Наследственный дефицит факторов VIII или IX (Гемофилия) > Клинические протоколы МЗ РК
Рекомендовано
Экспертным советом
РГП на ПХВ «Республиканский центр
развития здравоохранения»
Министерства здравоохранения
и социального развития
Республики Казахстан
от «15» октября 2015 года
Протокол № 12
Название протокола: Наследственный дефицит факторов VIII или IX (Гемофилия)
Гемофилия — наследственное, сцепленное с X хромосомой, заболевание системы гемостаза, характеризующееся снижением или нарушением синтеза факторов свертывания крови VIII (FVIII) (при гемофилии А) или фактор IX (FIX) (при гемофилии В). Заболевание наследуется по аутосомно-рецессивному типу, сцеплено с Х-хромосомой. Это определяет преимущественное возникновение болезни у лиц мужского пола, а носительство – у лиц женского пола.[1]
Код протокола:
Код МКБ -10:
D67.0- Наследственный дефицит фактора IX
Дата разработки протокола: 2015 год.
Сокращения, используемые в протоколе:
| АГ | – | артериальная гипертензия |
| АД | – | артериальное давление |
| АЛаТ | – | аланинаминотрансфераза |
| АСаТ | – | аспартатаминотрансфераза |
| ВЕ | – | Бетезде единица |
| ВИЧ | – | вирус иммунодефицита человека |
| ИИТ | – | индукция иммунной толерантности |
| ИФА | – | иммуноферментный анализ |
| КТ | – | компьютерная томография |
| ОАК | – | общий анализ крови |
| ОАМ | – | общий анализ мочи |
| ПЦР | – | полимеразная цепная реакция |
| СОЭ | – | скорость оседания эритроцитов |
| УЗИ | – | ультразвуковое исследование |
| ФГДС | – | фиброгастродуоденоскопия |
| ЧД | – | частота дыхания |
| ЧСС | – | частота сердечных сокращений |
| ЭКГ | – | электрокардиография |
| ЭхоКГ | – | эхокардиография |
| ЯМРТ | – | ядерно-магнитная резонансная томография |
Категория пациентов: пациенты с гемофилией А и В, взрослые, дети
Пользователи протокола: гематологи, терапевты, педиатры, врачи общей практики, врачи скорой помощи, хирурги, стоматологи, урологи, нейрохирурги, травматологи – ортопеды, физиотерапевты, сосудистые хирурги, ревматологи, гинекологи, акушеры, челюстно – лицевые хирурги, врачи лаборанты, рентгенологи, специалисты лучевой диагностики, трансфузиологи, гепатологи, инфекционисты, медицинские сестры и специалисты по профилю жалоб и симптомов.
При наличии клинических признаков у пациента врач любой смежной специальности обязан направить больного к гематологу. Подозрение на гемофилию и необходимость ее диагностики возникает при любом длительном кровотечении, независимо от его локализации (из пуповины и при кефалогематомах у новорожденных, при удалении зубов и оперативных вмешательствах у взрослых и пр.).[2]
Примечание: в данном протоколе используются следующие классы рекомендаций и уровни доказательств:
Класс I – польза и эффективность диагностического метода или лечебного воздействия доказана и и/или общепризнаны
Класс II – противоречивые данные и/или расхождение мнений по поводу пользы/эффективности лечения
Класс IIа – имеющиеся данные свидетельствуют о пользе/эффективности лечебного воздействия
Класс IIb – польза / эффективность менее убедительны
Класс III – имеющиеся данные или общее мнение свидетельствует о том, что лечение неполезно/ неэффективно и в некоторых случаях может быть вредным
| А | Высококачественный мета-анализ, систематический обзор РКИ или крупное РКИ с очень низкой вероятностью (++) систематической ошибки результаты которых могут быть распространены на соответствующую популяцию. |
| В | Высококачественный (++) систематический обзор когортных или исследований случай-контроль или Высококачественное (++) когортное или исследований случай-контроль с очень низким риском систематической ошибки или РКИ с невысоким (+) риском систематической ошибки, результаты которых могут быть распространены на соответствующую популяцию. |
| С | Когортное или исследование случай-контроль или контролируемое исследование без рандомизации с невысоким риском систематической ошибки (+). Результаты которых могут быть распространены на соответствующую популяцию или РКИ с очень низким или невысоким риском систематической ошибки (++ или +), результаты которых не могут быть непосредственно распространены на соответствующую популяцию. |
| D | Описание серии случаев или неконтролируемое исследование или мнение экспертов. |
| GPP | Наилучшая фармацевтическая практика. |
Фактор 8 анализ крови при беременности
Фактор VIII или антигемофильный глобулин — лабораторный диагностический маркер гемофилии А и риска тромбозов.
Синонимы: FVIII, F8, антигемофильный фактор A, антигемофильный глобулин, тромбоцитарный кофактор I, FVIII:C (коагуляционная активность фактора VIII)
— плазматический гликопротеин и фактор свертывания крови с молекуллярной массой 330 кДа.
Синтезируется преимущественно в печени, меньше в селезенке, поджелудочной железе, почках и мышечной ткани. Состоит из 2-х цепей (легкой и тяжелой), ионы кальция и меди стабилизируют его структуру.
Относится к не ферментативным коагуляционным факторам (как и фактор V — проакцелерин). Одновременно белок острой фазы воспаления, т.е. его концентрация растет при любом воспалительном процессе (вместе с С-реактивным белком, СОЭ).
Антигемофильный глобулин легко разрушается под воздействием ферментов плазмы, поэтому в кровяном русле циркулирует в связанной форме с фактором фон Виллебранда в соотношении 1:1. При контакте с негативно заряженной поверхностью фосфолипидов (при нарушении целостности эндотелия) фактор VIII высвобождается от переносчика. Под влиянием тромбина (фактор IIa) или фактора Xa свободный фактор VIII переходит в активную форму — VIIIа и формирует комплекс (внутренняя теназа) с фактором IXa, мембранными фосфолипидами и ионами кальция Ca 2+ . Фактор VIII в данной коалиции выполняет функции кофактора и в 10 000 раз ускоряет активацию фактора X (X→ Xa).
Группа крови на 30% определяет активность фактора VIII: у I (αβ) группы крови — наименьший, постепенно повышается у II (Аβ) и III (Вα), достигая максимума у IV (АВ) группы.
Ген антигемофильного фактора расположен на половой X-хромосоме (Xq28). У женщин две половые X-хромосомы и если ген фактора VIII на одной из них не «работает», то другая полностью компенсирует развившийся дефицит. В таком случае сама женщина будет без каких-либо симптомов или повышенной кровоточивости, но может передать «больную» хромосому своим детям.
У мужчин половых хромосом также две, одна Y и одна X. Если Х-хромосома будет нести поврежденный ген антигемофильного глобулина, то в таком случае говорят о заболевании гемофилией.
Гемофилия А – наследственное заболевание системы свертывания крови, в результате врожденного недостатка фактора VIII. Ген гемофилии А расположен на Х-хромосоме. Болеют гемофилией А мужчины, заболевание у женщин встречается крайне редко (фатально при наступлении половой зрелости).
У 75% гемофиликов есть родственники с гемофилией, но у 25% — нет, что может быть связано возникновением новой мутации или с «перескакиванием» заболевания через поколение, поскольку передают заболевание женщины, которые сами остаются здоровыми.
- гемартрозы — спонтанные кровоизлияния в суставы — коленные, локтевые, голеностопные, что ведет к реактивному воспалению их внутренней выстелки, разрушению хряща, а затем и кости; хрящ «заростает» соединительной тканью и становится неподвижным (анкилоз)
- суставы постоянно болезненны, отекшие
- атрофия мышц, мышечные контрактуры, отклонения суставной оси
- кровотечение может быть самопроизвольным, без какого либо провоцирующего фактора в любой орган — желудочно-кишечний тракт, почки, кровотечения из носа
- наиболее опасны кровоизлияния в головной и спинной мозг, в забрюшинное и заглоточное пространство
- анемия в результате постоянных кровепотерь
- при легкой форме гемофилии А кровотечения появляются только после травм или операций
Женщины-носительницы гена гемофилии также могут иметь повышенную кровоточивость, если активность фактора VIII
Повышенное содержание VIII фактора свертывания крови как фактор риска развития нарушения мозгового кровообращения Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»
УДК 616.151.511:616.831-005© И.В. Куртов, Ю.А. Косякова, Т.А. Гриценко, Ю.О. Берман,
Н.А. Никулина, Л. А. Нетроголова, И. Л. Давыдкин, А.М. Осадчук, 2011
И.В. Куртов, Ю.А. Косякова, Т.А. Гриценко, Ю.О. Берман, Н.А. Никулина, Л.А. Нетроголова, И.Л. Давыдкин, А.М. Осадчук
ПОВЫШЕННОЕ СОДЕРЖАНИЕ VIII ФАКТОРА СВЕРТЫВАНИЯ КРОВИ КАК ФАКТОР РИСКА РАЗВИТИЯ НАРУШЕНИЯ МОЗГОВОГО КРОВООБРАЩЕНИЯ
ГБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России
Проведен анализ двух групп больных с комбинированными тромбофилиями, включающими в себя патологию прокоагулянтного и антикоагулянтного звеньев гемостаза. Группы разделены в зависимости от уровня VIII фактора в крови. Установлено, что в группе с высоким содержанием антигемофильного глобулина у 25 % больных в анамнезе отмечены нарушения мозгового кровообращения, в отличие от группы с нормальным содержанием VIII фактора, где ишемических инсультов не было. Таким образом, повышение уровня VIII фактора в крови является фактором риска церебральных сосудистых катастроф. Неблагоприятным является сочетание избытка VIII фактора с мутацией ингибитора активатора плазминогена 1 типа.
Ключевые слова: тромбофилия, антигемофильный глобулин, нарушение мозгового кровообращения.
I.V. Kurtov, Yu.A. Kosyakova, T.A. Gritsenko, Yu. O. Berman, N.A. Nikulina, L.A. Netrogolova, I.L. Davyidkin, A.M. Osadchuk
THE INCREASED CONTENT OF VIII FACTOR IN BLOOD COAGULATION
AS THE RISK FACTOR OF DEVELOPMENT OF BRAIN CIRCULATION DAMAGE
The article deals with the analysis of two groups of patients with combined thrombophilia including pathology of procoagulated and anticoagulated units of hemostasis. The groups were divided in accordance with the level of VIII Factor in blood. It was defined that in the group with high content of antihemophile globulin — 25 % of patients in the anamnesis — the brain circulation damages to be noted in comparison with group having normal content of VIII Factor without ischemic shock. The increase of level of VIII Factor in the blood should be considered as the risk factor of cerebral vascular catastroph. The combination of increase level of VIII Factor with mutation of inhibitor activator plas-minogene of type 1 should be unfavourable.
Key words: thrombophilia, antigemophile globulin, brain circulation damage.
В семьях больных с венозными тромбозами и ранним атеросклерозом установлено более высокое содержание уровня фактора VIII у 40 % родственников первой линии, что является признаком повышенного риска для венозного и артериального тромбоза [4].
