНС.

Конкурентное ингибирование

При таком виде ингибирования ингибитор по своей структуре похож на субстрат фермента. Поэтому он соперничает с субстратом за активный центр (за контактный участок), что приводит к уменьшению связывания субстрата с ферментом и нарушению катализа. В этом состоит особенность конкурентного ингибирования – возможность усилить или ослабить ингибирование через изменение концентрации субстрата. При данном ингибировании максимальная скорость реакции остается вполне достижимой при создании высоких концентраций субстрата.

Например:

1. Ингибирование фермента цикла трикарбоновых кислот сукцинат-дегидрогеназы малоновой кислотой, структура которой схожа со структурой субстрата этого фермента – янтарной кислоты (сукцината).

Конкурентное ингибирование сукцинатдегидрогеназы

2. Также к конкурентным ингибиторам относят антиметаболиты или псевдосубстраты, например, антибактериальные средства сульфаниламиды, схожие по структуре с пара-аминобензойной кислотой, компонентом фолиевой кислоты. При лечении сульфаниламидами в бактериальной клетке возникает конкуренция  между сульфаниламидом и пара-аминобензойной кислотой при синтезе дигидрофолиевой кислоты, что и вызывает лечебный эффект.

3. В качестве других примеров лекарственных конкурентных ингибиторов можно привести

• ингибитор синтеза холестерина ловастатин, обратимо ингибирующий ГМГ-S-КоА-редуктазу,
• противоопухолевый препарат метотрексат, необратимо подавляющий дигидрофолатредуктазу,
• непрямой антикоагулянт дикумарол, конкурент витамина К,
• антигипертензивный препарат метил-ДОФА, подавляющий активность ДОФА-декарбоксилазы,
• средство для лечения подагры аллопуринол, ингибирующий ксантиноксидазу.

Примером конкуренции, но не ингибирования (!), является взаимодействие этанола и метанола за активный центр алкогольдегидрогеназы. В данном случае ингибирование, как таковое, отсутствует, но с активным центром фермента связывается тот спирт, концентрация которого больше. Данный эффект используют у пациентов с отравлением метанолом для которого этиловый спирт является антидотом.

Неконкурентное ингибирование

Данный вид ингибирования связан с присоединением ингибитора не в активном центре, а в другом месте молекулы. Но при этом меняется структура активного центра и связь с субстратом становится невозможной. Это может быть аллостерическое ингибирование, когда активность фермента снижается естественными модуляторами, или связывание с ферментом каких-либо веществ вне активного и аллостерического центра. Например:

• синильная кислота (цианиды) связывается с гемовым железом ферментов дыхательной цепи и блокирует клеточное дыхание,
• связывание ионов тяжелых металлов (Cu²⁺, Hg²⁺, Ag⁺) с SH-группами белков.

Также примером может служить фруктозо-1,6-дифосфат, который ингибируя аденилосукцинатсинтетазу (синтез пуриновых нуклеотидов), синхронизирует в мышце функционирование пуриннуклеотидного цикла и гликолиза, поставлющего энергию для мышечного сокращения.

Особенностью неконкурентного ингибитора является его способность связываться с ферментом независимо от субстрата, т.е. изменение концентрации субстрата

никак не влияет на образование комплекса фермент-ингибитор.

Бесконкурентное ингибирование

В этом случае ингибитор связывается в активном центре с фермент-субстратным комплексом. Повышение концентрации субстрата, увеличивая количество фермент-субстратного комплекса, усиливает и связывание ингибитора с ним. Таким образом, бесконкурентное ингибирование более сложно, чем другие типы ингибирования. 

В качестве примера бесконкурентного ингибирования обычно называют связывание пенициллина и фермента транспептидазы, обеспечивающей сшивку цепей пептидогликана при синтезе клеточной стенки бактерий.

Пенициллин встраивается в активный центр фермента и его лактамное кольцо мимикрирует под переходное

состояние фермента — фермент-субстрат. Хотя ситуация похожа на конкурентное ингибирование, из-за одновременного снижения Vmax и Km этот случай относят к бесконкурентному.

На примере пенициллина также рассматривается т.н. суицидное ингибирование. При нем субстрат первоначально связывается с ферментом обратимо, а затем образует устойчивое ковалентное соединение с активным центром, что приводит к ингибированию активности фермента.

Смешанное ингибирование

При таком ингибировании ингибитор способен присоединяться везде – не только в активном центре, но и в других частях молекулы. Но после этого фермент еще способен частично сохранять свою активность. Примером является влияние  мертиолата (ртутьорганическое вещество) на сахаразу грибов микромицетов для подавления их роста.

Дих Протизап — Стр 6

+угнетения фагоцитоза

+снижения синтеза простагландинов и лейкотриенов

-усиления пролиферации

-снижения венозной гипертензии

+ингибирования фосфолипазы А2

?

87. Препараты золота

+ауранофин и натрия ауротиомалат

-мелоксикам и лорноксикам

-применяются в экстремальных ситуациях

+действуют подобно D-пеницилламину

+обладают противовоспалительным действием

+обладают противоревматоидным действием

?

88. К селективным ингибиторам ЦОГ-2 относятся

+целекоксиб (целебрекс)

-ибупрофен (бруфен)

-индометацин (метиндол) +мелоксикам (мовалис) +нимесулид (нимулид) +рофекоксиб (виокс)

?

89. Для целекоксиба характерно

+селективно ингибирует ЦОГ-2 -обладает высокой токсичностью

-нарушает синтез лейкотриенов

+применяется для лечения ревматоидного артрита

+обладает менее выраженным в сравнении с индометацином ульцерогенным действием

?

1. К стероидным противовоспалительным средствам относят:

-производные салициловой кислоты

+глюкокортикоиды

-минералокортикоиды

?

2. Глюкокортикоиды:

-целекоксиб

+преднизолон

+дексаметазон

+гидрокортизон

?

3. Глюкокортикоиды, используемые только местно: +беклометазон

-преднизолон

-дексаметазон

+флуметазон

?

4. Нестероидные противовоспалительные средства:

-преднизолон

+индометацин

+ибупрофен

+напроксен

+целекоксиб

?

5. Неизбирательные ингибиторы ЦОГ-1 и иЦОГ-2:

+индометацин

-целекоксиб

+ибупрофен

+кислота ацетилсалициловая

+диклофенак-натрий

?

6. Избирательный ингибитор ЦОГ-2: -диклофенак-натрий

-напроксен

+целекоксиб

-кислота ацетилсалициловая

?

7. Основные свойства стероидных противовоспалительных средств:

-анальгетическое

+иммунодепрессивное

+противовоспалительное

-жаропонижающее

?

8. Противовоспалительное действие глюкокортикоидов обусловлено:

-угнетением циклооксигеназы

-угнетением липооксигеназы

+стимуляцией синтеза липокортинов (аннексинов), угнетающих фосфолипазу А2

?

9. Глюкокортикоиды нарушают образование:

-фосфолипидов

+арахидоновой кислоты

+лейкотриенов

+простагландинов

+фактора, активирующего тромбоциты

?

10. Противовоспалительное действие глюкокортикоидов связывают с угнетением образования:

-брадикинина

+простагландинов

+лейкотриенов

+фактора, активирующего тромбоциты

?

11. Стероидные противовоспалительные средства в основном блокируют метаболизм ненасыщенных жирных кислота на стадии образования:

+арахидоновой кислота из фосфолипидов

-циклических эндопероксидов из арахидоновой кислоты

-простагландинов из циклических эндопероксидов

?

12. Нестероидные противовоспалительные средства ингибируют:

-фосфолипазу А2

-липооксигеназу

+циклооксигеназу

?

13. Нестероидные противовоспалительные средства угнетают образование:

-фактора, активирующего тромбоциты

-арахидоновой кислоты

+простагландинов

-лейкотриенов

?

14. В отличие от глюкокортикоидов нестероидные противовоспалительные средства не нарушают образование:

+арахидоновой кислоты

-простагландинов

+лейкотриенов

+фактора, активирующего тромбоциты

?