Риск тромбозов возрастает при сочетании повышенного уровня фактора VIII с другими наследственными дефектами системы гемостаза, такими, как мутация фактора V Лейден [9]. Роль VIII фактора в артериальных тромбозах менее изучена. При уровне фактора VIII более 170 % риск ишемиче-ского инсульта возрастает в 2 раза [8].
Повышение уровня фактора фон Виллебранда, являющегося кофактором антигемофильного глобулина, также связано с увеличенным риском венозных тромбозов, но этот эффект в основном связан с повышением VIII фактора в крови [5].
Материал и методы исследования. Обследовано 50 пациентов, из них 43 женщины и 7 мужчин в возрасте от 22 до 48 лет, средний возраст — 30,4 ± 0,8 года. Основными причинами обращения у женщин стало невынашивание беременности на ранних сроках, а также неудачи экстракорпорального оплодотворения, у 4 женщин в анамнезе было острое нарушение мозгового кровообращения, у 1 пациентки — артериальный тромбоз сосудов пальцев кисти. У мужчин причинами обращения стали: тромбоэмболия легочной артерии у 1 пациента, тромбоз бедренной артерии — 1 пациент, повторное острое нарушение мозгового кровообращения — 1 пациент, тромбоз внутренней сонной артерии — 1 пациент, тромбоз вен нижних конечностей — 3 человека.
Методы исследования включали в себя определение показателей системы гемостаза: активированное частичное тромбопластиновое время, международное нормализованное отношение, фибриноген, тромбиновое время, уровень протеина С, протеина S, антитромбина III, плазминогена; содержание фактора VIII, фактора IX, фактора Виллебранда, количество тромбоцитов, определение агрегации тромбоцитов под действием индукторов, таких, как АДФ, коллаген и универсальный индуктор агрегации. Для определения показателей плазменного гемостаза использовали коагулометр STA Compact фирмы ROCHE (Швейцария).
Методом полимеразной цепной реакции в реальном времени (ПЦР-РВ) определяли генетические мутации системы свертывания крови: мутации метилентетрагидрофолатредуктазы (MTHFR) C677T, метионинсинтазы редуктазы MTRR Ile22Met, гена протромбина G20210A, ингибитора активатора плазминогена PAI-1, тромбоцитарного рецептора ITGB3 Leu33Pro, фибриногена 455G/A, FV Лейден Arg506Gln, фактора VII Arg353Gln.
У всех больных был исключен антифосфолипидный синдром (отсутствие в анализах крови «волчаночного антикоагулянта», а также антител к фосфолипидам, кардиолипину, ß2-гликопротеину-I).
Для определения влияния содержания антигемофильного глобулина группы больных были разделены в зависимости от уровня VIII фактора свертывания крови на группу с нормальным содержанием антигемофильного глобулина и группу с высоким содержанием VIII фактора в крови.
Группу больных с уровнем VIII фактора более 150 % (нормальные величины 50-150 %) составили 20 больных, из них 16 женщин и 4 мужчин. Средний возраст больных 31,2 ± 0,9 года. Уровень VIII фактора в данной группе 224,7 ± 3,2 % (р < 0,05). Группу больных с нормальным содержанием антигемофильного глобулина составили 30 пациентов, из них 27 женщин и 3 мужчин. Среднее содержание VIII фактора в группе сравнения составило 104,4 % ± 3,6.
Результаты и их обсуждение. При анализе полученных данных установлено, что у всех пациентов отмечены различные сочетания генетических тромбофилий, связанных с патологией антикоа-гулянтного звена гемостаза, а также дефекты системы фибринолиза, коагуляционного и тромбоци-тарного звеньев гемостаза (табл. 1, 2).
Таблица 1
Выявленные генетические мутации системы свертывания крови
_у обследованных больных_
Генетические мутации системы свертывания крови
MTHFR C677T G20210A MTRR Ile22Met PAI-1 ITGB3 Leu33Pro FGB 455G/A FV Arg506Gln FVII Arg353Gln
23 3 22 38 22 13 4 11
Таблица 2
Патология системы гемостаза у обследованных больных_
Патология системы гемостаза
Дефицит протеина С Дефицит протеина S Дефицит антитромбина III Дефицит плазминогена Избыток фактора VIII Избыток фактора IX Избыток фактора Виллебранда Гиперагрегация тромбоцитов
5 4 2 1 20 6 12 10
При сравнении групп больных, в зависимости от содержания уровня VIII фактора свертывания крови, установлено, что из числа обследованных больных все 5 человек, перенесших острое нарушение мозгового кровообращения по ишемическому типу, вошли в группу с высоким содержанием ан-тигемофильного глобулина. В группе сравнения нарушений церебрального кровотока отмечено не было. У указанных 5 пациентов средний уровень VIII фактора составил 231,6 ± 4,6 %. Из других нарушений в системе гемостаза у данных больных выявлен полиморфизм ингибитора активатора плаз-миногена 1 типа (у 4 человек — гомозиготный вариант, у 1 пациента — гетерозиготный). У 1 пациентки выявлена гетерозиготная мутация метионинсинтазы редуктазы MTRR Ile22Met, у 1 человека ме-тилентетрагидрофолатредуктазы MTHFR C677T и гетерозиготная мутация фибриногена 455G/A, у 2 больных выявлены гомозиготные мутации MTHFR C677T, у 1 пациента — гетерозиготная мутация интегрина ITGB3 Leu33Pro и повышенное содержание фактора фон Виллебранда (190 %). Нарушений количества и агрегационных свойств тромбоцитов у больных не было. Отягощенного семейного анамнеза у данных пациентов не отмечено.
Заключение. Таким образом, повышение уровня VIII фактора в крови является дополнительным фактором риска сосудистых катастроф в сосудах головного мозга даже у молодых пациентов. Вероятно, с возрастом процент сосудистых катастроф в церебральном кровотоке будет нарастать. Неблагоприятно для таких больных сочетание избытка VIII фактора с другими прокоагулянтными дефектами системы гемостаза, в частности, с полиморфизмом ингибитора активатора плазминогена 1 типа, что также было выявлено у данных больных. Очевидно, здесь играет роль состояние гипо-фибринолиза, характерное для мутации PAI-1. Таким образом, комплексное исследование системы свертывания крови, включая определение содержания VIII фактора в крови, желательно поводить у всех пациентов, особенно молодого возраста, перенесших острые нарушения мозгового кровообращения.
Список литературы
1. Давыдкин, И. Л. Основы клинической гемостазиологии / И. Л. Давыдкин, В. А. Кондурцев, Т. Ю.Степанова, С. А. Бобылев. — Самара : Офорт, 2009. — 436 с.
2. Макацария, А. Д. Тромбозы и тромбоэмболии в акушерско-гинекологической практике / А. Д. Макацария, В. О. Бицадзе, С. В. Акиньшина. — М. : Медицинское информационное агентство, 2007. — 1064 с.
3. Момот, А. П. Патология гемостаз
Связь уровня фактора VIII в плазме с тяжестью нарушения свертывания крови
Уровень VIII фактора свертывания крови от 0 до 1% обусловливает крайне тяжелую форму болезни, от 1 до 2% — тяжелую, от 2 до 5% — среднетяжелую, выше 5% — легкую форму, но с опасностью тяжелых и даже смертельных кровотечений при травмах и хирургических вмешательствах.
Среди всех возможных проявлений гемофилии на первое место выступают кровоизлияния в крупные суставы конечностей (тазобедренные, коленные, голеностопные, плечевые и локтевые), глубокие подкожные, межмышечные и внутримышечные кровоизлияния, обильные и длительные кровотечения при травмах, появление крови в моче. Несколько реже наблюдаются другие кровотечения, в том числе и такие тяжелые и опасные, как забрюшинные кровоизлияния, кровоизлияния в органы брюшной полости, желудочно-кишечные кровотечения, внутричерепные кровоизлияния (инсульты).
При гемофилии можно довольно четко проследить прогрессирование всех проявлений болезни по мере роста ребенка, а в дальнейшем и взрослого человека. При рождении могут наблюдаться более или менее обширные кровоизлияния под надкостницу костей черепа, подкожные и внутрикожные кровоизлияния, поздние кровотечения из пупочного канатика. Иногда болезнь выявляется при первой внутримышечной инъекции, которая может стать причиной большой, опасной для жизни межмышечной гематомы. Прорезывание зубов часто сопровождается не очень обильными кровотечениями. В первые годы жизни часто бывают кровотечения из слизистой оболочки полости рта, связанные с травмой различными острыми предметами. Когда ребенок учится ходить, падения и ушибы часто сопровождаются обильными носовыми кровотечениями и гематомами на голове. Кровоизлияния в глазницу, а также заглазничные гематомы могут привести к потере зрения. У ребенка, начавшего ползать, типичны кровоизлияния в области ягодиц. Затем на первый план выступают кровоизлияния в крупные суставы конечностей. Они появляются тем раньше, чем тяжелее протекает гемофилия. Первые кровоизлияния предрасполагают к повторным излияниям крови в те же суставы. У каждого отдельного человека, страдающего гемофилией, с особым упорством и частотой кровоизлияниями поражаются 1—3 сустава. Наиболее часто поражаются коленные суставы, за ними голеностопные, локтевые и тазобедренные. Сравнительно редко наблюдаются кровоизлияния в мелкие суставы кистей и стоп (менее 1% всех поражений) и суставы между позвонками. У каждого человека, в зависимости от возраста и тяжести заболевания, поражаются от 1—2 до 8—12 суставов.
Необходимо различать острые гемартрозы (первичные и рецидивирующие), хронические геморрагически-деструктивные остеоартрозы (артропатии), вторичный иммунный ревматоидный синдром как осложнение основного процесса.
Острый гемартроз проявляется как внезапное появление (часто после небольшой травмы) или резкое усиление боли в суставе. Сустав часто увеличен, кожа над ним красного цвета, горячая на ощупь. После первого переливания компонентов крови боль быстро (в течение нескольких часов) ослабляется, а при одновременном удалении крови из сустава почти немедленно проходит.
Выделяются IV стадии поражения суставов. В I, или ранней, стадии может быть увеличен объем сустава в результате кровоизлияния. В «холодном» периоде функция сустава не нарушена, но при рентгенологическом исследовании определяют характерные признаки поражения. Во II стадии отмечается прогрессирование процесса, что выявляют по данным рентгеновских снимков. В III стадии сустав резко увеличивается в размере, деформируется, часто неровен и бугрист на ощупь, определяется выраженная гипотрофия мышц пораженной ноги. Подвижность пораженных суставов более или менее ограничена, что связано как с поражением самого сустава, так и с изменениями мышц и сухожилий. В эту стадию формируется выраженный остеопороз, легко возникают переломы внутри суставов. В бедренной кости отмечается типичное для гемофилии кратеро- или туннелеподобное разрушение костного вещества. Надколенник частично разрушается. Внутрисуставные хрящи разрушены, в полости сустава обнаруживаются подвижные осколки этих хрящей. Возможны различного рода подвывихи и смещения костей. В IV стадии функция сустава почти полностью утрачивается. Возможны переломы внутри суставов. С возрастом тяжесть и распространенность поражения суставного аппарата прогрессирует и принимает более тяжелый характер при возникновении гематом вокруг патологически измененных суставов.
Вторичный ревматоидный синдром (синдром Баркагана—Егоровой) является частой формой поражения суставов у больных гемофилией. Впервые данный синдром был описан в 1969 г. Во многих случаях он просматривается врачами, поскольку возникает на фоне уже имеющихся гемартрозов и свойственных гемофилии разрушающих процессов в суставах. Вторичный ревматоидный синдром сопровождается хроническим воспалительным процессом (часто симметричным) в мелких суставах кистей и стоп, которые ранее не поражались кровоизлияниями. В последующем, по мере прогрессирования процесса, эти суставы подвергаются типичной деформации. В крупных суставах периодически появляется сильная боль, можно отметить выраженную утреннюю скованностью в суставах. Вне зависимости от появления новых кровоизлияний, суставной процесс неуклонно прогрессирует. В этот момент при исследовании крови обнаруживают появление или резкое усиление имеющихся лабораторных признаков воспалительного процесса, в том числе и иммунологических.
У большинства лиц, страдающих гемофилией, синдром появляется в возрасте старше 10—14 лет. К 20 годам его частота доходит до 5,9%, а к 30 — до 13% всех случаев заболевания. С возрастом распространенность и тяжесть всех поражений суставов неуклонно прогрессируют, что приводит к инвалидности, заставляет пользоваться костылями, колясками и другими приспособлениями. Прогрессирование поражения суставов зависит от частоты острых кровоизлияний, своевременности и полноценности их лечения (очень важно проведение раннего переливания крови и ее компонентов), качества ортопедической помощи, правильного применения лечебной физкультуры, физиотерапевтических и бальнеологических воздействий, выбора профессии и ряда других обстоятельств. В настоящее время все эти вопросы чрезвычайно актуальны, поскольку продолжительность жизни при гемофилии резко возросла благодаря успехам коррекционного лечения.
Очень тяжелы и опасны обширные и напряженные подкожные, межмышечные, субфасциальные и забрюшинные гематомы. Постепенно увеличиваясь, они могут достигать огромных размеров, содержать от 0,5 до 3 л крови и более, приводить к развитию анемии, вызывать сдавление и разрушение окружающих тканей и питающих их сосудов, некроз. Так, например, забрюшинные гематомы нередко полностью разрушают большие участки тазовых костей (диаметр зоны разрушения может достигать 15 см и более), гематомы на ногах и руках разрушают трубчатые кости, пяточную кость. Гибель костной ткани приводит к формированию кровоизлияний под надкостницу. Процесс такого разрушения костей на рентгенограммах довольно часто принимается за опухолевый процесс. Нередко в гематомы откладываются соли кальция, что иногда приводит к образованию новых костей, которые могут замыкать суставы и полностью их обездвиживать.
Многие гематомы, оказывая давление на нервные стволы или мышцы, вызывают параличи, нарушения чувствительности, быстро прогрессирующую атрофию мышц. Особо опасными являются обширные кровоизлияния в мягкие ткани подчелюстной области, шеи, зева и глотки. Данные кровоизлияния вызывают сужение верхних дыхательных путей и удушье.
Серьезную проблему при гемофилии создают обильные и упорные почечные кровотечения, наблюдаемые у 14—30% лиц с данным заболеванием крови. Эти кровотечения могут возникать как спонтанно, так и в связи с травмами поясничной области, сопутствующими пиелонефритами. Кроме того, почечные кровотечения могут возникать вследствие повышенного выделения кальция с мочой из-за разрушения костной ткани при гемофилии. Появлению или усилению таких кровотечений могут способствовать прием анальгетиков (ацетилсалициловая кислота и др.), массивные переливания крови и плазмы, что приводит к дополнительному повреждению почек. Почечным кровотечениям часто предшествует длительное выделение с мочой частиц крови, которые могут быть обнаружены только при лабораторном исследовании.
Появление крови в моче часто сопровождается выраженными расстройствами мочеиспускания, а также изменением количества выделяемой мочи (может быть как увеличение ее суточного объема, так и уменьшение), приступами почечной колики, обусловленными образованием сгустков крови в мочевыводящих путях. Особенно интенсивны и выражены эти явления при лечении, когда временно восстанавливается нормальное состояние крови. Прекращению выделения крови с мочой часто предшествуют почечная колика, а нередко и временное отсутствие выделения мочи с появлением признаков интоксикации организма токсическими продуктами обмена веществ.
Почечные кровотечения периодически повторяются, что с годами может привести к тяжелым дистрофически-деструктивным изменениям в этом органе, вторичной инфекции и смерти от развития почечной недостаточности.
Желудочно-кишечные кровотечения при гемофилии могут быть спонтанными, но чаще они обусловлены приемом ацетилсалициловой кислоты (аспирин), бутадиона и других препаратов. Вторым источником кровотечений служат явные или скрыто протекающие язвы желудка или двенадцатиперстной кишки, а также эрозивные гастриты различного происхождения. Вместе с тем иногда отмечаются диффузные капиллярные кровотечения без каких-либо деструктивных изменений слизистой оболочки. Эти кровотечения носят название диапедезных. При их появлении стенка кишечника на большом протяжении пропитывается кровью, что быстро приводит к возникновению комы в результате выраженной анемии, обморочному состоянию в связи с резким снижением артериального давления и смерти. Механизм развития подобных кровотечений до настоящего времени остается невыясненным.
Кровоизлияния в органы брюшной полости имитируют различные острые хирургические заболевания — острый аппендицит, кишечную непроходимость и др.
Кровоизлияния в головной и спинной мозг и их оболочки при гемофилии почти всегда связаны либо с травмами, либо с приемом препаратов, нарушающих функцию тромбоцитов, которые принимают непосредственное участие в свертывании крови. Между моментом травмы и развитием кровоизлияния может быть светлый промежуток продолжительностью от 1 — 2 ч до суток.
Характерной чертой гемофилии являются длительные кровотечения при травмах и операциях. Рваные раны значительно опаснее линейных разрывов. Кровотечения часто возникают не сразу после травмы, а через 1—5 ч.
Удаление миндалин при гемофилии значительно более опасно, чем полостные хирургические вмешательства.
Удаление зубов, особенно моляров, часто сопровождается многодневными кровотечениями не только из зубных лунок, но и из гематом, образовавшихся на месте инфильтрации тканей новокаином, что приводит к развитию анемии. Эти гематомы вызывают деструкцию челюсти. При гемофилии зубы удаляют на фоне действия антигемофилических препаратов под общим наркозом. Удаление нескольких зубов лучше проводить одномоментно.
Часть осложнений при гемофилии обусловлена потерей крови, сдавлением и разрушением тканей гематомами, инфицированием гематом. Большая группа осложнений связана также с иммунными нарушениями. Наиболее опасным из них является появление в крови в большом количестве иммунных ингибиторов («блокаторов») фактора VIII свертывания крови (или IX), трансформирующих гемофилию в так называемую ингибиторную форму, при которой основной метод лечения — трансфузионная терапия (переливание крови или ее компонентов) — почти полностью утрачивает свою эффективность. Более того, повторное введение антигемофилических препаратов часто вызывает быстрое нарастание количества ингибитора в крови, вследствие чего переливание крови и ее компонентов, первоначально дававшее какой-то эффект, вскоре становится бесполезным. Частота ингибиторной формы гемофилии, по данным разных авторов, колеблется от 1 до 20%, чаще от 5 до 15%. При ингибиторных формах заметно нарушается функция тромбоцитов, учащаются кровоизлияния в суставы и выделение крови с мочой, достоверно выше поражение суставов.
Основным методом лечения и профилактики кровотечений и кровоизлияний любой локализации и любого происхождения при гемофилии является внутривенное введение достаточных доз препаратов крови, содержащих фактор VIII. Фактор VIII изменчив и практически не сохраняется в консервированной крови, натуральной и сухой плазме. Для заместительного лечения пригодны только прямые переливания крови от донора и препараты крови с сохраненным фактором VIII свертывания. К прямым переливаниям крови от донора прибегают лишь тогда, когда врач не располагает какими-либо другими антигемофилическими препаратами. Грубой ошибкой является переливание крови от матери, так как она является передатчицей болезни, и уровень фактора VIII в ее крови резко снижен. Ввиду короткого периода жизни фактора VIII в крови реципиента (около 6—8 ч), переливания крови, как и переливания антигемофильной плазмы, должны повторяться не реже 3 раз в сутки. Для остановки массивных кровотечений и надежного прикрытия различных хирургических вмешательств такие переливания крови и плазмы непригодны.
Равный объем антигемофильной плазмы приблизительно в 3—4 раза эффективнее свежей консервированной крови. Суточная доза 30—50 мл/кг массы тела антигемофильной плазмы позволяет на некоторое время поддержать 10—15%-ный уровень фактора VIII. Главной опасностью такого лечения является перегрузка кровообращения объемом, что может привести к развитию отека легкого. Использование антигемофильной плазмы в концентрированном виде не меняет ситуации, так как высокая концентрация вводимого белка вызывает интенсивное перемещение жидкости из тканей в кровь, вследствие чего объем циркулирующей крови увеличивается так же, как и при вливании плазмы в нормальном разведении. Концентрированная сухая антигемофильная плазма имеет лишь то преимущество, что в ней более концентрирован фактор VIII свертывания крови, и в малом объеме он быстрее вводится в кровоток. Сухую антигемофильную плазму перед употреблением разводят дистиллированной водой. Лечения антигемофильной плазмой вполне достаточно для остановки большинства острых кровоизлияний в суставы (кроме наиболее тяжелых), а также для профилактики и лечения небольших кровотечений.
Наиболее надежны и эффективны при гемофилии концентраты фактора VIII свертывания крови. Самым доступным из них является криопреципитат. Он представляет собой белковый концентрат, выделяемый из плазмы с помощью охлаждения (криоосаждение), в котором содержится достаточное количество факторов свертывания крови, но мало белков. Низкое содержание белков позволяет вводить препарат в кровоток в очень больших количествах и повышать концентрацию фактора VIII до 100% и более, не опасаясь перегрузки кровообращения и отека легких. Криопреципитат необходимо хранить при — 20 °С, что затрудняет его транспортировку. При оттаивании препарат быстро утрачивает активность. Этих недостатков лишены сухой криопреципитат и современные концентраты фактора VIII свертывания крови. Их можно хранить в обычном холодильнике. Избыточное введение криопреципитата нежелательно, так как оно создает высокую концентрацию факторов свертывания в крови, вследствие чего нарушается микроциркуляция в органах и возникает опасность образования тромбов и развития ДВС-синдрома.
Все антигемофилические препараты вводят внутривенно только струйно, в возможно более концентрированном виде и возможно быстрее после их расконсервирования без смешивания с другими растворами для внутривенного введения. Одна из главных причин неудачи заместительной терапии заключается в капельном введении препаратов крови, что не приводит к повышению уровня фактора VIII свертывания в плазме. До стойкой остановки кровотечения нельзя использовать любые кровезаменители и препараты крови, которые не содержат антигемофилических факторов, так как это приводит к разведению фактора VIII и снижению его концентрации в сыворотке.