15. Под влиянием преднизолона снижается активность:

-циклооксигеназы

-липооксигеназы

+фосфолипазы А2

?

16. Кислота ацетилсалициловая ингибирует:

-фосфолипазу А2 +циклооксигеназу

-липооксигеназу

?

17. Анальгетический эффект нестероидных противовоспалительных средств обусловлен:

-активацией опиоидных рецепторов

+угнетением биосинтеза простагландинов

+повышением порога чувствительности ноцирецепторов к болевым стимулам

?

18. Глюкокортикоиды в зоне воспаления: +суживают мелкие сосуды

-повышают экссудацию

+уменьшают экссудацию

+снижают активность макрофагов и фибробластов

+снижают накопление лейкоцитов

?

19. Глюкокортикоиды:

+предупреждают выделение медиаторов аллергии из тучных клеток

-стимулируют пролиферацию Т-лимфоцитов

+угнетают пролиферацию Т-лимфоцитов

-стимулируют цитотоксичность Т-лимфоцитов

+угнетают цитотоксичность Т-лимфоцитов

?

20. Что характерно для влияния глюкокортикоидов на клеточный состав крови?

-снижение числа нейтрофилов

+повышение числа нейтрофилов

+снижение числа эозинофилов и лимфоцитов

-повышение числа эозинофилов и лимфоцитов

?

21. Анальгетический эффект вызывают:

-беклометазон

+кислота ацетилсалициловая

+ибупрофен

+целекоксиб

?

22. Жаропонижающий эффект вызывают: +диклофенак-натрий

-преднизолон

+ибупрофен

+напроксен

?

23. Показания к применению стероидных противовоспалительных средств: +аутоиммунные заболевания

+реакции гиперчувствительности немедленного типа

+реакции гиперчувствительности замедленного типа

+реакция отторжения трансплантанта

-остеопороз

?

24. Показания к применению преднизолона: +бронхиальная астма

-язвенная болезнь желудка и 12-перстной кишки

+контактный дерматит

+коллагенозы

?

25. Показания к применению нестероидных противовоспалительных средств: +острые и хронические ревматические заболевания

+приступ подагры

+в качестве жаропонижающих средств

-в качестве анальгетиков при остром инфаркте миокарда

+в качестве анальгетиков при артралгии, невралгии, миалгии

?

26. В качестве жаропонижающих средств используют:

-гидрокортизон

+кислоту ацетилсалициловую

+напроксен

+диклофенак-натрий

?

27. Стероидные противовоспалительные средства могут вызвать: +повышение артериального давления

+отеки

+гипергликемию

+гипофункцию коры надпочечников

+изъязвление слизистой оболочки желудка и 12-перстной кишки

-бронхоспазм

?

28. Какие побочны эффекты могут вызывать нестероидные противовоспалительные средства?

+диспепсические расстройства

+язвенные поражения желудка и 12-перстной кишки

-угнетение функции надпочечников

+аллергические реакции

?

29. Нестероидные противовоспалительные средства в отличие от глюкокортикоидов: +не угнетают иммунитет

-не обладают ульцерогенным действием

+не вызывают гипофункцию коры надпочечников

?

30. Побочные эффекты кислоты ацетилсалициловой: +отеки

-атрофия надпочечников

+диспепсические расстройства и изъязвления слизистой оболочки ЖКТ

+бронхоспазм

+нарушения слуха

?

31. Ульцерогенное действие кислоты ацетилсалициловой обусловлено угнетением синтеза:

-лейкотриенов

+простагландинов

-тромбоксана

?

32. Возможность развития бронхоспазма под влиянием кислоты ацетилсалициловой обусловлена:

-ослаблением продукции простагландинов

+усилением образования лейкотриенов

-угнетением синтеза простациклина

?

33. По сравнению с неизбирательными ингибиторами ЦОГ-1 и ЦОГ-2 избирательные ингибиторы ЦОГ-2:

+реже вызывают изъязвление слизистой оболочки желудка и кишечника

-чаще вызывают изъязвление слизистой оболочки желудка и кишечника

+не влияют на агрегацию тромбоцитов

?

34. Преднизолон:

+угнетает активность фосфолипазы А2

-повышает выделение ионов натрия и воды из организма

+задерживает ионы натрия и воды в организме

+нарушает образование простагландинов

+нарушает образование лейкотриенов

?

35. Дексаметазон вызывает:

+угнетение образования простагландинов

+угнетение образования лейкотриенов

-стимуляцию процессов иммунитета

+угнетение процессов иммунитета

+понижение содержания лимфоцитов и эозинофилов в крови

?

36. Кислота ацетилсалициловая: +блокирует ЦОГ-1 и ЦОГ-2 -избирательно блокирует ЦОГ-2

+блокирует ЦОГ необратимо

+угнетает агрегацию тромбоцитов

+вызывает анальгетический эффект

?

37. Целекоксиб:

+нестероидное противовоспалительное средство

+избирательно угнетает ЦОГ-2 -неизбирательно угнетает ЦОГ-1 и ЦОГ-2 -не обладает жаропонижающим действием

?

38. Диклофенак-натрий:

+нестероидное противовоспалительное средство

-избирательно ингибирует ЦОГ-2

+оказывает жаропонижающий и анальгетический эффекты

+по противовоспалительной активности превосходит кислоту ацетилсалициловую

?

39. Нарушает образование простагландинов и лейкотриенов за счет угнетения активности фосфолипазы А2; обладает противовоспалительными и иммунодепрессивными свойствами:

-ибупрофен

-диклофенак-натрий

+преднизолон

-целекоксиб

?

40. Нарушает образование простагландинов за счет ингибирования циклооксигеназы; обладает противовоспалительными, анальгетическими, жаропонижающими и антиагрегантными свойствами; в качестве побочных эффектов может вызвать изъязвление слизистой оболочки желудка, бронхоспазм и нарушения слуха:

-преднизолон

-гидрокортизон

-диклофенак-натрий

+кислота ацетилсалициловая

?

41. Отметить правильные утверждения:

-гидрокортизон – избирательный ингибитор ЦОГ-2

+преднизолон – стероидное противовоспалительное средство

-ибупрофен – глюкокортикоид

+целекоксиб – нестероидное противовоспалительное средство

?

42. Отметить правильные утверждения:

-диклофенак-натрий – глюкокортикоид

+преднизолон – стероидное противовоспалительное средство

+флуметазон – глюкокортикоид, используемый только местно

+целекоксиб – избирательный ингибитор ЦОГ-2

?

43. Отметить правильные утверждения: +преднизолон – глюкокортикоид

+ибупрофен — нестероидное противовоспалительное средство

+глюкокортикоиды нарушают образование арахидоновой кислоты из фосфолипидов

-гидрокортизон оказывает анальгетическое и жаропонижающее действие

?

44. Отметить правильные утверждения:

+дексаметазон — стероидное противовоспалительное средство

+кислота ацетилсалициловая ингибирует циклооксигеназу

-преднизолон обладает иммуностимулирующими свойствами

+ибупрофен оказывает анальгетическое действие

?

45. Отметить правильные утверждения:

-гидрокортизон – увеличивает выведение ионов натрия и воды из организма

+глюкокортикоиды стимулируют образование ингибиторов фосфолипазы А2

-кислота ацетилсалициловая угнетает образование лейкотриенов

?

46. Отметить правильные утверждения:

-гидрокортизон – иммуностимулятор

+ибупрофен ингибирует циклооксигеназу

+глюкокортикоиды увеличивают содержание нейтрофилов в крови

?

47. Отметить правильные утверждения:

-салицилаты стимулируют образование простагландинов

-ибупрофен обладает иммунодепрессантными свойствами

+нестероидные противовоспалительные средства могут вызвать язву желудка

Необратимое ингибирование Са(2+)-независимой фосфолипазы А2 метиларахидонилфторфосфонатом

. 1996 12 июля; 1302 (1): 55-60.

doi: 10.1016/0005-2760(96)00002-1.

Y C Лио ¹ , Л. Дж. Рейнольдс, Дж. Бальсинде, Э. А. Деннис

принадлежность

• ¹ Кафедра химии и биохимии, Revelle College, Сан-Диего, Ла-Хойя, Калифорния, США.