При острых кровоизлияниях в суставы необходима временная (не более чем на 3—5 дней) иммобилизация (обездвижение) пораженной конечности в физиологическом положении, обогревание пораженного сустава (компрессы), но не охлаждение. Раннее удаление излившейся в сустав крови не только сразу же устраняет болевой синдром, предотвращает дальнейшее свертывание крови в суставе, но и уменьшает угрозу развития и быстрого прогрессирования остеоартроза. Для предупреждения и лечения вторичных воспалительных изменений после удаления крови в полость сустава вводят 40—60 мг гидрокортизона. Поддерживающая трансфузионная терапия, которая проводится в течение первых 3—6 дней, предотвращает дальнейшее кровотечение и позволяет рано начать занятия лечебной физкультурой, что способствует более быстрому и полному восстановлению функции пораженной конечности, предотвращает атрофию мышц. Движения в пораженном суставе лучше разрабатывать поэтапно. В первые 5—7 дней после снятия повязки выполняют активные движения как в пораженном суставе, так и в других суставах конечности, постепенно увеличивая частоту и длительность упражнений. С 6—9-го дня переходят на «нагрузочные» упражнения, пользуясь велоэргометрами, педальными воротами для рук, эластическими тягами. С 11 —13-го дня с целью устранения остаточной тугоподвижности и ограничений максимального сгибания или разгибания с осторожностью выполняют пассивные нагрузочные упражнения. Одновременно с 5—7-го дня назначают физиотерапевтическое лечение — электрофорез гидрокортизона, анодную гальванизацию.
При кровоизлияниях в мягкие ткани проводится более интенсивное, чем при кровоизлияниях в суставы, лечение антигемофилическими препаратами. При развитии анемии дополнительно назначают внутривенные вливания эритроцитарной массы. Если возникают признаки инфицирования гематомы, то немедленно назначают антибиотики широкого спектра действия. Любые внутримышечные инъекции при гемофилии противопоказаны, так как могут стать причиной обширных гематом и псевдоопухолей. Пенициллин и его полусинтетические аналоги также нежелательны, поскольку в больших дозах усиливают кровоточивость.
Раннее и интенсивное лечение антигемофилическими препаратами способствует быстрому обратному развитию гематом. Осумковавшиеcя гематомы удаляют, если это возможно, хирургическим путем вместе с капсулой.
Наружные кровотечения из поврежденной кожи, носовые кровотечения и кровотечения из ранок в ротовой полости останавливают как трансфузионной терапией, так и местными воздействиями — обработкой кровоточащего участка препаратами, способствующими свертыванию крови. Кроме того, данные препараты могут приниматься и внутрь. На ранки накладывают давящие повязки или швы. Аналогичным образом останавливают кровотечения после удаления зубов. При удалении жевательных зубов проводится несколько более интенсивная трансфузионная терапия, а одновременное удаление нескольких зубов (3—5 и более) требует введения антигемофилических препаратов в первые 3 дня.
При носовых кровотечениях следует избегать тугой тампонады, так как после удаления тампонов кровотечение часто возобновляется с еще большей силой. Быстрая остановка носовых кровотечений обычно обеспечивается антигемофильной плазмой и антигемофилическими препаратами и одновременным орошением слизистой оболочки носа растворами, способствующими свертыванию крови.
Серьезную опасность представляют почечные кровотечения, при которых неэффективны внутривенные вливания антигемофильной плазмы и криопреципитата.
Желудочно-кишечные кровотечения останавливают большими дозами концентратов факторов свертывания крови. Следует помнить, что желудочные кровотечения часто провоцируются приемом в связи с болями в суставах, зубной или головной болью аспирина, бруфена, индометацина. У больных гемофилией даже однократный прием аспирина может вызвать желудочное кровотечение.
В профилактике и лечении хронических остеоартрозов и других поражений опорно-двигательного аппарата необходимо предусматривать различные способы защиты суставов и предупреждения травм конечностей. Для этого в одежду вшивают поролоновые щитки вокруг коленных, голеностопных и локтевых суставов, избегают тех видов спорта, которые связаны с прыжками, падениями и ушибами (в том числе езда на велосипеде и мотоцикле). Важное значение отводится как можно более раннему и полноценному лечению острых кровоизлияний в суставы и мышцы, интенсивной круглогодичной лечебной физкультуре. Для этого существуют специальные комплексы из атравматических упражнений в воде, на мягких матах и нагрузочных аппаратах — велоэргометрах, ручных воротах. Занятия нужно начинать в дошкольном или младшем школьном возрасте, т. е. до того, как развились тяжелые нарушения опорно-двигательного аппарата. Комплексную терапию дополняют физиотерапевтическими (токи высокой частоты, электрофорез глюкокортикостероидов) и бальнеологическими методами лечения, в первую очередь грязелечением, рапными и радоновыми ваннами. При частых и упорно повторяющихся кровоизлияниях в одни и те же суставы проводится рентгенотерапия и хирургическое лечение.
Важное значение в профилактике геморрагии имеет сведение к минимуму с раннего детского возраста опасности травм и порезов. Из обихода исключают легко ломающиеся игрушки (в том числе металлические и пластмассовые), а также неустойчивые и тяжелые предметы. Мебель должна быть с закругленными гранями, выступающие края обматывают ватой или поролоном, пол покрывают ворсовым ковром. Предпочтительнее общение и игры больных с девочками, а не с мальчиками. Для больного важен правильный выбор профессии и места работы.
Профилактика гемофилии пока не разработана. Определение пола будущего ребенка путем генетического исследования клеток, полученных из околоплодной жидкости, позволяет своевременно прервать беременность, но не показывает, является ли плод носителем гена гемофилии. Беременность сохраняют, если плод мужского пола, так как все сыновья больных рождаются здоровыми. Прерывают беременность в том случае, если плод женского пола, поскольку все дочери больных гемофилией являются носительницами заболевания.
У женщин — кондукторов гемофилии, имеющих 50%-ную вероятность родить больного ребенка (если плод мужского пола), или являющихся передатчицами гемофилии (если плод женского пола), рождение только девочек переносит опасность появления в семье больных гемофилией с первого поколения на второе, одновременно увеличивая общее число передатчиц заболевания.
Обновлено: 2019-07-09 23:42:08
Способ получения и свойства препарата VIII фактора свертывания плазмы крови человека Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»
СИБИРСКИЙ МЕДИЦИНСКИЙ ЖУРНАЛ № 22009 (выпуск 2)
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
УДК 612.115.4:615.012.8
А.В. Ямкин, О.В. Стронин, Л.Н. Никитина, Н.А. Семенова, А.А. Епанчинцев
E-mail: [email protected]
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И СВОЙСТВА ПРЕПАРАТА VIII ФАКТОРА СВЕРТЫВАНИЯ ПЛАЗМЫ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА
Филиал ФГУП «НПО Микроген» МЗ РФ в г. Томск «НПО «Вирион»
ВВЕДЕНИЕ
Очищенные препараты VIII фактора свертывания плазмы крови человека применяются для лечения гемофилии А, и их получение является одной из основных целей промышленного фракционирования плазмы крови во всем мире [1-3]. В России такие препараты не производятся [1, 4], тогда как минимальная ежегодная потребность отечественного здравоохранения в препаратах VIII фактора свертывания составляет 300 миллионов международных единиц (МЕ) [5]. В связи с этим изучение возможностей различных способов производства данного препарата является актуальной задачей.
Целью настоящей работы являлась оценка эффективности оригинального способа получения и изучение свойств препарата VIII фактора свертывания плазмы крови, полученного этим способом.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Разработанный оригинальный способ (патент №2324495 «Способ получения препарата VIII фактора свертывания крови человека») является комбинированным и включает криофракционирование плазмы крови для получения криопреципитата, растворение криопреципитата, вирусинактивирующую обработку раствора криопреципитата, хроматографию, ультрафильтрацию и лиофилизацию. Криопреципитат получали из свежезамороженной плазмы крови, соответствующей ФС 42-0091-02, путем ее разморозки при температуре 3-4°С до полного исчезновения льда и формирования отчетливо видимого осадка. Затем проводили центрифугирование размороженной плазмы на проточной центрифуге 0ТР101-К1
(Россия) при 15000 об/мин в течение (40±10) мин. Сразу после извлечения из ротора центрифуги полученный из плазмы осадок — криопреципитат — замораживали при температуре (-60±10)°С. Для получения очищенного фактора VIII криопреципитат растворяли в рабочем буфере при соотношении
0,4-2,0 мл рабочего буфера/г криопреципитата при (25±2)°С в течение 30 минут, затем полученный раствор криопреципитата подвергали осветляющей фильтрации с использованием префильтров с диаметром пор 5 мкм (NCG 29325, ООО «Палл Евразия», Москва). Вирусинактивирующую обработку раствора криопреципитата проводили сольвент-де-тергентным методом с использованием в качестве вирусинактивирующих агентов три-н-бутилфосфата и Тритона Х-100 (Sigma-Aldrich Chemie GmbH, Германия) в конечных концентрациях 0,3 и 1% соответственно. Инкубацию с вирусинактивирующими агентами проводили в течение 6 часов при температуре (27±2)°С при постоянном перемешивании. Затем проводили основную стадию очистки методом экс-клюзионной хроматографии, для чего вирусинак-тивированный раствор криопреципитата наносили на хроматографическую колонну XK 50/90 (GE Healhcare Bio-Sciences AB, Швеция) с сорбентом Se-pharose 4FF (GE Healhcare Bio-Sciences AB, Швеция) на скорости 60 см/ч при давлении в хроматографической системе (2,5±0,5) Бара. В полученный элюат, содержащий фактор VIII, добавляли стабилизаторы, а затем концентрировали его методом ультрафильтрации на полых волокнах с использованием аппаратов разделительных АР-0,1-100 ПС (г. Кириши) до получения необходимых значений активности фактора VIII на мл концентрируемого раствора. Затем проводили стерилизующую фильтрацию концентрированного элюата с использованием фильтров с диаметром пор 0,45 мкм (NXG 29325, ООО «Палл Евразия», Москва) и 0,22 мкм (NRG 29325, ООО «Палл Евразия», Москва), разливали продукт во флаконы, замораживали при температуре (- 45±5)°С и лиофилизировали. Лиофилизацию проводили в сублимационной установке ТГ-15 («Хохвакуум», Германия). Начальная температура в сублимационной установке составляла (-40±5)°С, конечная температура продукта составляла (45±5)°С. Общая длительность процесса лиофилизации продукта составляла (75±5) ч. Активность (количество) VIII фактора свертывания определяли методом измерения активированного частичного тромбопластинового времени (АЧТВ) с использованием коммерческих наборов («НПО Ренам», г. Москва), в качестве стандарта использовали плазму с аттестованной активностью фактора VIII («НПО Ренам», г. Москва). Содержание общего белка определяли биуретовым методом и методом Лоури [7]. Удельную активность фактора VIII оценивали как отношение активности фактора VIII к количеству общего белка в единице объема. Количество три-н-бутилфосфата определяли мето-
дом газовой хроматографии [8], количество Тритона Х-100 определяли методом обращенно-фазовой хроматографии [9]. Белковый спектр раствора криопреципитата и хроматографического элюата изучали методом электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии додецил-сульфата натрия [10].
Пробы не были нормированы по содержанию белка. Денситометрию геля проводили с помощью программы РЬоге11х.1.0.