• PMID: 8695655
• DOI: 10.1016/0005-2760(96)00002-1

YC Lio et al. Биохим Биофиз Акта. 1996 .

. 1996 12 июля; 1302 (1): 55-60.

дои: 10.1016/0005-2760(96)00002-1.

Авторы

Y C Лио ¹ , Л. Дж. Рейнольдс, Дж.  Бальсинде, Е.А. Деннис

принадлежность

• ¹ Кафедра химии и биохимии, Revelle College, Сан-Диего, Ла-Хойя, Калифорния, США.

• PMID: 8695655
• DOI: 10.1016/0005-2760(96)00002-1

Абстрактный

Недавно сообщалось, что метиларахидонилфторфосфонат (MAFP) является селективным, направленным на активный центр, необратимым ингибитором цитозольной фосфолипазы A2 группы IV 85 кДа (cPLA2). Мы показали, что это соединение также сильно ингибирует Ca(2+)-независимую цитозольную фосфолипазу A2 (iPLA2). MAFP ингибировал iPLA2 в зависимости от концентрации, при этом полумаксимальное ингибирование наблюдалось при 0,5 мкМ после 5-минутной предварительной инкубации при 40°C.

Это ингибирование не обращалось при значительном разбавлении фермента в смеси для анализа. Преинкубация iPLA2 с MAFP приводила к линейной, зависящей от времени инактивации активности фермента, и фермент был защищен от инактивации обратимым ингибитором PACOCF3. Способность MAFP ингибировать iPLA2 предполагает, что этот фермент протекает через промежуточное соединение ацил-фермент, как это было предложено для cPLA2. Дальнейшее тестирование показало, что MAFP не ингибирует активность арахидоноил-КоА-синтетазы, КоА-зависимой ацилтрансферазы или КоА-независимой трансацилазы из клеток P388D1. Таким образом, MAFP не является общим ингибитором ферментов, действующих на арахидоноильные субстраты. Вместо этого ингибитор, по-видимому, проявляет некоторую селективность в отношении PLA2, хотя он не различает cPLA2 и iPLA2. Следует проявлять особую осторожность, чтобы различать эти действия, если этот ингибитор используется в интактных клетках.

Похожие статьи

• Высвобождение арахидоната макрофагами через цитозольную Са(2+)-зависимую и -независимую фосфолипазы необходимо для распространения клеток.

  Тесленко В., Роджерс М., Лефковит Ю.Б. Тесленко В, и соавт. Биохим Биофиз Акта. 1997 г., 21 января; 1344 (2): 189–99. doi: 10.1016/s0005-2760(96)00137-3. Биохим Биофиз Акта. 1997. PMID:

  95

• Ингибирование ацетилгидролазы фактора активации тромбоцитов (PAF) метиларахидонилфторфосфонатом потенцирует синтез PAF в стимулированных тромбином эндотелиальных клетках коронарных артерий человека.

  Келл П.Дж., Крир М.Х., Краун К.Н., Вирсиг К., МакХоват Дж. Келл П.Дж. и др. J Pharmacol Exp Ther. 2003 г., декабрь; 307(3):1163-70. doi: 10.1124/jpet.103.055392. Epub 2003 14 октября. J Pharmacol Exp Ther. 2003. PMID: 14560038

• Индукция экспрессии циклооксигеназы-2 метиларахидонилфторфосфонатом в мышиных макрофагах J774: роль протеинкиназы C, ERK и p38 MAPK.

  Линь В.В., Чен до н.э. Лин В.В. и др. Бр Дж. Фармакол. 1999 март; 126(6):1419-25. doi: 10.1038/sj.bjp.0702436. Бр Дж. Фармакол. 1999. PMID: 10217536 Бесплатная статья ЧВК.

• Различение типов фосфолипазы А2 в биологических образцах с помощью групповых анализов в присутствии ингибиторов.

  Лукас К.К., Деннис Э.А. Лукас К.К. и др. Простагландины Другие липиды Медиат. 2005 г., сен; 77 (1–4): 235–48. doi: 10.1016/j.prostaglandins.2005.02.004. Простагландины Другие липиды Медиат. 2005. PMID: 16099408 Обзор.

• Каталитические свойства, регуляция и функция миокардиальной фосфолипазы А2.

  Макховат Дж., Крир М.Х. МакХоват Дж. и др. Агенты Curr Med Chem Cardiovasc Hematol. 2004 г., июль; 2(3):209-18. дои: 10.2174/1568016043356282. Агенты Curr Med Chem Cardiovasc Hematol. 2004. PMID: 15320787 Обзор.

Посмотреть все похожие статьи

Цитируется

• Мультимодальная регуляция процесса остеокластогенеза секретируемой фосфолипазой группы IIA A ₂ .

  Манджини М., Д’Анджело Р., Винчигуэрра С., Пайре С., Ламбо Г., Балестриери Б., Чарльз Дж. Ф., Мариджио С. Манджини М. и др. Front Cell Dev Biol. 2022 29 августа; 10:966950. doi: 10.3389/fcell.2022.966950. Электронная коллекция 2022. Front Cell Dev Biol. 2022. PMID: 36105351 Бесплатная статья ЧВК.

• Специфическая для thraustochytrid липаза/фосфолипаза с уникальной позиционной специфичностью способствует микробной конкуренции и получению жирных кислот из окружающей среды.

  Исибаси Ю., Аоки К., Окино Н., Хаяши М., Ито М. Исибаши Ю. и др. Научный представитель 8 ноября 2019 г .; 9 (1): 16357. doi: 10.1038/s41598-019-52854-7. Научный представитель 2019. PMID: 31705036 Бесплатная статья ЧВК.

• Серингидролазы, метаболизирующие липиды, в центральной нервной системе млекопитающих: эндоканнабиноиды и не только.

  Шин М., Уэр Т.Б., Ли Х.К., Хсу К.Л. Шин М. и др. Липиды Biochim Biophys Acta Mol Cell Biol. 2019 июнь; 1864 (6): 907-921. doi: 10.1016/j.bbalip.2018.08.007. Epub 2018 16 августа. Липиды Biochim Biophys Acta Mol Cell Biol. 2019. PMID: 30905349 Бесплатная статья ЧВК. Обзор.

• Набор химических и биологических инструментов для секреции типа Vd: характеристика аутотранспортера фосфолипазы A1 FplA из Fusobacterium nucleatum .

  Casasanta MA, Yoo CC, Smith HB, Duncan AJ, Cochrane K, Varano AC, Allen-Vercoe E, Slade DJ. Касасанта М.А. и соавт. Дж. Биол. Хим. 2017 8 декабря; 292(49):20240-20254. doi: 10.1074/jbc.M117.819144. Epub 2017 11 октября. Дж. Биол. Хим. 2017. PMID: 2

• 52 Бесплатная статья ЧВК.

• Фосфолипазная активность аденилатциклазного токсина опосредует транслокацию его аденилатциклазного домена.

  Гонсалес-Буллон Д., Урибе К.Б., Мартин С., Остолаза Х. Гонсалес-Буллон Д. и др. Proc Natl Acad Sci U S A. 15 августа 2017 г .; 114 (33): E6784-E6793. doi: 10.1073/pnas.1701783114. Epub 2017 31 июля. Proc Natl Acad Sci U S A. 2017. PMID: 28760979 Бесплатная статья ЧВК.

Просмотреть все статьи «Цитируется по»

Типы публикаций

термины MeSH

вещества

Грантовая поддержка

• GM 20,501/GM/NIGMS NIH HHS/США
• HD 26 171 / HD / NICHD NIH HHS / США

Исследования ингибирования ассоциированной с мембраной фосфолипазы A2 in vitro и продукции простагландина E2 in vivo в макрофагоподобной клетке P388D1.

Эффекты маноалида, 7,7-диметил-5,8-эйкозадиеновой кислоты и п-бромфенацилбромида . 1989 г., 25 мая; 264(15):8520-8.