Результаты представлены в виде среднего значения с указанием стандартного отклонения по выборке.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
В таблице 1 представлены обобщенные данные, полученные при производстве 46 экспериментальных серий при загрузках 10-12 литров плазмы, и показаны активность и степень очистки фактора VIII на основных этапах. Полученные результаты показывают, что основная очистка фактора VIII происходит на стадии эксклюзионной хроматографии. Так, после криофракционирования и вирусинактивирую-щей обработки удельная активность фактора VIII в растворе криопреципитата составляла 0,19 МЕ/мг (табл. 1). Оценка молекулярно-массового состава методом электрофореза в полиакриламидном геле показала, что на данном этапе криопреципитат содержал 87% белков с молекулярным весом 50-80 кДа и 7% белков с молекулярным весом 330 кДа (рис. 1). Следует отметить, что, по данным литературы, почти 90% всех белков криопреципитата составляет фибриноген, имеющий молекулярную массу 340 кДа
[11], который при электофорезе в редуцирующих условиях распадается на составляющие его альфа-бе-та-гамма-цепи с молекулярными массами 53-79 кДа
[12]. Молекула фактора VIII в плазме крови в норме связана с молекулами фактора фон Виллебранда и
Рис. 1. Молекулярно-массовый состав исходного раствора криопреципитата и хроматографических пиков при эксклюзионной хроматографии.
1 — маркеры молекулярных весов, [кДа]; 2 — исходный раствор криопреципитата, загружаемый на колонну; 3 — элюат первого пика; 4 — элюат второго пика
образует крупнейший белковый комплекс плазмы крови, молекулярная масса которого может достигать 20х103 кДа [13]. При электрофорезе в редуцирующих условиях комплекс фактор VIII — фактор фон Виллебранда также распадается на субъединицы с молекулярной массой порядка 240 кДа [12]. В связи с этим можно предположить, что в нашем исследовании молекулярно-массового состава (рис. 1) белки с молекулярным весом в области 50-80 кДа — это субъединицы фибриногена и другие балластные белки, а белки с молекулярным весом в области 330 кДа — это субъединицы комплекса фактора VIII, являющегося целевым белком в процессе очистки. Разница в молекулярных весах целевого белка и основного балластного белка — фибриногена обосновала выбор метода очистки эксклюзионной хроматографией с использованием сорбента, в гранулах которого радиус пор меньше, чем стоксовский радиус, отражающий
Таблица 1
Характеристика активности фактора свертывания VIII и концентрация вирусинактивирующих агентов в процессе получения препарата (M±m)
Наименование объекта исследования Активность VIII фактора свертывания [МЕ/мл] Содержание общего белка [мг/мл] Удельная активность VIII фактора свертывания [МЕ/мг] Три-н-бу- тилфосфат, мкг/мл Тритон Х-100, мкг/мл Выход фактора VIII, %
Вирусинактивирован- 9±2* 50±12* 0,19±0,05 3000 100000 35±7°
ныи криопреципитат n=46 n=46 п=46 n=46
Элюат, содержащий 5±1 0,33±0,02 15±2 0,3±0,1 0,5±0,2 82±7+
фактор VIII n=46 n=46 п=46 n=46 n=46 n=46
Препарат после 13±2 8,5±1,3** 1,5±0,3** 0,8±0,2 0,6±0,2 35±5***
лиофилизации n=46 n=46 п=46 n=46 n=46 n=46
Примечание:
М — среднее арифметическое значение по выборке; т — стандартное отклонение по выборке; п — объем выборки;
° — по отношению к свежезамороженной плазме; * — замороженный криопреципитат разводили в 4 раза;
** — после добавления стабилизаторов; + — по отношению к раствору криопреципитата, наносимого на хроматографическую колонну;
*** — по отношению к содержанию фактора VIII в растворе криопреципитата.
А.В. Ямкин, О.В. Стронин и др.
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ФАКТОРА VIII
молекулярный вес комплекса VIII фактора свертывания, но больше, чем стоксовский радиус молекул балластных белков [13]. Поэтому фактор VIII не проникает в гранулы сорбента и, оставаясь в свободном объеме колонны, элюируется первым пиком, а балластные белки проникают в поры гранул сорбента и элюируются медленнее, то есть вторым пиком. Этот механизм подтверждается при исследовании полученного хроматографического элюата. Так, методом АЧТВ было выявлено, что активность фактора VIII определялась только в элюате первого хроматографического пика (рис. 2).
Оценка молекулярно-массового состава также показала, что первый пик на 95% состоял из фракции с молекулярным весом не менее 320 кДа, к которой, предположительно, принадлежит фактор VIII (рис. 1). Во втором пике активность фактора VIII не определялась (рис. 2). По-видимому, это связано с тем, что второй пик на 93% состоял из белков и белковых субъ-
0 100 200 300 [мл]
Рис. 2. Профиль элюции раствора криопреципитата при эксклюзионной хроматографии и активность фактора VIII в разных хроматографических пиках.
——— активность фактора VIII [МЕ/мл]
—- — оптическая плотность при длине волны 280 нм [mAU]
единиц с молекулярной массой 5G-8G кДа (рис. i), к которым, предположительно, принадлежат балластные белки. По активности выход фактора VIII после эксклюзионной хроматографии в среднем составлял 82% от количества фактора VIII, содержавшегося в растворе криопреципитата, наносимого на хроматографическую колонну (табл. i). При этом удельная активность фактора VIII в элюате составляла (15±2) МЕ/мг (табл. i). Следует отметить, что хроматографический элюат, содержащий фактор VIII, является последним полупродуктом разработанного способа, где можно корректно оценить удельную активность фактора VIII как основного показателя степени очистки целевого белка, последующие показатели удельной активности оцениваются после добавления альбумина в качестве стабилизатора и не могут являться критерием степени очистки. Остаточное содержание три-н-бутилфосфата и тритона X-iGG в элюате было G,3±G,i мкг/мл и G,5±G,2 мкг/мл соответственно (табл. i). Это в 1G раз меньше минимально допустимого остаточного количества три-н-бутилфосфата и в 2G раз меньше минимально допустимого остаточного количества тритона X-iGG в препаратах крови согласно требованиям Всемирной организации здравоохранения [14]. После добавления стабилизаторов, концентрирования, стерилизующей фильтрации и лиофилизирования содержание общего белка в конечном препарате повысилось в 26 раз, тогда как активность фактора VIII только в 2,6 раза, что, соответственно, уменьшило удельную активность фактора VIII в конечном препарате в iG раз. Это связано с тем, что добавление стабилизаторов, в частности альбумина, снижало удельную активность фактора VIII, повышая содержание общего белка. Кроме этого, в процессе обработки элюата (концентрирование, стерилизующая фильтрация, лиофилиза-ция) терялось в среднем 58% от активности фактора
Таблица 2
Результаты контроля стабильности препарата VTTT фактора свертывания
№ серии препарата 17 17 17 19 19 19 22 22 22
Месяц/год исследования 04/05 07/06 10/06 05/05 08/06 11/06 06/05 09/06 12/06
Описание соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв.
Подлинность соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв.
Растворимость соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв.
Прозрачность соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв.
Цветность соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв.
Механические включения соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв.
Содержание общего белка [мг/мл] 7,7 7,2 7,5 8,9 9,1 9,3 8,1 8,4 7,8
Активность фактора VIII [МЕ/мл] 12 11 12 13 14 12 14 13 13
Удельная активность фактора VIII [МЕ/мг] 1,6 1,5 1,6 1,5 1,5 1,3 1,7 1,5 1,7
Пирогенность соотв. соотв. соотв. соотв. соотв. соотв.
Фактор свёртывания крови VIII — это… Что такое Фактор свёртывания крови VIII?
Фактор свёртывания крови VIII (Антигемофильный глобулин) — белок ß—глобулин. Образует комплекс с фактором Виллебранда, который синтезируется в клетках эндотелия и печени. Играет важную роль в процессах свёртывания крови.
Схема свёртывания кровиПри отсутствии данного фактора возникает гемофилия A[1].
Активируется по внешнему пути с участием тромбина и ионов Ca2+ путём отщепления от фактора Виллебранда. Его специфическая деятельность направлена на протеолиз фактора X и протекает при обязательном участии фактора IX. Следует отметить, что активация фактора X получила название теназной реакции[1].
Следует особо подчеркнуть возможность «альтернативных» путей для процессов коагуляции. Так фактор внешней системы VIIа и тканевой тромбопластин также могут активировать фактор внутренней системы IX. Поэтому при недостатке факторов VIII или IX наблюдаются более тяжёлые кровотечения, чем при дефиците факторов XI или XII: в последнем случае фактор IX может активироваться фактором VIIа. В свою очередь фактор VII может активироваться продуктами расщепления фактора XI и фактором IXа внутренней системы[2].
Примечания
- ↑ 1 2 Кузник Б. И. 6.4 Система гемостаза // Физиология человека / Под редакцией В. М. Покровского, Г. Ф. Коротько. — М.:: Медицина, 2000. — Т. 1. — С. 313—325. — 448 с. — 3000 экз. — ISBN 5-225-00960-3
- ↑ Marlar RA, Kleiss AJ, Griffin JH An alternative extrinsic pathway of human blood coagulation (англ.) // Blood. — 1982. — Т. 60. — № 6. — С. 1353—1358. — PMID 7139124.
Фактор свертываемости крови 7 (F7). Выявление мутации G10976A (Arg353Gln): исследования в лаборатории KDLmed
Маркер связан с изменением структуры фактора VII системы свертываемости крови. Исследуется для выявления генетической устойчивости к инфаркту миокарда, риска развития тромбоэмболических осложнений.
Название гена — F7
OMIM *613878
Локализация гена на хромосоме – 13q34
Функция гена
Ген F7 кодирует свертывающий фактор VII (проконвертин) — белок, синтезируемый в печени и регулирующий свертывание крови, выступая в качестве активатора факторов свертывания крови Х (F10) и IX (F9) в присутствии витамина К.
Генетический маркер F7 G10976A
Участок ДНК гена F7, в котором происходит замена гуанина (G) на аденин (А) в позиции 10976, обозначается как генетический маркер F7 G10976A. Следовательно, изменяются и биохимические свойства фермента, в котором происходит замена аминокислоты аргинина на глутамин.
G10976A – замена гуанина (G) на аденин (А) в позиции 10976 последовательности ДНК, кодирующей белок F7.
Arg353Gln – замена аминокислоты аргинина на глутамин в аминокислотной последовательности белка F7.
Возможные генотипы
Частота встречаемости в популяции
Частота встречаемости аллеля А в европейской популяции составляет 10%.
Ассоциация маркера с заболеваниями
- Тромбоэмболия
- Инфаркт миокарда
Описание
Система гемостаза представляет собой совокупность биохимических процессов, обеспечивающих жидкое состояние крови, поддержание её нормальных реологических свойств (вязкости), предупреждение и остановку кровотечений. В нее входят факторы свёртывающей, естественной противосвертывающей и фибринолитической систем крови. В норме процессы в ней уравновешены, что обеспечивает жидкое состояние крови. Смещение этого равновесия вследствие внутренних или внешних факторов может повышать риск кровотечений и тромбообразования.