М Д Листер ¹ , К. Б. Глейзер, Р. Дж. Улевич, Э. А. Деннис

Принадлежности

принадлежность

• ¹ Химический факультет Калифорнийского университета, Сан-Диего, Ла-Хойя 92093.

• PMID: 2498315

Бесплатная статья

М. Д. Листер и соавт. Дж. Биол. Хим. 1989 .

Бесплатная статья

. 1989 г., 25 мая; 264(15):8520-8.

Авторы

М Д Листер ¹ , К. Б. Глейзер, Р. Дж. Улевич, Э. А. Деннис

принадлежность

• ¹ Химический факультет Калифорнийского университета, Сан-Диего, Ла-Хойя 92093.

• PMID: 2498315

Абстрактный

Чтобы установить роль фосфолипазы А2 (ФЛА2) в высвобождении арахидоновой кислоты для биосинтеза эйкозаноидов, мы охарактеризовали Са2+-зависимую ФЛА2 из клеток P388D1, оценили ингибиторы ее активности и сопоставили эффекты этих ингибиторов на простагландин. PG) Производство E2 в интактной клетке. Ca2+-зависимая PLA2 мало предпочитает полярную головную группу или sn-2 жирную кислоту фосфолипидов, и теперь мы обнаружили, что она будет гидролизовать 1-алкил,2-ацилфосфолипиды, но не отдает предпочтение этому субстрату. над другими фосфолипидами. Исследования ингибиторов с Ca2+-зависимой PLA2 показали, что арахидоновая кислота является эффективным ингибитором. Аналоги природных жирных кислот, эйкозатетраиновая кислота и октадецилейкозаиновая кислота, оказались неэффективными в качестве ингибиторов PLA2 P388D1. Однако 7,7-диметил-5,8-эйкозадиеновая кислота оказалась таким же эффективным ингибитором (IC50 = 16 мкМ), как и арахидоновая кислота. Было обнаружено, что маноалид и его аналог, маноалог, являются хорошими ингибиторами P388D1 PLA2 (IC50 = 16 и 26 мкМ соответственно). Необратимый ингибитор внеклеточной PLA2, п-бромфенацилбромид, был очень слабым ингибитором P388D1 PLA2, кажущаяся IC50 = 500-600 мкМ. Хинакрин также был неэффективен в качестве ингибитора, как и ингибитор циклооксигеназы индометацин. На клеточном уровне клетки P388D1 реагируют на различные стимулы, продуцируя PGD2 и PGE2 в качестве основных продуктов циклооксигеназы с незначительной продукцией PGI2 и тромбоксана A2. Аналогичные профили метаболитов арахидоновой кислоты наблюдались для ионофора кальция A23187, мелиттина и фактора активации тромбоцитов. Маноалид, маноалог и 7,7-диметил-5,8-эйкосадиеновая кислота, эффективные ингибиторы выделенной PLA2, ингибировали продукцию PGE2 в интактных клетках P388D1 на 40-85% в исследованном диапазоне концентраций. Напротив, п-бромфенацилбромид, который неэффективен в качестве ингибитора P388D1 PLA2, не оказывал значительного влияния на продукцию PGE2 в используемых диапазонах концентраций. Эти результаты демонстрируют, что могут существовать важные различия между внутриклеточной PLA2 P388D1 и более часто изучаемыми внеклеточными формами PLA2. Эти различия также наблюдаются в исследованиях интактных клеток и подчеркивают необходимость оценки ингибиторов как in vitro, так и in vivo с использованием выделенного фермента и интактной клетки. Это первый пример исследований, направленных на сопоставление ингибирования очищенного внутриклеточного PLA2 с ингибированием продукции простагландинов в интактной клетке, из которой он получен.

Похожие статьи

• Регуляция биосинтеза эйкозаноидов in vitro и in vivo морским натуральным продуктом маноалидом: мощным инактиватором фосфолипаз яда.

  Майер А.М., Глейзер К.Б., Джейкобс Р.С. Майер А.М. и соавт. J Pharmacol Exp Ther. 1988 март; 244(3):871-8. J Pharmacol Exp Ther. 1988 год. PMID: 3150849

• Бактериальный липополисахарид праймирует макрофагоподобные клетки P388D1 для усиления метаболизма арахидоновой кислоты. Активация рецептора фактора активации тромбоцитов и регуляция фосфолипазы А2.