Ген F7 кодирует фактор свертывания крови VII (проконвертин, F7) – витамин-К-зависимый профермент, продуцирующийся в печени. Основной физиологической ролью F7 является активация фактора свертывания крови Х (F10). После повреждения сосуда F7 связывается с тканевым фактором III (TFA) и переходит в активную форму. Эта реакция является основным событием в процессе свертывания крови. Комплекс TFA и F7 служит для активации фактора IX (F9), X (F10) и фактора VII (F7). Активированный фактор Х (Xа) в свою очередь участвует в процессах активации протромбина и переходе его в тромбин. Фактор VII также может активироваться и факторами XIIa, IXa, Ха и IIa.
Изменения в гене F7 в большинстве случаев имеют протективный эффект относительно риска развития тромбоэмболии. Замена гуанина (G) на аденин (А) в позиции 10976 (генетический маркер G10976A) приводит к изменению биохимических свойств фактора VII, в котором происходит замена аминокислоты аргинина на глутамин. Снижение активности F7 в результате замены способствует уменьшению тромбообразования. Генотип А/А является причиной снижения активности фермента F7 на 72%, по сравнению с диким типом (генотип G/G).
Маркер ассоциирован со снижением вероятности инфаркта миокарда, даже при наличии ангиографически задокументированного, тяжелого коронарного атеросклероза. Гетерозиготы (носители одного аллеля А и одного G, генотип A/G) имеют риск заболевания инфарктом миокарда в 2 раза меньший, чем носители двух аллелей G (генотип G/G).
Интерпретация результатов
Оценка генотипа по маркеру:
- G/G – нормальная активность белка F7
- G/A – активность белка F7 умеренно снижена
- A/A – активность белка F7 значительно снижена
Интерпретация результатов исследования должна проводиться врачом в комплексе с другими генетическими, анамнестическими, клиническими и лабораторными данными.
Исследование рекомендуется проводить в комплексах:
[42-010] Генетический риск развития тромбофилии (расширенный)
Важные замечания
Для данного маркера не существует понятия «норма» и «патология», т. к. исследуется полиморфизм гена.
Список факторов свертывания, функции, сгусток крови и эмбол
Что такое сгусток крови?
Сгусток крови представляет собой коагулированную массу клеток крови и других компонентов крови. Он закупоривает любой поврежденный участок стенки сосуда и поддерживает целостность кровеносного сосуда, предотвращая утечку крови. На свертывание крови (коагуляцию) влияет множество факторов. Когда область выстилки сосуда, известная как эндотелий, повреждена, тромбоциты в крови прикрепляются к этой области.Затем он присоединяет фибриноген, длинные волокна, которые помогают сформировать ячеистую сеть. Фибриноген превращается в фибрин под действием фермента тромбина. Тромбоциты прилипают друг к другу, образуя плотную пробку, а фибрин становится плотно сплетенным, образуя сгусток (пробка тромбоцитов).
После того, как поврежденный участок запломбирован, выстилка стенки сосуда отрастает и сгусток растворяется. Целостность кровеносного сосуда восстанавливается и угроза потери крови на этом участке отсутствует.
Иногда внутри сосуда образуется сгусток крови, который продолжает расти, улавливая красные и белые кровяные тельца, с дальнейшей агрегацией тромбоцитов и отложением фибрина. Это влияет на кровоток в сосуде и может оторваться и застрять в другом месте сосудистой системы (эмбол). Это называется тромбом. Технически тромб — это сгусток крови, но при тромбозе процесс свертывания выходит за рамки того, что необходимо для закрытия поврежденной стенки сосуда.
Что такое факторы свертывания крови?
Факторы свертывания — это группа химических веществ, которые постоянно циркулируют в крови или присутствуют в тканях кровеносных сосудов.Эти соединения отвечают за образование тромба. Факторы свертывания обычно неактивны, но как только происходит повреждение стенки кровеносного сосуда, активируется первый фактор. Это имеет циклический эффект, и каждый фактор активирует следующий. Конечная цель состоит в том, чтобы эти факторы свертывания крови в конечном итоге преобразовали необходимые компоненты, которые будут формировать сгусток крови.
Функции факторов свертывания крови
Гемостаз — это механизм организма, останавливающий кровопотерю.Он состоит из нескольких механизмов, в которых фаза коагуляции включает факторы свертывания и образование сгустка крови. Серия реакций, при которых один фактор свертывания крови активирует другой, известна как каскад коагуляции . Факторы свертывания крови в конечном итоге превращают фибриноген в фибрин, который затем формирует сетку в месте повреждения. Это улавливает клетки крови и другие компоненты, чтобы сформировать прочный сгусток крови и тем самым полностью остановить потерю крови . Следовательно, функция факторов свертывания крови заключается в том, чтобы вызвать образование сгустка крови и стабилизировать его на столько, сколько необходимо.Факторы свертывания, следовательно, известны как прокоагулянты .
Список факторов свертывания крови
Фактор I
Название : Фибриноген
Источник : Печень
Путь : И внешний, и внутренний
Активатор : Тромбин : Действия 9000 Когда превращается превращаясь в фибрин тромбином, он образует длинные нити, которые составляют сетку для образования сгустков.
Фактор II
Название : Протромбин
Источник : Печень
Путь : Внешний и внутренний
Активатор : Активатор протромбина
Действия : Протромбин активируется в тромбин, который затем превращается в тромбин.
Фактор III
Название : Тромбопластин / тканевой фактор
Источник : Тромбоциты (внутренние) и поврежденный эндотелий (клетки), выстилающие кровеносный сосуд (внешний).
Путь : Внешний и внутренний
Активатор : Повреждение кровеносного сосуда
Действие : Активирует фактор VII (VIIa).
Фактор IV
Название : Кальций
Источник : Кость и абсорбция из пищи в желудочно-кишечном тракте
Путь : И внешний, и внутренний
Действие : Работает со многими факторами свертывания для активации других факторов свертывания .Это называется кальциево-зависимыми стадиями.
Фактор V
Название : Проацерин / Лабильный фактор / Ас-глобулин (Ac-G)
Источник : Печень и тромбоциты
Путь : И внешний, и внутренний
Активатор : Тромбин
Действие : Работает с фактором X для активации протромбина (активатора протромбина).
Фактор VII
Название : Проконвертин / ускоритель превращения протромбина в сыворотке (SPCA) / стабильный фактор
Источник : Печень
Путь : Внешний
Активатор : Фактор III (тканевой фактор)
Действия Активирует фактор X, который работает с другими факторами, превращая протромбин в тромбин.
Фактор VIII
Название : Антигемоплитический фактор / Антигемофильный фактор (AHF) или глобулин (AHG) / антигемофильный фактор A 1: Внутренний Активатор : Тромбин Название : Рождественский фактор / Тромбопластиновый компонент плазмы (PTC) / Антигемофильный фактор B Имя : Фактор Стюарта Проуэра / фактор Стюарта Название : Предшественник плазменного тромбопластина (PTA) / антигемофильный фактор C Название : Фактор Хагемана Название : Фактор стабилизации фибрина Источник : Печень Источник : Печень Эмбол (во множественном числе ~ эмбол ) — это нерастворенная, отделившаяся масса, которая перемещается через кровоток к другим участкам тела.Это может быть твердое тело, жидкость или газ. Этот процесс отрыва от исходного участка и транспортировки по кровотоку известен как эмболия или эмболизация. Кровоток почти полностью нарушен, а недостаток кислорода может привести к инфаркту. В большинстве случаев эмбол представляет собой тромб (сгусток крови внутри сосуда), который отрывается от своего первоначального места и оседает в другом месте. Этот свободно движущийся сгусток крови попадает в сосуд, который обычно меньше, и может частично или почти полностью закупорить сосуд. Когда твердый эмбол, такой как тромб, оседает в другом участке сосудистой системы, происходит дальнейшее свертывание крови, поскольку тромбоциты и фибрин оседают на сторонах эмбола и окружающей эндотелиальной выстилке. Клетки крови также попадают в ловушку, и это образует плотную пробку вокруг эмбола. Другие вещества, которые могут действовать как эмбол, включают: Эмбол может привести к снижению кровотока и притока кислорода к области, что приводит к гипоксии и ишемии тканей.Если не предпринять немедленного медицинского вмешательства, это может привести к инфаркту (отмиранию тканей). Эмболия может застрять в легочной артерии (тромбоэмболия легочной артерии), что может привести к внезапной смерти или вызвать закупорку артерии, поставляющей кислород в мозг, что приведет к инсульту (нарушение мозгового кровообращения или ЦВА). Список литературы Последнее обновление 5 сентября 2018 г. Фактор VIII обычно вводится в виде медленного внутривенного введения (болюсная инъекция). Непрерывная инфузия фактора VIII показана пациентам, нуждающимся в госпитализации в связи с сильными кровотечениями или хирургическими процедурами. Замещение фактора VIII у таких пациентов должно проводиться после консультации с отделением клинической гематологии. Непрерывная инфузия 3 единиц / кг / час с помощью шприцевого насоса начинается после болюсной ударной дозы. Поскольку фактор VIII не содержит противомикробных агентов, шприцы для непрерывной инфузии должны быть подготовлены таким образом, чтобы содержимое шприца было введено менее чем за 24 часа (как в примере выше). Если клинически показан уровень фактора VIII в плазме, образец не следует брать из той же внутривенной линии, что и при непрерывной инфузии.Сообщите в лабораторию о необходимости получения пробы. В Австралии доступно четыре продукта с рекомбинантным фактором VIII, см. Таблицу ниже. Объем разбавителя (вода для инъекций) Руководство по восстановлению 250 FVIII / 500 vWF 5 мл Нажмите здесь (pdf) Фактор IX обычно вводится в виде медленной внутривенной инъекции (болюсная инъекция). Непрерывная инфузия фактора IX показана пациентам, нуждающимся в госпитализации по поводу сильных кровотечений или хирургических вмешательств. Замещение фактора IX для таких пациентов следует проводить после консультации с отделением клинической гематологии. Непрерывная инфузия 3 единиц / кг / час с помощью шприцевого насоса начинается после болюсной ударной дозы. Поскольку фактор IX не содержит антимикробного агента, шприцы для непрерывной инфузии должны быть подготовлены таким образом, чтобы содержимое шприца было введено менее чем за 24 часа (как в примере выше). Если клинически указан уровень фактора IX в плазме, образец не следует брать из той же внутривенной линии, что и при непрерывной инфузии.Сообщите в лабораторию о необходимости получения пробы. Меры предосторожности: Пациенты с гемофилией B, принимающие ингибиторы (антитела к фактору IX), подвержены риску тяжелых аллергических реакций, в том числе
анафилаксия к фактору IX. Пациенты с гемофилией наблюдаются на предмет развития ингибиторов, а ингибиторы фактора IX встречаются редко. В Австралии доступны два продукта с рекомбинантным фактором IX, см. Таблицу ниже. Размеры флаконов Объем разбавителя Руководство по восстановлению Benefix ™ 250 5 мл 0.234% NaCl Руководство по восстановлению Benefix (pdf) Alprolix ™ 250 5 мл 0.325% NaCl Alprolix (pdf) Monofix TM Размеры флаконов (шт.) Объем разбавителя (вода для инъекций) Руководство по восстановлению 500 10 мл Mix2Vial — 5 простых шагов (pdf)
Источник : Кровеносные сосуды и тромбоциты, выстилающие эндотелий (пробка)
Путь
Действия : Работает с фактором IX и кальцием для активации фактора X.
Дефицит : Гемофилия A Фактор IX
Источник : Печень
Путь : Внутренний
Активатор : Фактор XI и кальций
Действия : Работает с фактором VIII и кальцием для активации фактора X.
Дефицит : Гемофилия B Фактор X
Источник : Печень
Путь : Внешний и внутренний
Активатор Фактор IX / IX (внешний фактор) IX + Фактор VIII + кальций (внутренний)
Действия : Работает с фосфолипидами тромбоцитов для преобразования протромбина в тромбин. Эта реакция ускоряется активированным фактором V. Фактор XI
Источник : Печень
Путь : Внутренний
Активатор 9000II6: Фактор X прекалликреин и кининоген
Actions : Работает с кальцием для активации фактора IX.
Дефицит : Гемофилия C Фактор XII
Источник : Печень
Путь : Внутренний
Активатор : Контакт с коллагеном в разорванной стенке кровеносных сосудов: Работает
Действия с прекалликреином и кининогеном для активации фактора XI. Также активирует плазмин, разрушающий сгустки. Фактор XIII
Источник : Печень
Активатор : Тромбин и кальций
Действия : Стабилизирует фибриновую сетку сгустка крови, помогая нитям фибрина связываться друг с другом .Поэтому он также помогает предотвратить распад фибрина (фибринолиз). Прекалликреин
Путь : Внутренний
Действия : Работает с кининогеном и фактором XII для активации фактора XI. Кининоген
Путь : Внутренний
Действия : Работает с прекалликреином и фактором XII для активации фактора XI. Что такое эмбол?
Причины эмболии
Artheromas
Газ
Жир
Опухоль
Инородные тела
Амниотическая жидкость
Что происходит с эмболом?
Переливание крови: концентраты фактора свертывания
Общая информация
Фактор VIII (8)
Дозировка
Администрация
ПРИМЕР: Ребенок 18 кг, принимающий рекомбинантный фактор VIII / Advate: Рекомбинантный фактор VIII
Стандартные продукты с фактором полужизни VIII доступны в банке крови RCH.
Продукты с увеличенным периодом полужизни VIII используются пациентами на домашнем лечении и не доступны в банке крови RCH. Фактор VIII, полученный из плазмы, и фактор фон Виллебранда (Biostate TM )
Biostate TM Размеры флаконов
(единицы FVIII / единицы vWF)
500FVIII / 1000 vWF
1000FVIII / 2000 vWF
10 мл
10 мл Фактор IX (9)
Дозировка
Администрация
ПРИМЕР: Ребенок 18 кг на рекомбинантном факторе IX / Benefix: Рекомбинантный фактор IX
Standard Half Life Factor IX доступен в банке крови RCH.
Extended Half Life Factor IX используется пациентами на домашнем лечении и недоступен в банке крови RCH. Фирменное наименование рекомбинантного FIX Период полураспада
Стандартный
500
1000
2000
3000 Расширенный
500
1000
2000
3000 Руководство по восстановлению Фактор IX, полученный из плазмы (Monofix TM )
1000
10 мл Активированный фактор VII (7) Новосэвэн ® RT
Дозировка
- Согласно индивидуальному плану лечения пациентов с гемофилией ингибиторами фактора VIII или IX (обычно многократные дозы 90 мкг / кг).
- 90 микрограммов / кг для трудноизлечимых кровотечений, не поддающихся хирургической или заместительной трансфузионной терапии (неонатальным пациентам могут потребоваться большие дозы, до 180 микрограмм / кг)
- 10 микрограмм / кг для лечения эпизодов кровотечений у пациентов с фактором VII дефицит (редко).
- Период полувыведения активированного фактора VII составляет 2 часа.
- После восстановления прилагаемым разбавителем каждый флакон содержит 1,0 мг / мл фактора VIIa.
Администрация
- Новосевен ® RT стабилен в течение 24 часов после восстановления, но его следует вводить как можно скорее во избежание микробного заражения
- Если не использовать сразу после восстановления, Novoseven ® RT следует хранить во флаконе (не в шприц) в холодильнике при температуре 2 0 C-8 0 C в течение не более 24 часов
- Вводить в виде медленного внутривенного введения (болюсная инъекция).
- Не смешивать с другими внутривенными растворами или лекарствами.
- Введите как можно ближе к внутривенной канюле.
- Промывание 0,9% хлоридом натрия до и после введения.
Novoseven ® RT Размеры флаконов | Разбавитель (10 ммоль L-гистидина в воде для инъекций) Объем | Концентрация | Руководство по восстановлению |
1 мг | 1.1 мл | 1 мг / мл | Нажмите здесь (pdf) |
FEIBA-NF ™ (агент обхода ингибитора фактора восемь)
- Фактор 2, полученный из плазмы (протромбин) и фактор Ха
- Показан и лицензирован для лечения и профилактики эпизодов кровотечений у пациентов с гемофилией с помощью ингибиторов (антител) к факторам VIII или IX
- Использование FEIBA-NF, особенно в высоких дозах , был связан с тромбозом
- Использование антифибринолитических средств (например,г. Транексамовая кислота) в сочетании с FEIBA-NF не рекомендуется
- Проконсультироваться с отделением клинической гематологии перед заказом этого продукта.
Дозировка
- Согласно индивидуальному плану лечения пациентов с гемофилией ингибиторами фактора VIII или IX. (Обычно 50-100 единиц / кг каждые 12 часов при эпизодах кровотечения).
- Максимальная разовая доза 100 единиц / кг
- Максимальная суточная доза 200 единиц / кг
Восстановление и введение
- Чтобы уменьшить вспенивание, дайте FEIBA-NF нагреться до комнатной температуры перед восстановлением.Не встряхивать, набирать в шприц медленно.
- Вводить с помощью шприцевого насоса. Максимальная скорость инфузии 2 единицы / кг / мин.
- Промывка 0,9% хлоридом натрия после введения.
- Если CVAD будет отключен после введения FEIBA-NF: промойте 20 мл хлорида натрия 0,9% пульсирующим действием, затем зафиксируйте 5 мл гепарина (50 единиц / 5 мл). Обратите внимание, что максимальная частота гепариновой блокировки — ежедневно.
Размеры флаконов FEIBA ™ (шт.) | Объем разбавителя (вода для инъекций) | Восстановление |
500 | 20 мл 20 мл 50 мл | Нажмите здесь (pdf) |
Фактор XIII (13) Фиброгаммин TM
- Фактор XIII, полученный из плазмы.
- Используется в основном для профилактики и лечения кровотечений при дефиците фактора XIII (редко).
- Вводится в виде медленного внутривенного введения (болюсная инъекция).
- Период полураспада фактора XIII составляет от 8 до 10 дней.
Фиброгаммин TM Размеры флаконов (шт.) | Объем разбавителя (вода для инъекций) | Руководство по восстановлению |
250 | 4 мл | См. Вставку продукта. |
Протромбинекс TM
- Концентрат протромбинового комплекса из плазмы, содержащий факторы II, IX и X.
- НЕ используется у пациентов с гемофилией B (дефицит фактора IX), поскольку очищенные концентраты фактора IX превосходят его.
- Используется для профилактики и лечения кровотечений у пациентов с низким уровнем фактора II или фактора X (редко) и у некоторых пациентов, которым требуется отмена антикоагулянтной терапии.
- Использование Протромбинекса с антифибринолитиками (транексамовая кислота) не рекомендуется из-за теоретического увеличения риска тромбоза.
- Вводится в виде медленного внутривенного введения (болюсная инъекция).
Prothrombinex TM Размеры флаконов (шт.) | Объем разбавителя (вода для инъекций) | Руководство по восстановлению |
500 | 20 мл | Нажмите здесь (pdf) |
Фактор XI (Одиннадцать) BPL TM
- Фактор XI, полученный из плазмы (Одиннадцать)
- Период полураспада фактора XI составляет приблизительно 2 дня.
- Использование концентратов фактора XI, особенно в высоких дозах, имеет были связаны с тромбозом
- Дозировку следует определять после консультации с Clinical Гематология
- Вводится в виде медленного внутривенного введения (болюсная инъекция).
- Используется в основном для профилактики и лечения кровотечений при дефиците фактора XI (редко)
Высушенный фактор XI (одиннадцать) фракция BPL TM Размеры флаконов (шт.) | Объем разбавителя (вода для инъекций) | Руководство по восстановлению |
1000 (обратите внимание, что фактическое содержание фактора XI также указано на каждом флаконе и может варьироваться в зависимости от партии) | 10 мл | Посмотреть товар вставить. |
- Плазма производный фибриноген (фактор I) концентрат
- Период полувыведения фибриногена составляет приблизительно 2-4 дня
- Доступен для профилактики и лечения кровотечений у пациентов с только врожденный дефицит фибриногена (это состояние встречается редко)
- Использование RiaSTAP ® и дозировку следует определять после консультации с отделом клинической гематологии
- Вводится путем медленной внутривенной инъекции со скоростью, не превышающей 300 мл в час.