  Глейзер К.Б., Асмис Р., Деннис Э.А. Глейзер К.Б. и др. Дж. Биол. Хим. 1990 г., 25 мая; 265(15):8658-64. Дж. Биол. Хим. 1990. PMID: 2160463

• Клеточные и топические мышиные модели воспаления in vivo при оценке ингибиторов фосфолипазы A2.

  Глейзер К.Б., Сунг М.Л., Хартман Д.А., Лок Ю.В., Бауэр Дж., Уолтер Т., Карлсон Р.П. Глейзер К. Б. и др. Кожная фармакология. 1995;8(6):300-8. дои: 10.1159/000211361. Кожная фармакология. 1995. PMID: 8688196

• Активность фосфолипазы A2 макрофагов и продукция эйкозаноидов: исследования с ингибиторами фосфолипазы A2 в клетках P388D1.

  Глейзер К.Б., Листер М.Д., Улевич Р.Дж., Деннис Э.А. Глейзер К.Б. и др. Adv Exp Med Biol. 1990;275:1-16. doi: 10.1007/978-1-4684-5805-3_1. Adv Exp Med Biol. 1990. PMID: 2239440 Обзор. Аннотация недоступна.

• Фосфолипаза А2 и сигнальная трансдукция.

  Бонвентре СП. Бонвентре СП. J Am Soc Нефрол. 1992 авг.; 3(2):128-50. doi: 10.1681/ASN.V32128. J Am Soc Нефрол. 1992. PMID: 1391715 Обзор.

Посмотреть все похожие статьи

Цитируется

• Компьютерные исследования физико-химических, фармакокинетических, токсикологических свойств и молекулярного докинга бетулиновой кислоты, входящей в состав Corypha taliera (Roxb. ), с фосфолипазой А2 (ФЛА2).

  Хан М.Ф., Нахар Н., Рашид Р.Б., Чоудхури А., Рашид М.А. Хан М.Ф. и др. BMC Комплемент Altern Med. 2018 февраль 2;18(1):48. дои: 10.1186/с12906-018-2116-х. BMC Комплемент Altern Med. 2018. PMID: 29391000 Бесплатная статья ЧВК.

• Высвобождение хиральных липидных медиаторов, воспалительных ферментов и липидных карт из биологической смазки.

  Деннис Э.А. Деннис ЭА. Дж. Биол. Хим. 2016 18 ноября; 291(47):24431-24448. дои: 10.1074/jbc.X116.723791. Epub 2016 23 августа. Дж. Биол. Хим. 2016. PMID: 27555328 Бесплатная статья ЧВК. Обзор.

• Изменение состояния активации новых мишеней, связанных с воспалением, с помощью белка, активирующего фосфолипазу A2 (PLAA).

  Чжан Ф., Ша Дж. , Вуд Т.Г., Галиндо К.Л., Гарнер Х.Р., Буркарт М.Ф., Суарес Г., Сьерра Д.К., Агар С.Л., Петерсон Д.В., Чопра А.К. Чжан Ф. и др. Сотовый сигнал. 2008 май; 20(5):844-61. doi: 10.1016/j.cellsig.2008.01.004. Epub 2008 17 января. Сотовый сигнал. 2008. PMID: 18291623 Бесплатная статья ЧВК.

• Количественное определение 14 кДа фосфолипазы A(2) тканей и иммунных клеток человека II типа с помощью иммуноферментного анализа.

  Болоньезе Б.Дж., Холмс С.Д., Макмиллан Л.Дж., Кайзер К.Ф., Маршалл Л.А. Болоньезе Б.Дж. и др. Инфламмофармакология. 1997;5(3):247-60. doi: 10.1007/s10787-997-0003-z. Инфламмофармакология. 1997. PMID: 17638134

• Роль цитозольной фосфолипазы А2 в стимулированном цитокинами высвобождении простагландинов клетками желчного пузыря человека.