RiaSTAP® Размеры флаконов | Объем разбавителя (вода для Впрыск) | Руководство по восстановлению |
1 грамм | 50 мл (не входит в комплект поставки) | См. Вставку продукта. |
Фактор свертывания крови VIII — Большая химическая энциклопедия
Ускоряет действие нескольких факторов свертывания крови (VIII, IX, X, XI и XII) … [Pg.237]| Рис. 6. Структурные отношения между аскорбатоксидазой, церулоплазмином, нитритредуктазой и фактором свертывания крови VIII . |
Продукты на основе фактора крови VIII показаны для лечения и профилактики пациентов с гемофилией A (см. Также Часть II, главы 1-3). Это генетическое заболевание, характеризующееся полным отсутствием или присутствием только при низких уровнях фактора свертывания крови VIII. Отсутствие адекватных уровней этого фактора свертывания крови приводит к длительным эпизодам кровотечения, возникающим спонтанно или после травмы / операции. [Стр.26]
Ниманн Х., Холтер Р., Карнват Дж. И др.Экспрессия фактора свертывания крови VIII человека в молочной железе трансгенных овец. Transgenic Res., 1999 8 (3) 237-347. [Pg.877]
Дефектный фактор свертывания крови VIII приводит к неконтролируемому кровотечению. [Pg.394]
Человеческий инсулин, интерферон, человеческий гормон роста и человеческий фактор свертывания крови VIII 1024 копии … [Pg.843]
Ранние исследования C. предполагали октамерную структуру, а затем тетрамерную структуру a2P2. Однако гель-фильтрация восстановленного и алкилированного C в 6 M гидрохлориде гуанидина показала, что белок из нескольких видов представляет собой единую цепь M, 120 000, более ранние результаты, вероятно, были артефактами протеолиза.Аминокислотная последовательность состоит из дважды повторяющейся (т.е. 3 копии) единицы из 340 остатков, которая на 30% гомологична субъединице A фактора свертывания крови VIII. [L.Ryden в R.Lontie (ed.) Copper Proteins and Copper Enzymes, CRC Press, Boca Raton, 1984 RMLawn Ce // 42 (1985) 405-406] … [Pg.107]
Липосомы имеют также использовался для иммобилизации некоторых других биологических веществ, представляющих интерес с клинической точки зрения. Авторы работы 371 описали препарат липосом, содержащий фактор VIII свертывания крови, который можно использовать для лечения гемофилии.Были проведены эксперименты по пероральному введению липосом, содержащих фактор VIII, гемофильным собакам. Ангиотензин II и гепарин также были захвачены липосомами. [Pg.349]
Было также высказано предположение, что из-за последовательности и возможной структурной гомологии с факторами свертывания крови V и VIII [6] церулоплазмин может также участвовать в свертывании крови и его регуляции [5]. [Pg.53]
В дополнение к своей ранее упомянутой роли в транспорте меди церулоплазмин представляет собой аминоксидазу, супероксиддисмутазу и феррооксидазу, способную катализировать окисление Fe2 + до Fe3 +.Церулоплазмин содержит три последовательные гомологичные последовательности из 350 остатков, которые, возможно, произошли от предкового гена оксидазы меди. Как и аскорбатоксидаза, этот синий белок содержит медь трех разных типов. Факторы свертывания крови V и VIII (рис. 12-17) и белок захвата железа Fet3 (раздел A, 1) также тесно связаны. [Pg.887]
Гликопротеины Интерфероны Факторы свертывания крови (факторы VIII, IX) Гликопротеиновые гормоны, активаторы плазминогена ЭПО, t-PA … [Стр.77]
Биофармацевтические препараты включают рекомбинантные цитокины (интерфероны, IL-2, GM-CSF), блокирующие антитела (такие как инфликсимаб против TNF-α) и вакцины, а также продукты, не связанные напрямую с иммунной системой. такие как факторы свертывания крови и гормоны (фактор VIII, эритропоэтин, гепарин), ферменты и гормоны (Crommelin et al., 2003). [Pg.155]
B. Факторы свертывания крови Наиболее важными агентами, используемыми для лечения гемофилии, являются свежая плазма и очищенные факторы свертывания крови человека, особенно фактор VIII и фактор IX, которые либо очищены из продуктов крови, либо произведены с помощью технологии рекомбинантной ДНК.Эти продукты чрезвычайно дороги и несут в себе риск заражения (из-за заражения патогенами в крови) и иммунологических реакций. [Pg.310]
Достижения в области рекомбинантных технологий облегчили проблему производства белка и его чистоты. С помощью технологии рекомбинантной ДНК и использования линий клеток, отличных от человека, человеческие белки могут быть произведены без вирусного загрязнения. Этот процесс позволяет производить большие количества белков, которые ранее было трудно получить из человеческих источников.Дальнейшее выделение белка из человеческих источников связано с высоким риском вирусного заражения. Один из таких примеров, плазменный фактор свертывания VIII, выделенный из крови человека, привел к передаче вирусных заболеваний, таких как гепатит и СПИД [1,2]. [Pg.738]
Все чаще белки плазмы, которые когда-то измерялись исключительно по их каталитической активности и выражались в единицах фермента, теперь измеряются методами иммуноанализа и выражаются в единицах концентрации (например,г., микрограммы на литр). Когда сравниваются результаты этих очень разных форм анализа, часто наблюдается небольшая корреляция. Во многих случаях это отражает тот факт, что белки могут существовать во множестве структурных форм, различающихся по конформационным свойствам, с точки зрения протеолитического расщепления или с точки зрения конкретных форм посттрансляционной модификации (например, фосфорилирования). Хотя эти формы могут сохранять некоторые консервативные эпитопы и, таким образом, иметь общие иммунологические свойства, структурные различия часто оказывают сильное влияние на их активность.Например, было обнаружено, что фактор белка крови VIII, который является одним из ключевых белков в каскаде свертывания крови, теряет свою каталитическую активность при гемофилии, в то время как … [Pg.2140]
.
Факторы свертывания: 10 поразительно фантастических ролей
Нажмите Ctrl + D , чтобы добавить эту страницу в закладки. Возможно, он вам понадобится в будущем.
Процесс гемостаза состоит из разных механизмов, преследующих одну и ту же цель; для предотвращения чрезмерной кровопотери и ускорения заживления, поддерживая равновесие.
Краткий обзор механизма гемостаза в ответ на нарушение эндотелия сосудов:Когда эндотелий «спровоцирован», он реагирует, активируя серию реакций (биохимических), которые обеспечивают состояние гемостатического баланса.Начальная реакция происходит, когда стенка эндотелия сосудов и тромбоциты контактируют друг с другом.
Далее процесс инициирует определенный коллаген, включая типы VI, III и I. В начальной реакции также активируются ламинины, микрофибриллы, фактор фон Виллебранда (vWF), фибронектин и тромбоспондин.
Общая и важная роль, которую выполняют активированные компоненты крови, — это обеспечение адгезии тромбоцитов, инициируя изменения в морфологии тромбоцитов.
- ПОДРОБНЕЕ
Далее обсуждаются некоторые важные факторы свертывания крови
1. Фактор Стюарта
Он функционирует как в внутреннем пути , так и во внешнем пути , первом участнике пути тромбина или конечном общем пути с печенью в качестве его источника.
Для активации фактора Стюарта требуется несколько комбинаций. Комбинации, обеспечивающие активацию, включают кальций, проконвертин, антигемоплитический фактор и фактор Рождества.Основная роль фактора свертывания крови заключается в изменении протромбина на тромбин . Он делает это с помощью фосфолипидов тромбоцитов .
Хотя, обоих их усилий недостаточно для преобразования. Следовательно, для ускорения реакции необходим катализатор. Этот катализатор представляет собой Proaccelerin в активированном состоянии.
2. Проконвертин
Путь проконвертина — внешний, , который также поступает из печени.Стабильный фактор и ускоритель конверсии протромбина в сыворотке (SPCA) — это другие названия, используемые для обозначения фактора свертывания крови.
После активации тромбопластином он, в свою очередь, активирует фактор Стюарта . Он играет роль в превращении протромбина в тромбин с его участием в активации фактора Стюарта, который в сочетании с другими факторами обеспечивает преобразование.
3. Ионы кальция
Ионы кальция играют ключевую роль в гемостатическом процессе, так как кальций-зависимых активностей не могут происходить в их отсутствие.
Путь — внешний и внутренний , где кость является основным источником. Кроме того, он возникает из желудочно-кишечного тракта из проглоченных продуктов, подвергшихся перевариванию.
4. Фибриноген
Гамма, бета и альфа — это трех полипептидных цепей , которые составляют фибриноген. Тромбин превращает фибриноген в фибрин, который помогает остановить чрезмерную кровопотерю за счет , образуя сетку вокруг поврежденных тканей .
Нерастворимый фибрин будет конечным результатом, когда тромбин действует на растворимый фибриноген в процессе преобразования. Фибриноген происходит из печени и имеет внутреннего и внешнего .
Установлено, что люди, страдающие мутациями фибриногена, страдают тромбоэмболией. Это наследственное заболевание, при котором в некоторых разновидностях встречаются мутации, которые включают дисфункциональный фибриноген (гиперфибриногенемия), полное отсутствие фибриногена (афибриногенемия) и ограниченное присутствие фибриногена (гипофибриногенемия).
5. Протромбин
Протромбин и тромбин неразделимы по функциям, потому что фактор Стюарта ферментативно расщепляет протромбин на тромбин. Протромбин представляет собой сериновую протеазу , зависящую от витамина К. Путь является как внутренним , так и внешним и исходит из печени.
На самом деле фибрин не может образоваться без протромбина. Это связано с тем, что для образования фибрина сначала должно произойти превращение протромбина в тромбин.После этого образовавшийся тромбин завершает процесс, превращая фибриноген в фибрин.
Недостаток протромбина в тяжелых и длительных случаях может быть опасен для жизни. Причина в поддержку этого беспокойства заключается в том, что люди с дефицитом протромбина подвержены различным заболеваниям, включая: гипопротромбинемию или диспротромбинемию, геморрагический диатез и меноррагию (страдают женщины).
6. Антигемоплитический фактор (AHF)
Внутренний в пути, фактор коагуляции работает с кальцием и фактором Рождества, чтобы активировать фактор Стюарта .Он активируется исключительно тромбином, который происходит из тромбоцитов и эндотелия, выстилающего кровеносные сосуды.
Антигемофильный фактор А и Антигемофильный глобулин — это некоторые из нескольких обозначений, которые относятся к одному и тому же фактору свертывания крови.
Лица с дефицитом AHF, вероятно, будут страдать гемофилией А. Заболевание представляет собой рецессивное заболевание свертывания крови, которое является X-сцепленным (генетическим), которое также обозначается как классическая гемофилия . Его называют классическим, потому что это наиболее распространенная категория гемофилии.Его жертвы изображают прогрессирующее, постепенное развитие состояния, представляющего большую опасность для жизни пострадавшего.
Начало проявления может развиваться уже в молодом возрасте, и состояние может определять здоровье человека на протяжении всей жизни.
Классическая гемофилия характеризуется травматическим и спонтанным кровотечением.
7. Прекалликрейн
Он происходит из печени и следует внутреннему пути .Прекалликреин работает вместе с фактором Хагемана и кининогеном, обеспечивая активацию PTA (Plasma Thromboplastin Antecedent) .
Активная форма прекалликреина называется Калликреин и представляет собой сериновую протеазу. Именно калликреин позволяет производить брендикинин при расщеплении кининогена.
8. Фактор Хагемана
Фактор Хагемана активируется при прямом контакте с поврежденными стенками кровеносных сосудов. Это внутреннего и происходит из печени.
Активация деструктора для тромбов (плазмин) и PTA являются его функциями. Однако для активации PTA требуется поддержка как кининогена, так и прекалликреина.
9. Фактор Рождества
Антигемофильный фактор B и компонент тромбопластина плазмы (PTC) — это другие названия фактора Рождества. Он поступает из печени, и это внутреннего пути.
Для активации фактора свертывания необходимо присутствие кальция и PTA.
Фактор Рождества действует для активации другого фактора, фактора Стюарта . Он активирует процесс с помощью кальция и антигемоплитического фактора.
Недостаток фактора Рождества вызывает болезнь Рождества (гемофилия B).
10. Кининоген
Участвует во внутреннем пути , он также происходит из печени. Кининоген выполняет свою основную роль в механизме гемостаза за счет активации PTA .Он успешно справляется с этой задачей, сочетая свою деятельность с фактором Хагемана и прекалликрейном.
Существует два основных жизненных процесса, которые полностью зависят от гемостаза: в важно предотвращение чрезмерной кровопотери в ответ на травму , а также поддержание текучести крови в требуемых физиологических условиях .
Когда гемостаз обеспечивает баланс обеих важных функций, достигается состояние равновесия .Но когда баланс нарушен в результате сосудистого повреждения, активируется прокоагулянтный ответ . Активация ответа обычно обозначается как патологическое нарушение .
Однако это не гарантирует, что прокоагулянтный ответ активируется только тогда, когда происходит повреждение, потому что некоторые люди генетически наследуют дефицит факторов коагулянта , приводящий к нарушениям нормального функционирования.
В довершение ко всему, гемостаз — это просто механизм организма, который касается предотвращения дальнейшей кровопотери, когда факторы свертывания крови запускают совместные механизмы, помогающие обеспечить восстановление гемостатического баланса .
Нажмите Ctrl + D , чтобы добавить эту страницу в закладки. Возможно, он вам понадобится в будущем.
- ПОДРОБНЕЕ
.
